中藥靶向治療腫瘤的基礎(chǔ)與臨床研究進展

肖震宇，何少忠，彭衛(wèi)衛(wèi)（江西贛州市人民醫(yī)院腫瘤科，贛州市 341000）

目前，腫瘤的治療有手術(shù)、放化療、介入等多種手段，但死亡率依然居高不下，現(xiàn)已上升為第一位。為此，許多腫瘤領(lǐng)域的專家、學者投入大量精力去研究和尋找治療腫瘤切實有效的方法。中醫(yī)藥作為我國的國粹，對于治療癌癥等疑難病癥有著悠久的歷史，特別是植物來源的藥物及其衍生物，如長春新堿、羥基喜樹堿、紫杉醇、多西紫杉醇等已廣泛應(yīng)用并作為一線用藥。世界腫瘤領(lǐng)域的藥物學家和臨床專家們開始密切關(guān)注我國傳統(tǒng)中醫(yī)藥的發(fā)展，其中抗癌中藥靶向給藥系統(tǒng)和中藥靶向治療的研究受到了極大關(guān)注。本文就近年來中藥制劑和中藥活性成分靶向治療腫瘤的基礎(chǔ)與臨床研究作一綜述。

1 中藥靶向制劑為靶向治療的發(fā)展奠定了基礎(chǔ)

抗癌中藥靶向制劑的研究具有極大的創(chuàng)新性，大大改革了傳統(tǒng)的中藥制劑工藝和劑型。與此同時，中藥與化療、生物靶向制劑聯(lián)合應(yīng)用，更進一步加大了化療藥物、生物靶向藥物在靶器官的藥物濃度，使其靶向性更強，同時也起到了增敏增效的作用。梁軍等[1]制備了單克隆抗體3A5-復(fù)方中藥安迪無菌粉末偶聯(lián)物（3A5-Andi），經(jīng)小鼠抗腫瘤實驗表明，其具有一定的腫瘤導(dǎo)向治療作用。張愛國等[2]采用溶劑揮發(fā)法制備去甲斑蝥素（NC）靶向性微球，并進行了小鼠體內(nèi)分布試驗。結(jié)果顯示，小鼠肺內(nèi)藥物濃度明顯高于其它組織臟器，NC的肺內(nèi)相對分布由8.10%提高到32.51%，其半衰期也延長了4倍，等等。盡管上述研究成果取得了突破性進展，但由于抗癌中藥成分復(fù)雜，中藥靶向制劑的原料藥現(xiàn)多采用從中藥中提取的單體或總成分，其藥物活性成分或有效成分難以精準確定，存在著制定中藥質(zhì)量控制標準難度較大以及制劑學、體內(nèi)藥動學不易研究等問題。但隨著生物藥劑學、藥動學、體內(nèi)藥效學研究和制藥工藝技術(shù)的不斷提高，中藥靶向制劑必將在未來腫瘤治療上發(fā)揮出巨大作用。

2 中藥靶向治療腫瘤的基礎(chǔ)研究進展

中藥靶向治療腫瘤是近年來興起的臨床腫瘤治療新方法，目前已受到腫瘤領(lǐng)域?qū)＜覀兊拿芮嘘P(guān)注。特別是三氧化二砷（As2O3）制劑的研發(fā)與臨床應(yīng)用，翻開了中藥抗腫瘤靶向治療領(lǐng)域發(fā)展的新篇章。中藥的靶向作用按照作用機制和靶點不同可以分為：抑制腫瘤新血管生成、抑制腫瘤細胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡等。

2.1 抑制腫瘤新血管生成藥物

抑制腫瘤血管生成是控制腫瘤生長和轉(zhuǎn)移的重要途徑之一。以抑制腫瘤新血管生成的相關(guān)因子為靶點的新血管生成抑制劑研究已成為當前基礎(chǔ)和臨床研究的熱點。近年來，大量的臨床和基礎(chǔ)試驗研究顯示，許多中藥及其有效成分、復(fù)方制劑都具有抗腫瘤轉(zhuǎn)移和抗血管生成的作用。

