感冒清口服液澄清工藝的研究*

衛(wèi)世杰，霍務(wù)貞

1廣東藥學(xué)院藥科學(xué)院；2廣東藥學(xué)院中藥開(kāi)發(fā)研究所，廣州 510006

感冒清驗(yàn)方是由板藍(lán)根、昆布、螺旋藻等5味中藥組成，具有辛涼解表、疏風(fēng)清熱、利咽解毒等功效，用于治療風(fēng)熱感冒。制成口服液具有吸收好、療效迅速、服用方便的特點(diǎn)，易為幼兒和老年患者所接受。但由于方中昆布和螺旋藻提取液中含有較多的植物蛋白和藻體蛋白，得到的浸膏粘稠，雜質(zhì)多，濾過(guò)困難，且制備的口服液澄清度差。為吸附雜質(zhì)，并盡可能保留有效成分，本文對(duì)昆布和螺旋藻的提取液的澄清工藝進(jìn)行了研究，以期達(dá)到減少服用量，提高澄清度的目的。

1 儀器和試藥

UV-260型紫外分光光度計(jì)（日本島津）；高速冷凍離心機(jī)CR-21G（日本日立）；Mettler AE240型電子天平（德國(guó)）；HH恒溫水浴鍋（江蘇金壇中大儀器廠）。

殼聚糖（脫乙酰度＞80%，80目，浙江磐安縣殼聚糖廠）；無(wú)水葡萄糖對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào) 110833－20050）；苯酚（上海試劑一廠）。

2 方法與結(jié)果

2.1 總多糖的含量測(cè)定

多糖為本制劑有效成分之一，總多糖的含量測(cè)定采用經(jīng)典的硫酸-苯酚比色法[1]。精密稱取18.9 mg葡萄糖置于100 mL量瓶中，加水溶解并稀釋至刻度，搖勻；精密吸取25 mL置50 mL量瓶中，加水至刻度，搖勻。分別精密吸取上述溶液0.1、0.2、0.3、0.4、0.6、0.8、1.0、1.1、1.2 mL 置離心管中，加水至 2.0 mL，加入苯酚溶液1.0 mL，搖勻，快速加入硫酸5.0 mL，搖勻，沸水中加熱15 min，取出后立即放冷。在486 nm的波長(zhǎng)處測(cè)定吸收度。得線性方程為A=0.0064C+0.0498（r=0.9993）。 專屬性試驗(yàn)表明，輔料對(duì)測(cè)定無(wú)干擾，測(cè)得的平均回收率為99.2%，方法準(zhǔn)確簡(jiǎn)便。

2.2 水浸出物量的測(cè)定[2]

精密量取昆布和螺旋藻提取液50 mL，置于干燥至恒重的蒸發(fā)皿中，在水浴上蒸干，放入烘箱干燥4 h，至恒重，迅速置干燥器中冷卻，稱重并計(jì)算水浸出物的量。

2.3 澄清方法的選擇

2.3.1 澄清方法的篩選根據(jù)文獻(xiàn)[2-3]，對(duì)5種不同澄清工藝進(jìn)行比較, 并以總多糖含量、水浸出物的量和外觀澄清度為指標(biāo)，采用綜合評(píng)分法（權(quán)重系數(shù)分別為 0.4、0.4、0.2）選擇澄清工藝。

由表1可見(jiàn)，低溫沉降法總多糖含量較高，但水浸出物含量、外觀等均較差；高速離心法澄清效果較好，但操作較麻煩，且對(duì)水浸出物含量影響不大；水醇法總多糖含量較低，且醇濃度越高，含量越低；101果汁沉降劑法對(duì)多糖含量影響較大；脫乙酰殼聚糖法對(duì)多糖含量影響較少，且水浸出物含量較低，外觀也澄清，效果較佳。因此選擇脫乙酰殼聚糖法做為昆布螺旋藻提取液的澄清方法。

2.3.2 澄清劑的篩選澄清劑的用量太少會(huì)造成除雜不完全，太多又會(huì)造成浪費(fèi)，且對(duì)口服液中其他成分的含量有影響。因此需對(duì)其用量進(jìn)行篩選[4]。具體方法為：取螺旋藻與昆布共同提取后的上清液適量，按表2加入澄清劑后，60℃水浴加熱，觀察澄清效果。

