黃酮甙對大鼠胃泌素及胃運動的影響

張 茂，李 瑞，吳小玫，丁東婧,王 剛,劉 彬

(重慶醫(yī)科大學附屬兒童醫(yī)院：1.中醫(yī)科；2.藥劑科 400014)

枳實是常用的理氣藥，為蕓香科植物酸橙的干燥幼果，主要成分為生物堿、黃酮甙及揮發(fā)油，藥理學實驗表明枳實對于胃腸運動具有調(diào)節(jié)作用，臨床上廣泛用于調(diào)節(jié)脾胃功能失調(diào)[1]。既往的研究主要集中在枳實單藥和枳實復方制劑對胃泌素及胃運動的影響，而對其活性成分黃酮甙和其促胃腸動力作用關系的研究尚少。為此本研究通過提取枳實活性成分黃酮甙(橙皮甙及柚皮甙)，研究其調(diào)節(jié)胃腸運動的機制，為臨床應用提供更多的理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1藥物的制備 藥材加8倍量60%乙醇回流提取1.5 h，提取液濃縮至每毫升相當于2 g枳實生藥。采用高效液相色譜法(HPLC)測定，色譜柱為HypersilODS2(250 mm×4.6 mm,5 μm),經(jīng)方法學驗證，標準品橙皮甙及柚皮甙分離良好，橙皮甙、柚皮甙的分離度大于1.5，結果表明橙皮甙濃度為0.014～0.140 mg/mL,柚皮甙為0.006 8～0.054 4 mg/mL。經(jīng)測定，提取液中橙皮甙含量為70 mg/mL，柚皮甙含量為13 mg/mL。

1.2動物及分組 SD大鼠30只，均為雌性，體質(zhì)量(170±20)g，均由第三軍醫(yī)大學大坪醫(yī)院實驗動物中心提供。實驗前先飼養(yǎng)觀察3 d。將實驗動物隨機分為3組：實驗組(A組)用黃酮甙對大鼠灌胃，B組用紅霉素對大鼠灌胃，C組用生理鹽水對大鼠灌胃。黃酮甙提取液置于5 ℃冰箱中保存，紅霉素腸溶片用5%的葡萄糖注射液溶解。A、B組給藥劑量為0.15 mg/100 g，C組用生理鹽水3～5 mL/100 g灌胃。

1.3試劑及儀器 胃泌素放射免疫分析試劑盒購于北京原子高科股份有限公司，批準文號為國藥準字S10940087；GC-911γ放射免疫計數(shù)器為中國科學技術大學科技實業(yè)總公司中佳光電儀器分公司產(chǎn)品；BL-410生物實驗機能系統(tǒng)為成都泰盟科技公司產(chǎn)品；紅霉素腸溶片的批準文號為國藥準字H10970170。

1.4方法

1.4.1各組大鼠血漿胃泌素的檢測方法 每日給予大鼠正常飲食、飲水。實驗前1周用水合氯醛0.3～0.4 mL/100 g注射麻醉后，股靜脈抽血2～3 mL置于促凝管中，高速離心機快速離心，分離血清，按照胃泌素放射免疫分析試劑盒操作程序檢驗血漿中胃泌素含量。

1.4.2胃肌電檢測方法 在以上藥物灌胃麻醉下抽取血清后，剖腹取胃前壁胃體上1/3處放置一電極，另取胃竇距幽門約0.5 cm處安放另一電極，將電極與BL-410生物機能實驗系統(tǒng)連接，能夠引出胃電波即可。

2 結 果

2.1黃酮甙對胃泌素的影響 灌注后A、B組血漿胃泌素水平明顯高于灌注前(P<0.05)；灌注后A、B組與C組比較，血漿中胃泌素含量均明顯增高(P<0.05)，且A組胃泌素含量明顯高于B組(P<0.05)，見表1。

