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    非創(chuàng)傷性檢測技術(shù)在光老化皮膚治療中的應(yīng)用進(jìn)展

    2012-04-29 12:47:40董依云周國瑜
    中國美容醫(yī)學(xué) 2012年17期
    關(guān)鍵詞:真皮顯微鏡老化

    董依云 周國瑜

    皮膚的老化分為內(nèi)源性老化和光老化,內(nèi)源性老化即自然老化,目前大多數(shù)研究認(rèn)為光老化加速了皮膚自然老化的進(jìn)程。皮膚光老化常發(fā)生于習(xí)慣暴露的部位,其中面部是最易受累的部位,另外還有手背、前臂、上胸部等光暴露部位。光老化的臨床特點(diǎn)為:皮膚質(zhì)地的改變,如皮膚干燥、松弛、細(xì)小皺紋、皮膚粗糙、毛孔擴(kuò)大等;色素性改變,如色素增加或脫失;血管性改變,如皮膚血管擴(kuò)張等[1-3]。對光老化皮膚的不同參數(shù)進(jìn)行檢測,有助于評價(jià)治療效果,本文就非創(chuàng)傷性檢測技術(shù)在光老化皮膚治療中的應(yīng)用進(jìn)展綜述如下。

    1皮膚光老化檢測方法

    1.1光數(shù)值等級:1992年,Griffiths等[4]以光數(shù)值等級對數(shù)個(gè)光老化皮膚參數(shù)進(jìn)行測量。他們選擇了不同階段光老化患者的典型照片,用遞增的9個(gè)階段標(biāo)準(zhǔn)來評價(jià)不同的參數(shù)(0為無,8為最嚴(yán)重)。這些參數(shù)為細(xì)紋、粗皺紋、色斑和臉色發(fā)黃的程度,臨床證明基于典型照片的光數(shù)值等級優(yōu)于書面描述。光數(shù)值等級方法簡單易行,有一定可重復(fù)性,可用于門診治療中,由有經(jīng)驗(yàn)的醫(yī)師和患者共同進(jìn)行治療前后面部改善情況的評價(jià)。

    1.2 檢測皮膚表面特性:皮膚光老化的一個(gè)顯著特征就是皮膚表面光滑度下降,粗糙度增加。目前國際上一個(gè)常用的方法是制作皮膚表面的硅膠復(fù)膜樣品,待復(fù)膜硬化后可將其掃描至電腦或以激光輪廓測量技術(shù)進(jìn)行測量。常規(guī)掃描方法有機(jī)械掃描法和光學(xué)掃描法,最近發(fā)展起來的透射測量法使用平行光照射非常薄的硅膠復(fù)膜樣品。Lee等[5]采用這種薄的硅膠復(fù)膜樣品分析皮膚粗糙度,復(fù)膜厚度為0.5mm,取下后放在光源和CCD攝像機(jī)之間,通過對其灰度的測量,可以得到不同年齡人群皮膚粗糙度的顯著差異。這種方法測量的速度較快,但是很薄的復(fù)膜樣品不容易制作。激光輪廓測量技術(shù)是根據(jù)光的放大和反射原理研制出來的,采用激光頭掃描,精確測量復(fù)膜樣品的三維坐標(biāo)并轉(zhuǎn)化為圖像[6]。當(dāng)然,這種方法耗時(shí)且價(jià)格昂貴,無法應(yīng)用于常規(guī)皮膚檢查。另外一種檢測手段就是皮膚鏡的使用,皮膚鏡可以對活體皮膚直接無創(chuàng)性放大,觀察皮膚表面精微形態(tài),最新發(fā)展的利用偏振光原理制作的皮膚鏡可以提供皮膚表面紋理、色素和血管的更多信息[7]。聯(lián)合使用數(shù)字圖像處理技術(shù)可作為一種常規(guī)色素治療功效評價(jià)的定量測量工具。該技術(shù)起步較晚,需要特定的儀器和軟件,目前國內(nèi)應(yīng)用較少。Takeshi等[8]研究了二次諧振的偏振光(SHG)顯微鏡在UVB暴露皮膚中膠原與皺紋之間的聯(lián)系,SHG發(fā)出的光可以被真皮層中的膠原纖維產(chǎn)生倍頻諧振,可以清晰地看到膠原纖維的分布以及與皮膚表面的距離,再通過計(jì)算機(jī)處理系統(tǒng)得出與皺紋之間的聯(lián)系。

