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      通心絡(luò)對糖尿病大鼠血糖及非酶糖基化終產(chǎn)物的影響*

      2011-06-21 02:17:48蘇曉乾張常喜謝春毅
      天津藥學(xué) 2011年2期
      關(guān)鍵詞:通心絡(luò)糖基化糖化

      蘇曉乾 , 張常喜 ,謝春毅

      (1.寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院, 銀川 750004; 2.寧夏回族自治區(qū)中醫(yī)研究院,銀川 750021; 3.上海中西結(jié)合醫(yī)院,上海 200082)

      通心絡(luò)具有益氣通絡(luò)的作用,有實(shí)驗(yàn)證明該藥對血糖有降低作用[1],也有實(shí)驗(yàn)證明通心絡(luò)對血糖作用不明顯。但臨床發(fā)現(xiàn)通心絡(luò)對于糖尿病患者多種心血管疾病均具有一定治療作用。本實(shí)驗(yàn)旨在觀察通心絡(luò)對糖尿病大鼠血糖和糖化血清蛋白的影響,探討通心絡(luò)對糖尿病病變的防治環(huán)節(jié)。

      1 材料和方法

      1.1材料 實(shí)驗(yàn)選用清潔級、體重(210±20) g、SD雄性大鼠60只(上海復(fù)旦大學(xué)動物實(shí)驗(yàn)中心提供,許可證號:SCXK滬2002-0002)。動物飼養(yǎng)溫度25 ℃,濕度40%。

      1.2藥品及試劑 通心絡(luò)由石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司提供。鏈脲佐菌素購自美國Sigma公司,進(jìn)口分裝。糖化血清蛋白(GSP)購自南京建成生物工程公司。G1ucolxend血糖試紙采用德國羅氏公司產(chǎn)品。

      1.3主要儀器設(shè)備 深低溫冰箱:美國REVCO,型號, ULT7150-9V/ULT10140-9V;電子精準(zhǔn)天平:Quantum 10509-00347; UV-2102C分光光度計(jì)2.1:上海精密科學(xué)儀器有限公司 (儀器編號:SFZ 1606016686);G1ucolxend血糖儀:德國羅氏公司。

      1.4方法

      1.4.1動物分組及處理 雄性SD大鼠60只,隨機(jī)取17只分為8周、12周正常對照組,8周組9只、12周組8只,正常飼養(yǎng),不予特殊處理。其余43只SD大鼠禁食12 h后,按55 mg/kg劑量腹腔內(nèi)注射濃度為1 mg/ml的鏈脲佐菌素(用檸檬酸-檸檬酸鈉緩沖液溶解配制,pH 4.2)。注射72 h后用羅氏血糖儀測定大鼠尾尖空腹血糖,血糖值>16.7 mmol/L,且伴有多飲、多食和尿量增加者確定為糖尿病(DM) 模型,納入糖尿病大鼠分組,不合格者剔除。最后有40只糖尿病造模成功,將其隨機(jī)分為兩組:模型組和通心絡(luò)組,每組又按取材時間分為8周和12周組;正常對照組和模型組每天予2 ml生理鹽水灌胃,通心絡(luò)治療組按1.0 g/kg·d-1給藥量稀釋于2 ml生理鹽水中灌胃。正常對照組8周組9只,12周組8只,余各組每組10只。分別于給藥8周、12周后腹腔注射1%戊巴比妥鈉麻醉后腹主動脈采血約10 ml左右并分離血清,大鼠采血后處死。以分光光度計(jì)測定糖化血清蛋白水平。

      1.4.2統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 多樣本均數(shù)比較采用單因素方差分析,組間比較采用LSD檢驗(yàn),均由 Spss 12.0軟件完成。

      2 結(jié)果

      本實(shí)驗(yàn)持續(xù)12周。實(shí)驗(yàn)每4周監(jiān)測血糖1次。以上實(shí)驗(yàn)在上海復(fù)旦大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心完成。重復(fù)造模不夠標(biāo)準(zhǔn)脫失3只。除正常大鼠組,糖尿病組及各藥物組大鼠均出現(xiàn)多食、多飲、多尿、消瘦等癥。實(shí)驗(yàn)中途脫失4只,其中正常8周組灌胃不當(dāng)死亡1只,糖尿病8周組死亡1只,通心絡(luò)8周組、12周組各因灌胃不當(dāng)各死亡1只,最終進(jìn)入結(jié)果分析53只。

