血管緊張素Ⅱ通過壓力反射重調(diào)定對大鼠心率的作用

李亙松，羅 丹，李 森，鄧 欣，王 洋

(中國醫(yī)科大學1.基礎(chǔ)醫(yī)學院生理學教研室、2.機能實驗中心，3.附屬第一臨床醫(yī)院神經(jīng)內(nèi)科，遼寧沈陽 110001)

我們以前對家兔的研究觀察到了靜脈輸注AngⅡ?qū)π穆首儺?HRV)的影響，但其具體機制并不清楚，我們推測循環(huán)血中的AngⅡ可能是通過其使壓力反射發(fā)生重調(diào)定作用來影響HRV的［1－3］。本研究用苯腎上腺素(PE)產(chǎn)生升壓作用所引起的反射性心率降低，檢測壓力反射的功能，并通過AT1受體阻斷劑氯沙坦(LOS)來消除AngⅡ?qū)毫Ψ瓷涞挠绊?，分析AngⅡ?qū)Υ笫笮穆首儺惖挠绊憴C制及與壓力反射的重調(diào)定作用和AT1受體的關(guān)系。

1 材料與方法

1.1 動物 普通♂Wistar大鼠，體質(zhì)量300 g，中國醫(yī)科大學實驗動物中心提供。

1.2 實驗過程及分組

1.2.1 動物處理 大鼠給予12 h∶12 h光照－黑暗周期，室溫，單籠飼養(yǎng)，自由進食，數(shù)據(jù)采集在8:00～12:00之間進行。

1.2.2 手術(shù) 用20%的氨基甲酸乙酯(6.5 ml·kg－1，ip)麻醉，仰臥位固定，沿血管走行方向切開皮膚3～4 cm，用止血鉗分離筋膜和肌肉，顯露股動靜脈。

1.2.3 股動、靜脈插管 在外科顯微鏡下，結(jié)扎游離股動脈的遠心端，用眼科剪在靠近結(jié)扎線處剪開股動脈，將動脈插管向心端插入并結(jié)扎和固定動脈與動脈插管，靜脈插管操作同上，溫度37℃。

1.2.4 壓力反射的檢測 靜脈注射PE分4次劑量為4、10、15、20 mg·g－1。間隔2～3 min/次，第4次注射結(jié)束20 min后再進行另一種藥物的注射(PE代謝完全需20 min)。取各劑量血壓變化的峰值與對應的心率值作線性回歸分析，靜脈注射前的HR值代入方程式求得的平均動脈壓(MAP)就是該藥物的壓力反射調(diào)定點。

1.2.5 分組 ①實驗組(n=10)，PE注射結(jié)束后20 min，股靜脈注射5%的葡萄糖(GS)3 ml·kg－120 min，然后股靜脈注射AngⅡ(20 ng·kg－1·min－1)15 min時進行壓力反射的檢測。②AT1受體阻斷組(n=10)作為對照組，PE注射結(jié)束后20 min，股靜脈注射LOS(5 g·g－1)20 min，然后股靜脈輸注AngⅡ(20 μg·g－1)15 min時進行壓力反射的檢測。

1.3 血壓及心電圖(ECG)檢測 股動脈逆血流方向用靜脈留置針與壓力換能器相連，并將壓力換能器接入Powerlab 4/25生物信號采集系統(tǒng)，測量血壓。采樣參數(shù):采樣率，1 kHz/s;范圍，10mV;低通，2 kHz;高通，直流。每首次注射PE前5 min的ECG數(shù)據(jù)，用HRV分析軟件進行數(shù)據(jù)分析。

2 結(jié)果

與手術(shù)后基礎(chǔ)狀態(tài)相比，對照組，壓力反射曲線向右上方移動，其調(diào)定點有升高的趨勢，但差異無顯著性(P＞0.05);壓力反射性心率曲線斜率的變化差異沒有顯著性(P＞0.05)，見Tab 1。然而實驗組(靜脈輸注GS和AngⅡ組)調(diào)定點變化的幅度值明顯大于靜脈輸注LOS和AngⅡ組，結(jié)果差異有統(tǒng)計學意義(11.50±5.12 vs－5.62±6.04，P＜0.05)，見Tab 1。

Tab 1 Baroreflex response to AngⅡor LOS injection(±s，n=10)

Tab 1 Baroreflex response to AngⅡor LOS injection(±s，n=10)

*P＜0.05，AngⅡ(CG)vs AngⅡ(EG).CG:control group;EG:experimental group;△change parameter.

