冬春季溫室切段扦插快繁馬鈴薯脫毒苗

高彥萍 ，楊謀 ，李掌 ，柳永強(qiáng) ，齊恩芳 ，張榮 ，張武

脫毒種薯的應(yīng)用使馬鈴薯增產(chǎn)高達(dá)30%以上，解決了馬鈴薯生產(chǎn)上因感染病毒所致的產(chǎn)量、品質(zhì)下降問(wèn)題。馬鈴薯脫毒種薯繁育技術(shù)對(duì)馬鈴薯產(chǎn)量的貢獻(xiàn)是馬鈴薯育種、栽培等其他單項(xiàng)技術(shù)所無(wú)法比擬的[1]。脫毒苗組培快繁是馬鈴薯脫毒種薯繁育體系的基礎(chǔ)生產(chǎn)環(huán)節(jié)，是一項(xiàng)科技含量高的生物應(yīng)用技術(shù)，需要投資組培快繁設(shè)施、設(shè)備，需要培養(yǎng)制作培養(yǎng)基和接種的長(zhǎng)期熟練工人[2]。當(dāng)然，一定規(guī)模的組培快繁車間具有相對(duì)固定的組培脫毒苗生產(chǎn)能力，馬鈴薯脫毒苗生產(chǎn)能力往往成為種薯公司擴(kuò)大種薯生產(chǎn)規(guī)模和提高效益的主要限制因素之一。已有報(bào)道，將剪切移栽成活的馬鈴薯組培脫毒苗莖尖段，扦插繁殖微型薯，可使脫毒苗增殖1倍[2~6]。受此啟發(fā)，設(shè)想利用扦插方式提高增殖倍數(shù)擴(kuò)繁馬鈴薯脫毒苗。通過(guò)幾年的試驗(yàn)研究，提出了冬春季溫室切段扦插快繁馬鈴薯脫毒苗模式，旨在為馬鈴薯脫毒苗繁育提供技術(shù)支撐與參考。

1 切段基礎(chǔ)苗的繁育

組培快繁車間上年度生產(chǎn)一結(jié)束，在高溫期（7~8月）立即對(duì)快繁車間、培養(yǎng)室進(jìn)行徹底清理和消毒，準(zhǔn)備下一輪組培苗快繁生產(chǎn)。8月至翌年1月通過(guò)5~6代的組培繼代擴(kuò)繁，脫毒苗數(shù)量以等比數(shù)列遞增方式擴(kuò)增，數(shù)量非常大，車間現(xiàn)有條件在下一個(gè)快繁周期內(nèi)已不能將其作為繼代轉(zhuǎn)接用基礎(chǔ)苗消耗掉。此時(shí)，將快繁組培苗分成2份，一份作為繼續(xù)進(jìn)行常規(guī)組培快繁的繼代基礎(chǔ)苗，另一份作為在防蟲(chóng)溫室進(jìn)行切段扦插快繁用的基礎(chǔ)苗。本文為了區(qū)別于馬鈴薯常規(guī)組培快繁脫毒苗，將防蟲(chóng)溫室切段扦插快繁的脫毒苗稱為馬鈴薯切段扦插脫毒苗（簡(jiǎn)稱馬鈴薯切段苗）。

2 防蟲(chóng)溫、網(wǎng)室準(zhǔn)備

冬春季節(jié)馬鈴薯切段苗繁育在防蟲(chóng)溫室中進(jìn)行，為防止蚜蟲(chóng)等昆蟲(chóng)傳播病毒，溫室門窗等開(kāi)放出口必須安裝防蟲(chóng)網(wǎng)紗，大型溫室直接在其內(nèi)搭建防蟲(chóng)網(wǎng)拱棚。在整理苗床前，采用熏蒸法（用異丙威煙劑，按每667 m28個(gè)煙彈換算量）對(duì)土壤和溫室進(jìn)行熏蒸，殺滅多種傳播病毒的媒介害蟲(chóng)及蟲(chóng)卵，采用撒施翻地方法 （用多菌靈1 kg/667 m2+五氯硝基苯3 kg/667 m2）對(duì)根層土壤進(jìn)行消毒。