      2.1通心絡(luò)對糖尿病大鼠血糖的影響 造模后初測模型組和通心絡(luò)治療組大鼠血糖水平均明顯高于正常對照組(P<0.05),而此兩組間血糖水平差異不明顯;實(shí)驗(yàn)8周時,模型組大鼠血糖水平明顯高于正常8周對照組(P<0.05),通心絡(luò)治療組血糖水平略高于模型組(P>0.05)。實(shí)驗(yàn)12周時,模型組大鼠血糖水平明顯高于正常12周對照組(P<0.05),通心絡(luò)12周治療組血糖水平與模型組無明顯差別(P>0.05)。見表1。

      表1 各組大鼠血糖比較 mmol/L

      2.2通心絡(luò)對糖尿病大鼠非酶糖基化終產(chǎn)物(糖化血清蛋白)的影響 實(shí)驗(yàn) 8周時通心絡(luò)治療組糖化血清蛋白水平低于模型組8周組(但P>0.05);實(shí)驗(yàn)12周后通心絡(luò)治療組糖化血清蛋白水平明顯低于模型組(P<0.05),見表2。

      表2 各組大鼠糖化血清蛋白的影響 mmol/L

      3 討論

      近年來隨著我國人民生活水平的提高,飲食結(jié)構(gòu)的改變,糖尿病的發(fā)病率持續(xù)上升。糖尿病及其并發(fā)癥對人民的身體健康構(gòu)成了嚴(yán)重的威脅,其心腦血管并發(fā)癥是致死致殘的主要原因。近10年來,中醫(yī)藥防治糖尿病并發(fā)癥取得了顯著的成績,開展中醫(yī)藥防治DM的基礎(chǔ)研究,對闡明中醫(yī)藥對DM的作用機(jī)制、提高中醫(yī)藥防治DM研究水平、推進(jìn)中醫(yī)藥現(xiàn)代化進(jìn)程,無疑將有所裨益。

      糖化血清蛋白是己糖(主要是葡萄糖) 與血清蛋白結(jié)合所形成的,其生成是一個緩慢、連續(xù)、不可逆的非酶促反應(yīng),其合成速率與血清蛋白所處環(huán)境中糖的濃度成正比, 有較長的半衰期,可代表6~8 周內(nèi)糖尿病病人血糖平均濃度[2 ,3]。也代表肌體內(nèi)組織蛋白非酶促糖基化蛋白的狀況。人類單核細(xì)胞表面具有糖基化終末產(chǎn)物(AGE)特異性受體[4],AGE與其受體結(jié)合后,可促使單核細(xì)胞釋放多種細(xì)胞因子及生長因子如腫瘤壞死因子ɑ、白介素-l、血小板源生長因子(PDGF)、IGF,TGF-β1等,增加內(nèi)皮細(xì)胞通透性及單核細(xì)胞趨化性,并促進(jìn)血管及心肌ECM的增生[5],從而導(dǎo)致糖尿病并發(fā)癥的發(fā)生發(fā)展。

      通心絡(luò)具有益氣通絡(luò)的作用,但對降糖作用說法不一。通過本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn),通心絡(luò)對糖尿病大鼠的血糖降低不明顯,無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,而應(yīng)用通心絡(luò)早期干預(yù)可以有效抑制蛋白的非酶糖基化反應(yīng),從而有效保護(hù)器官組織,并且通過8周組和12周組的比較可以看出,通心絡(luò)干預(yù)治療時間越長,對蛋白的非酶糖基化反應(yīng)的抑制作用越好。

      1 林楠,宋王宣,薛麗.通心絡(luò)膠囊治療糖尿病腎病療效觀察.中國誤診學(xué)雜志,2005,5(9):1663

      2 Steinbrook R. Facing the diabetes epidemic-mandatory reporting of glycosylated hemoglobin values in New York City.N Engl J Med, 2006,354: 545

      3 Browless M. The role of non - enzymatic glucosulation in thepathogenesis of diabetic angiopathy. Molecular and cellular biology of diabetes mellitus Vol Ⅲ complication of diabetes mellitus. New York :Alan R.Liss Inc ,1989:9-18

      4 Myint K M , Yamamoto Y , Sakurai S,etal.Blockade of diabetic vascular injury by controlling of AGE-RAGE system. Curr Drug Targets, 2005, 6(4): 447

      5 Zhao H M, Malgorzata P, Wu I H,etal.Inhibiting Glycosphingolipid Synthesis Improves Glycemic Control and Insulin Sensitivity in Animal Models of Type 2 Diabetes.Diabetes, 2007,56: 1210

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