近年新出現(xiàn)的兩種豬病

翁善鋼

（外高橋出入境檢驗檢疫局，上海市 200137）

近年新出現(xiàn)的兩種豬病

翁善鋼

（外高橋出入境檢驗檢疫局，上海市 200137）

豬腸道杯狀病毒和豬細環(huán)病毒感染是近年受到國內(nèi)外學者關注的兩種新出現(xiàn)的豬病。引起發(fā)病的豬腸道杯狀病毒主要是豬諾如病毒和豬札幌病毒，這兩種病毒能引起仔豬腹瀉。細環(huán)病毒在豬群中廣泛存在，可能同仔豬斷乳后多系統(tǒng)衰竭綜合征的發(fā)生有關。除了這兩種病外，各種新出現(xiàn)的豬病病毒感染也具有潛在的威脅，但迄今為止，不少病毒的生物學特性以及致病機理尚不清楚。本文將主要介紹豬腸道杯狀病毒 （Porcine Enteric Calicivir uses）及豬細環(huán)病毒 （To rqueteno susviruses，TTSuV）的流行、傳播以及診斷等相關情況。

豬腸道杯狀病毒；豬細環(huán)病毒；病原；流行；診斷

在過去的20多年中，一直有新的豬病不斷出現(xiàn)，給全世界養(yǎng)豬業(yè)帶來嚴重威脅。這些新出現(xiàn)的豬病通常沒有國界限制，廣泛存在于世界各地主要養(yǎng)豬國家。有些病如豬繁殖與呼吸綜合征（porcine reproductive and respiratory syndrome，PRRS）和豬圓環(huán)病毒 2型（porcine circovirus type 2，PCV2）感染等造成的損失非常嚴重，國內(nèi)外對其研究也較為深入，報道很多。但是對于豬腸道杯狀病毒和豬細環(huán)病毒感染沒有詳細的報道，下面筆者對豬腸道杯狀病毒以及豬細環(huán)病毒的流行、傳播、診斷等相關情況進行介紹。

1 豬腸道杯狀病毒感染

1.1 病原學

杯狀病毒科 （Caliciviridae）的病毒是無囊膜單股正鏈的RNA病毒。國際病毒分類委員會 （ICTV）在2002年將杯狀病毒科的病毒分為四個屬，分別是諾如病毒 （Norovirus，NoV），札幌病毒（Sapovirus， SaV）， 水 皰 疹 病 毒（Vesivirus）和兔病毒（Lagovirus）屬[1]。其中能夠感染豬并引起豬發(fā)病的主要是NoV和SaV。

NoV基因組長度約為 7.3～7.7 kb，包括 3個開放閱讀框 （open reading frames，ORF），用于編碼非結(jié)構(gòu)性多聚蛋白，主要衣殼蛋白 （VP1）和次要衣殼蛋白 （VP2）[2]。多聚蛋白經(jīng)過蛋白酶處理后能夠產(chǎn)生多種非結(jié)構(gòu)蛋白。衣殼蛋白由較為保守的S結(jié)構(gòu)域和高度可變的P結(jié)構(gòu)域組成。根據(jù)對諾瓦克病毒的病毒樣粒子 （VLP）的X射線晶體分析顯示，P結(jié)構(gòu)域可以進一步分為P1A，P2和P1B亞結(jié)構(gòu)域。諾瓦克病毒是具有高度遺傳變異特性的病毒。

SaV的基因組長度為 7.1～7.5 kb，與NoV不同的是，SaV只含有兩個ORF。ORF1編碼多聚蛋白和衣殼蛋白。多聚蛋白經(jīng)過蛋白酶處理能夠產(chǎn)生幾種非結(jié)構(gòu)性蛋白。SaV衣殼蛋白的基因直接連在ORF1上，這是SaV與NoV的主要區(qū)別[3]。NoV的衣殼蛋白由一個單獨的ORF2編碼。SaV的ORF2編碼一些功能尚不清楚的小片段蛋白。與NoV相似，SaV也是具有高度遺傳變異性的病毒。

1.2 流行

有一項研究調(diào)查了美國3個州 （俄亥俄、密歇根和北卡羅來納州）的7個豬場及1個屠宰場不同日齡豬的NoV流行情況。不同豬場的流行率差異很大，最高的豬場流行率達70%。然而這項研究結(jié)果顯示，保育豬以及斷奶仔豬（20周齡以下的斷奶仔豬）未能檢測到NoV。原因可能是幼齡仔豬對NoV不易感，這同人類感染NoV的情況類似。不過，調(diào)查的研究人員認為試驗所采用的RT-PCR檢測方法的敏感性不高，可能是幼齡仔豬未檢測到NoV的原因[4]。

