五味子油對(duì)2型糖尿病胰島素抵抗大鼠的作用及機(jī)制

劉 馨，劉學(xué)政

(1．遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110033;2．遼寧醫(yī)學(xué)院 附屬第一醫(yī)院，遼寧 錦州 121001;3．遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧 錦州 121001)

五味子油對(duì)2型糖尿病胰島素抵抗大鼠的作用及機(jī)制

劉 馨1，2，劉學(xué)政3

(1．遼寧中醫(yī)藥大學(xué)，遼寧 沈陽(yáng) 110033;2．遼寧醫(yī)學(xué)院 附屬第一醫(yī)院，遼寧 錦州 121001;3．遼寧醫(yī)學(xué)院，遼寧 錦州 121001)

目的 探討五味子油對(duì)2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用及其機(jī)制。方法 高脂飼料聯(lián)合小劑量鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)建立2型糖尿病大鼠胰島素抵抗模型。將SD大鼠隨機(jī)分為正常組，模型組，五味子油高劑量(1 mg/kg)、低劑量(0．5 mg/kg)組，羅格列酮組。連續(xù)灌胃6周，測(cè)定空腹血糖(FBG)、空腹胰島素(FINS)、游離脂肪酸(FFA)、血清中瘦素的水平，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。結(jié)果 五味子油可降低FBG、FINS、FFA的水平，抑制瘦素的表達(dá)，降低HOMA-IR。結(jié)論 五味子油改善2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的作用可能與瘦素有關(guān)。

五味子油;2型糖尿病;胰島素抵抗;游離脂肪酸;瘦素

胰島素抵抗(IR)是指胰島素作用的靶器官、組織對(duì)胰島素生物效應(yīng)的反應(yīng)性降低或喪失而產(chǎn)生的一系列病理和臨床表現(xiàn)。IR是2型糖尿病的主要發(fā)病機(jī)制之一，也是其主要病理生理特征之一。目前通過(guò)降糖、調(diào)脂、糾正代謝紊亂等已經(jīng)成為中藥治療2型糖尿病胰島素抵抗的研究方向。最近有研究表明，2型糖尿病既存在胰島素抵抗，又存在瘦素(Leptin)抵抗，胰島素和瘦素是拮抗關(guān)系［1］。我們前面的研究已經(jīng)證實(shí)五味子油對(duì)2型糖尿病IR具有降低血糖、調(diào)節(jié)脂代謝紊亂的作用［2］，本研究將進(jìn)一步探究五味子油改善IR的作用機(jī)制。

1 材料

五味子油(含五味子乙素≥2%)，浙江中藥研究所;鏈脲佐菌素(STZ)，美國(guó)Sigma公司，臨用前以 pH 4．5、0．1 mol/L 枸櫞酸鈉緩沖液配成 1．25%的溶液;羅格列酮片(規(guī)格:4 mg/片，批號(hào):20080702)貴州圣濟(jì)堂制藥有限公司;游離脂肪酸(FFA)試劑盒，南京建成生物工程研究所產(chǎn)品;瘦素放射免疫分析試劑盒、胰島素放射免疫分析試劑盒，北京北方生物技術(shù)研究所。

ONE-TOUCH血糖儀，美國(guó)強(qiáng)生公司;DNM-9602G酶標(biāo)分析儀，北京普朗新技術(shù)有限公司。

健康SD大鼠50只，雌雄各半，體質(zhì)量(180±20)g，購(gòu)自遼寧醫(yī)學(xué)院實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心，合格證號(hào):SCXK(遼)2011-00070。

2 方法

2．1 造 模

按文獻(xiàn)［2］方法進(jìn)行造模。

2．2 分組給藥

按文獻(xiàn)［2］方法進(jìn)行分組給藥。糖尿病模型大鼠分為4組:糖尿病模型組，每天灌胃等體積生理鹽水;五味子油低劑量組，每天灌胃五味子油0．5 mg/kg;五味子油高劑量組，每天灌胃五味子油1．0 mg/kg;羅格列酮組(陽(yáng)性對(duì)照組)，每天灌胃羅格列酮30 mg/kg。另設(shè)正常對(duì)照組。