3 育苗床準(zhǔn)備

育苗床有接地苗床和離地苗床。接地苗床先碾平土地再鋪網(wǎng)紗和加溫電熱線，中間用磚塊鋪出走道，為方便操作管理，走道兩邊用磚塊作成小畦，畦寬0.8~1 m，然后每小畦鋪8 cm厚的蛭石或草炭+蛭石，整平。離地苗床用石棉瓦架床，床高0.4 m左右，所鋪基質(zhì)及其厚度同接地苗床。于扦插前1 d給育苗床澆透水，扦插之前將苗床基質(zhì)刮成平面，表面噴灑溫水，要求基質(zhì)充分浸濕。新基質(zhì)直接用于扦插，舊基質(zhì)需要提前1周用上述溫網(wǎng)室消滅害蟲(chóng)和消毒方法進(jìn)行嚴(yán)格的殺蟲(chóng)和消毒處理。

4 切段苗扦插繁育

4.1 基礎(chǔ)苗切段、浸蘸生根液

將培養(yǎng)25~30 d、苗高8~10 cm、葉6~7片的組培苗從培養(yǎng)瓶中取出，放在水溫適中（25℃）的清水中，洗除根部固體培養(yǎng)基，用滅菌消毒剪刀剪除長(zhǎng)根，剪切植株成3段，分莖尖切段（1.5 cm）、中間切段（2.5~3 cm，含 2片葉）、根基切段（2.5 cm，含 1 片葉）依次盛于3個(gè)滅菌托盤中，每盛滿1盤，加入NAA 20 mg/L+KT 2 mg/L+GA30.5 mg/L作生根液，晃動(dòng)托盤，使所有切段均浸蘸到生根液，然后濾去生根液，開(kāi)始扦插。

4.2 切段苗扦插

順著畦寬方向劃線開(kāi)小溝，用滅菌消毒鑷子輕輕夾取切段扦插于小溝。按株距1.5~2 cm、行距5 cm扦插，密度1 000~1 300株/m2。扦插完1行，用鑷子撫平淺溝，輕壓苗基，扦插深度1 cm左右。3種切段混在一起扦插，生長(zhǎng)發(fā)育成苗進(jìn)度不一致，莖尖切段生長(zhǎng)發(fā)育最快，其次為基部切段，最慢為中間切段。因此，3種切段應(yīng)分區(qū)域或分溫室扦插，方便管理及下一次剪切。每扦插滿1畦，不用澆定根水，用半環(huán)形鐵絲在小畦上搭建塑膜拱棚，促進(jìn)切段苗快發(fā)根、快生長(zhǎng)。

4.3 切段苗繁育管理

①創(chuàng)造適宜的生長(zhǎng)微環(huán)境 扦插切段適宜的溫度為25~28℃，相對(duì)濕度90%，光照5 000~10 000 lx。冬季切段快繁主要受溫室低溫弱光限制，切段苗生長(zhǎng)發(fā)育緩慢。因此，冬季盡量選擇具備暖氣等加熱條件及補(bǔ)光燈改善弱光條件的溫室，必要時(shí)還應(yīng)通過(guò)苗床鋪設(shè)電熱線通電增溫。春季為切段扦插快繁的大好時(shí)節(jié)，此時(shí)氣溫回升，溫室內(nèi)光照充足，溫度適宜，切段苗繁育小畦上搭塑膜小拱棚，創(chuàng)造一個(gè)既保濕又增溫促進(jìn)切段生長(zhǎng)發(fā)育的微環(huán)境，扦插4 d后于早晚揭膜，進(jìn)行換氣及適應(yīng)鍛煉，1周后將小畦兩頭的塑膜揭開(kāi)，噴霧生長(zhǎng)調(diào)節(jié)液和營(yíng)養(yǎng)液后照樣蓋好。繼代扦插的切段苗在整個(gè)生長(zhǎng)期內(nèi)蓋膜，植株莖稈木質(zhì)化程度低，有利于繼續(xù)切段扦插。春末夏初晴天高溫進(jìn)行切斷扦插快繁時(shí)，還應(yīng)使用遮陽(yáng)網(wǎng)進(jìn)行遮光降溫。

