淺談 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室安全操作規(guī)程與注意事項(xiàng)

曾玉梅

近年來(lái)，隨著醫(yī)學(xué)微生物學(xué)、免疫學(xué)等學(xué)科的發(fā)展，許多高等院校以及醫(yī)療機(jī)構(gòu)開(kāi)設(shè)微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室。但微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的生物安全問(wèn)題，也是現(xiàn)實(shí)存在的不可忽視的問(wèn)題。管理的疏忽可能會(huì)造成工作人員感染、微生物外泄污染、危害社會(huì)等嚴(yán)重問(wèn)題。2003年春季，傳染性非典型性肺炎爆發(fā)，多地的實(shí)驗(yàn)室出現(xiàn)人員感染SARS病毒的事件，把實(shí)驗(yàn)室的安全操作規(guī)范的問(wèn)題再一次的擺在了我們的面前。因此，認(rèn)真研究實(shí)驗(yàn)室的具體情況，制定實(shí)驗(yàn)室的安全防護(hù)對(duì)策，顯得尤為重要。

1 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的特點(diǎn)

微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室作為進(jìn)行試驗(yàn)和科研的場(chǎng)所，操作者在工作中不可避免的要接觸到各種病原微生物及其他有害因素。作為學(xué)生試驗(yàn)教學(xué)的場(chǎng)所，微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室所接觸的有害因子雖然沒(méi)有臨場(chǎng)科室多，但其安全性同樣不可忽視。進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室學(xué)習(xí)的學(xué)生大多為初次進(jìn)入醫(yī)學(xué)院的新生，其醫(yī)學(xué)知識(shí)不足，自我保護(hù)意識(shí)淡薄，對(duì)病源微生物及其他有害物質(zhì)的危險(xiǎn)性認(rèn)識(shí)不足，需要重視實(shí)驗(yàn)室的安全規(guī)則和注意事項(xiàng)。近年來(lái)，隨著相關(guān)科學(xué)的發(fā)展，實(shí)驗(yàn)室的使用率不斷增加，人員流動(dòng)增加，這些都增加了保證實(shí)驗(yàn)室安全的難度。

2 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的感染

實(shí)驗(yàn)室中的感染來(lái)源主要來(lái)自以下幾個(gè)方面：（1）工作中的意外；（2）實(shí)驗(yàn)室氣溶膠的產(chǎn)生和傳播；（3）接種環(huán)、吸管、針頭及針筒的使用；（4）離心、勻漿、混和及振蕩等操作。微生物的感染途徑主要有口腔、呼吸道及皮膚粘膜等，而引起感染所需微生物的劑量又與感染途徑有關(guān)。因此，所有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的人員必須強(qiáng)化無(wú)菌操作觀念，養(yǎng)成良好的習(xí)慣。挑取、分離、培養(yǎng)、生化反應(yīng)、檢查等操作都需做好無(wú)菌操作，正確的處理吸管、試管、培養(yǎng)物等傳染性材料，正確的使用各種消毒器械。

3 微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的安全操作規(guī)程及注意事項(xiàng)

3.1 增加操作者的安全意識(shí) 首先實(shí)驗(yàn)室的所有人員要認(rèn)真掌握本實(shí)驗(yàn)室所涉及的所有標(biāo)本的來(lái)源、致病力、傳播途徑以及防范方法等，制定相關(guān)的實(shí)驗(yàn)室安全制度。具體包括制定微生物實(shí)驗(yàn)室的相關(guān)標(biāo)本操作規(guī)范、實(shí)驗(yàn)室的環(huán)境消毒，對(duì)廢棄物的處理，以及標(biāo)本的保存使用等。對(duì)新的病原體標(biāo)本進(jìn)行研究時(shí)，需要保持高度的警惕性與責(zé)任感，充分評(píng)估新樣本的危險(xiǎn)性，制定相關(guān)安全措施。

3.2 實(shí)驗(yàn)室的準(zhǔn)入制度及規(guī)章制度 實(shí)驗(yàn)室的入口需設(shè)立醒目的警示標(biāo)牌，非實(shí)驗(yàn)室工作人員禁止進(jìn)入，不得隨意讓非實(shí)驗(yàn)室人員參觀。在進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室后，所有人員需遵守實(shí)驗(yàn)室規(guī)則：（1）所有進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室人員需穿著隔離衣，在試驗(yàn)結(jié)束后，需將隔離衣反折好放入指定位置。（2）除外個(gè)人所需的書(shū)籍、文具外不得將其他的個(gè)人物品帶入實(shí)驗(yàn)室。（3）嚴(yán)禁在實(shí)驗(yàn)室內(nèi)吃喝；不得吸煙、嚼口香糖；不得將手指觸及頭面部，尤其是眼睛、鼻口周圍。（4）實(shí)驗(yàn)室內(nèi)不得打鬧、高喊、隨意走動(dòng)。（5）對(duì)實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的器材妥善使用，如有破損立即報(bào)告，不得私自妥善處理。（6）污染物及危險(xiǎn)物品需放入指定容器，專門(mén)處理；離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室前需檢查門(mén)窗是否關(guān)好，檢查水、電、電器是否關(guān)閉，使用消毒水洗手后離開(kāi)實(shí)驗(yàn)室。