2．3 指標(biāo)測(cè)定

空腹血糖(FBG)用強(qiáng)生ONE-TOUCH血糖儀測(cè)定;取血離心收集血清，用放射免疫測(cè)定法空腹胰島素(FINS)和瘦素的水平，并計(jì)算胰島素抵抗指數(shù)(HOMA-IR)。FFA測(cè)定按試劑盒說(shuō)明進(jìn)行。

2．4 統(tǒng)計(jì)分析

數(shù)據(jù)均以(x±s)表示，采用SPSS13．0軟件進(jìn)行處理，組間比較采用t檢驗(yàn)，P＜0．05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

3 結(jié)果

3．1 五味子油對(duì)糖尿病IR大鼠血糖代謝的影響

正常對(duì)照組大鼠皮毛有光澤，精神狀態(tài)良好，反應(yīng)靈敏，體重維持穩(wěn)定上升，未見死亡。模型組大鼠，經(jīng)腹腔注射STZ后，飲食和飲水均增加，尿多消瘦，精神不振，皮毛無(wú)光澤，反應(yīng)遲鈍。給藥6周后，糖尿病大鼠癥狀有所好轉(zhuǎn)。與正常對(duì)照組相比，模型組大鼠FBG水平明顯升高(P＜0．01);說(shuō)明造模成功。與模型組相比，五味子油低劑量組FBG降低(P＜0．05)，而五味子油高劑量組和羅格列酮組FBG降低更顯著(P＜0．01)，血糖接近正常值;五味子油高劑量組與羅格列酮組降糖水平無(wú)顯著差異(P ＞0．05)，見表 1。

3．2 五味子油對(duì)糖尿病IR大鼠胰島素水平的影響

結(jié)果見表2。與正常組對(duì)照相比，糖尿病組FINS水平升高顯著(P＜0．01)，進(jìn)一步證明造模成功。用藥6周后，與糖尿病模型組相比，五味子油低劑量組和高劑量組均能降低FINS水平(P＜0．05或0．01)，五味子油高劑量組和羅格列酮組對(duì)FINS水平降低無(wú)明顯明顯(P＞0．05)，結(jié)果與我們前期的研究［2］一致。

表1 五味子油對(duì)糖尿病IR大鼠FBG的影響(x ± s，n=6)

表2 五味子油對(duì)糖尿病IR大鼠FINS及HOMA-IR的影響(x ± s，n=6)

3．3 五味子油對(duì)糖尿病IR大鼠血清中FFA和瘦素的影響

結(jié)果見表3。與正常對(duì)照組相比，糖尿病組FFA和瘦素水平顯著升高(P＜0．01);五味子油高、低劑量組能抑制糖尿病IR大鼠血清中FFA和瘦素水平的升高(P＜0．01或0．05);五味子油高劑量組的作用與羅格列酮組相似。

表3 五味子油對(duì)糖尿病IR大鼠血清中FFA及瘦素的影響(x ± s，n=6)

4 討論

2型糖尿病患者普遍存在著不同程度的脂代謝紊亂和IR。高血脂通過(guò)FFA干擾胰島素在周圍組織中與受體結(jié)合，使胰島素生物效應(yīng)降低，最終使血液中胰島素水平升高。瘦素是脂肪細(xì)胞分泌的一種肽類激素，具有調(diào)節(jié)糖、脂代謝的作用。瘦素刺激糖原異生，促進(jìn)脂肪分解，抑制脂肪合成，瘦素的代謝效應(yīng)與胰島素的作用相反［3］，因此瘦素水平與FINS水平及體脂百分?jǐn)?shù)密切相關(guān)，因而目前瘦素被視為IR 的一個(gè)標(biāo)志物［4］。