豬SaV廣泛分布于世界各地的豬群中，近些年，陸續(xù)從美國、丹麥、芬蘭、匈牙利、委內(nèi)瑞拉、意大利、西班牙、日本、斯洛文尼亞、加拿大、巴西、韓國等國的豬群中分離到豬SaV。豬SaV在不同國家的感染率不同。通常2～8周齡的仔豬感染率最高。采用豬SaV Cowden毒株對SPF豬進行人工感染實驗顯示，SaV可以引起腹瀉以及腸道病變。不過，最近的一項流行病學研究稱，在丹麥和瑞典，患有腹瀉的仔豬與健康的仔豬的SaV感染率并沒有明顯區(qū)別。在國內(nèi)，有關豬SaV感染已有相關報道，但不多見。國內(nèi)對于豬NoV和SaV的研究尚處于起步階段。

1.3 診斷

對于NoV和SaV的實驗室診斷主要基于病毒抗原檢測、病毒RNA檢測以及血清抗體反應。

電鏡觀察可以直接觀察到病毒粒子。但是觀察電鏡需要較高的技術和經(jīng)驗，還需要配備先進的設備，因此有大量樣品需要檢測時，電鏡觀察并不是一種常用的方法。此外，杯狀病毒科包含的多種病毒在形態(tài)上差異也比較大，因此對檢測人員電鏡觀察的技術水平要求較高。

ELISA方法能用于檢測病毒抗原。用于檢測病毒RNA的傳統(tǒng)RT-PCR以及實時定量RT-PCR也見報道。重組VLP作為檢測抗體的ELISA的包被抗原，可用于檢測血清中的抗體水平。上述檢測豬NoV和SaV的多種方法都有報道，但不同方法之間的特異性和敏感性的差別較大[5]。

2 豬細環(huán)病毒感染

2.1 病原學

細 環(huán) 病 毒 （Torque teno virus，TTV）于1997年首次報道，其是一種能夠感染人和多種動物 （如豬、雞、奶牛、綿羊、貓和狗等）的病毒。其中，豬細環(huán)病毒 1型 （Torque teno sus virus1，TTSuV1）和豬細環(huán)病毒 2型（Torque teno sus virus2，TTSuV2）能夠感染豬。

對于人TTV的研究顯示，TTV的病毒粒子為20面體，無囊膜，直徑為30～32 nm。血清和糞便中的TTV在氯化銫中的浮密度分別為 1.31～1.33 g/cm3和1.33～1.35 g/cm3。TTV為單股環(huán)狀負鏈DNA病毒，基因組長度因宿主不同而有所不同，在2.1～3.8 kb之間，其中TTSuV（豬細環(huán)病毒）的長度大約為2.8 kb。TTSuV具有一定的遺傳多樣性，同一頭豬有可能感染至少兩種不同基因型或者亞型的 TTSuV[6]。TTSuV1和TTSuV2的核苷酸序列相似性較低，僅為50%[7]。

2.2 流行與傳播

TTSuV在世界各地豬群中的流行率在24%～100%之間，與很多其它豬病病毒類似，直到近些年TTSuV才被人們注意到[8]。TTV主要的傳播途徑是糞口傳播，但垂直傳播也是重要的傳播方式[9]?？稍?周齡仔豬的鼻腔和糞便樣本中檢測到TTSuV的DNA，陽性率往往隨著日齡增加而增加。15周齡的豬主要通過鼻腔排毒，而不是通過糞便排毒。TTSuV通過糞便排毒的概率為 15%，TTSuV1通過鼻腔排毒的概率為 30%，TTSuV2通過鼻腔排毒的概率為55%[10]。病毒也可以垂直傳播，在胎兒組織、血液、精液、初乳中都能檢測到病毒[11]。很多胎兒被檢測到感染了TTSuV，其中TTSuV2的感染率更高一些。病毒感染同母豬流產(chǎn)沒有直接聯(lián)系[12]。胎兒組織中所含的TTSuV DNA的量一般較低。用于人工授精的公豬的精液中也檢測到TTSuV[13]。因此，精液傳播也是一種重要的傳播方式，但尚未發(fā)現(xiàn)病毒對精液的數(shù)量以及質(zhì)量有何影響。由于TTSuV具有多種有效的傳播方式，TTSuV廣泛存在分布于世界各地。然而，最近的研究顯示不同的地區(qū)存在不同TTSuV優(yōu)勢亞型。

