華蟾素髂內(nèi)動(dòng)脈注入治療4-氨基雙聯(lián)苯誘發(fā)大鼠膀胱腫瘤的效果觀察

李雪梅

(荊楚理工學(xué)院醫(yī)學(xué)院，湖北 荊門(mén) 448000)

研究表明［1］，華蟾素具有低毒、高效和抗癌譜廣等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)環(huán)磷酰胺(CTX)所致的白細(xì)胞減少有防治作用，可提高機(jī)體免疫力和放化療療效，減輕化療藥物的毒性反應(yīng)。膀胱腫瘤是泌尿外科最常見(jiàn)的腫瘤，化療是治療和預(yù)防腫瘤復(fù)發(fā)的重要手段之一，由于目前所用的化療藥物都有一定的毒性，故尋找一種有效、安全治療膀胱腫瘤的藥物具有重要意義。體外實(shí)驗(yàn)證明［2，3］，華蟾素具有抗膀胱癌細(xì)胞增殖的作用。2010年3月～2011年3月，我們對(duì)用4-氨基雙聯(lián)苯成功誘發(fā)膀胱腫瘤的大鼠模型，經(jīng)髂內(nèi)動(dòng)脈注入華蟾素，觀察其對(duì)大鼠膀胱腫瘤的治療效果。

1 材料與方法

1.1 主要實(shí)驗(yàn)材料及動(dòng)物分組 致癌劑4-氨基雙聯(lián)苯(武漢福德醫(yī)藥化工有限公司)，華蟾素注射液(安徽金蟾生化股份有限公司)。80只SD雌性大鼠(河北醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物中心提供)，6～7周齡，重350～400 g。80只大鼠隨機(jī)分為正常組(正常對(duì)照，30只)和誘癌組(50只)。后者分為A、B組，各25只。

1.2 膀胱腫瘤模型建立及用藥方法 誘癌組采用4-氨基雙聯(lián)苯膀胱灌注法［4，5］建立膀胱腫瘤大鼠模型，其中A組不注入任何藥物，為病理對(duì)照;B組經(jīng)皮穿刺髂內(nèi)動(dòng)脈注入華蟾素0.8 ml/次、每2周1次，總量 3.2 ml/只。

1.3 標(biāo)本采集及觀察指標(biāo) 于末次灌注后第6周處死各組動(dòng)物，使其膀胱處于擴(kuò)張狀態(tài)，完整切除，觀察其大體變化，在病變明顯處5點(diǎn)取材，光鏡觀察。另隨機(jī)選取各組5只大鼠的由髂內(nèi)動(dòng)脈供血的其他臟器如直腸和腎組織，進(jìn)行組織學(xué)檢查。

2 結(jié)果

2.1 各組膀胱大體觀察 正常組大鼠膀胱黏膜呈光滑、有光澤的正常狀態(tài)。誘癌組中的A組膀胱壁可見(jiàn)結(jié)節(jié)狀腫物者5只，米粒樣乳頭狀者7只，菜花狀腫物者13只;B組中膀胱黏膜光滑如正常者5只，黏膜局部可見(jiàn)散在白色斑塊并有點(diǎn)狀出血者8只，黏膜增厚伴有局部隆起者14只。

2.2 各組膀胱鏡下檢查結(jié)果 正常組膀胱黏膜上皮由2～3層移行上皮細(xì)胞組成，細(xì)胞大小一致，扁平，核圓形、淺染，壁層排列正常。誘癌組中，A組膀胱黏膜表面瘤變、不光滑，壞死或有鈣鹽沉著，多乳頭粗短融合，癌細(xì)胞黏膜下浸潤(rùn)，基質(zhì)變性、出血、壞死;B組黏膜上皮細(xì)胞脫落、壞死，肌層和漿膜充血、水腫、壞死，并有急、慢性炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，癌細(xì)胞壞死。

2.3 兩組直腸、腎臟組織學(xué)檢查結(jié)果 兩組直腸和腎組織均無(wú)壞死，呈正常組織狀態(tài)。

3 討論

雖然手術(shù)是目前治療膀胱腫瘤最有效的辦法，但需與化療配合才能預(yù)防腫瘤的復(fù)發(fā)。目前應(yīng)用的化療藥物均有較嚴(yán)重的毒性作用，尤其是對(duì)機(jī)體免疫功能的損害，限制了這些藥物的臨床應(yīng)用。

祖國(guó)醫(yī)學(xué)認(rèn)為華蟾蜍干蟾及華蟾蜍精具有超強(qiáng)抗癌活性、超強(qiáng)抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)的作用，可增強(qiáng)放化療效果，減輕放化療不良反應(yīng)。華蟾素主要抗癌成分為蟾素內(nèi)酯素［6］。實(shí)驗(yàn)證明［7］華蟾素對(duì)癌細(xì)胞DNA和RNA合成有顯著抑制作用，從而抑制癌細(xì)胞生長(zhǎng)和增殖，且有提高機(jī)體免疫功能的作用［8］。華蟾素的抗膀胱腫瘤的作用機(jī)制可能有以下幾點(diǎn)［9，10］:①能抑制腫瘤細(xì)胞增殖，誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞分化凋亡，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞生長(zhǎng);②顯著增強(qiáng)大鼠單核吞噬細(xì)胞的吞噬功能以及體液免疫功能，有效增強(qiáng)繼發(fā)性免疫功能低下小鼠的細(xì)胞免疫功能;③具有免疫調(diào)節(jié)作用。

因采用4-氨基雙聯(lián)苯誘導(dǎo)法建立膀胱腫瘤動(dòng)物模型的方法簡(jiǎn)單、致癌劑用量少、造模時(shí)間短［5］，故本實(shí)驗(yàn)采用該方法建立大鼠模型。本實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，正常組膀胱黏膜正常，誘癌組中A組可見(jiàn)膀胱腫瘤，B組膀胱未見(jiàn)腫瘤生長(zhǎng)，膀胱黏膜上皮細(xì)胞脫落、壞死，肌層和漿膜充血、水腫、壞死，并有炎性細(xì)胞浸潤(rùn)，癌細(xì)胞壞死。可見(jiàn)華蟾素可導(dǎo)致膀胱腫瘤細(xì)胞缺血、缺氧及壞死。因此我們認(rèn)為，華蟾素髂內(nèi)動(dòng)脈灌注對(duì)4-氨基雙聯(lián)苯誘發(fā)的大鼠膀胱腫瘤有明顯的治療作用。另外本實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，髂內(nèi)動(dòng)脈供血的其他臟器如直腸和腎組織學(xué)檢查均無(wú)壞死現(xiàn)象，呈正常狀態(tài)，說(shuō)明華蟾素髂內(nèi)動(dòng)脈灌注對(duì)膀胱以外的正常組織影響極小［11］。

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