健脾化濕顆粒的制備工藝研究

杜建平，施之琪*，江志強(qiáng)

1廣東省中醫(yī)研究所，廣州 510095；2廣州中醫(yī)藥大學(xué)，廣州 510405

健脾化濕顆粒來(lái)源于臨床經(jīng)驗(yàn)方。該方以四君子湯為基礎(chǔ)，由柴胡、白芍、茯苓、白術(shù)等多味疏肝健脾化濕類(lèi)中藥組成，臨床常用于肝炎、慢性胃炎、膽囊炎、脅間神經(jīng)痛等屬肝郁脾虛濕滯者。本研究以中醫(yī)藥理論為指導(dǎo)，根據(jù)現(xiàn)代中藥化學(xué)、藥理研究成果及臨床使用特點(diǎn)，利用現(xiàn)代制劑技術(shù)對(duì)上述多味中藥的提取、濃縮、干燥和成型工藝進(jìn)行了研究，確定了健脾化濕顆粒的制備方法[1]。

1 儀器與試藥

DZF-6050真空干燥箱 （上海一恒科技有限公司）；電子分析天平 （METTLERXS205DU，瑞士）；TC-15套式恒溫器 （海寧市新華醫(yī)療器械廠）；Agilent 1200高效液相色譜儀 （美國(guó)Agilent公司）；DC-1500噴霧干燥機(jī)（上海達(dá)程公司）；GK-70型干式造粒機(jī)（江蘇瑰寶制藥機(jī)械廠）。

柴胡、茯苓、白芍、白術(shù)等藥材均購(gòu)于廣東省藥材公司中藥飲片廠，經(jīng)廣東省中醫(yī)研究所鑒定和檢驗(yàn)，符合《中國(guó)藥典》2010版藥材質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)；芍藥苷對(duì)照品（中國(guó)藥品生物制品檢定所，批號(hào)：110736-200526）；糊精、淀粉、麥芽糖糊精、乳糖均為藥用規(guī)格；甲醇為色譜純；其它試劑均為分析純；水為超純水。

2 方法與結(jié)果

2.1 健脾化濕顆粒的制備和含量測(cè)定[2]

2.1.1 試驗(yàn)設(shè)計(jì) 本處方在預(yù)試驗(yàn)考察的基礎(chǔ)上，采用正交試驗(yàn)優(yōu)化提取工藝參數(shù)，設(shè)定提取時(shí)間（A）、加水量（B）和提取次數(shù)（C）作為考察因素，各因素取3個(gè)水平，以L9（34）正交試驗(yàn)表安排試驗(yàn)，篩選最佳工藝條件，因素水平見(jiàn)表1。

表1 因素水平表

2.1.2 正交試驗(yàn)樣品制備 按處方量的比例稱(chēng)取柴胡、茯苓、白芍、白術(shù)等藥材共9份，分別按表2的正交試驗(yàn)安排水煎煮提取，提取液濾過(guò)、濃縮、放冷，置100 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

陰性樣品制備：按處方量的比例稱(chēng)取除白芍外其他藥材共1份，依法水煎煮提取，提取液濾過(guò)、濃縮、放冷，置100mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，即得。

2.1.3 芍藥苷含量測(cè)定方法[3]照《中國(guó)藥典》2010版一部“白芍”項(xiàng)下進(jìn)行芍藥苷含量測(cè)定。

色譜條件：色譜柱為phenomenex C18柱（4.6 mm×250 mm，5 μm）；流動(dòng)相為乙腈-0.1%磷酸溶液（14∶86，V/V）；檢測(cè)波長(zhǎng)為230 nm；流速為1 mL· min-1；柱溫為30℃。

對(duì)照品溶液的制備：精密稱(chēng)取芍藥苷對(duì)照品6.35 mg置100 mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀釋至刻度，搖勻，即得（63.5 μg·mL-1）。

供試品溶液的制備：精密吸取樣品溶液1 mL，置于10 mL量瓶中，加水稀釋至刻度，搖勻，過(guò)0.45 μm微孔濾膜，取續(xù)濾液，即得。

照上述色譜條件測(cè)定，供試品穩(wěn)定，陰性無(wú)干擾。

2.1.4 干膏得率的測(cè)定 精密吸取正交試驗(yàn)樣品10 mL置于恒重的蒸發(fā)皿中，水浴蒸干，照干燥失重測(cè)定法（《中國(guó)藥典》2010年版一部附錄Ⅸ G）測(cè)定，按下列公式計(jì)算出膏率。

