一種家兔持續(xù)靜脈麻醉方法

孫婷婷，王宏坤

(1.福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院，福州 350001;2.南京軍區(qū)福州總醫(yī)院，福州 350025;3.第四軍醫(yī)大學(xué)西北醫(yī)院，西安 710032)

一種家兔持續(xù)靜脈麻醉方法

孫婷婷1，王宏坤2，3

(1.福建醫(yī)科大學(xué)附屬協(xié)和醫(yī)院，福州 350001;2.南京軍區(qū)福州總醫(yī)院，福州 350025;3.第四軍醫(yī)大學(xué)西北醫(yī)院，西安 710032)

目的 為進(jìn)行某些特殊項(xiàng)目的實(shí)驗(yàn)研究，建立一種持續(xù)麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。方法 戊巴比妥鈉粉劑加生理鹽水溶解，配成1%水劑，按3 mL/kg(30 mg/kg)耳緣靜脈注射。誘導(dǎo)成功后約2 h經(jīng)留置針使用恒速微量泵1 mL/h·kg給藥，維持4 h后調(diào)節(jié)至2 mL/h·kg給藥，并長期維持。每日上午、下午各停止靜脈給藥1 h，為動(dòng)物飼食水。結(jié)果 經(jīng)實(shí)驗(yàn)證明家兔可耐受120 h連續(xù)麻醉。實(shí)驗(yàn)動(dòng)物耐受情況好，家兔麻醉前呼吸48～68次/min，心跳140～200次/min，體溫為39.4℃ ±1.0℃。以3～6 mg/s速度，成年兔的正常耳緣靜脈注射后，平均3+2.8 s實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呈三度麻醉狀態(tài)，無自主運(yùn)動(dòng)，未見興奮躁動(dòng)過程，呼吸24±6.6次/min。死亡率12.5%。持續(xù)麻醉期間動(dòng)物二便正常。結(jié)論 長期持續(xù)麻醉的效果要求是以避免動(dòng)物掙扎的鎮(zhèn)靜為主，戊巴比妥適合于建立長期麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。該方法在爆炸傷和創(chuàng)面愈合等實(shí)驗(yàn)實(shí)際應(yīng)用中效果理想。

戊巴比妥;家兔;持續(xù)麻醉

利用實(shí)驗(yàn)動(dòng)物進(jìn)行醫(yī)學(xué)研究是目前醫(yī)學(xué)研究 的重要方法之一。對于一些特殊研究項(xiàng)目如創(chuàng)面觀察、局部用藥、局部間斷取材等。往往實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的掙扎等自主運(yùn)動(dòng)會(huì)明顯干擾實(shí)驗(yàn)的進(jìn)行和效果。建立一種能夠持續(xù)麻醉的實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型十分適于解決此類問題。

1 材料和方法

1.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物

家兔8只，不分雌雄，重量1.8～2.2 kg，由第四軍醫(yī)大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供［SCXK(軍)2007-007］。

1.2 實(shí)驗(yàn)藥品

戊巴比妥鈉粉劑，分子式C11H17N2NaO3分子量248.26，德國生產(chǎn)、科昊生物工程有限責(zé)任公司分裝，批號69020100。

1.3 試驗(yàn)方法

戊巴比妥鈉粉劑加生理鹽水溶解，配成1%水劑，按3 mL/kg(30 mg/kg)耳緣靜脈注射。誘導(dǎo)成功后于家兔耳緣或胸腹部淺靜脈穿刺固定留置針，生理鹽水或5%葡萄糖注射液經(jīng)輸液器，以滴壺內(nèi)6～10滴/min滴注。將實(shí)驗(yàn)動(dòng)物俯臥肢體蜷縮簡單固定，約2 h后(視手術(shù)刺激強(qiáng)度)，家兔出現(xiàn)自主運(yùn)動(dòng)，經(jīng)留置針使用恒速微量泵1 mL/h·kg給藥，維持4 h調(diào)節(jié)至2 mL/h·kg給藥，并長期維持。每日上午、下午各停止靜脈給藥1 h，為動(dòng)物飼食水。停藥期間注意觀察，如實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)掙扎跡象，經(jīng)靜脈1～2 mg/s速度給藥1～1.5 mL，實(shí)驗(yàn)動(dòng)物出現(xiàn)垂頭嗜睡立即恢復(fù)微量泵給藥維持。

