凡納濱對蝦飼料中用花生粕替代魚粉的研究

楊奇慧 譚北平 董曉慧 遲淑艷 劉泓宇

(1.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料實驗室，湛江 524025;2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，雅安 625014)

凡納濱對蝦飼料中用花生粕替代魚粉的研究

楊奇慧1，2譚北平1董曉慧1遲淑艷1劉泓宇1

(1.廣東海洋大學(xué)水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料實驗室，湛江 524025;2.四川農(nóng)業(yè)大學(xué)動物營養(yǎng)研究所，雅安 625014)

本研究旨在研究花生粕替代不同水平魚粉蛋白質(zhì)對凡納濱對蝦生長性能、體成分、血清生化指標、消化酶活性和養(yǎng)分表觀消化率的影響。選擇初始體重為(0.75±0.01)g的健康對蝦苗720尾，隨機分成6個處理，每個處理3個重復(fù)，每個重復(fù)40尾蝦。試驗配制6種等氮等能飼料，即以 0、3.83%、7.65%、11.48%、15.30% 和 22.96% 的花生粕分別替代 0、10%、20%、30%、40%和60%的魚粉蛋白質(zhì)。飼養(yǎng)試驗持續(xù)56 d。結(jié)果表明:當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)水平高于10%時，凡納濱對蝦的增重率、特定生長率和蛋白質(zhì)效率顯著降低(P＜0.05);當替代水平高于20%時，飼料系數(shù)顯著提高(P＜0.05)。當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)水平高于40%時，全蝦粗蛋白質(zhì)含量顯著降低(P＜0.05);當替代水平高于30%時，全蝦粗脂肪含量顯著提高(P＜0.05)。當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)水平高于20%時，肝胰臟蛋白酶和脂肪酶活性顯著降低(P＜0.05)，而淀粉酶活性則顯著提高(P＜0.05)。當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)水平高于10%時，血清總蛋白和葡萄糖含量顯著下降(P＜0.05);當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)水平高于20%時，血清總膽固醇含量顯著下降(P＜0.05);當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)水平高于30%時，血清甘油三酯含量顯著升高(P＜0.05)。飼料的干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和能量表觀消化率，對照組顯著高于其他各組(P＜0.05);此外，花生粕替代水平為10%和20%的組的蛋白質(zhì)表觀消化率顯著高于替代水平為40%和60%的組(P＜0.05)。賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸、蘇氨酸、酪氨酸、絲氨酸、谷氨酸、脯氨酸、甘氨酸和丙氨酸以及總氨基酸的表觀消化率，對照組均顯著高于其他各組(P＜0.05);蛋氨酸、組氨酸、精氨酸和天冬氨酸的表觀消化率，對照組與替代10%組差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著高于替代60%組(P＜0.05)。然而，花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)水平的變化對對蝦成活率、全蝦的磷和灰分含量及飼料脂肪表觀消化率影響不顯著(P＞0.05)。結(jié)果提示，以生長性能為指標并結(jié)合飼料養(yǎng)分表觀消化率，在粗蛋白質(zhì)含量為40%、魚粉含量為30%的凡納濱對蝦基礎(chǔ)飼料中花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)的適宜比例為10%。

凡納濱對蝦;魚粉;花生粕;替代水平

眾所周知，魚粉是水產(chǎn)養(yǎng)殖動物最主要的蛋白質(zhì)源［1］。然而，隨著水產(chǎn)養(yǎng)殖業(yè)的迅猛發(fā)展，魚粉需求量大幅度增加，供應(yīng)量嚴重不足，用其他蛋白質(zhì)原料替代魚粉的研究已成為水產(chǎn)飼料營養(yǎng)研究的熱點［2］。花生粕(peanutmeal，PNM)是花生脫殼后用浸提法榨油后的副產(chǎn)品，其蛋白質(zhì)含量高、精氨酸豐富［3］，是水生動物飼料中常用蛋白質(zhì)原料之一［4－6］。研究表明，凡納濱對蝦(Litopenaeus vannameiBoone)對花生粕的蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪和能量的表觀消化率均與魚粉接近［7］。

目前，關(guān)于花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦生長的影響已有報道。研究表明，用花生粕替代20%魚粉飼喂凡納濱對蝦56 d，對其增重率無顯著影響［8］;在30%魚粉的基礎(chǔ)飼料中添加24%花生粕，凡納濱對蝦的生長與飼喂46%魚粉組無顯著差異［9］;花生粕替代飼料中20%動物蛋白復(fù)合物(53%曼哈頓魚粉+34%蝦加工副產(chǎn)物+13%魷魚粉)，對凡納濱對蝦增重率無顯著影響，當替代水平高于40%時則降低其增重率［6］。然而，關(guān)于花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦組織消化酶活性、血液生化指標和養(yǎng)分表觀消化率的影響未見報道。因此，開展花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦生長、飼料利用、肝胰臟消化酶活性、血液生化指標和養(yǎng)分表觀消化率影響的研究，探討凡納濱對蝦飼料中花生粕替代魚粉的適宜比例具有一定的學(xué)術(shù)意義，并可為花生粕在對蝦配合飼料中的合理使用提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗設(shè)計

