于 澎,白 靜,劉 佳,衛(wèi)建光,3,楊琳琳,劉少麗,邢美茜
(1.長春中醫(yī)藥大學(xué)藥學(xué)院,吉林 長春 130117;2.白山市食品藥品檢驗所,吉林 白山 134300;3.四平市第一人民醫(yī)院,吉林 四平 136001)
藥對是中藥方劑組成的重要組成部分,具有協(xié)同增效或減毒作用。本文從簡單活血化瘀指標入手,為丹參、王不留行作為藥對使用的合理性進行初步探索,為其合理配伍與應(yīng)用提供依據(jù)。
1.1 動物 Wistar大鼠,雌雄各半,體質(zhì)量180~220 g,購吉林大學(xué)實驗動物中心,合格證號為SCXK-(吉)2008-0005。
1.2 藥品和試劑 丹參(安徽亳州)、王不留行(安徽亳州);阿司匹林(吉林省銀河制藥廠,批號090213);冰醋酸(北京北化精細化學(xué)品有限責(zé)任公司,批號:870322);氯化鈉注射液(長春豪邦藥業(yè)有限公司,批號:10012310);腎上腺素(鹽酸腎上腺素注射液,天津金輝氨基酸有限公司,批號:0712141);烏來糖(國藥集團化學(xué)試劑有限公司,批號:T20091109);肝素(上海生物化學(xué)制藥廠,批號:840720)。
1.3 儀器設(shè)備 電子天平(常德市意歐儀器儀表有限公司,型號:DT161);臺式離心機(上海安亨科學(xué)儀器廠制造,型號:TDL80-2B);全自動自清洗血流變儀(北京普利生儀器有限公司,型號:CBY-N6B);血沉架(Becton,Dickinson and Company,批號:14352);血沉管(江蘇康健醫(yī)療用品有限公司,批號:110301)。
2.1 藥物提取 按照臨床給藥最大量經(jīng)體表面積法換算至大鼠給藥量,藥對用量為2個單味藥量之和取藥材飲片,各加水煎煮2次:第1次10倍量2.0 h,第2次8倍量1.5 h,合并濾液,濃縮成所需濃度備用。
2.2 動物分組 取大鼠50只,雌雄兼用,隨機分成5組,每組10只:空白對照組(蒸餾水),模型組(蒸餾水),丹參組,王不留行組,丹參-王不留行組。
2.3 對大鼠凝血時間、全血黏度及血沉的影響 各組動物每日灌胃給藥1次,連續(xù)給藥7 d,于給藥第6天,除空白對照組外,各組大鼠皮下注射0.1%腎上腺素0.2 mL/只,注射2 h后置0~4 ℃水中游泳5 min,再2 h后,皮下注射腎上腺素1次,制造冰水-腎上腺素型大鼠血瘀模型。第7天末次給藥1 h后大鼠剪尾采血2滴,分開滴于玻璃片上(直徑4~5 mm),自血液滴在玻片上開始計時,每隔30 s用1 mL注射器針頭挑動血液1次,如見針尖挑起纖維蛋白絲,停止計時,記錄時間,再挑動另1滴未挑過的血液作對照,并以前1滴血作為結(jié)果報告。[1]比較各組動物的凝血時間的變化(見表1)。
表1 各組對大鼠凝血時間的影響(±s,n=10)
烏拉坦麻醉,腹主動脈取血5 mL,其中1.5 mL迅速裝入肝素抗凝管中,置35 ℃恒溫水浴備用,然后測定高切黏度150、中切黏度60、低切黏度10、還原黏度,[2]比較各組動物血液流變性變化(見表2)。
3.1 各組對大鼠凝血時間的影響 見表1。
3.2 各組對大鼠全血液黏度的影響 見表2。
表2 各組對大鼠全血黏度的影響(±s,n=10)
本實驗采用冰水-腎上腺素型大鼠血瘀模型,該模型根據(jù)“內(nèi)感憂怒,外感寒邪”致血瘀而制作血瘀證動物模型:根據(jù)人類在暴怒時機體內(nèi)分泌大量腎上腺素和其他激素,急性心肌梗死時血中兒茶酚胺增高,同時伴有血液流變性異常的現(xiàn)象,給予大鼠注射大劑量腎上腺素模擬暴怒,以冰水浸泡模擬寒邪。該模型制作簡單、迅速,既反應(yīng)了血瘀證的部分病因,又與臨床血瘀證的血液流變學(xué)某些指標相近[3-4]。
根據(jù)實驗結(jié)果,丹參、王不留行、丹參-王不留行藥對在凝血時間上均能延長正常和模型大鼠的凝血時間,且結(jié)果表現(xiàn)為配伍后藥對的作用強于配伍前的單味藥。
本實驗表明,各藥對大鼠紅細胞沉降速率無明顯影響,同時模型動物血沉值與空白組比較也無統(tǒng)計學(xué)意義,可能說明血沉指標不是血瘀模型造模和治療的評價指標。
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