海木的化學(xué)成分研究

盧海嘯， 李家洲， 陸新萍， 陳 媛， 陳 曉

（玉林師范學(xué)院，廣西玉林， 537000）

海木的化學(xué)成分研究

盧海嘯， 李家洲*， 陸新萍， 陳 媛， 陳 曉

（玉林師范學(xué)院，廣西玉林， 537000）

目的 對(duì)產(chǎn)自廣西桂林市永福縣的海木的化學(xué)成分進(jìn)行研究。方法 海木樹皮用95%乙醇回流提取，提取液經(jīng)減壓濃縮得到浸膏，浸膏石油醚部分應(yīng)用硅膠柱色譜方法分離得到化合物Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ；浸膏三氯甲烷部分應(yīng)用硅膠柱色譜和sephadex LH-20分離得到化合物Ⅴ、Ⅵ、Ⅶ、Ⅷ、Ⅸ，浸膏正丁醇部分應(yīng)用硅膠柱色譜方法分離得到化合物Ⅹ，并根據(jù)其理化性質(zhì)和波譜分析來解析這些化合物的結(jié)構(gòu)。結(jié)果 從海木的莖皮中分離得到7個(gè)甾體化合物：3β-羥基豆甾-5-烯-7-酮 （I），膽甾-5，22-二烯-3β-醇（II），β-谷甾醇（Ⅲ），α-菠甾醇（Ⅳ），豆甾醇（Ⅵ），胡蘿卜苷（Ⅸ），豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷（Ⅹ）。3個(gè)其他化合物，棕櫚酸（Ⅴ），二十七烷醇（Ⅶ），二十九烷醇（Ⅷ）。結(jié)論 化合物Ⅰ、II、Ⅳ、Ⅹ為首次從該植物中分離得到。

海木；化學(xué)成分；甾體化合物

海木Trichilia connaroides為楝科 Meliaceae植物，別名老虎楝、鷓鴣花［1］，是具有一定毒性的藥用植物，全年可采［2］，有清熱解毒，祛風(fēng)濕腰腿痛，祛心、胃氣痛等功效［3］。海木三氯甲烷提取物對(duì)通過化學(xué)處理、熱處理和甲醛誘導(dǎo)處理的昆明小鼠和Wistar大鼠建立的炎癥模型，表現(xiàn)出顯著的依賴性止痛作用和抗炎活性［4］；對(duì)菜青蟲的幼蟲表現(xiàn)出明顯的拒食活性，同時(shí)還能抑制菜青蟲的乙酰膽堿酯酶活性，提高蛋白水解酶活性，降低蟲體內(nèi)蛋白質(zhì)含有量的作用［5］。在化學(xué)成分研究方面，目前已從海木根、果皮中分離出4個(gè)結(jié)構(gòu)類似于印楝素的四降三萜類成分（海木素A，海木素B，海木素B乙酸鹽和 2-羥基-3-O-裼袼酰-6-O-乙酰基桃心花木 內(nèi)酯）［6-7］以及一個(gè)新排列的碳骨架的四降三萜（海木素 C）和一個(gè)新孕甾烷（3β，4α-二羥基孕烷-16-醇）［3］。

1 儀器、試劑與材料

WGH-30A 雙光束紅外分光光度計(jì)（天津市港東科技發(fā)展有限公司，KBr壓片法）；WRS-1B數(shù)字熔點(diǎn)儀（上海精密科學(xué)儀器有限公司，溫度計(jì)未校正）；核磁共振譜、質(zhì)譜由廣西師范大學(xué)化學(xué)化工學(xué)院代測；柱色譜用硅膠H（200～300目）（青島海洋化工廠）；薄層層析硅膠H（青島海洋化工廠）；Sephadex LH-20（Pharmacia）；其它試劑均為分析純，由廣東汕頭西隴化工有限公司提供。

海木樹皮采自廣西桂林市永福縣。原植物經(jīng)廣西植物研究所劉演研究員鑒定，為楝科鷓鴣花屬植物海木Trichilia connaroides。標(biāo)本存于廣西植物研究所標(biāo)本館。

2 提取與分離

海木干燥樹皮粗粉6 kg，用95%乙醇回流提取3次，減壓回收溶劑得浸膏600 g。浸膏加水稀釋后依次用石油醚、三氯甲烷、乙酸乙酯、正丁醇萃取，回收溶劑，得相應(yīng)部位的萃取物。