飼料配方中用 0、3.83%、7.65%、11.48%、15.30%和22.96%的花生粕分別替代0、10%、20%、30%、40%和60%的魚粉蛋白質(zhì)，配制成6種等氮等能飼料(表1)。根據(jù)凡納濱對蝦對氨基酸的需要量［10］，分別添加L－賴氨酸(98%)、DL－蛋氨酸(98%)、L－蘇氨酸(98%)和L－精氨酸(98%)以平衡各處理中賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和精氨酸的含量，并滿足凡納濱對蝦生長對賴氨酸、蛋氨酸、精氨酸和蘇氨酸的需要。

表1 試驗飼料組成及營養(yǎng)水平(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 1 Composition and nutrient levels of experimental diets(DM basis) %

1.2 飼料配制與試驗動物

在配制試驗飼料過程中，各種原料粉碎過60目篩，按表1的配方準確稱量各種飼料原料，微量添加成分采取逐級擴大法混合均勻，再添加30%左右的水分，再次混勻后，壓制成粒徑為1.0和1.5 mm的顆粒飼料。風(fēng)干后，用自封袋密封，放于－20℃冰柜中保存?zhèn)溆谩?/p>

試驗蝦為廣東粵海飼料股份有限公司湛江東海島種苗場培育的凡納濱對蝦苗。選擇初始體重為(0.75±0.01)g的健康對蝦苗720尾，隨機分為6組，各投喂1種試驗飼料。每組設(shè)3個重復(fù)，以重復(fù)為單位放入0.5 m3的玻璃纖維鋼桶中，每桶40尾。

1.3 飼養(yǎng)管理

試驗在廣東粵海飼料股份有限公司湛江東海島科研基地室內(nèi)養(yǎng)殖系統(tǒng)進行。每天按體重的8% ～10% 投餌，分別在 07:00、11:30、17:30、21:00各投喂1次。試驗用水為經(jīng)過沉淀、過濾的海水，每天觀察對蝦攝食、蛻殼、生長情況，并記錄投喂量、水溫、pH、鹽度、溶氧等水質(zhì)參數(shù)，每周定期測定水中氨氮含量。試驗期間水溫為28.0～30.5 ℃，鹽度為26.5 ～28.0，試驗期間連續(xù)充氧，溶解氧 ＞7.0 mg/L，pH 為 7.8 ～8.2，氨氮含量＜0.03 mg/L。試驗期為56 d。

1.4 糞便收集

參考Lin等［11］方法收集糞便。試驗開始4周后，每次投喂1 h后，先將桶中剩余飼料排出，再通過虹吸法將糞便吸出篩絹網(wǎng)上并濾干水，然后把包膜完整并成形的糞便收集在封口袋中，放入－20℃冰箱中保存。待每桶糞便樣品收集足量(干重約為10 g)，再將每個重復(fù)中糞樣經(jīng)過干燥、研磨粉碎后，密封存放于－20℃冰箱中，用于分析糞樣中的三氧化二鉻(Cr2O3)、蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪和能量的含量。

1.5 樣品采集

試驗結(jié)束前24 h停止投喂。試驗結(jié)束時，以重復(fù)為單位稱重并記錄尾數(shù)，計算增重率和成活率。每桶中隨機選取5尾蝦，保存于－20℃冰箱中，用于全蝦體成分分析;每桶另取10尾蝦，于冰浴中剝離肝胰臟，稱取重量后迅速放于液氮中保存，再轉(zhuǎn)移到－80℃超低溫冰箱中存放，以測定肝胰臟相關(guān)酶活指標;每桶再選取10尾蝦，用1 m L注射器從圍心腔中抽血，將血液置于1.5 m L Eppendorf管中，在4℃冰箱中靜置過夜后離心，取上清液備用。

1.6 測定指標

1.6.1 生長指標計算公式

1.6.2 體成分分析

參照 AOAC(1995)［12］方法，分別測定全蝦樣品中的水分、粗蛋白質(zhì)、粗脂肪、粗灰分和磷的含量。其中:水分含量通過用恒溫烘箱在105℃下烘干至恒重測定;粗蛋白質(zhì)含量采用自動凱氏定氮儀(2300 － Auto-analyzer，F(xiàn)oss Tecator，Sweden)測定;粗脂肪含量采用自動脂肪測定儀(Soxtec System 2050，F(xiàn)oss Tecator，Sweden)測定;粗灰分含量是在550℃馬福爐中灼燒12 h后測得;磷含量采用等離子發(fā)射光譜(ICP)儀［IRIS Advantage(HR)，102 Thermo Jarrell Ash，103 Woburm，USA］測定。

1.6.3 肝胰臟消化酶活性的測定

從－80℃超低溫冰箱中取出肝胰臟樣品，轉(zhuǎn)移到4℃冰箱中，待其解凍后備用。準確稱量肝胰臟0.5 g，然后按1∶5的質(zhì)量體積比加入預(yù)冷的生理鹽水，在冰浴條件下，用玻璃勻漿器勻漿，將勻漿液在0～4℃、9 000 r/m in離心30 m in所得上清液即為粗酶液，將其置于－4℃冰箱中保存，并于24 h內(nèi)測完消化酶(蛋白酶和淀粉酶)活力。脂肪酶酶液的制備:在肝胰臟樣品中加入3～4倍體積預(yù)冷的0.025 mol/L磷酸緩沖液，冰浴中勻漿，勻漿液于0～1℃、3 600 r/m in離心20 m in，取其上清液用于脂肪酶活力的測定。

蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的測定分別用南京建成生物研究所研制的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶試劑盒和型號Uquant全波段酶標儀。蛋白酶活力以37℃下每分鐘水解干酪素產(chǎn)生1μg酪氨酸定義為1個酶活力單位;淀粉酶活力以每毫克蛋白質(zhì)37℃下每分鐘水解1 mg淀粉定義為1個酶活力單位;脂肪酶活力以在一定條件下，每分鐘釋放出1μmol脂肪酸的酶量定義為1個酶活力單位;酶液蛋白質(zhì)濃度采用南京建成生物工程研究所生產(chǎn)的蛋白質(zhì)定量試劑盒(考馬斯亮蘭法)測定，以牛血清白蛋白作為標準，單位表示為mg/m L。

1.6.4 血清生化指標的測定

血清總蛋白(total protein，TP)含量采用南京建成生物工程研究所研制的蛋白質(zhì)定量試劑盒(考馬斯亮蘭法)測定，以牛血清白蛋白作為標準，單位表示為mg/m L;葡萄糖(glucose，GLU)含量采用中生北控生物科技股份有限公司生產(chǎn)的葡萄糖試劑盒(葡萄糖氧化酶法)測定，單位表示為mg/dL;甘油三酯(triglyceride，TG)含量采用長春匯力生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的甘油三酯試劑盒測定，單位表示為mmol/L;總膽固醇(total cholesterol，TC)含量采用長春匯力生物技術(shù)有限公司生產(chǎn)的總膽固醇試劑盒測定，單位表示為mmol/L。

1.6.5 養(yǎng)分表觀消化率計算公式

參考Pond等［13］方法，分別計算飼料中的干物質(zhì)和蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪和能量的表觀消化率，計算公式如下:

式中:F是糞便中某營養(yǎng)素含量;D是飼料中某營養(yǎng)素含量;DCr是飼料中Cr2O3的含量，F(xiàn)Cr是糞便中Cr2O3的含量。

1.7 數(shù)據(jù)處理與分析

結(jié)果用平均值±標準差表示。采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件對數(shù)據(jù)進行單因素方差分析(Oneway ANOVA)，并結(jié)合Duncan氏法進行多重比較檢驗處理之間的差異顯著性，P＜0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦生長性能的影響

由表2可知，花生粕替代不同比例的魚粉蛋白質(zhì)對凡納濱對蝦增重率、飼料系數(shù)和特定生長率影響顯著(P＜0.05)，而對成活率無顯著影響(P＞0.05)。

增重率和特定生長率:以對照組最高，替代10%組次之，替代60%組最低;對照組和替代10%組顯著高于其他各組(P＜0.05)，且對照組和替代10%組間差異不顯著(P＞0.05);替代20%和30%組顯著高于替代40%和60%組(P＜0.05)，且替代20%和30%組間差異不顯著(P＞0.05);替代60%組顯著低于其他各組(P＜0.05)。

飼料系數(shù):以對照組最低，替代60%組最高;對照組、替代10%和20%組顯著低于替代30%、40%和60%組(P＜0.05)，其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

蛋白質(zhì)效率:以對照組最高，替代10%組次之，替代60%組最低;對照組與替代10%組差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著高于其他各組(P＜0.05);替代20%組顯著低于對照組(P＜0.05)，顯著高于替代30%、40%和60%組(P＜0.05)，與替代10%組差異不顯著(P＞0.05)。

成活率:各組成活率均在94%以上，各組間無顯著差異(P＞0.05)。

2.2 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦體成分的影響

花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦體成分的影響見表3?；ㄉ商娲煌壤聂~粉蛋白質(zhì)對凡納濱對蝦的全蝦粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量有顯著影響(P＜0.05)，而對全蝦粗灰分、磷含量的影響不顯著(P＞0.05)。

粗蛋白質(zhì)含量:以替代30%組最高，替代20%組次之，替代60%組最低;替代30%組顯著高于替代40%和60%組(P＜0.05)，與其他各組差異不顯著(P＞0.05);替代60%組顯著低于其他各組(P＜0.05);替代40%組顯著高于替代60%組(P＜0.05)，顯著低于其他各組(P＜0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

粗脂肪含量:以對照組最低，替代10%組次之，替代60%組最高;替代60%組顯著高于其他各組(P＜0.05);替代30%和40%組顯著低于替代60%組(P＜0.05)，但顯著高于其他各組(P＜0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

粗灰分和磷含量:各組間差異均不顯著(P＞0.05)。

表2 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦生長性能的影響Table 2 Effects of replacement of fish mealwith peanutmeal on growth performance of white shrimp(Litopenaeus vannamei Boone)

表3 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦體成分的影響(干物質(zhì)基礎(chǔ))Table 3 Effects of replacement of fish mealwith peanutmeal on body composition of white shrimp(Litopenaeus vannamei Boone)(DM basis) %

2.3 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦肝胰臟消化酶活性的影響

由表4可知，花生粕替代不同比例的魚粉蛋白質(zhì)對凡納濱對蝦肝胰臟中的蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶活性均有顯著影響(P＜0.05)。