表1 各組灌注前后血漿胃泌素的變化

a:P<0.01，與同組灌注前比較；b:P<0.05,與灌注后C組比較；c:P<0.05,與灌注后B組比較。

2.2各組胃肌電的變化 A組大鼠胃慢波表現(xiàn)為規(guī)則的波形，可見典型的雙峰波，振幅較齊，慢波頻率較前明顯的加快；B組大鼠胃慢波表現(xiàn)為較為規(guī)則的正弦波，振幅較齊，慢波頻率明顯增快；C組大鼠胃慢波多數(shù)呈現(xiàn)近似正弦波，振幅較為整齊。見圖1～3。各組灌注后胃電慢波頻率變化見表2。

圖1 A組大鼠胃電波圖

圖2 B組大鼠胃電波圖

圖3 C組大鼠胃電波圖

表2 各組大鼠灌注后胃電慢波頻率變化次/分)

a：P<0.01，與C組比較；b：P<0.05，與B組比較。

3 討 論

胃腸功能障礙性疾病是臨床常見病，主要指因胃腸動力紊亂引起的以各種消化道癥狀為臨床表現(xiàn)的胃腸道疾病，該類疾病系高級神經(jīng)活動障礙導致自主神經(jīng)系統(tǒng)功能失常，主要為胃腸的運動與分泌功能失調(diào)的一組胃腸綜合征的總稱[2]。多數(shù)患者癥狀很重，體征不明顯，缺乏特異性的檢查方法，診斷和治療均存在一定困難。

從有人發(fā)現(xiàn)促胰液素并提出胃腸激素的概念以來，對胃腸激素的認識不斷深入，目前已知胃腸激素對消化系統(tǒng)的生理功能具有主要的調(diào)節(jié)作用，其分泌異常可導致許多臨床癥狀或綜合征[3]。已知胃泌素可促進胃酸分泌，同時也可促進胃蛋白酶、胰液、胰泌素和膽汁中水和鹽的分泌，上調(diào)黏膜上皮細胞胃泌素受體的數(shù)量，還能增加黏膜血流量，促進胃腸道黏膜生長。五肽胃泌素可使大鼠胃竇部收縮運動加強[4]，有研究表明胃泌素還可促進胃竇縱行肌肌條的收縮與膽堿能神經(jīng)功能改變[5]。胃泌素可提高食管下端括約肌的肌張力，能起到防止胃內(nèi)容物反流的作用，能提高胃慢波頻率，松弛幽門平滑肌，有助于胃的排空。

近年來人們就中藥對胃腸動力的影響及其調(diào)節(jié)機制作了一些探索，并提出了“胃腸動力中藥”這一概念。所謂胃腸動力中藥是指能增強蠕動，促進排空，具有降逆止嘔、消痞除滿、疏肝利膽、健脾和胃及攻積導滯等作用的一類中藥，如行氣疏肝類枳實等[6]。

本研究結果顯示，灌胃后A、B組大鼠與C組大鼠比較，血漿中胃泌素含量均明顯增高(P<0.05)；A組大鼠胃泌素含量明顯高于B組大鼠(P<0.05)。各組大鼠灌注后胃電慢波頻率變化，A、B組與C組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)；A組與B組比較，差異也有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。

通過研究作者認為，枳實活性成分黃酮甙能刺激體內(nèi)胃泌素的分泌，提高胃收縮力，促進胃的基本消化、排空功能，從而發(fā)揮調(diào)節(jié)胃腸運動的作用。

[1]宋婷婷，尋慶英，魏義全，等.枳實對大鼠小腸電活動影響的下丘腦作用機制研究[J].中國中西醫(yī)結合雜志，2006，26(S1)：55-58.

[2]程珠琴，鄭立升.中西醫(yī)結合治療胃腸動力障礙性疾病的進展[J].中醫(yī)藥學刊，2006，24(10)：1894-1897.

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[4]陳建峰，唐銘翔，周知午.保和丸對大鼠血液中胃泌素及胃動素含量的影響[J].湖南中醫(yī)雜志，2008，24(4)：89-90.

[5]曾嶸，李靖云.枳實消痞丸對大鼠血液中胃泌素和胃動素含量的影響[J].醫(yī)藥導報，2008，27(7)：760-762.

[6]魏睦新.促胃腸動力中藥研究概況[J].江蘇中醫(yī)藥，2007，39(3)：5-6.