趙建萍
(河南省鄭州市婦幼保健院,鄭州450012)
滴蟲陰道炎是婦女的常見病多發(fā)病,嚴(yán)重危害著婦女的身心健康,其診斷多依靠臨床癥狀和白帶常規(guī)傳統(tǒng)鏡檢,但是鏡檢陽性率較低[1,2]。干化學(xué)酶法診斷婦科炎癥的試劑盒已經(jīng)用于臨床,為評價其對陰道滴蟲的診斷效果,將干化學(xué)酶法陽性而傳統(tǒng)鏡檢法陰性的標(biāo)本進(jìn)行滴蟲培養(yǎng),現(xiàn)報道如下.
1.1 病人來源 598例病人均來自我院婦產(chǎn)科門診,年齡在18~68歲。
1.2 試劑盒 干化學(xué)酶法婦科聯(lián)檢卡及試劑均來自鄭州安圖綠科生物工程有限公司。陰道滴蟲培養(yǎng)基采用自配肝浸湯:15%肝浸液,蛋白胨2.0g、麥芽糖1.0g、半胱氨酸鹽酸鹽0.2g,N a C l 0.5g,10%胎牛血清1 m l。調(diào)節(jié)pH至5.8~6.0。
1.3 取材 用無菌棉簽在陰道后穹隆及側(cè)壁旋轉(zhuǎn)涂擦,放入潔凈小試管中立即送實驗室檢驗。檢驗前加0.8 m l試劑盒配套稀釋液。
1.4 方法 ①嚴(yán)格按試劑說明書的要求進(jìn)行操作,結(jié)果按說明書進(jìn)行判斷。②濕片鏡檢:將標(biāo)本攪勻滴一滴于載波片,用顯微鏡檢查,最低觀察20個高倍視野,按常規(guī)觀察,檢出滴蟲的直接報告。③革蘭氏染色觀察:涂片,干燥,染色,再次排除滴蟲感染。④滴蟲培養(yǎng):經(jīng)革蘭氏染色后再次觀察仍為陰性的標(biāo)本但干化學(xué)酶法滴蟲陽性的標(biāo)本10例,接種肝浸湯陰道毛滴蟲培養(yǎng)基,置37℃孵箱培養(yǎng),24 h~48 h后從試管近底部吸取20∶1培養(yǎng)物,滴于載玻片上,加蓋玻片,高倍鏡鏡檢,觀察蟲體形態(tài)和活動力。
2.1 滴蟲鏡檢 濕片法直接鏡檢見陰道滴蟲無色半透明、圓形或梨形、運動活躍的活滋養(yǎng)體,革蘭氏染色后4根前鞭毛和1根后鞭毛清晰可見。
2.2 陽性率 598份陰道分泌物陰道滴蟲干化學(xué)酶法檢出滴蟲陽性率為8.36%,高于普通鏡檢法的6.35%,采用配對設(shè)計分類變量資料的卡方檢驗,(滴蟲檢驗:χ2=4.611,P<0.05,P<0.01。)其差異具有顯著性意義。
陰道毛滴蟲(tricho monasva ginalis,TV)是一種致病性原蟲,導(dǎo)致滴蟲陰道炎,被認(rèn)為是最流行的性傳播疾?。⊿TD)[3]。資料還提示宮頸癌、早產(chǎn)與滴蟲感染相關(guān)。臨床表現(xiàn)為外陰灼痛、瘙癢、陰道分泌物增多為泡沫狀或膿性,實驗室檢查在滴蟲病診斷中十分必要。臨床上常用的檢查方法是陰道分泌物生理鹽水直接涂片鏡檢(濕片法),簡便、經(jīng)濟(jì)、快速。但濕片法漏檢率較高,并且影響因素也較多。比如觀察者的責(zé)任心、經(jīng)驗、以及標(biāo)本的保溫處理等。盡管培養(yǎng)法繁瑣、費時、費用較高。培養(yǎng)法(培養(yǎng)準(zhǔn)確性98%)被認(rèn)為是診斷滴蟲病的 “金標(biāo)準(zhǔn)”。本研究10例濕片加革蘭氏染色鏡檢均陰性但干化學(xué)酶法陽性且p H>4.8的標(biāo)本培養(yǎng)結(jié)果8例陽性。顯示干化學(xué)酶法檢出率明顯高于其他方法。
婦科五聯(lián)檢診斷陰道滴蟲主要原理是陰道滴蟲具有較強(qiáng)的乙酰氨基葡萄糖苷酶活性,通過酶促反應(yīng)是否陽性和p H來反推病源種類,故陽性率較高,通過臨床鏡檢染色觀察到一些其他的微生物的出現(xiàn)也可導(dǎo)致此酶活性升高,從而可導(dǎo)致一定的假陽性。本次研究10例干化學(xué)酶法滴蟲陽性,2例假陽性,說明基于乙酰氨基葡萄糖苷酶活性設(shè)計的陰道聯(lián)檢還有一定的局限。并且在報結(jié)果時,要嚴(yán)格按照試劑盒說明書上的說明,所以針對干化學(xué)酶法乙酰氨基葡萄糖苷酶陽性時,必須用鏡檢確認(rèn)是滴蟲還是假絲酵母菌。否則極易誤判。
總之,陰道分泌物干化學(xué)酶法作為陰道分泌物常規(guī)檢測的一種新的方法學(xué),診斷滴蟲陰道炎方法簡便快捷,檢出率高,有較為廣闊的臨床應(yīng)用前景。
[1]李宏魁.探討三種方法對念珠菌性陰道炎的診斷價值[J].臨床和實驗醫(yī)學(xué)雜志,2006,(09):1376.
[2]段斌.陰道滴蟲濕片法與濃縮加溫法檢查結(jié)果比較[J].臨床檢驗雜志,1991,9(2):107.
[3]Van Der Schee.C.,A.van Belkum,L.Zwijgers L,et al.Improved diagnosis ofTrichomonas vaginalis infection by PCR using vaginal swabs and urine specimenscompared to diagnosis by wet mount microscopy,culture,and fluorescent staining.[J].Clin.Microbiol,1999,37(12):4127~4130.