蛋白酶活性:以對照組最高，替代10%組次之，替代60%組最低;對照組顯著高于替代30%、40%和60%組(P＜0.05)，與其他各組差異不顯著(P＞0.05);替代30%和40%組與替代60%組差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著低于對照組以及替代10%和20%組(P＜0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

脂肪酶活性:以替代10%組最高，對照組次之，替代60%組最低;替代10%組和對照組顯著高于替代30%、40%和60%組(P＜0.05)，與替代20%組差異不顯著(P＞0.05);替代60%組與替代40%組差異不顯著(P＜0.05)，但均顯著低于其他各組(P＜0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

淀粉酶活性:以替代60%最高，替代40%組次之，對照組最低;替代60%組顯著高于對照組以及替代10%和20%組(P＜0.05)，與其他2組差異不顯著(P＞0.05);替代20%組顯著高于對照組和替代10%組(P＜0.05)，顯著低于替代60%組(P＜0.05)，與其他各組差異不顯著(P＞0.05);對照組與替代10%組差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著低于其他各組(P＜0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

2.4 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦血清生化指標的影響

由表5可知，花生粕替代不同比例的魚粉蛋白質(zhì)對血清總蛋白、葡萄糖、總膽固醇和甘油三酯的含量均有顯著影響(P＜0.05)。

總蛋白含量:以對照組最高，替代10%組次之，替代40%組最低;對照組和替代10%組間差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著高于其他各組(P＜0.05);替代20%和30%組顯著高于替代40%和60%組(P＜0.05)，但替代20%和30%組間差異不顯著(P＞0.05);替代40%和60%組顯著低于其他各組(P＜0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

表4 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦肝胰臟消化酶活性的影響Table 4 Effects of replacement of fish meal with peanutmeal on activities of hepatopancreas digestive enzymes of white shrimp(Litopenaeus vannamei Boone)

葡萄糖含量:以對照組最高，替代20%組次之，替代60%組最低;對照組與替代10%組差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著高于其他各組(P＜0.05);替代20%組顯著高于替30%和40%組(P＜0.05)，與替代 60%組差異不顯著(P＞0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

總膽固醇含量:以替代10%組最高，對照組次之，替代60%組最低;10%組顯著高于替代30%、40%和60%組(P＜0.05)，與對照組差異不顯著(P＞0.05);替代30%和60%組顯著低于對照組以及替代10%和20%組(P＜0.05)，與其他各組差異不顯著(P＞0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

甘油三酯含量:以替代60%組最高，替代40%組次之，對照組最低;替代60%和40%組間差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著高于其他各組(P＜0.05);其余各組差異不顯著(P＞0.05)。

表5 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦血清生化指標的影響Table 5 Effects of replacement of fish meal with peanutmeal on serum biochem ical indices of white shrimp(Litopenaeus vannamei Boone)

2.5 花生粕替代魚粉對飼料中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪和能量表觀消化率的影響

由表6可知，花生粕替代不同比例的魚粉蛋白質(zhì)對飼料中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和能量表觀消化率有顯著影響(P＜0.05)，對脂肪表觀消化率的影響不顯著(P＞0.05)。

干物質(zhì)表觀消化率:以對照組最高，顯著高于其他各組(P＜0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

蛋白質(zhì)表觀消化率:以對照組最高，顯著高于其他各組(P＜0.05);替代10%和20%組顯著高于替代40%和60%組(P＜0.05)，與替代30%組差異不顯著(P＞0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

能量表觀消化率:以對照組最高，顯著高于其他各組(P＜0.05);其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

脂肪表觀消化率:各組脂肪表觀消化率均在94.16% ～96.18%范圍內(nèi)，組間差異不顯著(P＞0.05)。

表6 花生粕替代魚粉對飼料中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪和能量表觀消化率的影響Table 6 Effects of replacement of fish mealwith peanutmeal on apparent digestibilities of dry matter，protein，lipid and energy in diets %

2.6 花生粕替代魚粉對飼料中氨基酸表觀消化率的影響

由表7可知，花生粕替代不同比例魚粉蛋白質(zhì)對飼料中各氨基酸表觀消化率均有顯著影響(P＜0.05)。

必需氨基酸表觀消化率:9種必需氨基酸的表觀消化率均以對照組最高，替代60%組最低;賴氨酸、亮氨酸、異亮氨酸、苯丙氨酸、纈氨酸和蘇氨酸的表觀消化率，對照組均顯著高于其他各組(P＜0.05);蛋氨酸、組氨酸和精氨酸的表觀消化率，對照組與替代10%組差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著高于替代60%組(P＜0.05)。

非必需氨基酸表觀消化率:除天冬氨酸外，其余非必需氨基酸的表觀消化率均以對照組最高，且均顯著高于其他各組(P＜0.05);天冬氨酸的表觀消化率，對照組與替代10%組差異不顯著(P＞0.05)，但均顯著高于替代60%組(P＜0.05)。