3.3 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的菌種管理 根據(jù)《中國(guó)醫(yī)學(xué)微生物菌種保存管理辦法》的規(guī)定結(jié)合實(shí)驗(yàn)室的具體情況，制定本實(shí)驗(yàn)室的菌種保存規(guī)程：（1）設(shè)置專門(mén)的冰柜保存菌種，進(jìn)入實(shí)驗(yàn)室的所有菌種都必須購(gòu)自正規(guī)單位。（2）對(duì)一、二類菌種設(shè)置專門(mén)的冰柜保存，建立實(shí)驗(yàn)室的菌種使用記錄，制定專人負(fù)責(zé)，防止菌種丟失。（3）使用菌種時(shí)要采用嚴(yán)格的防范措施，嚴(yán)格操作規(guī)程，防止菌種傳播。（4）對(duì)危險(xiǎn)品及劇毒品需由專人、專柜保管、上鎖，防止其被盜、誤用或泄露。（5）對(duì)所有的廢棄物制定專門(mén)的管理辦法，并嚴(yán)格遵守以上規(guī)程。

3.4 實(shí)驗(yàn)室內(nèi)的儀器管理 為維護(hù)實(shí)驗(yàn)室儀器的正常運(yùn)行，需要定期對(duì)實(shí)驗(yàn)室儀器進(jìn)行全面的檢查。（1）對(duì)冰箱及超低溫冰箱內(nèi)保存的所有容器都必須注明標(biāo)簽，記錄有內(nèi)容物的科學(xué)命名、貯存時(shí)間及貯存人。清理冰箱時(shí)需攜帶面部保護(hù)罩及厚膠手套。（2）離心機(jī)在使用前需檢查離心管是否破損；離心結(jié)束后，需要等離心機(jī)完全停止后再開(kāi)蓋；若離心前發(fā)現(xiàn)有離心管破碎，均需行消毒處理。（3）使用生物安全柜時(shí)，需一次性放入所需物品，表面通過(guò)70%的乙醇消毒，打開(kāi)風(fēng)機(jī)5～10min后再操作。若感染性物質(zhì)流出時(shí)，以減低氣溶膠產(chǎn)生方式消毒滅菌。試驗(yàn)結(jié)束后，對(duì)安全柜內(nèi)的所有物品進(jìn)行消毒，關(guān)機(jī)前運(yùn)行5min，凈化殘余氣體。其他如恒溫箱、高壓消毒器等器械需按時(shí)進(jìn)行檢查清理。

3.5 實(shí)驗(yàn)室的清潔消毒 實(shí)驗(yàn)室必須具備必須的清潔消毒用品并及時(shí)檢查補(bǔ)充，清潔和消毒均要符合生物安全要求，遵循先消毒后清潔的總原則。在消毒處理時(shí)，遵循及時(shí)、徹底、有效的原則。為保證消毒效果，根據(jù)不同的消毒對(duì)象使用相應(yīng)的消毒方法。實(shí)驗(yàn)結(jié)束后，所有的實(shí)驗(yàn)臺(tái)面及實(shí)驗(yàn)器材表面需要使用消毒液消毒，及時(shí)通風(fēng)，并定期使用紫外線照射消毒。當(dāng)紫外線的照射強(qiáng)度小于原照射量的70%時(shí)，需找專人進(jìn)行更換。

3.6 實(shí)驗(yàn)室廢棄物的處理 實(shí)驗(yàn)室在日常工作中會(huì)產(chǎn)生大量的廢棄物，需及時(shí)安全的進(jìn)行處理，以防止人員的感染及污染事件。實(shí)驗(yàn)室主要污染材料有三大類型：（1）可丟棄的材料如廢紙、廢液、破碎的器材等；（2）可處理后再使用的材料如剪刀、鑷子、工作服等；（3）被污染的設(shè)備，如離心機(jī)、恒溫箱、震動(dòng)器等。對(duì)于實(shí)驗(yàn)室的污染材料根據(jù)不同材料和利用價(jià)值的處理方法大致為：化學(xué)消毒、高壓蒸氣滅菌、焚燒滅菌三種。每天對(duì)空氣、各種物體表面和地面進(jìn)行常規(guī)消毒；盛放生物廢物的容器要防漏，放在專用滅菌袋中滅菌；尖銳破損物的放置容器要堅(jiān)固并且不易刺穿；所有能消毒的物品在送出實(shí)驗(yàn)室前盡可能用的硬質(zhì)容器盛放；盛放生物廢物的容器在送出前進(jìn)行一次高壓消毒處理。

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