不同類型子宮內膜中PTEN和CD44V6的表達及其意義

鄭慶紅 李娜 尹艷英

不同類型子宮內膜中PTEN和CD44V6的表達及其意義

鄭慶紅 李娜 尹艷英

目的 檢測PTEN與CD44V6在不同類型子宮內膜組織中的表達情況，探討其與內膜癌生物學行為之間的關系。方法 采用免疫組織化學法(SP法)檢測PTEN與CD44V6在82例子宮內膜組織中的表達。結果 ①PTEN在子宮內膜增生期、單純型增生過長、復雜型增生過長、不典型增生及內膜樣腺癌組織中的表達率呈顯著遞減趨勢，而CD44V6的表達率呈遞增趨勢，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05);②PTEN、CD44V6的表達均與子宮內膜樣腺癌的組織病理分級、手術病理分期、肌層浸潤有關，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)。結論 PTEN與CD44V6的表達在子宮內膜癌發(fā)生、發(fā)展中起一定的作用，可作為反映子宮內膜癌惡性潛能的分子標志物。

子宮內膜;PTEN;細胞黏附分子;免疫組織化學

子宮內膜癌是女性生殖道常見的三大惡性腫瘤之一。子宮內膜增生(單純性，復雜性)、不典型增生和子宮內膜癌無論在形態(tài)上還是在生物學上為一個連續(xù)的演變過程，但其病因學分子機制尚不清楚。PTEN是于1997年發(fā)現(xiàn)并命名的一種新的抑癌基因，因其獨特的作用途徑在腫瘤研究中倍受重視，并且PTEN基因是在子宮內膜癌中的突變率最高的抑癌基因。黏附分子CD44是一種分布極為廣泛的細胞表面跨膜糖蛋白，CD44V6作為CD44的變構體，只表達于發(fā)生轉移或有轉移能力的腫瘤細胞［1］。本實驗通過檢測 PTEN、CD44V6在不同類型子宮內膜組織中的表達，探討二者在子宮內膜癌發(fā)生發(fā)展中的作用及與內膜癌臨床病理學特征之間的關系，來分析其與內膜癌生物學行為之間的關系。

1 資料與方法

1.1 一般資料 收集2004年1月至2009年12月大慶油田總醫(yī)院婦產科手術切除的子宮組織標本共82例。按病理診斷結果、經病理證實的子宮內膜癌標本40例，子宮內膜增生22例(單純性增生7例、復雜性增生7例、不典型增生8例)，增生期或分泌期子宮內膜20例。子宮內膜癌按2000年FIGO分期標準進行手術病理分期:Ⅰ期29例，Ⅱ期4例，Ⅲ期6例，Ⅳ期1例;組織學分級:G115例、G212例、G313例;組織學類型:子宮內膜樣腺癌39例，透明細胞癌1例;子宮肌層侵潤深度:限于內膜層10例，侵潤＜1/2肌層24例，≥1/2肌層6例。患者年齡33～76歲，平均(48.6±8.3)歲。所有患者有完整的臨床病理資料，取材前均未經化療、放療及激素治療。所有標本以10%福爾馬林固定，石蠟包埋。

1.2 實驗方法 采用常規(guī)SP法，按說明書操作進行。PTEN鼠單抗和鼠抗人CD44V6單抗以及SP試劑盒均購自福建邁新生物技術有限公司，以PBS液代替一抗作陰性對照，用已知PTEN陽性的結腸癌及CD44V6陽性的肺癌切片作陽性對照。

1.3 結果判定 PTEN及CD44V6陽性判定:PTEN以細胞漿內出現(xiàn)棕黃色顆粒為陽性。CD44V6以細胞膜和/(或)細胞漿內出現(xiàn)明顯的棕黃色顆粒者為陽性(+)，無著色者為陰性(-)。

1.4 統(tǒng)計學方法 采用SPSS 13.0統(tǒng)計軟件，根據數據資料類型，各組間率的比較采用χ2檢驗，等級相關采用Spearman等級相關分析，P＜0.05表示差異有統(tǒng)計學意義。

2 結果

2.1 不同子宮內膜組織中PTEN和CD44V6的表達 PTEN在正常內膜、單純性增生、復雜性增生、不典型性增生及子宮內膜癌中的陽性表達率分別為:100%、81.25%、76.57%、52.18%和45.34%。進行Spearman分析后，提示不同子宮內膜組織與PTEN蛋白的表達強度呈負相關關系，(r=-0.146，P＜0.01)，差異有統(tǒng)計學意義。而CD44V6在復雜性增生、不典型性增生及子宮內膜癌中的陽性表達率分別為:10.81%、34.28%、64.63%，正常子宮內膜組織及單純性增生子宮內膜中無一例陽性表達(P＜0.05)。