2.1.1 人參皂苷-Rg3人參皂苷-Rg3是存在于人參中的四環(huán)三萜皂苷。Shinkai K等[3]將多種腫瘤細胞（小鼠腹水肝癌細胞MM-1、人小細胞肺癌OC-10和人胰腺癌細胞PSN-1等）接種在單層腸系膜細胞上，發(fā)現(xiàn)人參皂苷20（R）-Rg3異構(gòu)體能不同程度地抑制這些腫瘤細胞對單層膜的浸潤作用，尤其是對MM-1細胞浸潤作用的抑制率可達98.8%，并呈劑量相關(guān)性。王兵等[4]將不同濃度的人參皂苷-Rg3液加入到胃癌細胞條件培養(yǎng)液下血管內(nèi)皮細胞（VEC）培養(yǎng)板中24 h后觀察到，Rg3濃度為0.125～0.5 mmol·mL-1時，對胃癌MKN-45細胞條件培養(yǎng)液誘導(dǎo)的VEC增殖有誘導(dǎo)調(diào)亡作用（P＜0.01），抑制率為13.10%～77.38%。高勇等[5]采用雞胚絨毛尿囊膜（CAM）方法和Lewis肺癌模型開展了人參皂苷-Rg3影響腫瘤新生血管的生成和對腫瘤細胞生長抑制的研究。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，人參皂苷-Rg3在明顯抑制Lewis肺癌瘤體生長的同時，對腫瘤誘導(dǎo)新生血管的形成同樣有明顯的抑制作用。

2.1.2 參麥注射液 尹麗慧等[6]采用MTT法檢測參麥注射液對牛血清促進的牛內(nèi)皮細胞、人肝癌細胞SMMC-772增殖的影響；用瓊脂糖刮除法檢測參麥注射液對牛血清促進細胞遷移的影響；利用CAM模型觀察參麥注射液對CAM血管生成的影響。結(jié)果顯示，參麥注射液能明顯抑制牛內(nèi)皮細胞的增殖和遷移，并可抑制CAM的血管生成。180 μL·mL-1的參麥注射液對SMMC-7721的抑制率只有31%，而對內(nèi)皮細胞的抑制率可高達82%。由此可見，參麥注射液對內(nèi)皮細胞具有選擇性抑制作用，是一種特異性內(nèi)皮細胞生長抑制劑。

2.1.3 鱉甲與蟾蜍 陳達理等[7]通過實驗發(fā)現(xiàn)，鱉甲煎丸可以顯著降低荷瘤小鼠腫瘤的微血管計數(shù)，這說明鱉甲煎丸可通過抑制荷瘤小鼠腫瘤的血管生成來達到抑瘤作用。Lee DY[8]用原代培養(yǎng)的牛主動脈內(nèi)皮細胞在溶膠原蛋白三維培養(yǎng)基中生成的毛細血管樣網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)為模型，觀察蟾蜍靈對血管生成的影響。結(jié)果，小劑量蟾蜍靈即可顯著抑制毛細血管生成，VEC阻滯與G2/M期，細胞增殖受到抑制。

2.1.4 其他 目前，已經(jīng)研究并報道的具有抑制腫瘤新血管生成的中藥和有效成分及其制劑有：康萊特注射液、川芎嗪注射液、固本消瘤膠囊、髓清丸、復(fù)方血瘤散、半枝蓮、鯊魚軟骨、莪術(shù)、郁金、海參、白及、白藜蘆醇、半邊旗二萜類、蟾蜍靈、姜黃素、青蒿琥酯、雷公藤紅素、昆布硫酸多糖、熊果酸、苦參堿、槲皮素、云芝多糖、綠茶提取物茶多酚等。