②生長(zhǎng)調(diào)節(jié)液、營(yíng)養(yǎng)液 莖尖切段扦插4~5 d長(zhǎng)出新根，且長(zhǎng)高新增1莖節(jié)，25 d后苗高8~10 cm，莖節(jié)7~8節(jié)，可進(jìn)行第二輪切段扦插?；壳卸吻げ?~5 d后老根伸展生長(zhǎng)，新生長(zhǎng)部分白嫩，腋芽也已萌動(dòng)，正常條件長(zhǎng)高到8~10 cm需要35 d，但于扦插3、6 d分別噴霧生長(zhǎng)調(diào)節(jié)液 （NAA 5 mg/L+6-BA 0.5 mg/L+GA31 mg/L）1次，可促進(jìn)腋芽快速萌發(fā)生長(zhǎng)，25 d后苗高8~10 cm，莖節(jié)7~8節(jié)，可進(jìn)行第二輪切段扦插。中間切段6 d后開(kāi)始生根，10~12 d腋芽萌動(dòng)，且生長(zhǎng)緩慢，正常條件長(zhǎng)高到8~10 cm需要40~50 d，但于扦插3、6、9 d噴霧生長(zhǎng)調(diào)節(jié)液（NAA 5 mg/L+KT 0.5 mg/L+GA31 mg/L）3 次，可促進(jìn)腋芽生長(zhǎng)發(fā)育，長(zhǎng)高到8~10 cm需要35~40 d。不同來(lái)源莖段成苗時(shí)間不同，這有利于下次繼代切段快繁錯(cuò)開(kāi)工期。

營(yíng)養(yǎng)液為1/2 MS營(yíng)養(yǎng)液或1/2 K5營(yíng)養(yǎng)液+植物葉面肥（華碩828等），營(yíng)養(yǎng)液噴霧施入。切段扦插6 d后澆第一次營(yíng)養(yǎng)液，以后5 d 1次，直到進(jìn)行下一輪的重復(fù)切段扦插。K5營(yíng)養(yǎng)液中缺乏微量元素及有機(jī)物質(zhì)，配合噴施植物葉面肥可促進(jìn)切段苗生長(zhǎng)，1/2 MS營(yíng)養(yǎng)液也可與植物葉面肥交替噴施。

切段苗繁育中所澆液體溫度均控制在25℃左右，不要直接盛接自來(lái)水澆灌，切忌暴熱時(shí)涼水噴苗。為提高水溫，可提前1周在儲(chǔ)水池或用貯水桶、大水缸等盛水，放置于溫室中備用，也可通過(guò)添加熱水調(diào)節(jié)水溫。

③病蟲(chóng)害預(yù)防 切段苗源自組培快繁苗，自身不帶病菌（污染的組培苗最好勿進(jìn)行切段扦插或分區(qū)域進(jìn)行），苗床前期進(jìn)行了嚴(yán)格消毒處理，一般在切段快繁第一代不發(fā)生病蟲(chóng)害。但以預(yù)防為主，每隔7 d對(duì)苗床用50%多菌靈可濕性粉劑1 000倍液、72%農(nóng)用硫酸鏈霉素可濕性粉劑2 000倍液、72%百菌清1 000倍液或敵克松1 000倍液，輪流噴霧進(jìn)行滅菌消毒?？稍诶^代扦插前3~5 d，對(duì)扦插基礎(chǔ)苗分別用50%氯溴異氰尿酸2 000倍液、70%代森錳鋅1 000倍液或20%鹽酸嗎啉雙胍·銅1 000倍液噴霧預(yù)防馬鈴薯早、晚疫病，同時(shí)最好配施馬鈴薯葉面肥。切段苗快繁溫網(wǎng)室嚴(yán)禁蚜蟲(chóng)等傳毒昆蟲(chóng)，每天均留心觀察蟲(chóng)害情況，用6.5%氯氟·啶蟲(chóng)脒3 000倍液、1%噻蟲(chóng)啉2 000倍液或10%吡蟲(chóng)啉2 500倍液噴霧預(yù)防，發(fā)現(xiàn)零星蚜蟲(chóng)或周圍環(huán)境發(fā)生有翅蚜蟲(chóng)，用異丙威煙劑按每667 m24個(gè)煙彈換算量對(duì)溫室進(jìn)行熏蒸，也可直接噴6.5%氯氟·啶蟲(chóng)脒2 000倍液、1%噻蟲(chóng)啉1 500倍液或10%吡蟲(chóng)啉1 500倍液防治，3 d 1次，噴霧3次，以噴葉片背面效果好。