總氨基酸表觀消化率:以對照組最高，顯著高于其他各組(P＜0.05)，其余各組間差異不顯著(P＞0.05)。

3 討論

3.1 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦生長性能的影響

目前，關(guān)于花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦生長性能影響的報道較少。Lim［6］研究表明，用11.7%花生粕替代20.0%的動物蛋白復(fù)合物(53%曼哈頓魚粉+34%蝦加工副產(chǎn)物+13%魷魚粉)，對凡納濱對蝦增重率無顯著影響，但用23.4%的花生粕替代40.0%的動物蛋白復(fù)合物時，增重率則顯著降低。劉立鶴等［8］研究表明，飼喂用10.38%花生粕替代飼料30.00%的魚粉蛋白質(zhì)的飼料56 d后，對蝦增重率顯著低于對照組。本試驗中，當飼料中花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)高于20%時，隨著替代比例的增加，凡納濱對蝦的生長性能降低?？梢?，本試驗結(jié)果中花生粕可替代魚粉蛋白質(zhì)的比例低于 Lim［6］和劉立鶴等［8］的研究結(jié)果。但進一步比較可知，結(jié)果存在差異的原因可能與基礎(chǔ)飼料中魚粉含量的不同有關(guān)。Lim［6］的試驗中基礎(chǔ)飼料中動物蛋白復(fù)合物的含量為50%，劉立鶴等［8］的試驗中基礎(chǔ)飼料中含有36%的魚粉，均高于本試驗基礎(chǔ)飼料中30%的魚粉含量。此外，劉立鶴等［8］研究表明，用花生粕替代0～50%魚粉，投喂56 d后，凡納濱對蝦的成活率差異不顯著，為 82.2% ～90.0%;Lim［6］研究也表明，飼料中花生粕替代0～100%動物蛋白復(fù)合物，隨著替代水平增加，凡納濱對蝦的成活率有所下降，但無顯著差異。本試驗結(jié)果與上述研究結(jié)果相一致。關(guān)于花生粕替代魚粉對飼料利用的影響，在蝦上也有研究。劉立鶴等［8］研究表明，花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例大于40%時，凡納濱對蝦蛋白質(zhì)效率顯著降低;而 Lim［6］研究表明，用46.8%花生粕替代飼料中高于80.0%的動物蛋白復(fù)合物，凡納濱對蝦的蛋白質(zhì)效率顯著降低。本試驗結(jié)果與上述研究結(jié)果接近。同時，在魚上的研究表明，花生粕替代17%的魚粉對莫桑比克羅非魚(Nlapia mossambicus)的生長無顯著影響，但隨著替代水平的增加，羅非魚的增重率降低［14］。由此可見，用花生粕僅可較低水平部分替代水產(chǎn)動物飼料中的魚粉。目前，對于花生粕替代魚粉影響動物生長和飼料利用的原因一般認為是由于花生粕容易感染黃曲霉，而由黃曲霉所產(chǎn)生的黃曲霉毒素(aflatoxin)對水產(chǎn)動物生長和生理機能造成負面的影響，且水產(chǎn)動物對黃曲霉毒素非常敏感［9］。在對虹鱒(Oncorhynchusmykiss)的研究中表明，體重為50 g的虹鱒，黃曲霉毒素對其半數(shù)致死量(LD50)為0.5 ～1.0 mg/kg 體重，中毒的主要表現(xiàn)為生長緩慢、貧血、肝臟和其他器官受損、免疫力下降、死亡率增加等［15］。

表7 花生粕替代魚粉對飼料中氨基酸表觀消化率的影響Table 7 Effects of replacement of fish meal with peanutmeal on apparent digestibility of am ino acids in diets %

3.2 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦體成分的影響

本試驗結(jié)果表明，花生粕含量增加且魚粉含量降低的同時，凡納濱對蝦全蝦粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量有顯著差異，而全蝦粗灰分、磷含量的無顯著差異。目前，關(guān)于花生粕替代魚粉對蝦體成分的影響未見報道。但 Lim［6］研究表明，用11.7%花生粕替代20.0%動物蛋白復(fù)合物時，全蝦蛋白質(zhì)含量從對照組的20.26%降低為19.76%;用57.5%花生粕替代100.0%動物蛋白復(fù)合物時，全蝦蛋白質(zhì)含量僅為17.00%;用23.4%花生粕替代40%動物蛋白復(fù)合物時，全蝦脂肪含量從對照組的1.82%降低到1.68%，100%替代動物蛋白復(fù)合物后，全蝦脂肪含量僅有0.74%?？梢?，本試驗結(jié)果與Lim［6］研究結(jié)果一致，即隨著花生粕含量增加，魚粉含量降低，全蝦粗蛋白質(zhì)和粗脂肪含量也降低。Lim［6］研究表明，花生粕替代高于20%動物蛋白復(fù)合物時，全蝦灰分含量顯著降低;當替代比例為60%時，灰分含量僅有3.14%，且顯著低于對照組的3.34%。本試驗結(jié)果與Lim［6］的研究結(jié)果有差異，其原因可能是由于本試驗中用花生粕替代魚粉，而Lim［6］的研究中則是用花生粕替代動物蛋白復(fù)合物，這可能引起全蝦灰分沉積量的不一致。而周歧存［16］對軍曹魚的研究表明，用花生粕替代10% ～60%的魚粉，全魚和肌肉的水分、蛋白質(zhì)、脂肪和灰分含量均無顯著影響。有關(guān)花生粕替代魚粉影響水產(chǎn)動物體組成的機制仍有待進一步研究。