2.2 抑制腫瘤細胞增殖和誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡藥物

人體正常細胞的內(nèi)外環(huán)境在受到物理或化學等因素影響后，細胞微環(huán)境發(fā)生了改變，最終會造成人體局部組織細胞惡性增殖，凋亡減少，最終形成腫瘤，而細胞的增殖是受到細胞分裂周期監(jiān)控點和各種酶類或蛋白來調(diào)節(jié)的。因此，影響腫瘤細胞增殖的各種酶類、受體或各類細胞因子、受體成為了腫瘤靶向治療藥物的靶點。目前研究涉及到的因子主要有：表皮生長因子（VEGF）及受體、黏著斑激酶（FAK）、凋亡抑制蛋白（IAP）如 Survivin、內(nèi)皮祖細胞（EPCs）、腫瘤生長因子（TGF-β）、凋亡執(zhí)行因子Caspase、Fas、Bax、堿性成纖維細胞生長因子（bFGF）、Her-2、NF-κB等。

2.2.1 三氧化二砷（AS2O3）制劑 Bazarbachi A等[9]研究報道，As2O3和IFN-α具有明顯的協(xié)同效應(yīng)，可抑制HTLV-1轉(zhuǎn)化的APL細胞的生長，導(dǎo)致細胞G1期停滯，并誘導(dǎo)細胞凋亡。最新的基因芯片檢測發(fā)現(xiàn)，兩者聯(lián)合作用能夠降低HTLV-1、Tax蛋白的表達和逆轉(zhuǎn)Tax誘導(dǎo)的NF-κB的持續(xù)激活。王曉春等[10]選用結(jié)腸癌SW620細胞系，運用FCM檢測As2O3對結(jié)腸癌的抑制和誘導(dǎo)凋亡作用；用逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）方法檢測MRP-mRNA的表達。結(jié)果，As2O3能下調(diào)MRP-mRNA表達，對結(jié)腸癌SW620細胞具有抑制生長作用以及增加凋亡誘導(dǎo)率，不同濃度的As2O3均可誘導(dǎo)其凋亡。唐印華等[11]利用皮下種植肝癌小鼠模型，觀察小鼠在超聲引導(dǎo)下瘤體內(nèi)注射As2O3溶液（2.5 mg·kg-1）后腫瘤體積變化與抑瘤率。結(jié)果，As2O3能縮小腫瘤體積、增加抑瘤率，并能降低VEGF和COX-2的表達。劉連新等[12]在探討As2O3對肝癌細胞系BEL-7402的影響及其作用機制時發(fā)現(xiàn)，As2O3可以明顯增加肝癌細胞系半胱氨酸蛋白酶-3（Caspase-3）蛋白活性，誘導(dǎo)肝癌細胞凋亡，凋亡的可能機制是通過Caspase-3起作用。徐丹等[13]在探討As2O3和順鉑（DDP）對人大腸癌細胞株CCL-187端粒酶活性及細胞凋亡的影響的研究中發(fā)現(xiàn)，1.0μmol·L-1As2O3對人大腸癌CCL-187細胞有促進分化的作用，0.2μmol·L-1DDP和合用組有誘導(dǎo)凋亡的作用。其機制可能是下調(diào)細胞端粒酶hTERT-mRNA的基因表達，從而抑制端粒酶的活性。胡云等[14]在卵巢癌細胞系A(chǔ)2780中研究發(fā)現(xiàn)，經(jīng)As2O3處理后，Bax表達增強，Bcl-2表達下調(diào)，使Bcl-2/Bax比值減少。結(jié)果表明，調(diào)節(jié)Bcl-2、Bax二者相對含量的變化是As2O3誘導(dǎo)A2780細胞凋亡的分子機制之一。張俊文等[15]運用MTT法觀察As2O3對人胃癌細胞系SGC-7901細胞黏附能力的影響，免疫細胞化學法觀察As2O3對SGC-7901細胞轉(zhuǎn)化生長因子-β1的影響等。結(jié)果，As2O3能降低細胞轉(zhuǎn)化生長因子-β1的表達，表明As2O3能有效抑制胃癌侵襲轉(zhuǎn)移和血管形成。

