卡式微柱凝膠方法在血型鑒定中的應(yīng)用及價(jià)值

袁碧和（重慶市墊江縣人民醫(yī)院輸血科 408300）

隨著醫(yī)學(xué)科學(xué)的迅猛發(fā)展，輸血已經(jīng)成為一門涉及多個(gè)學(xué)科的新興學(xué)科。輸血作為一種特殊的治療手段可挽救患者生命，而準(zhǔn)確的血型鑒定及交叉配血方法對(duì)安全輸血起著非常重要的作用。安全輸血是輸血工作中的重點(diǎn)，必須保證血型鑒定、交叉配血等輸血相關(guān)檢測(cè)百分之百正確，因?yàn)?.1%的誤差可能就會(huì)危及受血者的健康，甚至是生命。隨著科學(xué)技術(shù)的進(jìn)步，卡式微柱凝膠方法（簡(jiǎn)稱卡式法）已在全國(guó)各級(jí)醫(yī)院中普遍運(yùn)用，逐步取代了已使用百年傳統(tǒng)式的血型血清學(xué)技術(shù)。相對(duì)于從前國(guó)內(nèi)各級(jí)醫(yī)院傳統(tǒng)的血型鑒定及配血試驗(yàn)來(lái)說(shuō)，卡式法結(jié)果準(zhǔn)確、操作簡(jiǎn)單、時(shí)間短、試劑用量小、環(huán)境污染?。?－3］。2009年1月至2011年12月對(duì)本院需輸血治療的1 435例住院患者用卡式法進(jìn)行血型鑒定及配血，現(xiàn)將結(jié)果報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 2009年1月至2011年12月本院需輸血治療的住院患者1 435例，其中男730例，女705例，年齡5～70歲，平均（25.49±13.65）歲。抽取肘靜脈3mL，肝素抗凝，同時(shí)分別用卡式法和手工鹽水法進(jìn)行血型鑒定。

1.2 試劑 抗A、抗B血清購(gòu)自上海血液生物醫(yī)藥有限責(zé)任公司，抗D單克隆血清由長(zhǎng)春博德生物技術(shù)有限責(zé)任公司提供，ABO、RhD血型鑒定Cellbind微柱凝膠卡由荷蘭皇家血液基金會(huì)有限公司提供。鹽水購(gòu)自天圣制藥集團(tuán)股份有限公司。操作及結(jié)果判定按使用說(shuō)明書進(jìn)行。

1.3 儀器 免疫微柱孵育器和血型血清學(xué)離心機(jī)由長(zhǎng)沙英泰儀器有限公司提供。

1.4 方法

1.4.1 手工鹽水法 按《全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程》［4］規(guī)定，正向定型和反向定型用試管法進(jìn)行。

1.4.2 卡式法 按荷蘭皇家血液基金會(huì)有限公司Cellbind微柱凝膠卡血型鑒定操作手冊(cè)進(jìn)行：取微柱凝膠卡分別標(biāo)明ABO／D正、反定型卡各1張，標(biāo)記患者姓名、住院號(hào)和日期等，撕去卡上部的錫紙膜。在A、B、D孔內(nèi)，各加入0.5%受檢紅細(xì)胞45μL，再分別加入20μL抗A、抗B、抗D血清。在A1、B孔內(nèi)各加入45μL的0.5%A、B型紅細(xì)胞懸液，再加入45μL受檢血清。900r／min離心2min，1 480r／min離心3min，4 400r／min離心5min，取出觀察結(jié)果。按微柱凝膠卡說(shuō)明書提示標(biāo)準(zhǔn)判讀結(jié)果，紅細(xì)胞完全降至柱底者為陰性，完全或部分被阻擋于凝膠內(nèi)者為陽(yáng)性。

2 結(jié) 果

在1 435例送檢血樣中，微柱凝膠法一次性正確率正定型為100.0%，反定型為99.7%；手工鹽水法一次性正確率正定型為99.3%，反定型為98.9%。兩種方法血型鑒定正確率比較見表1。1 435例血樣共檢測(cè)RhD型12例，占0.83%。正反定型不相符者30例，將血液紅細(xì)胞用生理鹽水洗滌3次，再進(jìn)行重復(fù)鑒定，有6例為紅細(xì)胞濃度異常，10例血漿中含有纖維蛋白，5例為紅細(xì)胞懸液不新鮮。其余9例正反定型不符者，進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)2例有抗IgG抗體（腫瘤），3例自身凝集（多發(fā)性骨髓瘤），2例有嚴(yán)重冷凝集（凝血功能障礙），2例紅細(xì)胞被抗體致敏（自身免疫性溶血性貧血）。