石油醚萃取液減壓濃縮后所得浸膏29 g，經(jīng)硅膠（200～300目）柱層析，用石油醚－乙酸乙酯（30∶1～0∶1）進(jìn)行梯度洗脫，得3個(gè)化合物，分別為化合物Ⅰ（13 mg），化合物Ⅱ（31.1 mg），化合物 Ⅲ（45.6 mg），化合物 Ⅳ﹙194.2 mg ﹚。

三氯甲烷萃取液減壓濃縮后所得浸膏55 g，經(jīng)硅膠常壓、加壓柱層析，結(jié)合溶劑法，重結(jié)晶及Sephadex LH-20等方法，得到4個(gè)化合物，分別為化合物Ⅴ﹙879.7 mg﹚，化合物 Ⅵ﹙150 mg﹚，化合物Ⅶ﹙120.3 mg﹚，化合物 Ⅷ（1.9 mg），化合物 Ⅸ（3 mg）。

取正丁醇萃取物10 g，經(jīng)加壓硅膠柱層析得到化合物Ⅹ（6.2 mg）。

3 結(jié)構(gòu)鑒定

化合物I：無色針晶（石油醚-丙酮），mp 126～127 ℃，分子式 C29H48O2。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：5.67（1H，s，H-6），3.64（1H，m，H-3α），1.18（3H，s），0.91（3H，d，J=6.4 Hz），0.85（3H，d，J=7.2 Hz），0.83（3H，d，J=6.6 Hz），0.79（3H，m），0.66（3H，s）為 6 個(gè)甲基。13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：36.32（C-1），31.12（C-2），70.51（C-3），41.79（C-4），165.07（C-5），126.11（C-6），202.35（C-7），45.39（C-8），49.90（C-9），38.26（C-10），21.20（C-11），38.67（C-12），43.08（C-13），49.90（C-14），26.31（C-15），28.54（C-16），54.67（C-17），11.96（C-18），17.29（C-19），36.06（C-20），18.91（C-21），33.91（C-22），26.04（C-23），45.79（C-24），29.08（C-25），19.79（C-26），19.01（C-27），23.02（C-28），11.96（C-29）。ESI-MSm/z：428。以上數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)值基本一致［8］，確定為 3β-羥基豆甾-5-烯-7-酮。

化合物II：無色針狀晶體（丙酮），濃硫酸-乙醇顯紫紅色，分子式 C27H46O，相對(duì)分子質(zhì)量386。Liebermann-Burchard 反 應(yīng) 陽 性。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：5.36（1H，t，3 Hz，H-6），3.52（1H，m，H-3），0.68（3H，s，18-Me），0.86（6H，d，6.5 Hz，26，27-Me），0.92（3H，d，J=6.4，21-Me），1.00（3H，s，19-Me）。13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：37.27（C-1），31.68（C-2），71.81（C-3），42.32（C-4），140.76（C-5），121.71（C-6），31.92（C-7），31.92（C-8），50.16（C-9），36.51（C-10），21.10（C-11），39.80（C-12），42.32（C-13），56.79（C-14），24.29（C-15），28.01（C-16），56.18（C-17），11.86（C-18），19.39（C-19），36.79（C-20），18.72（C-21），137.77（C-22），128.81（C-23），39.53（C-24），28.01（C-25），22.55（C-26），22.81（C-27）。經(jīng)文獻(xiàn)［9］對(duì)照，數(shù)據(jù)基本一致，僅在C-22位為雙鍵，故鑒定該化合物為膽甾-5，22-二烯-3β-醇。

化合物III：白色針狀結(jié)晶（石油醚）。mp137～139℃。薄層色譜硫酸乙醇顯色呈紫紅色。Liebermann-Burchard反應(yīng)顯紫紅色。TLC的Rf值在3種不同的展開劑條件下與β-谷甾醇對(duì)照品一致，與對(duì)照品混合后熔點(diǎn)不下降，故鑒定該化合物為β-谷甾醇。