1.4 觀察項(xiàng)目

給藥后觀察誘導(dǎo)時(shí)間、麻醉持續(xù)時(shí)間、死亡率、麻醉癥狀包括呼吸頻率、體溫(直腸溫度，環(huán)境溫度24℃ ～27℃)、疼痛反射、睫毛反射。

2 結(jié)果和應(yīng)用

家兔麻醉前呼吸48～68次/min，心跳 140～200次/min，體溫為 39.4℃ ±1.0℃。以 3～6 mg/s速度，成年兔的正常耳緣靜脈注射后，平均3±2.8 s實(shí)驗(yàn)動(dòng)物呈三度麻醉狀態(tài)，無自主運(yùn)動(dòng)，未見興奮躁動(dòng)過程，呼吸24±6.6次/min。持續(xù)麻醉過程中參數(shù)見表1。

以誘導(dǎo)后120 h或動(dòng)物死亡為實(shí)驗(yàn)終點(diǎn)。死亡動(dòng)物1只，死亡率12.5%。持續(xù)麻醉期間動(dòng)物二便正常。為延長動(dòng)物生命，提高對麻醉的耐受，可同時(shí)靜脈滴注5%葡萄糖注射液。

在創(chuàng)面愈合的實(shí)驗(yàn)過程中應(yīng)用該模型，干預(yù)條件作用于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物創(chuàng)面，動(dòng)物無掙扎、撕咬。所使用干預(yù)條件與創(chuàng)面結(jié)合緊密無剝脫，實(shí)驗(yàn)效果理想。設(shè)置空白對照發(fā)現(xiàn)持續(xù)麻醉并不影響實(shí)驗(yàn)動(dòng)物創(chuàng)面的愈合速度和質(zhì)量。

表1 家兔持續(xù)麻醉過程中各時(shí)間點(diǎn)效果Tab.1 The effect of time points during persistent anesthesia for rabbits

3 經(jīng)驗(yàn)與討論

戊巴比妥鈉為中效巴比妥類藥物，對中樞神經(jīng)有廣泛的抑制作用，是動(dòng)物實(shí)驗(yàn)常用的麻醉劑，一般由靜脈注射或腹腔注射［1］。在無外界強(qiáng)刺激的條件下，戊巴比妥麻醉劑量一次可麻醉家兔3～5 h［2］。通常靜脈注射戊巴比妥鈉的濃度為3%，但因戊巴比妥鈉給藥后起效快，將濃度從3%降1%，可延長注射時(shí)間，延緩進(jìn)入體內(nèi)的藥量，且劑量易于掌握，因此家兔更安全，能提高實(shí)驗(yàn)成功率［3］。戊巴比妥鎮(zhèn)靜催眠效果明顯，但鎮(zhèn)痛作用差，與復(fù)合劑型速眠新有本質(zhì)不同［4］，麻醉較淺時(shí)動(dòng)物對疼痛刺激有反應(yīng)，在麻醉過深出現(xiàn)呼吸抑制時(shí)也可通過疼痛刺激進(jìn)行動(dòng)物搶救。長期持續(xù)麻醉的效果要求是以避免動(dòng)物掙扎的鎮(zhèn)靜為主，所以戊巴比妥更適合于建立長期麻醉實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型。

導(dǎo)致麻醉失敗，動(dòng)物死亡的主要原因應(yīng)為呼吸抑制。戊巴比妥對于呼吸的抑制不但和劑量有關(guān)而且和靜脈注射的速度有密切的關(guān)系［5］。注射的速度過快發(fā)生呼吸抑制的可能就越大，動(dòng)物發(fā)生死亡的風(fēng)險(xiǎn)增加［6，7］。尤其在進(jìn)行靜脈誘導(dǎo)的時(shí)候，應(yīng)該注意注射速度，避免發(fā)生呼吸抑制。靜脈注射雖然使動(dòng)物很快進(jìn)入麻醉狀態(tài)，但此種麻醉途徑劑量不好控制，并可能導(dǎo)致動(dòng)物呼吸困難而死亡，注射時(shí)不能只按參考的劑量，應(yīng)注射同時(shí)觀察眼瞼的反射、瞳孔和呼吸的變化情況［8］。