    1.3檢測皮膚內(nèi)部特性:雖然皮膚活檢可以很方便地提供光老化皮膚相關(guān)的結(jié)構(gòu)改變,但這畢竟是一種有創(chuàng)方法,很多患者無法接受。越來越多的無創(chuàng)檢測手段發(fā)展起來。

    1.3.1超聲檢測法:同其他以超聲為基礎(chǔ)的技術(shù)一樣,用可以發(fā)射超聲波的探頭接觸皮膚,通過超聲波作用到表皮下從而測得表皮下結(jié)構(gòu)[9]。隨著技術(shù)的發(fā)展,高頻率的超聲換能器實(shí)現(xiàn)了對皮膚高分辨率的測試。Lee等[5]采用Dermascan C高頻率超聲測試儀對皮膚真皮層的距離和密度做出測量,由微處理器評價(jià)和可視化成為一個(gè)二維彩色圖像[10]。實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示皮膚真皮層密度與皮膚表面粗糙度有強(qiáng)烈的正相關(guān)關(guān)系,這為我們提供了一種新的直接測量皮膚表面皺紋的方法。

    1.3.2磁共振成像:磁共振成像(MRI)是一種廣泛應(yīng)用于身體各部位診斷的檢測技術(shù),尤其是皮膚深處的組織。由于無法獲取高的空間分辨率,該方法在很長的一段時(shí)間內(nèi)都不適用于皮膚。新發(fā)展的磁共振微成像(MRM)可以無創(chuàng)性地呈現(xiàn)出高分辨率的皮膚圖像,并借助計(jì)算機(jī)分析系統(tǒng)獲取皮下的3D結(jié)構(gòu),得到毛孔大小、表皮厚度和真皮結(jié)構(gòu)改變[11],可用于皮膚不同層次變化的評估。

    1.3.3共聚焦顯微鏡:共聚焦顯微鏡(CLSM)是一種非創(chuàng)性、實(shí)時(shí)、動(dòng)態(tài)掃描三維成像技術(shù),可對活體的不同皮膚層面進(jìn)行分析,被稱為“皮膚CT”。共聚焦顯微鏡利用組織細(xì)胞不同聚焦面的發(fā)射系數(shù)不同,一層層對皮膚進(jìn)行顯像,空間分辨率達(dá)1μm[12]。超聲檢測和MRI檢測更適合于觀測真皮和皮下組織,而共聚焦顯微鏡在觀測角質(zhì)層、表皮和真皮乳頭層上更有優(yōu)勢。共聚焦顯微鏡是一種準(zhǔn)確敏感,可以把年齡對皮膚的影響量化和特征化的工具。用這種技術(shù)對青年(18~25歲)和老年人(大于65歲)前臂內(nèi)側(cè)的皮膚檢測,逐層分析表皮和真皮乳頭層,隨年齡增長,角質(zhì)層厚度無明顯改變,顆粒層、基底細(xì)胞層厚度增加,真皮乳頭數(shù)目顯著減少[13]。紫外線照射皮膚之后,在皮膚還未發(fā)生肉眼可見的變化時(shí),共聚焦顯微鏡即可觀測到黑素細(xì)胞體積增大,數(shù)量增多,當(dāng)局部毛細(xì)血管血流增加被腎上腺素阻斷后,可以減少色素沉著的發(fā)生[14]。共聚焦顯微鏡最大的優(yōu)點(diǎn)是可以將皮膚受到外界刺激之后表皮和真皮的變化量化,這為臨床和實(shí)驗(yàn)研究提供了統(tǒng)計(jì)依據(jù)。Christopher等[15]最近報(bào)道有一種新的手持共聚焦激光掃描顯微鏡MEMS (Lucid Vivascope 3000),可以直接測量一些較難的部位,拍到毛細(xì)血管情況并且提供更加高清的圖片。

