龔英峰
(唐山市灤縣人民醫(yī)院檢驗科,063700)
蛋白質(zhì)是人體生命活動的物質(zhì)基礎,在人體組成與新陳代謝中意義重大,在病理和生理情況下,各種血清蛋白質(zhì)的濃度和組分間的比例可發(fā)生改變。蛋白質(zhì)在堿性環(huán)境中帶負電,在電場中向陽極泳動,由于各種蛋白質(zhì)的顆粒大小、等電點及所帶電荷多少不同,所以在電場中的泳動速度也不同。血清蛋白電泳就是利用這一原理將各組蛋白分開。電泳后從陽極開始依次為白蛋白、α1球蛋白、α2球蛋白、β和γ球蛋白區(qū)帶。各區(qū)帶的改變與人體病理及生理情況密切相關。醋酸纖維素薄膜電泳是傳統(tǒng)的電泳方法,但是由于醋酸纖維素薄膜雜質(zhì)多,含大量的纖維和金屬離子,造成電泳速度慢,分離不良,并有嚴重的電滲現(xiàn)象,而瓊脂糖凝膠則具有微細的多孔網(wǎng)狀結構,所以隨著電泳技術的不斷發(fā)展,瓊脂糖凝膠電泳已經(jīng)逐步替代醋酸纖維素薄膜電泳并實現(xiàn)了自動化,且操作簡單;另外它的最大優(yōu)點是幾乎不吸附蛋白質(zhì),因此電泳無拖尾現(xiàn)象,分離清晰、分辨率高,更適用于對大量標本的常規(guī)分析,易于普及,所以血清蛋白電泳技術已經(jīng)在各個醫(yī)院普遍開展用于疾病的診斷和預后的判斷[1]。我們利用法國Sebia半自動瓊脂糖凝膠電泳儀對本地區(qū)待產(chǎn)婦和育齡未孕健康女性的血清蛋白電泳圖譜進行比較和分析,為臨床研究孕婦的生理提供參考。
1.1 對象 選擇2010-11—2011-01在我院住院的待產(chǎn)婦100例為實驗組,年齡23~39歲,平均年齡(30.03±5.78)歲。選擇同期門診的育齡未孕健康女性75例作為對照組,年齡22~35歲,平均年齡(28.20±5.30)歲。
1.2 儀器和試劑 法國Sebia公司HYDRASYS半自動電泳儀和配套試劑盒、日立7060全自動生化分析儀、德國利德曼公司總蛋白試劑。
1.3 方法 收集實驗組及對照組空腹血液標本,先檢測總蛋白,再進行蛋白電泳分析:取10 μL血清加樣、電泳、干燥以及染色、脫色、干燥,最后取出凝膠板用掃描儀進行掃描定量。
1.4 統(tǒng)計學處理 采SPSS 15.0軟件包進行統(tǒng)計處理。計量資料比較采用分組樣本資料t檢驗。
通過本研究我們發(fā)現(xiàn)實驗組總蛋白濃度(TP)、白蛋白(ALB)百分比顯著低于對照組,差異有高度統(tǒng)計學意義(P<0.001);實驗組α1、α2、β球蛋白百分比顯著高于對照組,差異有高度統(tǒng)計學意義(P<0.001);實驗組γ球蛋白百分比與對照組比較,差異無統(tǒng)計學意義 (P>0.05,表1)。
表1 實驗組與對照組血清蛋白電泳結果比較±s)
表1 實驗組與對照組血清蛋白電泳結果比較±s)
組別 例數(shù) TP(g/L) ALB(%) α1(%) α2(%) β(%) γ(%)實驗組 100 58.2±6.6 50.2±6.2 5.1±0.9 13.9±1.7 15.2±2.5 15.0±3.0對照組 75 70.2±5.2 65.4±3.4 2.5±0.4 9.0±0.7 8.6±1.1 14.6±1.7
血清蛋白電泳是臨床疾病診療中常用的技術之一,目前已經(jīng)自動化。自動化的瓊脂糖凝膠電泳可以很好地分離各組蛋白區(qū)帶并通過掃描儀準確地算出各區(qū)帶蛋白所占的百分比,若同時結合總蛋白濃度則可對各區(qū)帶蛋白進行定量。瓊脂糖凝膠電泳的廣泛應用為肝臟疾病、腎臟疾病以及M蛋白血癥等疾病的診斷提供了可靠的依據(jù)。
正常妊娠時,為滿足胎兒的發(fā)育與生長,母體發(fā)生一系列適應性的變化,并且在高水平的雌、孕激素的影響下,血清蛋白組分發(fā)生明顯變化[2]。母體在妊娠期的血容量平均增加45%[3],此時由于血液稀釋而使總蛋白濃度降低;另外由于孕婦腎小球濾過率的增加,蛋白質(zhì)從尿中丟失也隨之增加[3],由于白蛋白分子量較小所以丟失較多,本實驗數(shù)據(jù)顯示實驗組白蛋白降低比較顯著與此相符。α1抗胰蛋白酶、α1脂蛋白和甲狀腺素結合球蛋白存在于α1球蛋白區(qū),有報道[4]稱孕婦體內(nèi)α1抗胰蛋白酶隨孕周增加而減少,另有報道[5]α1脂蛋白在妊娠及高雌激素血癥時可輕度增加,所以實驗組α1球蛋白比例增加與其體內(nèi)α1脂蛋白以及甲狀腺素結合球蛋白增加有關。α2、β球蛋白增加是由銅藍蛋白、低密度脂蛋白及轉鐵蛋白增加所引起的。妊娠婦女銅藍蛋白升高是其對體內(nèi)銅、鐵代謝改變的一種適應,是一種正常的生理現(xiàn)象[6];轉鐵蛋白增加,是妊娠婦女對生理性貧血的一種代償。孕婦血中免疫球蛋白IgG輕度下降、IgD增高、IgA和IgM水平基本不變[3],由于免疫球蛋白大多存在于γ球蛋白區(qū),所以這可能是導致實驗組γ球蛋白無明顯變化的根本原因。
綜合以上資料分析說明,待產(chǎn)婦血清蛋白成分的改變是一種正常的生理現(xiàn)象,在將血清蛋白電泳技術用于臨床疾病診療時應注意妊娠所帶來的影響。
[1]龔英峰.腎病患者血清蛋白電泳圖譜分析[J].中國療養(yǎng)醫(yī)學,2012,21(1):33-34.
[2]鐘蘭,林瑜,蔡玉玲,等.待產(chǎn)婦與不同疾病患者血清蛋白電泳圖譜的鑒別分析[J].中國婦幼保健,2007,22(34):4927-4930.
[3]周新,涂植光.臨床生物化學和生物化學檢驗[M].3版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2004:432-433.
[4]裘儉,黃雅萍,張玲玲,等.妊娠婦女血中α1-抗胰蛋白酶與纖維蛋白原相關性研究[J].中國實驗診斷學,2000,4(4):160-161.
[5]金梅枝,付雪芹.血清蛋白電泳的臨床應用[J].中國醫(yī)藥指南,2007(5):111-112.
[6]呂合作,胡守芬,陳治文.孕婦血清銅藍蛋白氧化酶活力的變化[J].蚌埠醫(yī)學院學報,2000,25(4):242-243.