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    神經(jīng)型鈣黏附蛋白在大腸腺癌組織中的表達(dá)及意義

    2011-09-05 01:56:26韓黎麗鄧文英陳小兵羅素霞
    山東醫(yī)藥 2011年35期
    關(guān)鍵詞:大腸癌陽(yáng)性細(xì)胞大腸

    韓黎麗,劉 宇 ,鄧文英,陳小兵,李 寧,羅素霞

    (1鄭州大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院,鄭州 450000;2鄭州大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院)

    cadherin家族是由一系列結(jié)構(gòu)和功能相似的單鏈跨膜糖蛋白組成,按其最初來(lái)源分為上皮型、神經(jīng)型和胎盤型3種,主要參與介導(dǎo)鈣離子依賴的同型細(xì)胞間的黏附。研究發(fā)現(xiàn),神經(jīng)型鈣黏附蛋白(N-cadherin)可促使癌細(xì)胞從癌組織塊上脫離及癌細(xì)胞與內(nèi)皮或基質(zhì)成分黏附,在腫瘤形成的過(guò)程中有助于血管形成及上皮細(xì)胞—間質(zhì)細(xì)胞的遷移,從而使腫瘤細(xì)胞更加富于侵襲性,易于轉(zhuǎn)移[1~3]。2001~2005年,我們采用免疫組織化學(xué)的方法檢測(cè)了98例大腸腺癌組織以及10份癌旁組織中N-cadherin表達(dá)情況,并分析其表達(dá)與臨床病理的關(guān)系。

    1 材料與方法

    1.1 臨床資料 98份大腸癌組織標(biāo)本(觀察組),患者男63例,女35例;年齡32~76歲,平均56.3歲。均經(jīng)手術(shù)病理檢查證實(shí)診斷。組織學(xué)分級(jí):Ⅰ級(jí)(高分化)34例,Ⅱ級(jí)(中等分化)38例,Ⅲ級(jí)(低分化)26例。根據(jù)2003版美國(guó)腫瘤聯(lián)合會(huì)(AJCC)和國(guó)際抗癌聯(lián)盟(UICC)大腸癌TNM臨床分期標(biāo)準(zhǔn),Ⅰ期15例,Ⅱ期49例,Ⅲ期34例。術(shù)前均未接受放、化療或其它特殊治療。對(duì)照組為10例正常大腸上皮組織(取自手術(shù)切除標(biāo)本的兩殘端,距癌組織3 cm以上),經(jīng)病理證實(shí)為分化良好的腺上皮及少量固有層成分。

    1.2 N-cadherin檢測(cè) N-cadherin鼠抗人單克隆抗體均購(gòu)自美國(guó)Abcam公司,工作濃度均為1∶110;PV-9000二步法免疫組織化學(xué)檢測(cè)試劑盒、DAB顯色增強(qiáng)劑購(gòu)自北京中杉生物技術(shù)有限公司。兩組標(biāo)本甲醛固定,石蠟包埋,行HE染色。用已知表達(dá)N-cadherin的精原細(xì)胞瘤組織切片作陽(yáng)性對(duì)照;以未經(jīng)免疫的鼠IgG代替一抗作為陰性對(duì)照;以PBS代替一抗作為空白對(duì)照。染色結(jié)果由3名醫(yī)師雙盲評(píng)價(jià),每例至少評(píng)價(jià)5個(gè)高倍鏡視野,每個(gè)視野觀察細(xì)胞數(shù)不少于200個(gè)。將胞質(zhì)著色判為陽(yáng)性,按陽(yáng)性細(xì)胞所占百分比及著色深淺判定結(jié)果。細(xì)胞染色:細(xì)胞無(wú)著色為0分,淺黃色為1分,棕黃色為2分,棕褐色為3分。按陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)百分比評(píng)分:0分,無(wú)陽(yáng)性細(xì)胞;1分,陽(yáng)性細(xì)胞<10%;2分,陽(yáng)性細(xì)胞為10% ~50%;3分,陽(yáng)性細(xì)胞>50%。取兩項(xiàng)評(píng)分的乘積作為終評(píng)分:0分為陰性或弱陽(yáng)性,1分為中度陽(yáng)性,2分為強(qiáng)陽(yáng)性,≥1分為陽(yáng)性。