2.2.2 華蟾素注射液 盛秀勝等[16]報道，華蟾素作用K562細胞后，K562細胞Caspase-3表達增高并發(fā)生凋亡，且呈量效關(guān)系。由此推測，華蟾素有可能是通過影響Caspase-3的表達而誘導(dǎo)白血病細胞發(fā)生凋亡。韓仲等[17]通過SP免疫組化技術(shù)對喉癌Hep-2細胞檢測p53、c-myc和Bcl-2基因蛋白的表達。結(jié)果發(fā)現(xiàn)，華蟾素能使抑癌基因p53蛋白表達增加，c-myc和Bcl-2表達明顯下降。

2.2.3 去甲斑蝥素制劑 安巍巍等[18]研究表明，去甲斑蝥素誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡與半胱氨酸天冬氨酸酶家族和Bcl-2家族的激活、絲裂原激活的蛋白激酶（MAPK）和線粒體途徑的參與有關(guān)。

2.2.4 其他 已經(jīng)研究并報道的具有抑制腫瘤細胞增殖、誘導(dǎo)腫瘤細胞凋亡的中藥制劑以及有效成分有：鴉膽子油乳、欖香烯乳、莪術(shù)油、益氣解毒片、肺巖寧肺、肺一丸、苦參堿、葫蘆素、秋水仙堿以及白花蛇舌草、白及、人參、斑蝥、蟾酥、紅豆杉、刺五加、黃芪等提取物。

3 中藥靶向治療腫瘤的臨床研究

中藥靶向治療腫瘤的臨床研究目前還處于起步階段。目前臨床應(yīng)用的中藥制劑大多是復(fù)合藥物或復(fù)合成分，藥物體內(nèi)代謝、藥效學以及制劑研究困難，質(zhì)量難以控制，由此造成中藥制劑的腫瘤靶向治療作用很難評價。筆者建議，中藥制劑應(yīng)納入聯(lián)合治療方案中，發(fā)揮其腫瘤靶向治療的協(xié)同作用，同時可以降低靶向、化療藥物的毒副反應(yīng)。

3.1 As2O3注射液

林英城等[19]針對鼻咽癌開展了放療與As2O3注射液聯(lián)合治療方案的臨床研究。結(jié)果顯示，放射治療20 Gy后，全組鼻咽原發(fā)腫瘤組織Ang-1和Ang-2蛋白表達明顯下調(diào)，但僅As2O3增敏組Ang-1和Ang-2下調(diào)差異有統(tǒng)計學意義。由此推斷，As2O3通過干擾腫瘤Ang-1和Ang-2表達的失衡，從而達到干擾腫瘤性血管的有效生成，抑制腫瘤的生長。

3.2 康萊特注射液（KLT）

王越華等[20]對46例未能完全切除腫瘤的晚期結(jié)、直腸癌患者進行隨機分組，對照組：化療用OFL方案；治療組：在同對照組的化療基礎(chǔ)上，加用KLT。結(jié)果顯示：對照組化療后血漿TNF-α和 IL-lβ含量與治療組比較，明顯升高（P＜0.05），治療結(jié)束后與治療組比較，升高愈加明顯（P＜0.01）。

4 總結(jié)

上世紀末至本世紀初，腫瘤分子靶向治療領(lǐng)域發(fā)展較快，已成為腫瘤臨床繼手術(shù)、放化療后的另一個亮點。近年來，抗腫瘤藥物市場誕生了許多新的腫瘤靶向治療藥物，如格列衛(wèi)（甲磺酸伊馬替尼）、易瑞沙（吉非替尼）、恩度（重組人血管內(nèi)皮抑制素）等。不可回避的現(xiàn)實是，目前分子靶向藥物治療效果與人們的期待尚有距離，原因之一是多數(shù)實體腫瘤的發(fā)生與生長都是受多靶點、多環(huán)節(jié)的調(diào)控。阻斷一個受體就認為能阻斷任何信息傳導(dǎo)是不現(xiàn)實的。因此，近期藥物研發(fā)熱點由單一作用靶點藥物向多靶點作用藥物轉(zhuǎn)換。中藥具有多組分、多靶點、副作用小、抑制腫瘤新血管生成、抑制腫瘤細胞增殖及誘導(dǎo)其調(diào)亡、降低放化療毒副反應(yīng)、提高機體免疫力和生活質(zhì)量等諸多優(yōu)點，未來必將在腫瘤臨床治療領(lǐng)域發(fā)揮不可替代的作用。

[1]粱 軍，孫紀元，謝艷華，等.單克隆抗體3A5——復(fù)方中藥安迪偶聯(lián)物的肝癌導(dǎo)向治療[J].世界華人消化雜志，2003，11（4）：404.