2.2 PTEN和CD44V6陽性表達與子宮內膜癌臨床病理特征的關系 子宮內膜癌組織中PTEN和CD44V6蛋白的陽性表達與內膜癌的發(fā)病年齡無明顯相關(P＞0.05)，而與內膜癌組織學類型、淋巴轉移及臨床分期密切相關(P＜0.05或P＜0.01)。見表1。

表1 子宮內膜癌臨床病理特征與PTEN及CD44V6表達關系

3 討論

3.1 PTEN在不同子宮內膜組織中的表達及其臨床意義PTEN基因是1997年在原發(fā)性乳腺癌患者組織中分離獲得的一種新的抑癌基因，該基因具有蛋白質酪氨酸磷酸酶和雙重特異性磷酸酶的活性［2］。PTEN基因通過抑制細胞有絲分裂，誘導細胞凋亡，參與調節(jié)細胞的黏附、轉移和分化等各個方面發(fā)揮抑癌基因的作用［3］。

本研究發(fā)現(xiàn)PTEN在正常內膜、單純性增生、復雜性增生、不典型性增生及子宮內膜癌中的陽性表達率逐級減少，提示隨著PTEN的表達強度增高，內膜傾向正常，這符合PTEN作為抑癌基因功能的表現(xiàn)，與國內外研究結果一致，推測PTEN在子宮內膜癌的早期形成階段起作用。伊鐵忠等［4］報道:PTEN表達缺失與臨床分期和病理分級有關，與肌層浸潤、淋巴轉移無明顯相關性。而本研究則認為PTEN的陽性表達與內膜癌的發(fā)病年齡無明顯相關(P＞0.05)，而與內膜癌組織學類型、淋巴轉移及臨床分期密切相關(P＜0.05或P＜0.01)，提示PTEN的缺失使得PTEN對細胞生長的調控及對細胞凋亡、粘附和遷移的控制減弱，有助于癌變的發(fā)生和發(fā)展。

3.2 CD44V6在子宮內膜癌中的表達及其臨床意義 CD44基因定位于11號染色體短臂上［5］。CD44V6是CD44的變異型，與人體多種腫瘤關系較為密切，其表達與腫瘤進展程度、轉移和預后密切相關，認為CD44V6可作為獨立的預后指標。

本研究表明，正常子宮內膜組織及單純性增生的子宮內膜組織中CD44V6均陰性表達，而在內膜癌組織中的陽性表達率為64.63%，差異有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)，提示CD44V6表達可能是內膜癌發(fā)生發(fā)展的促進因素。本研究發(fā)現(xiàn)，隨著子宮內膜癌組織學分級、臨床分期的級別增高、肌層浸潤的加深和轉移，CD44V6的陽性表達呈增高趨勢，提示CD44V6的陽性表達對內膜癌的侵襲轉移和臨床進展過程中起重要作用，表明CD44V6可能是子宮內膜癌發(fā)生發(fā)展的晚期事件。

總之，PTEN低水平表達或CD44V6的高水平表達，子宮內膜腫瘤的惡性程度越高，患者的預后越差，這兩種蛋白可作為反映子宮內膜腫瘤惡性潛能的分子標志物，對其發(fā)生發(fā)展和預后有重要意義。

［1］ Gunthert U，Hoffmann M，Rudy W，et al.A new variant of glycoprotein CD44 confers metastatic potential to rat carcinoma cells. Cell，1991，65(1):13-24．

［2］ Steck PA，Pershouse MA，Jasser SA，et al.Identification of a candidate tumor suppressor gene，MMAC1，at chromosome 10q23.3 that is mutated in multiple advanced cancers.Nature Genetics，1997，15(4):356-363．

［3］ 杜雪.PTEN與子宮內膜癌.國外醫(yī)學婦產科學分冊，2003，30 (6):385-386．

［4］ 伊鐵忠，糜若然，朱莉.子宮內膜癌PTEN PCNA和C2B22的表達及其意義.中國實用婦科與產科雜志，2006，22(4): 127-128.

163001黑龍江省大慶油田總醫(yī)院醫(yī)院婦產科