    1.3.4光學(xué)相干斷層掃描:光學(xué)相干斷層掃描技術(shù)(OCT)是超聲的光學(xué)模擬品,檢測生物組織不同深度層面對入射弱相干光的不同反射信號,可得到活體組織表面2~3mm深的超微二維或三維結(jié)構(gòu)圖像,可用于無創(chuàng)檢測活體表皮和真皮超微結(jié)構(gòu)[16],具有廣闊的發(fā)展前景。高分辨率的OCT能檢測到人體健康皮膚的表皮層、真皮層、附屬器和血管。Welzel等[17]用各種外部刺激引導(dǎo)正常皮膚形態(tài)和功能的改變,并成功地應(yīng)用OCT檢測了角質(zhì)層厚度的改變,黑素可輕微減少真皮中的信號強(qiáng)度,紅斑和水腫可減少光衰減,表明不同的生理狀況將影響皮膚的光學(xué)特性。

    1.3.5多光子激光掃描成像:多光子吸收的歷史可追溯到1931年,當(dāng)時(shí)Meier做出了高光強(qiáng)度下多光子吸收會發(fā)生的理論預(yù)斷。多光子激光掃描顯微鏡采用波長較長的紅外激光,能量脈沖式激發(fā),能量密度高,在生物組織中的穿透力更強(qiáng),熒光激發(fā)只發(fā)生在焦點(diǎn),定位準(zhǔn)確,對活細(xì)胞損傷小,可以從細(xì)胞及分子水平反映真皮基質(zhì)膠原情況[18]。Keiichi等[19]通過多光子激光掃描顯微鏡攝取志愿者臉頰部皮膚圖像,可以深入到皮膚表面110μm的深度,分析發(fā)現(xiàn)SHG和SAAID與年齡線性相關(guān),并且準(zhǔn)確反映真皮膠原層和皮膚彈性,可以認(rèn)為SHG和SAAID指數(shù)可以作為評價(jià)皮膚老化的有效客觀指標(biāo)。多光子激光掃描顯微鏡彌補(bǔ)了共聚焦顯微鏡易產(chǎn)生光漂白和光毒性的不足。各種無創(chuàng)性檢測方法的優(yōu)缺點(diǎn)見表1。

    1.4皮膚機(jī)械性能檢測:皮膚彈性無創(chuàng)性評價(jià)把皮膚彈性的研究加以量化,使皮膚彈性的評價(jià)有了客觀標(biāo)準(zhǔn)。目前的測量方法主要分為三類:①彈性切力波測量法:如DensiScore,該儀器通過接觸皮膚,按壓雙臂水平施加同等壓力,在青年人的皮膚,水平壓力可以產(chǎn)生細(xì)小的皺褶,而皺褶的數(shù)目和寬度隨著年齡而增長。這為測量年齡相關(guān)的皮膚機(jī)械性能下降提供了直接的檢測技術(shù)。與DensiScore不同的是,Extensometer[20]采用伸拉的方法測量,傳感器記錄皮膚可被牽拉的伸展度,此方法耗時(shí)較短,使用起來比較方便;②扭力法:早在1989年Escoffier等[21]開始應(yīng)用twistometer研究年齡對皮膚生物特性的影響,該儀器可以輕柔地?cái)Q轉(zhuǎn)皮膚,通過不斷施加特定時(shí)間間隔的轉(zhuǎn)力,研究者可以測量皮膚的變形程度,以及變形恢復(fù)到基線狀態(tài)所需要的時(shí)間。研究者可據(jù)此計(jì)算皮膚的伸展性、粘性和還原性。優(yōu)點(diǎn)是較適合對皮膚硬度做評價(jià),但對其他彈性參數(shù)無法獨(dú)立評價(jià);③吸力法:代表是CK公司的Cutometer[22]系列,這種方法目前應(yīng)用最廣泛。從最早的SEM474到SEM575、MPA580,都是基于吸力和拉伸原理設(shè)計(jì)。在被測試皮膚表面產(chǎn)生一個(gè)負(fù)壓將皮膚吸進(jìn)一個(gè)特定的測試探頭內(nèi),皮膚被吸進(jìn)測試探頭的深度通過一個(gè)非接觸式光學(xué)測試系統(tǒng)測得,得到一條皮膚被拉伸的長度和時(shí)間的關(guān)系曲線,通過此曲線得到的彈性參數(shù)代表皮膚彈性特征。該方法測試程序迅速簡便,采用的參數(shù)不受皮膚厚度的影響,是研究皮膚老化的較好指標(biāo)。缺點(diǎn)是測試部位較局限,并且不能測量較硬皮膚的粘彈性和評價(jià)皮膚的各向異性。