化合物IV：白色片狀結(jié)晶（甲醇），易溶于氯仿、甲醇。10% 硫酸噴霧顯紫紅色，Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性。13C-NMR譜顯示29個(gè)碳信號(hào)，且1H-NMR譜中氫質(zhì)子在高場處疊在一起，提示該化合物為一個(gè)甾體類化合物，分子中有兩個(gè)雙鍵，其碳信號(hào)分別出現(xiàn)在 δ：139.6，138.3，129.3，117.4處，δ 71.2 為羥基取代碳信號(hào)峰。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：5.02（1H，dd，J=15.6，8.4 Hz，H-22），5.14（1H，dd，J=15.6，8.4 Hz，H-3），5.16（1H，tlike，H-7），3.60（1H，m，H-3），1.55（3H，s，18-CH3），1.03（3H，d，J=6.4 Hz，21-CH3），0.85（3H，d，J=6.4 Hz，27-CH3），0.82（3H，d，J=6.4 Hz，26-CH3），0.80（3H，m，29-CH3），0.55（3H，s，19-CH3）；13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：37.1（C-1），31.5（C-2），71.2（C-3），38.0（C-4），40.2（C-5），29.6（C-6），117.4（C-7），139.6（C-8），49.4（C-9），34.2（C-10），21.1（C-11），39.4（C-12），43.3（C-13），55.1（C-14），23.0（C-15），28.5（C-16），56.0（C-17），12.0（C-18），13.0（C-19），40.8（C-20），21.5（C-21），138.3（C-22），129.3（C-23），51.2（C-24），31.9（C-25），21.3（C-26），19.0（C-27），25.4（C-28），12.2（C-29）。與文獻(xiàn)［10］對(duì)照，其光譜數(shù)據(jù)與α-菠甾醇一致，故確定該化合物為α-菠甾醇。

化合物V：白色塊狀結(jié)晶（乙酸乙酯）。mp 52～53℃。ESI-MS顯示相對(duì)分子質(zhì)量為 256。1HNMR（CDCl3，500 MHz）δ：2.37（1H，t，J=10 Hz，H-2），1.67（2H，m，H-15），1.28（24H，br.s，（CH2）12），0.9（3H，5，J=7.2Hz，H-16）；13C-NMR（CDCl3，100 MHz）δ：177.6（C-1），33.6（C-2），31.9（C-14），29.4-29.0（10C-，C4-C13），24.7（C-3），22.7（C-15），14.1（C-16）。以上光譜數(shù)據(jù)與文獻(xiàn)［11］對(duì)照一致，確定該化合物為棕櫚酸。

化合物VI：白色針狀結(jié)晶（甲醇）。mp 167.4～169℃。Liebermann-Burchard反應(yīng)陽性（顯紫紅色）。TLC的Rf值在3種不同的展開劑條件下與豆甾醇對(duì)照品一致，與對(duì)照品混合后熔點(diǎn)不下降，故鑒定該化合物為豆甾醇。

化合物 VII：白色粉末（石油醚-丙酮）。mp 62.5～64.3℃。ESI-MS 顯 示 相 對(duì) 分 子 質(zhì) 量 為396。1H-NMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.90（3H，t，J=6.7 Hz，-CH2-CH3），1.28（48H，br.s，（CH2）24），3.66（2H，-CH2-CH2-OH）；羥基峰未出現(xiàn).可能為溶劑中殘留重水，發(fā)生活潑氫交換所致；因其為長鏈飽和脂肪醇，分子式為CH2n+2O，得n=27，又只有一個(gè)-CH3，確定該化合物為二十七烷醇。

化合物VIII：白色粉末（石油醚-丙酮）。mp 75～76℃。ESI-MS顯示相對(duì)分子質(zhì)量為 424。1HNMR（CDCl3，500 MHz）δ：0.90（3H，t，J=6.59 Hz，-CH2-CH3），3.66（2H，-CH2-CH2-OH），1.28（52H，br.s，（CH2）26）；羥基峰未出現(xiàn)，可能為溶劑中殘留重水，發(fā)生活潑氫交換所致；因其為長鏈飽和脂肪醇，分子式為CH2n+2O，得n=29，又只有一個(gè)-CH3，確定該化合物為二十九烷醇。

化合物IX：白色粉末（甲醇），與胡蘿卜苷對(duì)照品進(jìn)行TLC對(duì)照，在3種溶劑系統(tǒng)中展開，Rf值一致，且混合熔點(diǎn)不下降，故確定該化合物IX為胡蘿卜苷。

化合物X：白色塊狀結(jié)晶，10%濃硫酸顯紫紅色，Liebermann-Burchard反應(yīng)呈陽性。EI-MSm/z：396（［M-glu+2H］+），394（［M-glu］+），382，255，213，145 ，81 。結(jié)合13C-NMR 數(shù)據(jù)分析可知其分子式為C35H58O6。1H-NMR（C5D5N，500 MHz）數(shù)據(jù)和13C-NMR（C5D5N，100 MHz）數(shù)據(jù)與豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷數(shù)據(jù)一致［12］，因此確定該化合物為豆甾醇-3-O-β-D-葡萄糖苷。

［1］中國科學(xué)植物研究所.中國高等植物圖鑒：第二冊［M］.北京：科學(xué)出版社，2002：572.

