孟 莉, 焦富英, 向紹杰, 喬 敏, 秦文艷, 李 淼
(遼寧省中醫(yī)藥研究院,遼寧沈陽 110034)
ICR小鼠,♀♂各半,體重18~22 g,由吉林大學(xué)基礎(chǔ)醫(yī)學(xué)院實驗動物中心提供,SPF級,許可證號:SCXK(吉)2007-0003;Wistar大鼠,250 g ~ 300 g,♀♂各半,由軍事醫(yī)學(xué)科學(xué)院實驗動物中心提供,SPF 級,許可證號:SCXK(軍)2007-004。
腦栓通顆粒,由遼寧省中醫(yī)藥研究院藥學(xué)實驗室提供,黃色至棕黃色顆粒,1 g顆粒含3.2 g生藥,批號:20080924;通心絡(luò)膠囊,石家莊以嶺藥業(yè)股份有限公司,批號:080735。鹽酸腎上腺素注射液,上海禾豐制藥有限公司,批號:080405;戊巴比妥鈉,中國醫(yī)藥集團(tuán)上?;瘜W(xué)試劑廠,批號:F20030816;烏拉坦,中國醫(yī)藥集團(tuán)上海化學(xué)試劑公司,批號20020808;水合氯醛,青島市第二制藥廠,批號840408。
BI-2000醫(yī)學(xué)圖像分析系統(tǒng),成都泰盟儀器有限公司;FASCO-3010A全自動血流變快測儀,重慶大學(xué)維多生物工程研究所;YLS-14A小動物血栓生產(chǎn)儀,山東省醫(yī)學(xué)科學(xué)院設(shè)備站。DT-100分析天平,北京光學(xué)儀器廠。
1.4.1 小鼠耳廓微循環(huán)實驗[4-5]小鼠50只,♀♂各半,按體重隨機(jī)分5組:空白對照組、腦栓通顆粒低、中、高劑量組(18.85 g生藥/kg、37.70 g生藥/kg、75.40 g生藥/kg),通心絡(luò)膠囊組(0.81 g/kg)。每天灌胃給藥1次,連續(xù)7 d。試驗前禁食不禁水,于末次給藥后45 min,以戊巴比妥鈉腹腔注射麻醉,將小鼠側(cè)臥在觀察臺上,耳廓平展于載物臺上,在微循環(huán)觀察儀下對固定視野進(jìn)行觀察,記錄耳廓微動脈的流速、流態(tài)、管徑。小鼠尾靜脈注射鹽酸腎上腺素0.25 mg/kg造成實驗性微循環(huán)障礙,于2 min、8 min分別觀察耳廓微動脈的流態(tài)(線流5分、線粒流4分、粒線流3分、粒流2分、擺流1分、停止0分)、流速和管徑的變化情況。
1.4.2 大鼠血液流變學(xué)實驗[6-7]大鼠60只,♀♂各半,按體重隨機(jī)分為6組,即空白對照組,模型對照組,腦栓通顆粒低、中、高劑量組(13.05 g生藥/kg、26.10 g 生藥/kg、52.20 g 生藥/kg),通心絡(luò)膠囊組(0.56 g/kg)。每天灌胃給藥1次,連續(xù)給藥7 d,空白對照組和模型對照組給予等容積的蒸餾水。末次給藥前1 d,于給藥后1 h皮下注射0.08 mg/kg的腎上腺素兩次,間隔4 h,第一次給予腎上腺素后2 h,除空白對照組外將其余各組大鼠放入冰水中5 min。試驗前禁食不禁水,于末次給藥后1 h,用20%烏拉坦腹腔注射麻醉,腹主動脈取血,肝素鈉抗凝,每只取血5 mL,測定全血高、中、低切血黏度,紅細(xì)胞聚集指數(shù),紅細(xì)胞電泳時間。
1.4.3 大鼠血栓生成的實驗[4-8]大鼠50只,♀♂各半,按體重隨機(jī)分為5組,即空白對照組,腦栓通顆粒低、中、高劑量組(13.05 g生藥/kg、26.10 g生藥/kg、52.20 g生藥/kg),通心絡(luò)膠囊組。每天灌胃給藥1次,連續(xù)給藥7 d,空白對照組給予等容積的蒸餾水。試驗前禁食不禁水,于末次給藥后1 h,以10%的水合氯醛腹腔注射麻醉,剝離一側(cè)頸總動脈,用血栓生成儀的探頭夾住剝離好的頸總動脈,在1.2 mA電流下刺激5 min,記錄阻塞率,刺激結(jié)束后立即取出血栓稱重。
