蘆薈氣霧劑的制備與質(zhì)量控制

區(qū)潔雯，梁頌暉，洪醒華，李嘉順

廣東省佛山市順德區(qū)第一人民醫(yī)院，廣東佛山 528300

蘆薈氣霧劑是我院自行研制的制劑。蘆薈具有殺菌、抑菌、消除炎癥、分解毒素、促進傷口愈合等作用[1-2]，臨床用于小兒疳積、驚風(fēng)，外治濕癬。近年有蘆薈軟膏[3]、蘆薈混合液霧化[4]、蘆薈液含漱等制劑的研制報道。蘆薈成分豐富，其中蘆薈苷是主要抗菌有效成分之一[5]。蘆薈有多個品種，本文選用2010年版《中國藥典》收載的庫拉索蘆薈，以二甲醚為拋射劑，研制了蘆薈氣霧劑，臨床用于扁桃體炎、咽喉發(fā)炎等的治療，并以蘆薈苷為指標，制定質(zhì)量控制標準。現(xiàn)報道如下：

1 儀器與材料

MA200型電子分析天平（上海第二天平儀器廠）；超聲波清洗器（上海申船重工七院七二六所）；ZF-C型三用紫外分析儀（上?？岛坦怆妰x器有限公司）；PE紫外檢測儀（Lamboda Bio 20）；庫拉索蘆薈Aloe vera（水鑫果業(yè)生物資源功能產(chǎn)品廠提供），蘆薈苷對照品（批號：110787-200504，中國藥品生物制品檢定所），蘆薈大黃素對照品（批號：110795-200806，中國藥品生物制品檢定所），藥用二甲醚（由萊雅氣霧劑制罐充填中心提供），蘆薈氣霧劑（本院制劑，批號20080905）。

2 方法與結(jié)果

2.1 蘆薈氣霧劑的制備

2.1.1 蘆薈提取液的制備

取庫拉索蘆薈鮮葉100 g，蒸餾水清洗干凈，攪碎，移至1 000 ml帶塞錐形瓶中，加入4倍量的95%乙醇，超聲提取1 h，暗處放置 48 h，過濾，濾液水浴濃縮至120 ml，過濾，置冷處放置24 h，過濾，得澄清的蘆薈提取液，按《中國藥典》2005年版附錄中蒸餾法第一法測得乙醇含量為54%，蘆薈含量0.83g/ml。

2.1.2 處方的篩選

2.1.2.1 正交試驗的因素水平表 本方為溶液型氣霧劑，乙醇和甘油均為助溶劑，通過單因素試驗，影響氣霧劑質(zhì)量的3個主要因素是乙醇、甘油含量以及二甲醚的加入量。選用L9（34）表進行正交實驗。以穩(wěn)定性、噴射總量為考察指標，采用綜合評分方法，穩(wěn)定性：差（放置1 d內(nèi)有沉淀產(chǎn)生）得0分，較好（放置10 d內(nèi)有沉淀產(chǎn)生）得1分，好（放置20 d內(nèi)沒有沉淀產(chǎn)生）得2分；噴出總量：85%～90%得0分，90%～95%得1分，95%以上得2分。實驗設(shè)計及結(jié)果見表1、表2。

表1 因素與水平表

表2 正交試驗結(jié)果

由表2可見：因素C對穩(wěn)定性和噴射總量影響最大，由綜合得分最高的實驗得到最佳處方為A3B1C2，即蘆薈鮮葉5 g，乙醇和甘油的百分含量分別為45%和5%，加水稀釋成10 ml的處方液，二甲醚的加入量為25%。

2.1.3 制備工藝的驗證

按篩選得到的最佳處方進行放大試制蘆薈氣霧劑3批，制得蘆薈氣霧劑放置1個月均性狀穩(wěn)定，沒有變色和沉淀產(chǎn)生。按《中國藥典》2005年版的方法進行氣霧劑噴出總量的測定，測得3批噴出總量分別為 (94.66±0.24)%，(94.25±0.05)%，(94.82±0.08)%。

2.2 質(zhì)量控制

2.2.1 性狀

本品在耐壓容器中的藥液應(yīng)為橙黃色澄清溶液，撳壓閥門，藥液即呈霧滴噴出。

2.2.2 鑒別

取本品連續(xù)噴射3 s至蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，殘渣加1 ml甲醇使溶解作為供試品溶液。另取蘆薈苷，加甲醇制成每1 ml含有5 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法（《中國藥典》2005年版一部附錄ⅥB）試驗，吸取供試品和對照品各5 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以乙酸乙酯∶甲醇∶水（100∶17∶13）為展開劑，展開，取出晾干，置紫外燈（365 nm）下檢視，供試品色譜中，在與對照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點。

2.2.3 其他

其他應(yīng)符合氣霧劑項下有關(guān)的各項規(guī)定。

2.2.4 蘆薈苷含量則定

2.2.4.1 對照品儲備液的配制 1.0 mmol/L蘆薈苷標準溶液：精確稱取10.5 mg蘆薈苷對照品，用少量無水乙醇溶解，并定容于25 ml容量瓶中。

1.0 mmol/L蘆薈大黃素標準溶液：精確稱取蘆薈大黃素對照品6.8 mg，用無水乙醇溶解并定容于25 ml容量瓶中。

2.2.4.2 吸收光譜繪制及測定波長的選擇 精密量取上述貯備液各2.5 ml，分置于25 ml容量瓶中，加無水乙醇定容。以無水乙醇為空白，在波長300～500 nm間掃描，得到蘆薈苷和蘆薈大黃素的吸收光譜見圖1。