3.3 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦消化酶活性和干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪和能量表觀消化率的影響

本試驗結(jié)果表明，花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的變化對飼料中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和能量的表觀消化率均有顯著的影響，對脂肪表觀消化率影響不顯著。當飼料中花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例高于10%時，隨著替代比例增加，飼料干物質(zhì)的表觀消化率顯著降低，蛋白質(zhì)和能量表觀消化率的變化趨勢與之相一致。

目前，對于花生粕替代魚粉對飼料干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪和能量表觀消化率的影響在蝦上未見報道。但Yang等［7］研究表明，凡納濱對蝦對花生粕的蛋白質(zhì)、氨基酸、脂肪和能量的表觀消化率與魚粉均無顯著差異，且認為在凡納濱對蝦中，花生粕的生物利用性與魚粉相當。同時，關(guān)于花生粕干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪和能量的表觀消化率在水產(chǎn)動物中已有研究。Yang等［7］研究表明，凡納濱對蝦對花生粕的蛋白質(zhì)表觀消化率為93.18%。在其他水產(chǎn)動物上的研究也表明花生粕的蛋白質(zhì)表觀消化率較高，中國明對蝦(Fenneropenaeus Chinensis)［17］的 為 87%、矛 尾 復(fù) 蝦 虎 魚(Synechogobius hasta)［18］的為 90.17% 、黃鰭鯛(Sparus latus)［19］的為 97.3% 、軍曹魚(Rachycentron canadum)［20］的為 90.24%。而在本試驗中，花生粕替代魚粉后，飼料蛋白質(zhì)表觀消化率為92.12% ～94.56%，但花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)高于10%時，飼料中蛋白質(zhì)的表觀消化率顯著降低。同時，結(jié)合表4消化酶活性的結(jié)果可知，當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例高于20%時，肝胰臟蛋白酶的活性顯著降低，說明隨著花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的增加不僅降低了凡納濱對蝦肝胰臟蛋白酶的活性，也降低了飼料蛋白質(zhì)的表觀消化率。已有研究表明，凡納濱對蝦對花生粕的脂肪表觀消化率為95.28%［7］，而軍曹魚對花生粕的脂肪表觀消化率為93.85%［20］。本試驗中，花生粕替代魚粉后，飼料中脂肪的表觀消化率為94.16% ～96.01%，且隨著花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的變化，飼料中脂肪的表觀消化率無顯著變化。結(jié)合表4消化酶活性的測定結(jié)果可知，當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例高于20%時，肝胰臟脂肪酶的活性顯著降低，說明了花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的提高雖抑制了脂肪酶的活性，但對飼料中脂肪的表觀消化率并未產(chǎn)生顯著影響。研究表明，凡納濱對蝦對花生粕的能量表觀消化率為82.29%［7］，軍曹魚對花生粕的能量表觀消化率為82.25%［20］，黃鰭鯛對花生粕的能量表觀消化率的較低，僅為59.80%［19］?？梢?，不同的水產(chǎn)動物對花生粕的能量表觀消化率存在差異。而本試驗中，花生粕替代魚粉后，飼料中能量的表觀消化率為86.34% ～92.98%，且隨著花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的提高，飼料中能量表觀消化率顯著降低。結(jié)合表4消化酶活性的測定結(jié)果可知，當花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例高于20%時，肝胰臟淀粉酶的活性顯著提高，說明花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的提高顯著提高了淀粉酶的活性，但對飼料的能量表觀消化率影響不顯著。綜合肝胰臟中蛋白酶、脂肪酶和淀粉酶的活性變化與飼料中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)、脂肪和能量的表觀消化率結(jié)果，進一步說明了在凡納濱對蝦飼料中，隨著花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例增加，對蝦肝胰臟蛋白酶和淀粉酶的活性受到抑制，并導(dǎo)致其對飼料中干物質(zhì)、蛋白質(zhì)和能量表觀消化率的降低。目前，關(guān)于花生粕替代魚粉對水產(chǎn)動物消化酶活性的影響未見報道。已有研究表明，花生粕與大多數(shù)豆類籽實一樣，含有胰蛋白酶抑制因子和其他蛋白酶抑制因子，大量使用將會引起動物肝臟病變，最終導(dǎo)致消化功能的降低［21］。然而，梅娜等［22］研究則認為，花生粕中總黃酮含量較高，可達到1.095 mg/g，而黃酮類化合物是重要的生物活性物質(zhì)，具有保護肝臟等活性。關(guān)于隨飼料中花生粕用量的增加黃酮類化合物的含量提高對水產(chǎn)動物消化功能的影響機制尚存在爭議，有待進一步研究。