[2]張愛國，楊軍巨.去甲斑蝥靶向性微球的制備及其小鼠體內(nèi)分布[J].山東醫(yī)藥工業(yè)，2000，19（3）：10.

[3]Shinkai K，Akcedo H，Mukai M，et al.Inhibition of in vitro cell invasion by ginsenoside Rg3[J].Jpn J Cancer Res，1996，87（4）：357.

[4]王 兵，王杰軍，徐 均，等.人參皂苷-Rg3對胃癌誘導(dǎo)血管內(nèi)皮細胞增殖的抑制作用[J].腫瘤防治雜志，2001，8（3）：234.

[5]高 勇，王杰軍，許 杏，等.人參皂甙抑制腫瘤新血管形成機制研究[J].腫瘤防治研究，2001，28（3）：179.

[6]尹麗慧，丁保山.參麥注射液對血管生成的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2002，10（2）：761.

[7]陳達理，張緒慧.鱉甲煎丸抗腫瘤血管生成的實驗研究[J].浙江中醫(yī)雜志，2004，12（12）：535.

[8]Lee DY，Yasuda M，Yamamoto T，et al.Bufalin inhibits endothelial cell proliferation and angiogenesis vitro[J].Life Sei，1997；60（2）：127.

[9]Bazarbachi A，EI-Sabban ME，Nasr R，et al.Arsenic trioxide and interferon-alpha synergize to induce cell cycle arrest and apoptosis in human T-cell lymphotropic virus type I-transformed cells[J].Blood，1999，93：278.

[10]王曉春，王志華，博挽瀾.三氧化二砷對結(jié)腸癌凋亡及耐藥基因表達影響的研究[J].哈爾濱醫(yī)科大學學報，2009，43（4）：362.

[11]唐印華，尚國印，梁 陶.三氧化二砷對鼠肝癌VEGF及COX-2表達影響的研究[J].哈爾濱醫(yī)科大學學報，2009，43（5）：435.

[12]劉連新，朱安龍，陳 煒.三氧化二砷對原發(fā)性肝癌的作用及其機理研究[J].中華外科雜志，2005，43（l）：33.

[13]徐 丹，楊幼林，徐洪宇，等.三氧化二砷和順鉑對大腸癌細胞端粒酶活性及細胞凋亡的影響[J].中國現(xiàn)代醫(yī)學雜志，2008，18（12）：1633.

[14]胡 云，翟 玲.三氧化二砷誘導(dǎo)卵巢癌細胞凋亡的研究[J].中國優(yōu)生與遺傳雜志，2006，14（9）：30.

[15]張俊文，王怌龍.三氧化二砷對胃癌細胞侵襲轉(zhuǎn)移和血管生成的抑制作用[J].實用腫瘤雜志，2004，19（5）：409.

[16]盛秀勝，徐玲娟.華蟾素誘導(dǎo)人白血病細胞k-562凋亡及對Caspase-3表達的影響[J].實用腫瘤雜志，2007，22（1）：32.

[17]韓 仲，蘇紅星，黃晉生，等.華蟾素對喉癌細胞生長及癌基因表達的影響[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2001，21（特集）：126.

[18]安巍巍，薛 蓮，王敏偉，等.去甲斑蝥素誘導(dǎo)小鼠肺纖維瘤 L929細胞凋亡[J].中國癌癥雜志，2005，15（1）：22.

[19]林英城，李德銳，林 雯，等.三氧化二砷對鼻咽癌放療增敏作用及其機制的研究[J].中華腫瘤防治雜志，2008，15（8）：591.

[20]王越華，李兆元，龔先奇.康萊特注射液聯(lián)合化療治療晚期結(jié)直腸癌[J].腫瘤，2006，26（12）：1135.