本研究結(jié)果顯示，2型糖尿病IR大鼠血清中血糖、胰島素、HOMA-IR及瘦素的水平與正常對(duì)照組相比明顯升高，瘦素與胰島素水平呈顯著正相關(guān)，這表明2型糖尿病大鼠存在著IR和瘦素抵抗，且兩者之間關(guān)系密切，這與國(guó)外研究的結(jié)果相一致［5］。本研究顯示五味子油高、低劑量組均能使糖尿病大鼠瘦素水平降低，同時(shí)降低FINS的含量，從而抑制IR和瘦素抵抗。

瘦素是脂肪-胰島反饋軸的重要信使，胰島素可刺激瘦素分泌，而瘦素負(fù)反饋抑制胰島素分泌。五味子油可抑制瘦素分泌，五味子油高劑量組瘦素水平降低顯著(P＜0．05)。五味子油降低2型糖尿病IR大鼠血清中FBG、FINS、降低FFA水平及HOMAIR，改善糖尿病大鼠IR作用，可能與五味子油抑制血清中瘦素水平有關(guān)，其具體的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)機(jī)制有待于進(jìn)一步研究。

［1］ Kolaczynski J W，Nyce M R，Considine R V，et al．Acute and chronic effects of insulin on leptin production in humans:Studies in vivo and in vitro［J］．Diabetes，1996，45(5):699-701．

［2］ 劉 馨，劉學(xué)政，李香華．五味子油對(duì)2型糖尿病大鼠胰島素抵抗的影響［J］．中國(guó)生化藥物雜志，2012，33(5):612-614．

［3］ Leroy P，Dessolin S，Villageois P，et al．Expression of gene in adipose cell．Regulation by insulin［J］．Biol Chem，1996，271:2365-2368．

［4］ Bi S，Ladenheim E E，Schwartz G J，et al．A role for NPY overexpression in the dorsomedial hypothalamus in hyperphagia and obesity of OLETF rats［J］．Am J Physiol Regul Integur Comp Physiol，2001，281(1):8254-8260．

［5］ Wauters M，Considine R V，Yudkin J S，et al．Leptin levels in type 2 diabetes:associations with measures of insulin resistance and insulin secretion［J］．Horm Metab Res，2003，35(2):92-96．

The mechanism of Schisandrae chinenesis oil on type 2 diabetes rats with insulin resistance

LIU Xin1，2，LIU Xue-zheng3
(1．Liaoning University of TCM，Shenyang 110033，China;2．The No．1 Affiliated Hospital of Liaoning Medical University，Jinzhou 121001，China;3．Liaoning Medical University，Jinzhou 121001，China)

Purpose To explore the effect of Schisandrae chinenesis oil on insulin resistance of type 2 diabetes rats and its mechanism．Methods The high-fat diet combined with low-dose STZ at the ideal interval was used to establish the experimental rat model of type 2 diabetes．Rats were randomly divided into nomal group，model group，Schisandrae chinenesis oil 1 and 0．5 mg/kg groups and rosiglitazone group．Fasting blood glucose(FBG)，fasting insulin(FINS)，free fatty acids(FFA)and leptin were measured after 6 weeks，and the insulin resistance index(HOMA-IR)was caculated．Results Schisandrae chinenesis oil could obviously decrease FBG，F(xiàn)INS，leptin and HOMA-IR．Conclusion Schisandrae chinenesis oil could decrease the level of leptin，and improve insulin resistance．The function of improving insulin resistance of Schisandrae chinenesis oil is associated with the leptin in type 2 diabetes rats．

Schisandrae chinenesis oil;type 2 diabetes;insulin resistance;free fatty acids;leptin

R285．5

A

1005-1678(2012)06-0800-03

2012-07-08

劉 馨，男，在讀博士，副教授，副主任檢驗(yàn)師，碩士研究生導(dǎo)師，研究方向:臨床檢驗(yàn)診斷;劉學(xué)政，通信作者，教授，博士研究生導(dǎo)師，研究方向:糖尿病及其并發(fā)癥研究，E-mali:lyy66112@163．com。