由圖1可見，蘆薈苷最大吸收峰361.1 nm，蘆薈大黃素在此有干擾，當參比波長為468.2 nm時△A＝0。故選定以361.1 nm為測定波長，468.2 nm為參比波長。

2.2.4.3 標準曲線的繪制 精密量取蘆薈苷貯備液，逐級用無水乙醇稀釋至不同濃度的標準溶液，以無水乙醇為空白，分別在361.1 nm和468.2 nm處測定吸收度，差值為△A，進行線性回歸得回歸方程：△A＝31.919 5C－0.008 1(C的單位為mg/ml)，r＝1.000 0(n=5)， 結(jié)果表明蘆薈苷在 0.8×10-2～4.4×10-2mg/ml范圍內(nèi)符合比爾定律。

2.2.4.4 加樣回收試驗 在樣品中加入一定量的蘆薈苷標準溶液，按樣品測定方法測定并計算回收率，從表3中可以看出測定回收率在98.3%～101.5%，結(jié)果令人滿意。

表3 加樣回收結(jié)果

2.2.4.5 樣品的測定 取本品一罐，除去罐外塑料保護膜后，精密稱定，在鋁罐上鉆一個小孔，待拋射劑排出后，打開鋁蓋，將內(nèi)容物移至100 ml量瓶，容器用無水乙醇分次洗滌數(shù)次，合并洗液至量瓶，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，濾過，精密量取續(xù)濾液5 ml置50 ml量瓶，用無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，分別在361.1 nm和468.2 nm處測定吸收度，差值為△A代入回歸方程，求得蘆薈苷的含量。將本品的容器洗凈烘干，精密稱定，與原來的重量之差即為藥液重量，與每瓶蘆薈苷的量相比，即可求得藥液的濃度。結(jié)果見表4。

表4 樣品測定結(jié)果

3 討論

蘆薈是種藥用價值很高的植物，廣泛應(yīng)用于醫(yī)藥、保健和日常生活。我國植物資源非常豐富，開發(fā)蘆薈具有廣闊的應(yīng)用前景。王林麗等[6]報道，蘆薈臨床治療痤瘡、鼻炎、皮炎、鼻咽癌、皮膚損傷等方面有積極作用。本文以二甲醚作為拋射劑，研制庫拉索蘆中藥氣霧劑，臨床用于治療扁桃體炎、咽喉發(fā)炎，對藥用二甲醚的應(yīng)用和蘆薈新產(chǎn)品的開發(fā)應(yīng)用作進一步的研究。

2010年1月1 日已全面停止CFCs作藥用輔料，二甲醚作為拋射劑的替代品在1999年獲得了藥用批準文號，不會產(chǎn)生環(huán)境污染。本品作為氣霧劑有以下優(yōu)點：使用方便，奏效迅速；能保持藥物清潔和無菌狀態(tài)，并能提高藥物的穩(wěn)定性。由于藥物裝在密閉容器內(nèi)，能避免與空氣、水分、和光線的接觸，因此減少了污染與變質(zhì)的可能；噴出的霧粒微小，能直達作用部位或吸收部位，且分布均勻，給藥劑量較小，故副作用小。

研究表明，蘆薈中總蒽醌類化合物的提取最佳條件是以95%乙醇為溶劑[7]，而超聲波可以強化乙醇浸提法，達到省時、高效、節(jié)能的目的[8]。

制劑中乙醇含量越高越穩(wěn)定，但過高對黏膜有刺激；二甲醚的加入量越大，穩(wěn)定性越差，但過低對噴射總量有影響。本品室溫放置一年，穩(wěn)定性好。

因蘆薈苷是主要的抗菌有效成分之一，作用較蘆薈大黃素強[3]，故選用蘆薈苷作質(zhì)量指標。雙波長紫外分光光度法能消除蘆薈大黃素對蘆薈苷的干擾，從回收率可見，本法簡便且精確，對控制本品的質(zhì)量提供了方法。

[1]陳小剛.常用中草藥臨床新用[M].廣州：廣東科學(xué)技術(shù)出版社,2005：1-35.

[2]Reynolds T,Dweck AC.Aloe Vera Leaf Gel：A Review Update[J].Ethnopharmacol,1999,68：3.

[3]王國團,程立華,袁濤.復(fù)方蘆薈軟膏的制備與質(zhì)量控制[J].新疆中醫(yī)藥,2008,26(2)：54-55.

[4]陳瑤舟,張錦龍,鄭莉華,等.蘆薈混合液霧化防治放射性口腔黏膜反應(yīng)的療效觀察[J].現(xiàn)代護理,2008,14(4)：435-436.

[5]田兵,華躍進,馬小瓊,等.蘆薈抗菌作用與蒽醌化合物的關(guān)系[J].中國中藥雜志,2003,28(11)：1034-1037.

[6]王林麗,徐夢雪.蘆薈的藥理作用及臨床研究進展 [J].中國藥業(yè),2003,12(8)：70-71.

[7]周建青,郭珍,李林.蘆薈中蒽醌類物質(zhì)的提取研究[J].安徽農(nóng)業(yè)科學(xué),2007,35(22)：6707,6736.

[8]裴正玲,孫婷婷,黃鎖義.超聲波提取蘆薈總黃酮及其鑒別[J].微量元素與健康研究,2007,24(1)：26-27,33.