    1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS16.0統(tǒng)計(jì)軟件。兩個(gè)有序變量之間的聯(lián)系用Spearman相關(guān)分析;分類變量之間的比較用χ2檢驗(yàn)。檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05。

    2 結(jié)果

    2.1 N-cadherin表達(dá) 觀察組N-cadherin陽(yáng)性率為71.4%,對(duì)照組未見(jiàn)N-cadherin表達(dá)(P<0.01)。

    2.2 N-cadherin的表達(dá)與大腸腺癌臨床病理特征的關(guān)系 見(jiàn)表1。

    表1 N-cadherin表達(dá)與大腸腺癌臨床病理特征的關(guān)系

    3 討論

    N-Cadherin 基因定位于 18q11.2[4],表達(dá)相對(duì)分子質(zhì)量約120 kD的單鏈跨膜糖蛋白。研究發(fā)現(xiàn),N-cadherin蛋白在胚胎的發(fā)育以及多種生物學(xué)過(guò)程(消化道形成、神經(jīng)突觸的形成以及調(diào)節(jié)垂體后葉的活動(dòng))中起重要作用[5~7],被認(rèn)為是一種潛在的促癌基因。

    本研究發(fā)現(xiàn),N-cadherin在大腸腺癌細(xì)胞的胞質(zhì)均有不同程度表達(dá)。其表達(dá)水平與大腸腺癌患者年齡、性別、腫瘤位置、腫瘤大小、浸潤(rùn)深度以及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況無(wú)關(guān),但與腫瘤的TNM分期以及組織學(xué)分級(jí)呈正相關(guān),即腫瘤的臨床分期越高,腫瘤細(xì)胞的分化程度越低,N-cadherin的表達(dá)越高。其促進(jìn)腫瘤侵襲及轉(zhuǎn)移的可能機(jī)制:①使表皮生長(zhǎng)因子受體(EGFR)的作用持續(xù)增強(qiáng)[8]。EGFR是一種具有酪氨酸激酶特性的生長(zhǎng)因子受體,當(dāng)表皮生長(zhǎng)因子與之結(jié)合后可刺激細(xì)胞的分裂和增殖,從而促進(jìn)腫瘤形成。②直接作用于成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體,調(diào)節(jié)腫瘤細(xì)胞的侵襲和轉(zhuǎn)移[9]。③增加惡性T細(xì)胞瘤對(duì)上皮細(xì)胞的黏附力,使其更容易發(fā)生轉(zhuǎn)移[10]。④激活MAPKERK信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)系統(tǒng),誘導(dǎo)MMP-9表達(dá),促進(jìn)腫瘤血管的形成,使腫瘤易于生長(zhǎng)和轉(zhuǎn)移。

    綜上所述,N-cadherin參與了大腸腺癌的浸潤(rùn)和轉(zhuǎn)移,有望成為大腸癌治療的新靶點(diǎn)。

    [1]Suyama K,Shapiro I,Guttman M,et al.A signaling pathway leading to metastasis is controlled by N-cadherin and the FGF receptor[J].Cancer cell,2002,2(4):301-314.

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    [3]Nagi C,Guttman M,Jaffer S,et al.N-cadherin expression in breast cancer:correlation with an aggressive histologic variant--invasive micropapillary carcinoma[J].Breast Cancer Res Treat,2005,94(3):225-235.

    [4]Tran NL,Nagle RB,Cress AE,et al.N-cadherin expression in human prostate carcinoma cell lines.An epithelial-mesenchymal transformation mediating adhesion with stromal cells[J].Am J Pathol,1999,155(3):787-798.

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    [8]Suyama K,Shapiro I,Guttman M,et al.A signaling pathway leading to metastasis is controlled by N-cadherin and the FGF receptor[J].Cancer Cell,2002,2(7):301-314.

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