    1.5皮膚水分的檢測:皮膚屏障功能在很大程度上依賴于角質(zhì)層的水分和脂質(zhì)成分[23]。皮膚水分的非創(chuàng)傷性檢測用于在保證皮膚不受任何損傷的情況下,測量出人體皮膚的水分比值。主要采用電容原理,即根據(jù)水和其他物質(zhì)的介電常數(shù)的差別進(jìn)行皮膚含水量的測定。較常見的有corneometer測試儀,通過測定角質(zhì)層對電流的抵抗力,檢測皮膚電特性[24],可提供直觀、可信的角質(zhì)層水分檢測方法。另外,還可以使用Evaporimeter濕度計(jì)檢測經(jīng)表皮失水率,檢測在一定時(shí)間內(nèi)水蒸氣丟失量[25]。

    1.6皮膚脂質(zhì)產(chǎn)物檢測:皮膚表面的脂質(zhì)可以通過顯微鏡觀測,也可以采用更加方便的方法,比如Lipometer、Sebumeter或Sebutape進(jìn)行檢測,后者是一種可以吸收油脂的卷帶[26],這種卷帶是不透明的薄膜,當(dāng)接觸皮膚油脂后變?yōu)橥该?,然后放入脂質(zhì)儀中通過記錄透明區(qū)域的大小和數(shù)量檢測脂質(zhì)產(chǎn)量和皮脂腺活躍度。

    2展望

    縱觀皮膚光老化的無創(chuàng)性測量方法,老方法得到不斷研究擴(kuò)展,新方法不斷開發(fā)和引進(jìn),如何制定出一套系統(tǒng)客觀有效的評價(jià)標(biāo)準(zhǔn)成為一個(gè)值得思索的問題。隨著數(shù)碼技術(shù)的發(fā)展,從主觀目測發(fā)展到客觀的計(jì)算機(jī)數(shù)字化處理體系的應(yīng)用,以及多種技術(shù)和方法的聯(lián)合應(yīng)用。最終目的均在于使得檢測更為簡便、精確和科學(xué),從而為光老化皮膚的診斷和治療提供科學(xué)依據(jù)。但必須意識到各種方法均有其優(yōu)點(diǎn)和局限性,應(yīng)根據(jù)實(shí)際需要選擇,特別是在精確性、實(shí)際可操作性方面,如臨床治療效果評估要求快速方便,可借助于皮膚鏡、數(shù)碼照片、評分表等。而對精確性要求較高的科研工作,可借助昂貴的大型儀器,如共聚焦顯微鏡、多光子激光掃描顯微鏡和光學(xué)相干斷層掃描技術(shù)等。

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    [收稿日期]2012-05-07[修回日期]2012-07-28

    編輯/李陽利

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