另外，戊巴比妥會(huì)導(dǎo)致實(shí)驗(yàn)動(dòng)物體溫下降。一般情況下戊巴比妥鈉低劑量時(shí)，主要抑制多突觸反應(yīng)，減弱易化作用，增強(qiáng)抑制作用，有報(bào)道在麻醉50 min后即可降低到最低點(diǎn)并形成溫度穩(wěn)定期，說明家兔全麻醉中仍存在體溫調(diào)節(jié)反應(yīng)，并能預(yù)防體溫進(jìn)一步下降［9］。本實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)麻醉后有體溫下降期-低體溫穩(wěn)定期-體溫回升期的過程。至實(shí)驗(yàn)結(jié)束時(shí)家兔體溫可恢復(fù)到接近正常。戊巴比妥鈉直接擴(kuò)張血管，抑制調(diào)節(jié)溫度的血管收縮功能和使代謝降低 20% ～30%［9］，而血管擴(kuò)張?jiān)黾觽鲗?dǎo)熱量很少。機(jī)體代謝率降低才是在全麻后體溫下降0.5℃ ～1.5℃ 的主要原因［3］。

由于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物麻醉后，呼吸及循環(huán)都減弱，體溫會(huì)下降，特別是冬天，一定要注意保暖。萬一麻醉過量，應(yīng)根據(jù)不同情況，積極采取措施，如：施行人工胸外按壓、掐捏后肢進(jìn)行疼痛刺激，也可靜脈注射5%葡萄糖溶液［8］。實(shí)踐證明，靜脈注射5%葡萄糖溶液對家兔戊巴比妥的催醒作用十分明顯。使用留置針應(yīng)注意時(shí)刻保持低流量輸液維持，如完全停藥要及時(shí)行肝素鈉封管，否則將于短時(shí)間(2～3 min)內(nèi)發(fā)生留置針堵塞。

［1］ 夏明澤，栗瑞福，汪曉燕，等.噻胺酮和戊巴比妥鈉用于家兔全身麻醉的觀察實(shí)驗(yàn)［J］.中國實(shí)驗(yàn)動(dòng)物學(xué)雜志，1994，3，4(1)：24-25.

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A Method of Persistent Intravenous Anesthesia for Rabbits

SUN Ting-ting，WANG Hong-kun
(1.Fujian Medical University Union Hospital，F(xiàn)uzhou 350001，China;2.Fuzhou General Hospital，F(xiàn)uzhou 350025，China;3.The Fourth Military Medical University，Xi'an 710032，China)

Objective To build up an ongoing experimental animal models of anesthesia for the purpose of special projects for the conduct of experimental studies is necessary.Method Pentobarbital powder was dissolved in saline into 1%liquid，and was injected by ear vein at 3 mL/kg.About 2 hours after the induction，the solution was given by constant-speed micro pump via intravenous trocar at 1 mL/(h·kg)，which lasted for 4 hours.Then the dosage was adjusted to and maintained for long term at 2 mL/(h·kg)body weight dose.Each day，the administration was suspended for an hour in both morning and afternoon，and meanwhile，the animals were fed with water.Resul As showed in the experiment，the rabbits tolerated 120 h continuous anesthesia，and were in good condition of tolerance.Before anesthetized，the rabbits’breath rate was 48 ～68 times/min，heart rate was 140～200 times/min，body temperature was 39.4±1.0℃.After ear vein injection at the speed of 3～6mg/sec，the rabbits were in drugged state every 3±2.8 s，no voluntary movement or excited agitation was observed，and the breath rate was 24±6.6 times/min.The mortality of these animals was 12.5%.During anesthesia，the animals kept normal urination and bowel movements.Conclusion The major requirement of long-term continuous anesthesia is that the animals should be under sedation and avoid struggling.Pentobarbital is suitable for establishment of animal models for long-term anesthesia.This method has a satisfactory effect on treatment of blast injury and wound healing in practical applications.

Pentobarbital;Rabbits;Continuing narcotic

A

1671-7856(2011)03-0056-03

2010-08-10

10.3969/j.issn.1671.7856.2011.03.014

共同第一作者，孫婷婷(1980-)，女，醫(yī)師;王宏坤(1979-)，男，醫(yī)師。