［2］陳冀勝，鄭 碩.中國有毒植物［M］.北京：科學(xué)出版社，1987：402.

［3］Zhang H P，Wu S H，Shen Y M，et al.A pentanortriterpenoid with a novel carbon skeleton and a new pregnane fromTrichilia connaroides［J］.Can J Chem，2003，81：253-257.

［4］Ashok P，Prasanna G S，Mathuram V，et al.Analgesic and antiinflammatory activity of the chloroform extract ofTrichilia connaroides（W.＆ A.）Bentilizen［J］.Indian J Pharm Sci，2006，68（2）：231-233.

［5］李典鵬，劉金磊，陳海珊，等.海木提取物對(duì)菜青蟲幼蟲的生物活性［J］.廣西植物，2007，27（3）：453-456.

［6］Purushothaman K K，Venkatanarasimhan M，Sarada A，et al.Trijugins A and B，tetranortriterpenoids with a novel rearranged carbon skeleton fromHeynea trijuga（Meliaceae）［J］.Can J Chem，1987，65：35-37.

［7］Inada A，Konishi M，Murata H，et al.Structures of new limonoids and a new triterpenoid derivative from pericarps of Trichilia connaroides［J］.J Nat Prod，1994，57（10）：1446-1449.

［8］張樹祥，蔡少青，趙玉英.長莖金耳環(huán)化學(xué)成分的研究（1）［J］.中國中藥雜志，2001，26（11）：762-763.

［9］黃建設(shè)，李慶欣，吳 軍，等.粗吻海龍化學(xué)成分的研究［J］.中草藥，2004，35（5）：485-487.

［10］馮衛(wèi)生，王彥志，鄭曉珂.中藥化學(xué)成分結(jié)構(gòu)解析［M］.北京：科學(xué)出版社，2008，431.

［11］烏莉婭·沙依提，陳 妍，耿 萍，等.維藥芹菜根化學(xué)成分的研究［J］.中藥材，2007，30（1）：1535-1536.

［12］呂金良，熱比古麗·斯拉木，埃吉艾克拜爾·艾薩，等.芹菜籽黃酮類化學(xué)成分研究［J］.中成藥，2007，29（23）：406-408.

Chemical constituents of Trichilia connaroides

LU Hai-xiao， LI Jia-zhou*， LU Xin-ping， CHEN Yuan， CHEN Xiao
（Yulin Normal College，Yulin 53700，China）

AIMTo study the chemical constituents ofTrichilia connaroides.METHODS Bark ofTrichilia connaroidswas extracted with 95%ethanol for reflux，and the extracts were evaporated.The compoundsⅠ，Ⅱ，Ⅲ，Ⅳ，Ⅹ were isolated by silica gel chromatography from petrol ether part of extracts，and the compoundsⅤ，Ⅵ，Ⅶ，Ⅷ，Ⅸwere isolated by silica gel and Sephadex LH-20 column chromatography from chloroform part of extracts，and the compound Ⅹ was isolated by silica gel chromatography from methanol part of extracts.Their structures were identified on the basis of physico-chemical characters and spectroscopic analysis.RESULTSSeven steroidal compounds were obtained fromTrichilia connaroides3β-hydroxystigmast-5-en-7-one（I），cholest-5，22-dien-3β-ol（II），β-sitosterol（III），α-spinasterol（IV），stigmasterol（Ⅵ），daucossterol（Ⅸ），stigmasterol-3-O-β-D-glucopyranoside（Ⅹ）.Three other compounds were obtained palmitic acid（Ⅴ），n-heptacosyl alcohol（Ⅶ），nonacosanol（Ⅷ）.CONCLUSIONCompoundsⅠ、II、Ⅳ、Ⅹ are isolated from this plant for the first time.

Trichilia connaroides；chemical constituents；steroidal compounds

R284.1

A

1001-1528（2011）07-1194-03

2010-07-06

廣西教育廳科研項(xiàng)目面上項(xiàng)目（200810MS126）

盧海嘯（1974—），男，講師，博士，主要從事中藥與天然藥物活性成分及結(jié)構(gòu)修飾的研究工作。Tel：18922410480，E-mail：luhaixiao76@163.com。

*通信作者：李家洲（1958—），男，副教授，主要從事藥理學(xué)和生理學(xué)的教學(xué)和研究工作。Tel：13907750778，E-mail：ljz5810@163.com。