W為10 mL濃縮液中干浸膏重量，V為定容體積，Wt為藥材重量。

2.1.5 提取工藝的優(yōu)選[4]取9份正交試驗(yàn)樣品，分別測(cè)定芍藥苷提取率和干膏得率，結(jié)果各按0.5的權(quán)重系數(shù)進(jìn)行綜合評(píng)分，利用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件對(duì)評(píng)分結(jié)果進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，由直觀分析和方差分析判斷各因素對(duì)提取效果的影響程度，篩選出在該試驗(yàn)條件下的優(yōu)化提取參數(shù)。結(jié)果見(jiàn)表2、表3。

表2 正交試驗(yàn)結(jié)果

表3 方差分析結(jié)果

分析可知，影響提取效果的因素順序?yàn)椋禾崛〈螖?shù)（C）＞提取時(shí)間（B）＞加水量（A）；由此得出的最佳工藝組合為A3B3C3。由表3方差分析結(jié)果顯示，提取次數(shù)（P＜0.05）和提取時(shí)間（P＜0.05）對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響顯著，而加水量對(duì)試驗(yàn)結(jié)果影響不顯著。綜合考慮各方面因素，擬確定選擇A2B3C2作為水提取工藝參數(shù)，即加水10倍，提取2次，每次提取2 h。

2.1.6 驗(yàn)證試驗(yàn) 為確定該工藝的優(yōu)劣和穩(wěn)定性，按處方比例稱(chēng)取藥材，共3批，按上述優(yōu)選提取工藝和測(cè)定方法進(jìn)行驗(yàn)證試驗(yàn)，分別測(cè)定樣品中的干膏得率和芍藥苷提取率，結(jié)果見(jiàn)表4。

結(jié)果表明，驗(yàn)證試驗(yàn)的綜合評(píng)分和芍藥苷提取率均較高，正交試驗(yàn)優(yōu)選的工藝條件合理、穩(wěn)定可行。

表4 工藝驗(yàn)證試驗(yàn)

2.2 濃縮工藝的確定

中藥提取液在濃縮時(shí)，既要求高濃縮率，又不能損失有效成分。普通常壓濃縮加熱時(shí)間長(zhǎng)，耗能大，現(xiàn)多不采用此法。本工藝結(jié)合現(xiàn)代設(shè)備條件，對(duì)提取液采用減壓濃縮。結(jié)果表明，溫度在75～85℃，真空度在-0.06～-0.08Mpa之間，可達(dá)良好的濃縮效果。

2.3 干燥工藝的確定

本研究采用先進(jìn)的噴霧干燥法制備浸膏粉，再行制粒。在固定出風(fēng)溫度為80℃的前提下，對(duì)影響噴霧干燥的主要因素料液相對(duì)密度、進(jìn)風(fēng)溫度進(jìn)行了考察。以粉末含水量和粉末性狀作為評(píng)價(jià)噴霧干燥效果指標(biāo)，利用單因素試驗(yàn)法選擇噴霧干燥工藝參數(shù)，試驗(yàn)方案和結(jié)果見(jiàn)表5。

由實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，料液濃度低時(shí)，料液干燥速度慢，膏粉含水量會(huì)增加，膏粉易結(jié)成團(tuán)塊，色澤深，與高密度液體相比，粘壁更嚴(yán)重。綜合考慮噴干效果和節(jié)約工時(shí)，以料液相對(duì)密度1.10為宜。進(jìn)風(fēng)溫度對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量和工作效率也有較大影響，在較高的進(jìn)風(fēng)溫度的同時(shí)，加大抽氣量，即可以加快噴干速度，又可以很好地保持噴干粉的性狀。所以本試驗(yàn)選擇180℃為進(jìn)風(fēng)溫度。

表5 健脾化濕顆粒噴霧干燥試驗(yàn)結(jié)果

2.4 成型工藝的研究

2.4.1 輔料選擇 由于本方臨床服用劑量較大，為了使制得的顆粒具備適宜服用體積，故不宜加入過(guò)多輔料。而干法制粒技術(shù)可以大大減少顆粒制備的輔料用量，提高顆粒收率并節(jié)約工時(shí)和能源，因此成型工藝采用干法制粒。選用價(jià)廉易得的麥芽糖糊精、糊精、乳糖和可溶性淀粉作為輔料，以干膏粉第一次通過(guò)干法制粒機(jī)所得合格顆粒的一次成型率為指標(biāo)，對(duì)輔料的配比進(jìn)行優(yōu)選，結(jié)果見(jiàn)表6。