表1 澄清方法選擇（n=3）

從表2可知，加澄清劑5%以上均可以取得良好效果, 但加入10%的澄清劑時(shí),有少量澄清劑膠體懸浮于液體中，可能為過(guò)量，因此，采用5%用量較好。

表2 澄清劑用量篩選

2.3.3 澄清劑pH值篩選[5-6]由表3可知，溶液pH值對(duì)澄清效果有較大的影響，其值在3～5時(shí)對(duì)澄清劑的澄清效果影響不大，從口服液的整體穩(wěn)定性考慮，選擇pH 5較為合適。

表3 最佳pH值篩選

2.4 澄清劑殘留量的測(cè)定

殘留的殼聚糖會(huì)吸附口服液中其他有效成分，造成含量降低，且會(huì)在長(zhǎng)期放置后出現(xiàn)沉淀，因此需對(duì)其殘留量進(jìn)行測(cè)定。參照文獻(xiàn)方法[7]，采用溴甲酚綠比色法測(cè)定殼聚糖的含量

2.4.1 線性范圍以0.167 mol·L-1的乙酸溶液分別配制一系列濃度的殼聚糖溶液，分別加入0.02 mmol·L-1的溴甲酚綠 2.0 mL， 于 37℃水浴加熱 5 min，以空白管為參照，在620 nm處測(cè)定吸收度。結(jié)果表明，殼聚糖濃度在1～10 mg·L-1的范圍內(nèi)，本法線性關(guān)系較好，回歸方程為:A=7.17×10-3C+6.92×10-3（r=0.9995）。

2.4.2 專屬性及回收率考察分別量取樣品溶液及不加殼聚糖的樣品溶液0.5 mL，各加入0.02 mmol·L-1的溴甲酚綠 2.0 mL， 于 37℃水浴加熱 5 min，在400～800 nm間進(jìn)行掃描。結(jié)果陰性樣品在620nm處基本無(wú)干擾。平均回收率為103.2%。結(jié)果表明該方法準(zhǔn)確、可靠。

2.4.3 樣品含量的測(cè)定取3個(gè)批次的樣品溶液各20 mL進(jìn)行測(cè)定，殼聚糖含量為4.3 μg·mL-1。由于含量很低，對(duì)其他成分基本無(wú)影響，表明澄清的殼聚糖的用量較為合理。

3 討 論

感冒清處方中含有昆布和螺旋藻，提取液含有較多雜質(zhì)，影響口服液的澄清度，因此在篩選澄清工藝時(shí)，以有效成分含量為指標(biāo)，同時(shí)考慮雜質(zhì)量及外觀澄清度，綜合考察各種澄清方法的優(yōu)劣。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，常用的水醇法不適合本制劑的澄清，對(duì)多糖含量影響較大[8]；殼聚糖吸附法制得的成品澄清度好，且在長(zhǎng)時(shí)間放置中未產(chǎn)生沉淀，穩(wěn)定性較好，對(duì)有效成分的保留高于其他方法，能縮短生產(chǎn)周期，降低成本，可用于制備感冒清口服液。

處方中含有板藍(lán)根，其有效成分為靛玉紅等脂溶性成分，據(jù)文獻(xiàn)報(bào)道，用殼聚糖作澄清劑，對(duì)靛玉紅等脂溶性成分有影響，因此本實(shí)驗(yàn)對(duì)殼聚糖的殘留進(jìn)行了測(cè)定。與文獻(xiàn)報(bào)道的殼聚糖直接加入到板藍(lán)根的提取液不同，本工藝是將殼聚糖加入昆布螺旋藻提取液中，殼聚糖絮凝后沉淀基本除去，且測(cè)得的殘留量極低，因此按本工藝方法各提取液混合后殼聚糖對(duì)靛玉紅的吸附沉淀作用很少，對(duì)靛玉紅的含量基本無(wú)影響，達(dá)到了既去除雜質(zhì)、使溶液澄明，又能保留有效成分的目的。

[1] 莊筱葳，劉秀芳，毛貴元，等.西藏紅雪茶多糖含量測(cè)定[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)方劑學(xué)雜志，2012，18（4）：103-6.

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[8] 胡 勇.殼聚糖用于澄清中藥提取液的研究[J].江蘇藥學(xué)與臨床研究，2002，10（2）：23-5.