各組滴加腎上腺素2 min后,流態(tài)、流速、管徑與滴腎上腺素前有顯著差異(P﹤0.001,P﹤0.001,P﹤0.05),見表1~3。8min后除腦栓通高劑量組外,低、中劑量組流態(tài)與滴腎上腺素前比較仍有顯著差異(P﹤0.05,P﹤0.01)。說明腦栓通高劑量組滴腎上腺素8 min后流態(tài)已基本恢復(fù)。8 min后各給藥組流速、管徑與滴腎上腺素前比較均無顯著差異。說明給藥組滴腎上腺素8 min后流速、管徑基本已基本恢復(fù)。提示腦栓通顆粒具有改善小鼠耳廓膜微循環(huán)障礙的作用。
腦栓通顆粒低、中、高劑量組與模型對照組比較均能降低高、中、低切狀態(tài)下的全血黏度,其中腦栓通中、高劑量組,與模型對照組比較有顯著差異(P﹤0.05,P﹤0.01)。低、中劑量組能增加紅細(xì)胞聚集指數(shù),與模型對照組比較有顯著差異(P﹤0.05);腦栓通顆粒低、中、高劑量組均能縮短紅細(xì)胞電泳時間,與模型對照組比較有顯著差異(P﹤0.05,P﹤0.01,P﹤0.05),見表4。提示腦栓通顆粒具有改善血流變的作用。
表1 腦栓通顆粒對小鼠耳廓微循環(huán)流態(tài)的影響(±s)
表1 腦栓通顆粒對小鼠耳廓微循環(huán)流態(tài)的影響(±s)
與滴加腎上腺素前比較,*P﹤0.05,**P﹤0.01,***P﹤0.001。
8 min空白對照組 — 10 5.00±0.00 2.10±0.87*** 3.80±0.63組別 劑量/(g生藥/kg) 動物數(shù)/只 流態(tài)滴腎上腺素前 滴腎上腺素后2 min 滴腎上腺素后***腦栓通顆粒低劑量組 18.85 10 5.00±0.00 2.90±0.57*** 4.40±0.52**腦栓通顆粒中劑量組 37.70 10 5.00±0.00 2.80±0.60*** 4.60±0.30*腦栓通顆粒高劑量組 75.40 10 5.00±0.00 2.60±0.52*** 4.70±0.48通心絡(luò)膠囊組 0.81(g/kg) 10 5.00±0.00 2.60±0.84*** 4.30±0.67**
表2 腦栓通顆粒對小鼠耳廓微循環(huán)流速的影響(±s)
表2 腦栓通顆粒對小鼠耳廓微循環(huán)流速的影響(±s)
與滴加腎上腺素前比較,*P﹤0.05,***P﹤0.001。
8 min空白對照組 — 10 108.40±16.53 45.80±17.56*** 91.65±18.26組別 劑量/(g生藥/kg) 動物數(shù)/只 流速/(μm/s)滴腎上腺素前 滴腎上腺素后2 min 滴腎上腺素后*腦栓通顆粒低劑量組 18.85 10 110.00±15.76 55.20±14.49*** 103.00±13.12腦栓通顆粒中劑量組 37.70 10 115.11±8.55 55.29±16.06*** 111.70±7.54腦栓通顆粒高劑量組 75.40 10 117.60±17.18 57.82±15.46*** 114.81±17.27通心絡(luò)膠囊組 0.81(g/kg) 10 120.60±14.42 59.30±11.04***111.16±12.35
表3 腦栓通顆粒對腎上腺素致小鼠微循環(huán)障礙的管徑的影響(±s)
表3 腦栓通顆粒對腎上腺素致小鼠微循環(huán)障礙的管徑的影響(±s)
與滴加腎上腺素前比較,*P﹤0.05,**P﹤0.01。
8 min空白對照組 — 10 4.76±0.76 3.65±0.84** 4.09±0.67組別 劑量/(g生藥/kg) 動物數(shù)/只 管徑/μm滴腎上腺素前 滴腎上腺素后2 min 滴腎上腺素后*腦栓通顆粒低劑量組 18.85 10 4.64±0.81 3.50±0.85** 4.48±0.75腦栓通顆粒中劑量組 37.70 10 4.52±0.75 3.44±0.80** 4.27±0.84腦栓通顆粒高劑量組 75.40 10 4.93±0.59 3.72±0.78** 4.81±0.65通心絡(luò)膠囊組 0.81(g/kg) 10 4.88±0.77 3.42±0.67**4.56±0.74