采用半定量PCR檢測方法檢測發(fā)現(xiàn)5周齡以下的仔豬或者胎豬的組織病毒含量較少，有的甚至檢測不到病毒。日齡較大的豬 （大約25周齡～待宰日齡）TTSuV的含量以及流行率比較高。TTSuV感染可導致漸進性地持續(xù)感染。抗ORF1抗體數(shù)量的增多往往與血清中病毒DNA含量的下降有關[14]。但大多數(shù)研究表明，中和抗體不能完全清除病毒血癥，這也是病毒感染能夠持續(xù)存在的原因。此外，胎兒感染TTSuV，可使其出生后對TTSuV產(chǎn)生免疫耐受。

2.3與TTSuV感染相關的疾病

TTSuV在健康豬群感染比例較高。因此，病毒本身并不能立即引起疾病。不少研究認為TTSuV感染能夠影響其它一些疾病的發(fā)展。近些年有報道稱TTSuV感染同豬圓環(huán)病毒2型感染及其引起的豬圓環(huán)病毒病 （PCVD）有關[15]。還有報道稱患有仔豬斷奶后多系統(tǒng)衰竭綜 合 征 （post-weaning multisystemic wasting syndrome，PMWS）的仔豬中TTSuV2的感染率 （91%）高于健康的仔豬 （72%）。PMWS是由PCV2感染引起的疾病。采用定量PCR技術進行檢測也表明，患有PMWS的仔豬中TTSuV2含量要高于健康仔豬。但TTSuV1在不同仔豬中的感染率差異不是十分明顯。也有研究報道認為，TTSuV感染并不會加重PMWS的癥狀，不過這項研究僅采用了11頭患PMWS仔豬和11頭健康的仔豬進行了實驗，下結(jié)論還為時尚早[16]。

一項對健康以及患PMWS仔豬長期研究顯示，在11周齡時，無論是健康豬還是患PMWS的豬，TTSuV1 DNA含量都開始下降。健康豬的TTSuV2含量也是從11周起開始下降，然而患PMWS的豬的TTSuV2含量卻呈持續(xù)上升趨勢直到疾病暴發(fā)[17]。一項血清學研究顯示，患PMWS的仔豬與健康仔豬相比，TTSuV2 DNA的滴度較高，而抗TTSuV2的抗體水平較低。目前尚無關于抗TTSuV1的抗體水平的相關報道。

另一方面，SPF豬在人工接種了含有TTSuV1的組織勻漿后 7天感染PCV2，可使豬患上了 PMWS，但是僅人工感染 TTSuV1并不能夠引起PMWS。TTSuV1感染對于SPF豬能夠引起輕度的間質(zhì)性肺炎，暫時性胸腺萎縮，肝臟淋巴細胞組織浸潤等病變。迄今尚未對SPF豬進行人工感染TTSuV2的報道?，F(xiàn)有的研究顯示，不同種的TTSuV不僅基因不同，致病性也不同。此外，尚無證據(jù)顯示TTSuV單獨感染或者TTSuV與PCV2共同感染與繁殖障礙有關[18]。

在自然狀態(tài)下，TTSuV與PCV2共同感染的概率很高。但在大多數(shù)情況下，共感染并不能導致疾病，只是呈現(xiàn)亞臨床感染。疾病的發(fā)生可能不只是病毒共感染的問題，還同病毒的含量有關。因此，TTSuV可能是引起免疫系統(tǒng)損害的一個重要觸發(fā)因素。最新的研究表明當宿主處于疾病狀態(tài)時，TTSuV2復制及釋放的量會增加。因此，有學者推測，TTSuV2引起的病毒血癥與仔豬的免疫力水平有關。

作為一種新出現(xiàn)的豬病病毒，TTSuV在我國國內(nèi)的研究較少，尚處于起步階段，但已有部分報道證實了該病毒存在于我國的豬群中。

當前，國內(nèi)豬病流行形式十分復雜，各類新老疫病反復出現(xiàn)，加強對NoV、SaV以及TTSuV等新出現(xiàn)病毒的研究任重而道遠。

[1]Mayo MA.A summary of taxonomic changes recently approved by ICTV.Arch Virol，2002，147（8）:1655-1656.