3.4 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦氨基酸表觀消化率的影響

由本研究結(jié)果可知，隨著花生粕含量增加且魚粉含量的降低，凡納濱對蝦對飼料中必需氨基酸、非必需氨基酸和總氨基酸的表觀消化率均降低?；ㄉ商娲~粉蛋白質(zhì)比例為0～40%時，除了蛋氨酸外，其余8種必需氨基酸的表觀消化率均在90%以上，且隨著花生粕含量的增加，所有必需氨基酸的表觀消化率顯著降低。除天冬氨酸外，其余非必需氨基酸的表觀消化率均為對照組顯著高于其他各組;總氨基酸的表觀消化率也有相似的變化規(guī)律。目前，關(guān)于花生粕替代魚粉對飼料氨基酸表觀消化率的影響在水產(chǎn)動物中未見報道。但花生粕替代魚粉對蝦類機體氨基酸沉積率的影響已有研究。劉立鶴等［8］在凡納濱對蝦上的研究表明，當花生粕替代0～50%魚粉時，隨著花生粕替代魚粉比例的增加，全蝦精氨酸含量從對照組的5.56%增加到6.25%;花生粕替代50%魚粉時，全蝦蛋氨酸含量僅為1.41%，較全魚粉組的1.70%降低了17%，并指出了飼料中精氨酸含量隨著花生粕用量增加而提高，而蛋氨酸含量卻逐漸下降，因此精氨酸與蛋氨酸比例的不平衡導(dǎo)致體成分中蛋氨酸含量下降。而在本試驗中，通過添加晶體氨基酸，各組間的賴氨酸、蛋氨酸、精氨酸和蘇氨酸含量達到相同水平，因此各組間氨基酸表觀消化率的差異并不是由于飼料中氨基酸不平衡所引起的，而可能是由花生粕含量的增加降低了飼料適口性及抗營養(yǎng)因子含量提高所導(dǎo)致的負面效應(yīng)。同時，關(guān)于花生粕中氨基酸表觀消化率的研究在一些水生動物中已有報道。常青等［23］研究表明，花鱸(Lateolabrax japonicus)對花生粕中蛋氨酸的利用率僅有50%，而對賴氨酸的利用率可達90%;榮長寬等［17］研究指出，中國明對蝦對單一花生粕中賴氨酸和蛋氨酸的消化利用率均為87%。而在本試驗中，花生粕替代不同比例魚粉蛋白質(zhì)后，飼料中花生粕的蛋氨酸表觀消化率均在85%以上，與上述研究結(jié)果較相近。與魚粉相比，花生粕賴氨酸含量低，但精氨酸含量高［3］。Yang 等［7］研究表明，凡納濱對蝦對花生粕中的賴氨酸、蛋氨酸、精氨酸和蘇氨酸的表觀消化率分別為 91.97%、96.62%、94.16% 和 79.96% ，魚粉的賴氨酸、蛋氨酸、精氨酸和蘇氨酸的表觀消化 率 分 別 為 92.73%、94.71%、90.79% 和84.73%，得出凡納濱對蝦對花生粕和魚粉中這4種必需氨基酸的表觀消化率均無顯著差異。在本試驗中，隨著飼料中花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的增加，氨基酸的表觀消化率顯著降低?？梢姡m然在飼料中氨基酸總量一致，但由于對蝦對原料中結(jié)合態(tài)的氨基酸和晶體氨基酸的消化率和利用率存在差異，導(dǎo)致不同組合間賴氨酸表觀消化率的不同，這可能也是蛋氨酸、蘇氨酸等必需氨基酸表觀消化率降低的原因之一。

3.5 花生粕替代魚粉對凡納濱對蝦血清生化指標的影響

本試驗結(jié)果表明，隨著花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的增加，血清總蛋白、葡萄糖、總膽固醇的含量顯著降低，而甘油三酯含量則隨著飼料中花生粕替代魚粉比例增加而顯著升高。目前，關(guān)于花生粕替代魚粉對血清生化指標的影響在水生動物中已有報道。伍代勇［9］研究表明，用24%花生粕與30%魚粉組合后，凡納濱對蝦血清中總蛋白含量與高魚粉組(魚粉含量為46%)無顯著差異，并提出其原因可能與基礎(chǔ)飼料中含有較高比例(30%)的魚粉有關(guān)，在含30%魚粉基礎(chǔ)飼料中對蝦的生理狀態(tài)較好，足以消除花生粕中抗營養(yǎng)因子對血清總蛋白含量的影響［9］，這與 Dabrowski等［24］得出的虹鱒血清中總蛋白、膽固醇含量與飼料中植物蛋白質(zhì)源的含量無必然聯(lián)系的研究結(jié)果相似。同時，伍代勇［9］研究也表明，在30%魚粉基礎(chǔ)上再添加24%的花生粕，與46%的魚粉組相比，其血清中的酚氧化物酶、超氧化物歧化酶和過氧化氫酶活性均無顯著影響，說明在30%魚粉基礎(chǔ)上添加24%花生粕比魚粉(46%)作為單一蛋白質(zhì)源對凡納濱對蝦肝胰臟的保護更有利［9］。然而，本試驗結(jié)果與伍代勇［9］研究結(jié)果存在差異，但通過比較可知，本試驗對照組魚粉含量為30%，而伍代勇［9］研究中魚粉用量較高，對照組中魚粉含量為46%，遠高于本試驗對照組30%的魚粉含量。周歧存［16］對軍曹魚的研究表明，花生粕替代10%～60%的魚粉蛋白質(zhì)，當替代水平由10%增至30%時，血漿中葡萄糖含量顯著上升，而隨著花生粕替代魚粉水平的進一步增加，其含量反而降低;血清中甘油三酯和總蛋白含量則隨著飼料中花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例的增加而顯著提高。而葉元土等［25］研究表明，分別以35%魚粉、52%花生粕作為唯一蛋白質(zhì)源，飼喂草魚(Ctenopharyngodon idellus)43 d后，魚粉組血紅蛋白含量高于花生粕組，表明花生粕的使用導(dǎo)致草魚出現(xiàn)一定程度的貧血反應(yīng)?？梢?，在不同的水產(chǎn)動物中，花生粕替代魚粉對其血液生化指標的影響差異較大。