表1 兩種方法血型鑒定結(jié)果比較

續(xù)表1 兩種方法血型鑒定結(jié)果比較

3 討 論

隨著醫(yī)學(xué)的發(fā)展，安全輸血日益受到人們的重視。目前，大多數(shù)醫(yī)院在進(jìn)行交叉配血試驗(yàn)時(shí)還在應(yīng)用鹽水法、酶法、聚凝胺法等傳統(tǒng)方法，這些方法靈敏度較低，操作繁瑣，需反復(fù)洗滌紅細(xì)胞，自動(dòng)化程度低，試驗(yàn)全過(guò)程不宜標(biāo)準(zhǔn)化，且影響因素多，不利于臨床采取正確的診治手段?？ㄊ椒ㄊ墙陙?lái)被推薦使用的，是微柱凝膠技術(shù)與上述傳統(tǒng)方法結(jié)合的產(chǎn)物，其既克服了傳統(tǒng)方法的缺點(diǎn)，又具有靈敏度、準(zhǔn)確性高等優(yōu)點(diǎn)，為臨床安全輸血提供了很好的保障［5－6］。

本研究結(jié)果顯示，正反定型不相符者30例，有6例為紅細(xì)胞濃度異常，10例血漿中含有纖維蛋白，4例為紅細(xì)胞懸液不新鮮。紅細(xì)胞濃度或過(guò)高或離心不徹底，血清中含纖維蛋白、出現(xiàn)細(xì)胞“凝塊”、細(xì)菌污染、反定型紅細(xì)胞懸液不新鮮等，可能導(dǎo)致卡式法呈假陰性或假陽(yáng)性［7］。因此，準(zhǔn)確的紅細(xì)胞濃度是卡式法正確操作的關(guān)鍵之一，文獻(xiàn)報(bào)道2%為最佳紅細(xì)胞濃度。

本研究結(jié)果表明，9例正反定型不符者，進(jìn)一步檢測(cè)發(fā)現(xiàn)2例有抗IgG抗體（腫瘤），3例自身凝集（多發(fā)性骨髓瘤），2例有嚴(yán)重冷凝集（凝血功能障礙），2例紅細(xì)胞被抗體致敏（自身免疫性溶血性貧血），說(shuō)明某些疾病可引起的自身凝集、冷凝集等，引起的抗原減弱，會(huì)影響卡式法鑒定結(jié)果，應(yīng)予以重視。

本研究結(jié)果表明，卡式法鑒定血型，其正確率及反應(yīng)強(qiáng)度均高于手工鹽水法，且操作簡(jiǎn)便、快速、省時(shí)、省力，樣本、試劑用量少，易于觀察結(jié)果，并可以長(zhǎng)時(shí)間保存血型鑒定樣本（保存1周以上），有利于事后復(fù)查。同時(shí)，卡式法結(jié)果的判讀易于標(biāo)準(zhǔn)化，最大限度減少了操作人員主觀因素的影響。但由于卡式法成本略高于手工鹽水法，因此，作者建議對(duì)門診患者采用手工鹽水法，而對(duì)住院患者則采用卡式法。

綜上所述，卡式法是一種靈敏、安全的血型鑒定技術(shù)，對(duì)于提高血型檢驗(yàn)質(zhì)量有明顯的促進(jìn)作用，為臨床安全輸血提供了很好的保障，但由于成本略高于手工鹽水法，可應(yīng)用于住院患者血型鑒定。

［1］ 劉永霞.凝聚胺法與微柱凝膠法在臨床配血中的應(yīng)用比較［J］.現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志，2012，21（3）：266－267.

［2］ 鐘月華，羅鐵軍，黃華華，等.微柱凝膠法與凝聚胺法在交叉配血中的比較研究［J］.廣西醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2010，27（2）：296－297.

［3］ 趙小燕，王風(fēng)玉，張英，等.兩種方法在交叉配血中聯(lián)合應(yīng)用的效果評(píng)價(jià)［J］.中國(guó)醫(yī)藥指南，2009，7（14）：22－23.

［4］ 葉應(yīng)嫵，王毓三，申子瑜.全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程［M］.3版.南京：東南大學(xué)出版社，2006：135.

［5］ 楊瑩，譚雅玲，蔣永青.卡式配血在臨床輸血中的應(yīng)用價(jià)值［J］.實(shí)驗(yàn)與檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2011，29（3）：332.

［6］ 葉巧國(guó)，楊毓，何靜，等.微柱凝膠卡式法在交叉配血及不規(guī)則抗體檢測(cè)中的應(yīng)用［J］.現(xiàn)代醫(yī)院，2011，11（12）：59－61.

［7］ 王小平.微柱凝膠法應(yīng)用于血型鑒定［J］.廣州醫(yī)藥，2007，38（2）：60－61.