[2]Belliot G，Sosnovtsev SV，Mitra T，et al.In vitro proteolytic processing of the MD145 norovirus ORF1 nonstructural polyprotein yields stable precursors and products similar to those detected in calicivirus-infected cells.J Virol，2003，77（20）:10957-10974.

[3]Zheng DP，Ando T，F(xiàn)ankhauser RL，et al.Norovirus classification and proposed strain nomenclature.Virology，2006，346（2）:312-323.

[4]Kim HJ，Cho HS，Cho KO，et al.Detection and molecular characterization of porcine enteric calicivirus in Korea，genetically related to sapoviruses.J Vet Med B Infect Dis Vet Public Health，2006，53（4）:155-159.

[5]Wang QH，Chang KO，Han MG，et al. Development of a new microwell hybridization assay and an internal control RNA for the detection of porcine noroviruses and sapoviruses by reverse transcription-PCR.JVirol Methods，2006，132（1-2）:135-145.

[6]Gallei，A.，S.Pesch，W.S.Esking，et al.Porcine Torque teno virus:determination of viral genomic loads by genogroup-specificmultiplex rt-PCR，detection of frequent multiple infectionswith genogroups 1or 2，and establishment of viral full-length sequences.Vet.Microbiol，2010，143:202-212.

[7]Cortey，M.，L.Macera，J.Segales，et al. Genetic variability and phylogeny of Torque teno sus virus 1（TTSuV1）and 2（TTSuV2）based on complete genomes.Vet.Microbiol，2011，148:125-131.

[8]Segale′s，J.，L.Mart|′nez-Guino′，M. Cortey，et al.Retrospective study on swine Torque teno virus genogroups 1 and 2 infection from 1985 to 2005 in Spain.Vet.Microbiol，2009，134:199-207.

[9]Pozzuto，T.，B.Mueller，B.Meehan，et al.Inutero transmission of porcine torque teno viruses.Vet.Microbiol，2009，137:375-379.

[10]Sibila，M.，L.Mart|′nez-Guino′，E. Huerta，et al.Swine torque teno virus（TTV）infection and excretion dynamics in conventional pig farms.Vet.Microbiol，2009，139:213-218.

[11]Aramouni，M.，J.Segale′s，M.Cortey，et al.Age-related tissue distribution of swine Torque teno sus virus 1 and 2.Vet.Microbiol，2010，146:350-353.

[12]Mart|′nez-Guino′，L.，T.Kekarainen，J. Maldonado，et al.Torque teno sus virus（TTV）detection in aborted and slaughterhouse collected Foetuses.Theriogenology，2010，74:277-281.

[13] Kekarainen，T.，S.Lo′pez-Soria，J. Segale′s.Detection of swine Torque teno virus genogroups 1 and 2 in boar sera and semen. Theriogenology，2007，68:966-971.

[14]Huang，Y.W.，K.K.Harrall，B.A.Dryman，et al.Expression of the putative ORF1 capsid protein of porcine Torque teno sus virus 2 （TTSuV2）and development of Western blot and ELISA serodiagnostic assays:correlation between TTSuV2 viral load and IgG antibody level in pigs.Virus Res，2011，158:79-88.

[15]Ellis，J.A.，G.Allan，S.Krakowka. Effect of coinfection with genogroup 1 porcine torque teno virus on porcine circovirus type 2-associated postweaning multisystemic wasting syndrome in gnotobiotic pigs.Am.J.Vet.Res，2008，69:1608-1614.

[16]Lee，S.S.，S.Sunyoung，H.Jung，et al. Quantitative detection of porcine Torque teno virus in Porcine circovirus-2-negative and Porcine circovirus-associated disease-affected pigs.J.Vet.Diagn.Invest，2010，22:261-264.

[17]Nieto，D.，M.Aramouni，L.Grau-Roma，et al.Dynamics of Torque teno sus virus 1（TTSuV1）and 2（TTSuV2）DNA loads in serum of healthy and postweaningmultisystemic wasting syndrome （PMWS）affected pigs.Vet.Microbiol，2011，152:284-290.

[18]Ritterbusch，G.A.，C.A.Sa Rocha，N. Mores，et al.Natural co-infection of torque teno virus and porcine circovirus 2 in the reproductive apparatus of swine.Res.Vet.Sci，2011，92（3）:519-523.

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2012-06-15