4 結(jié)論

①飼料中花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)比例高于10%會使凡納濱對蝦的生長性能和飼料利用率下降，同時還會降低飼料中蛋白質(zhì)、氨基酸和能量的表觀消化率，肝胰臟中蛋白酶和脂肪酶活性以及血清中總蛋白、葡萄糖和甘油三酯含量。

②以生長性能為指標并結(jié)合飼料養(yǎng)分表觀消化率，在粗蛋白質(zhì)含量為40%、魚粉含量為30%的凡納濱對蝦基礎(chǔ)飼料中花生粕替代魚粉蛋白質(zhì)的適宜比例為10%。

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Author，YANG Qihui，associate professor，E-mail:qihuiyang03@163.com

(編輯 菅景穎)

Rep lacement of Fish Meal with Peanut Meal in Diets for W hite Shrim p(Litopenaeus vannameiBoone)

YANG Qihui1，2TAN Beiping1DONG Xiaohui1CHIShuyan1LIU Hongyu1
(1.Laboratory of Aquatic Animal Nutrition and Feed，College of Fisheries，Guangdong Ocean University，Zhanjiang524025，China;2.Institute of Animal Nutrition，Sichuan Agricultural University，Ya’an625014，China)

This experimentwas conducted to study the effects of peanutmeal as a replacement for fish meal in diets on growth performance，body composition，serum biochem ical indices，digestive enzyme activities，and nutrient apparent digestibility of white shrimp(Litopenaeus vannameiBoone).A total of 720 shrimp with an initial body weightof(0.75 ± 0.01)g were random ly divided into 6 groupswith 3 replicates per group and 40 shrimp in each replicate.Six kinds of isonitrogenous and isoenergetic diets were prepared with 0，3.83%，7.65%，11.48%，15.30%and 22.96%peanutmeal to replace 0，10%，20%，30%，40%and 60%of protein derived from fishmeal，respectively.The feeding experiment lasted for 56 days.The results showed as follows:when the replacement level of fish meal protein with peanutmeal was over 10%，weight gain rate，special growth rate and protein efficiency ratio of white shrimp were significantly decreased(P＜0.05);when the replacement levelwas over 40%，feed conversion ratio was significantly increased(P＜0.05).The crude protein content of whole body in shrimp was significantly decreased when the replacement levelwas over 40%in the diets(P＜0.05)，while the lipid content of whole body in shrimp was significantly increased when the replacement levelwas over 30%in the diets(P＜0.05).When the replacement level of fishmeal protein with peanutmealwas above 20%in the diets，activities of hepatopancreas protease and lipase were significantly decreased(P＜0.05)，while amylase activity was significantly increased(P＜0.05).Serum total protein and glucose contents were significantly decreased when the replacement levelwas over 10%(P＜0.05)，and serum total cholesterol content was significantly decreased when the replacement level was over 20%(P＜0.05)，while serum triglycerides contentwas significantly increased when the replacement levelwas over 30%(P＜0.05).The apparent digestibilities of dry matter，protein and energy in control diet were significantly higher than those in other diets(P＜0.05).Apparent protein digestibility in groups with 10%and 20%replacement levelswere higher than those in groupswith 40%and 60%replacement levels(P＜0.05).Apparent digestibilities of lysine，leucine，isoleucine，phenylalanine，valine，threonine，tyrosine，serine，glutam ic acid，proline，glycine，alanine and total am ine acids in the control dietwere significantly higher than those in other diets(P＜0.05).Apparent digestibilities ofmethionine，histidine，arginine and aspartate in the control diet and 10%replacement level dietwere significantly higher than those in other diets(P＜0.05)，but there was no significant difference between the control diet and 10%replacement level diet(P＞0.05).However，changes in replacement proportion of peanutmeal and fish meal showed no significant effect on survival rate，phosphorus and ash content of whole body in shrimp and lipid apparent digestibility(P＞0.05).Based on the growth performance and nutrient apparent digestibility，the optimal replacement level of fish meal protein with peanutmeal is10%in the white shrimp basal diet containing 40%crude protein and 30%fish meal.［Chinese Journal of Animal Nutrition，2011，23(10):1733-1744］

white shrimp(Litopenaeus vannameiBoone);fish meal;peanutmeal;replacement level

S963

A

1006-267X(2011)10-1733-12

10.3969/j.issn.1006-267x.2011.10.013

2011－05－09

國家自然科學(xué)基金資助項目(0804282);廣東高校優(yōu)秀青年創(chuàng)新人才培育計劃資助項目(1009324);廣東海洋大學(xué)自然科學(xué)基金資助項目(061218)

楊奇慧(1978—)，女，廣東遂溪人，博士，副教授，碩士生導(dǎo)師，從事水產(chǎn)動物營養(yǎng)與飼料科學(xué)教學(xué)與科研工作。E-mail:qihuiyang03@163.com