Group Factor mmHg CG△Slope /beats·min－1·mmHg－1△Setpoint/ infusion －0.25±0.13 11.50±5.12 LOS injection －0.03±0.01 －7.37±4.19 AngⅡinfusion －0.08±0.05 －5.62±6.04* EG GS injection －0.54±0.17 －1.98±2.96 AngⅡ

3 討論

我們以前的研究結(jié)果顯示靜脈輸注AngⅡ時，心率變異(HRV)的SDNN(心動周期的標準差)、RMSSD(心動周期差值的均方根)、TP(總功率)和HF(高頻功率譜)較對照組明顯降低，而LF(低頻功率譜)和LF/HF(低頻/高頻)的比值明顯升高，結(jié)果差異有顯著性。同時我們也使用神經(jīng)節(jié)阻斷劑(溴化六烴季胺)阻斷中樞自主神經(jīng)系統(tǒng)活動，證明了AngⅡ是通過中樞機制影響HRV的(資料沒有顯示)。

由于AngⅡ使壓力反射性心率的重調(diào)定作用的中樞作用位點還沒有定論［4－5］，所以本研究使用能夠通過大鼠血腦屏障的LOS來阻斷靜脈輸注AngⅡ?qū)毫Ψ瓷涞挠绊懀^察AngⅡ通過壓力反射的重調(diào)定作用對大鼠心率的調(diào)節(jié)作用。我們的結(jié)果顯示靜脈輸注AngⅡ后，壓力反射的調(diào)定點發(fā)生了重調(diào)定，反映心迷走神經(jīng)緊張性的HRV指標降低，而注射LOS后，MAP-HR曲線幾乎沒有發(fā)生移動，說明阻斷AT1受體后，AngⅡ所致的壓力反射重調(diào)定作用消失，對HRV的影響也消失。因此，AngⅡ在血循環(huán)中對大鼠心率以及心率變異的影響可能是在AT1受體介導下通過對大鼠壓力反射性心率的重調(diào)定作用實現(xiàn)的。

［1］ 任亞麗，徐濟良，虞 玨，等.苯那普利與厄貝沙坦對心衰大鼠心室重構(gòu)過程中AngⅡ受體及ACE2的影響［J］.中國藥理學通報，2008，24(2):1582－6.

［1］ Ren Y L，Xu J L，Yu J，et al.Effects of benazepril and irbesartan on angiotensinⅡreceptor and ACE2 in chronic heart failure rats during cardiac remodeling［J］.Chin Pharmacol Bull，2008，24 (2):1582－6.

［2］ 杜 軍，陳長勛.血管緊張素(1-7)的心血管效應［J］.中國藥理學通報，2007，23(5):572－4.

［2］ Du J，Chen C X.Cardiovascular effects of angiotensin(1-7)［J］.Chin Pharmacol Bull，2007，23(5):572－4.

［3］ 毛張凡，孫宗全，杜心靈.五甲基槲皮素對血管緊張素Ⅱ致大鼠心肌纖維化的作用［J］.中國藥理學通報，2009，25(8): 1103－7.

［3］ Mao Z F，Sun Z Q，Du X L.3，3'，4'，5，7-Pentamethylquercetin reducers cardiac fibrosis in angiotensinⅡ-infused rats［J］.Chin Pharmacol Bull，2005，25(8):1103－7.

［4］ 吳曉東，王 微，周 賀，等.κ阿片受體激動劑U50488H對血管緊張素Ⅱ誘導內(nèi)皮細胞產(chǎn)生白介素-6和白介素-8的影響［J］.中國藥理學通報，2010，26(7):922－5.

［4］ Wu X D，Wang W，Zhou H，et al.Effect of к opioid receptor agonist U50488H on angiotensinⅡ-induced production of interleukin-6 and interleukin-8 from endothelial cells［J］.Chin Pharmacol Bull，2010，26(7):922－5.

［5］ 周紅敏，晉玉章，謝文利，劉艷霞.黃芪苷Ⅳ對血管緊張素Ⅱ誘導新生大鼠心肌細胞肥大的保護作用［J］.中國藥理學通報，2009，25(10):1330－4.

［5］ Zhou H M，Jin Y Z，Xie W L，Liu Y X.Protective effects of astragalosideⅣon hypertrophy induced by angiotensinⅡin primary cultured cardiomyocytes of neonatal rats［J］.Chin Pharmacol Bull，2009，25(10):1330－4.