表4 腦栓通顆粒對血瘀大鼠血液流變學(xué)的影響(±s,n=10)
表4 腦栓通顆粒對血瘀大鼠血液流變學(xué)的影響(±s,n=10)
與空白對照組比較,△P<0.05,△△△P<0.001;與模型對照組比較,*P﹤0.05,**P﹤0.01。
/min空白對照組 — 5.47±0.76 6.55±0.95 12.63±1.66 10.38±2.02 2組別 劑量/(g生藥/kg)全血黏度/(mpa·s)高切/(200/s) 中切/(100/s) 低切/(30/s ) 紅細(xì)胞聚集指數(shù) 紅細(xì)胞電泳時間0.53±2.85模型對照組 — 7.28±0.47△△△ 8.73±0.57△△△ 15.83±0.83△△△ 12.15±1.05 27.31±1.78△腦栓通顆粒低劑量組 13.05 6.55±0.93* 7.88±1.15 14.85±1.87 10.45±1.98* 24.56±3.49*腦栓通顆粒中劑量組 26.10 6.32±1.22* 7.58±1.49* 14.22±2.34* 10.42±1.71* 22.69±4.32**腦栓通顆粒高劑量組 52.20 6.56±0.60** 7.99±0.68** 14.89±1.05* 11.29±0.83 24.94±2.09*通心絡(luò)膠囊組 0.56(g/kg) 7.08±0.65 8.51±0.78 15.64±1.17 11.15±2.4 26.56±2.42
腦栓通顆粒高劑量組與空白對照組比較,平均阻塞率有顯著差異(P﹤0.05);腦栓通中、高劑量組血栓濕重,與空白對照組比較有顯著差異(P﹤0.05),見表5。提示腦栓通顆粒具有抑制血小板凝集、抗血栓形成的作用。
表5 腦栓通顆粒對大鼠血栓生成的影響(±s)
表5 腦栓通顆粒對大鼠血栓生成的影響(±s)
與空白對照組比較,*P﹤0.05。
組別 劑量/(g生藥/kg)動物數(shù)/只平均阻塞率/%血栓濕重/mg空白對照組 —10 78.06±0.18 2.29±0.84腦栓通低劑量組 13.05 10 66.02±0.17 1.52±0.94腦栓通中劑量組 26.10 10 65.82±0.11 1.47±0.82*腦栓通高劑量組 52.20 10 62.98±0.19*1.49±0.60*通心絡(luò)膠囊組 0.56(g/kg)10 68.96±0.15 1.96±0.69
缺血性中風(fēng),是中老年人的常見病,包括腦血栓形成、腦栓塞、短暫性腦缺血發(fā)作等,具有發(fā)病率高、病死率高、致殘率高及并發(fā)癥多的“三高一多”的特點[9-10],嚴(yán)重危害著人類健康。缺血性中風(fēng)的病因,主要是動脈硬化和高血壓。常因心力衰竭、心肌梗塞、心律失常、產(chǎn)后出血、疲勞和睡眠等,引起血壓降低,血流緩慢,血黏度增加或血液凝固性異常增高而產(chǎn)生血栓?;钛鲎饔糜兄陬A(yù)防腦血栓的形成,進(jìn)而預(yù)防和改善腦血管阻塞性疾患,從而使大腦的缺血狀態(tài)得到改善,預(yù)防缺血性腦中風(fēng)的發(fā)生[11-12]。實驗結(jié)果表明,腦栓通顆粒能顯著加快血流速度,擴(kuò)張血管,從而改善小鼠的微循環(huán)障礙;能明顯降低血瘀大鼠高、中、低切狀態(tài)下的全血黏度,降低紅細(xì)胞聚集指數(shù),縮短紅細(xì)胞電泳時間;能抑制大鼠血栓形成。提示腦栓通顆粒具有顯著的活血化瘀作用,為臨床預(yù)防治療缺血性中風(fēng)提供實驗依據(jù)。
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