4.4 繼代剪切快繁

第一次切段苗分別生長(zhǎng)25、30、35 d，苗高8~10 cm，莖節(jié)6~7節(jié)時(shí)，可進(jìn)行第二次繼代切段繁殖，植株不用拔出，直接在每株上剪取莖段2個(gè)，即莖尖切段和中間切段（大小同4.1所述），基部切段帶1~2片葉留于蛭石中。將莖尖切段和中間切段按照4.1、4.2的方法處理與扦插。如此重復(fù)繼代切段繁殖下去，直到繁殖夠所需數(shù)量為止。當(dāng)然，最后一次切段快繁的栽植密度按照微型薯生產(chǎn)苗密度進(jìn)行，免去間苗移栽程序。

繼代切段快繁理論上增殖3n倍 （n為切繁次數(shù)）。實(shí)際受到環(huán)境、氣候、人工、管理措施限制，在3~6月切繁時(shí)間內(nèi)，可增殖20~25倍，較理論增殖34=81倍出入較大，但接近33=27倍。

4.5 間苗移栽

切段苗高5~6 cm，可間苗移栽。這時(shí)切段苗繁育苗床變?yōu)槲⑿褪砩a(chǎn)苗床，按照微型薯生產(chǎn)移栽苗密度計(jì)算所留苗密度，移走多余的切段苗。間苗方法：用滅菌鑷子插入蛭石，挑起切段苗，輕搖抖落根基大部分蛭石，15株1撮放入轉(zhuǎn)運(yùn)盤中，不用清洗根部基質(zhì)直接用于移栽。馬鈴薯切段苗移栽方法以及移栽成活后的管理同常規(guī)馬鈴薯組培苗。

5 結(jié)論

馬鈴薯脫毒技術(shù)能否在生產(chǎn)上充分發(fā)揮其增產(chǎn)作用的關(guān)鍵是能否在有限的生產(chǎn)季節(jié)內(nèi)繁殖出相當(dāng)數(shù)量的脫毒苗。溫網(wǎng)室切段扦插快繁馬鈴薯脫毒苗是常規(guī)組培快繁的有益補(bǔ)充，是馬鈴薯脫毒苗快繁的有效方法之一。其特點(diǎn)是不要求無(wú)菌條件下嫻熟的接種技術(shù)，一般勞動(dòng)者均可操作，從而在一定程度上分擔(dān)了組培快繁車間脫毒苗生產(chǎn)壓力；其繼代增殖倍數(shù)高，在相同繁殖周期內(nèi)，較僅剪切莖尖莖段扦插技術(shù)增加5倍，經(jīng)計(jì)算，較馬鈴薯常規(guī)組培快繁節(jié)約成本20%以上。

[1]孫慧生，楊元軍，王培倫，等.脫毒微型薯快速利用于生產(chǎn)的模式、效果和問(wèn)題[C]//中國(guó)作物學(xué)會(huì)馬鈴薯專業(yè)委員會(huì)2002年年會(huì)論文集.

[2]謝慶華，吳毅歆，張勇飛，等.脫毒馬鈴薯試管苗剪尖扦插無(wú)土繁殖研究[J].中國(guó)馬鈴薯，2000，14（3）：135-137.

[3]柳永強(qiáng)，王一航，高彥萍，等.馬鈴薯移栽苗剪插快繁脫毒微型種薯技術(shù)[J].長(zhǎng)江蔬菜，2010（7）：13-14.

[4]朱明全，黃雪麗，倪蘇，等.馬鈴薯試管苗及頂芽扦插原原種產(chǎn)量研究[J].中國(guó)馬鈴薯，2008，22（6）：342-345.

[5]王曉春，劉尚前.抗生素對(duì)脫毒馬鈴薯扦插苗成活率及生長(zhǎng)發(fā)育的影響[J].長(zhǎng)江蔬菜，2009（9）：37-38.

[6]胡四化，朱志華.植物生長(zhǎng)調(diào)節(jié)劑在馬鈴薯脫毒苗網(wǎng)室快繁中的應(yīng)用研究[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2006（6）：19-21.