結(jié)果顯示，加入20%的麥芽糖糊精，顆粒的一次成型率較高，達(dá)38.05%，為減少輔料的用量，增大顆粒的成型性，故選擇20%的麥芽糖糊精用量。

表6 不同輔料對(duì)健脾化濕顆粒成型性的影響

2.4.2 健脾化濕顆粒制備 按上述優(yōu)選的結(jié)果，取噴干粉與20%的麥芽糖糊精混合均勻，采用GK-70型干式造粒機(jī)進(jìn)行制粒，工藝參數(shù)為：室溫25℃，52%相對(duì)濕度，15r·min-1轉(zhuǎn)速，干壓送樣頻率為30r· min-1，12目篩整粒，主壓為3.5～4.0 Mpa。結(jié)果顯示制粒效果良好，能滿足產(chǎn)品要求。

2.4.3 健脾化濕顆粒臨界相對(duì)濕度的測(cè)定 將健脾化濕顆粒置于已恒重的稱(chēng)量瓶底部，厚度不超過(guò)2 mm，準(zhǔn)確稱(chēng)量后置于分別盛有7種不同濕度的干燥器內(nèi)，打開(kāi)稱(chēng)量瓶蓋，于25℃恒溫箱中保持72 h后，精密稱(chēng)量，計(jì)算顆粒吸濕百分率。以吸濕百分率為縱坐標(biāo)，相對(duì)濕度為橫坐標(biāo)，繪出顆粒吸濕平衡曲線，通過(guò)作圖法求得臨界相對(duì)濕度。由圖1可知，制成的顆粒吸濕性一般，其臨界相對(duì)濕度為68%，在生產(chǎn)本制劑時(shí)，車(chē)間環(huán)境的相對(duì)濕度控制在50%即可。

圖1 健脾化濕顆粒臨界相對(duì)濕度測(cè)定

3 討 論

本方白芍柔肝止痛，芍藥苷是其主要有效成分和質(zhì)量控制指標(biāo)。采用芍藥苷與得膏率兩個(gè)指標(biāo)綜合評(píng)分對(duì)水提取的效果進(jìn)行評(píng)價(jià)。

使用的噴霧設(shè)備為實(shí)驗(yàn)用小型DC-1500噴霧干燥機(jī)，不能設(shè)定進(jìn)料速度和抽氣速度參數(shù)。通過(guò)預(yù)實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)出風(fēng)溫度設(shè)定在80℃時(shí)，干燥效果較好。本實(shí)驗(yàn)選擇了對(duì)噴霧干燥效果影響較大的藥液濃度和進(jìn)風(fēng)溫度兩個(gè)指標(biāo)做進(jìn)一步考察。

搖擺制粒、離心造粒和干壓制粒都是本工藝可以選擇的制粒方法。對(duì)健脾化濕顆粒的制粒方法進(jìn)行了預(yù)試驗(yàn),用干壓制粒法不僅易制粒,且顆粒色澤均勻,服用量少,因此采用了干壓制粒法。通過(guò)對(duì)輔料的篩選，選擇麥芽糖糊精制備的顆粒，其成型性和性狀明顯優(yōu)于可溶性淀粉等其他輔料。

[1] 陳楊芳，王 珍，陳師農(nóng)，等.祛風(fēng)除痹顆粒制備工藝的實(shí)驗(yàn)研究[J].安徽醫(yī)藥，2009，13(1)：19-21.

[2] 湯建成，王溶溶，陳丹菲，等.糖足顆粒的制備工藝研究[J].中藥新藥與臨床藥理，2009，20(4)：383-5.

[3] 國(guó)家藥典委員會(huì).中華人民共和國(guó)藥典 （一部）[S].北京：中醫(yī)藥科技出版社，2010：96-7.

[4] 何 健，韓正洲，張躍飛.正交試驗(yàn)法優(yōu)選苦參配方顆粒的提取工藝[J].海峽藥學(xué)，2011，23(5)：25-6.