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    四妙勇安湯對2型糖尿病大鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞功能的影響*

    2010-11-29 00:48:38黃金瑋
    天津中醫(yī)藥 2010年6期
    關(guān)鍵詞:妙勇安列酮羅格

    黃金瑋,常 柏

    (1.唐山工人醫(yī)院分院內(nèi)三科,唐山 063000;2.天津醫(yī)科大學(xué)代謝病醫(yī)院,天津 300070)

    糖尿病大血管病變屬中醫(yī)的“脫疽”范疇,四妙勇安湯為治療“脫疽”的代表方劑。筆者長期應(yīng)用四妙勇安湯治療糖尿病大血管病取得了良好的治療效果。本研究試圖以2型糖尿病大鼠為研究對象探討四妙勇安湯治療糖尿病大血管病變的作用機(jī)制。

    1 材料與方法

    1.1 T2DM大血管病變大鼠模型的制備 SPF級雄性 Wistar大鼠,50 只,體質(zhì)量:(180±20)g,由中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院放射醫(yī)學(xué)研究所實(shí)驗(yàn)動物中心提供。許可證號:SCXK津2006-0001。高脂飼料喂養(yǎng)3個月,在空腹6 h狀態(tài)下,尾靜脈快速注射鏈脲佐菌素30 mg/kg,1周后取尾靜脈血,檢測血糖>16.7 mmol/L的大鼠作為2型糖尿?。═2DM)模型大鼠;

    1.2 實(shí)驗(yàn)分組、給藥及指標(biāo)檢測 選取T2DM大鼠36只,按血糖結(jié)合體質(zhì)量分層隨機(jī)分為3組:模型組、羅格列酮治療組、四妙勇安湯治療組,另取12只大鼠作為正常對照組。各組動物每日灌胃給藥1次,正常對照組和T2DM模型組灌胃等劑量自來水,治療組給予羅格列酮、四妙勇安湯,連續(xù)給藥4周。實(shí)驗(yàn)期間除正常對照組給予普通飼料外,其余各組均給予高脂高熱量飼料。用藥前、2周、4周分別取尾靜脈血用強(qiáng)生血糖儀檢測血糖,4周末股動脈取血,離心血清,檢測各組大鼠糖化血清蛋白;給藥4周后,各組大鼠股動脈取血,取血清檢測血管可溶性細(xì)胞間黏附分子(sVCAM-1),血漿檢測一氧化氮(NO)、內(nèi)皮素-1(ET-1)、腫瘤壞死因子-α(TNF-α)。

    1.3 實(shí)驗(yàn)藥物及試劑 四妙勇安湯飲片由天津中新藥業(yè)集團(tuán)有限公司提供。馬來酸羅格列酮,4mg/片,葛蘭素史克(天津)有限公司生產(chǎn),批號:03110001。鏈脲佐菌素(STZ),美國Sigma公司產(chǎn)品。大鼠TNF-α、sVCAM-1定量EIA試劑盒,尚柏生物醫(yī)學(xué)技術(shù)(北京)有限公司。大鼠ET-1放射免疫分析藥盒,北京市福瑞生物工程公司提供。NO測試藥盒:南京聚力生物醫(yī)學(xué)工程研究所提供。

    2 結(jié)果

    T2DM模型大鼠血清sVCAM-1、血漿TNF-α含量明顯升高;血漿ET-1較正常組上調(diào),NO明顯下調(diào)。四妙勇安湯及羅格列酮均能顯著降低血清sVCAM-1、血漿TNF-α含量,顯著降低血漿ET-1的含量,顯著提高血漿NO含量(P<0.01)。見表1。

    3 討論

    糖尿病大血管病變屬中醫(yī)的“消渴”“脫疽”范疇,屬于糖尿病的脈損階段,治療上把握“陰虛為本,燥熱為標(biāo)”的本虛標(biāo)實(shí)的核心病機(jī)。四妙勇安湯載于清代鮑相敖《驗(yàn)方新編》,方能滋陰降火,和營解毒,由金銀花、玄參、當(dāng)歸和甘草組成,為治療“脫疽”的代表方劑,臨床廣泛用于下肢血管病變。筆者長期應(yīng)用四妙勇安湯治療糖尿病大血管病取得了良好的治療效果。

    表1 四妙勇安湯對T2DM大鼠血清sVCAM-1、血漿TNF-α、NO、ET-1的影響 (±sTab.1 Effects of Simao yongan decoction on serum levels of sVCAM-1,plasma TNF-α,NO,ET-1 in diabetic rats(±s

    表1 四妙勇安湯對T2DM大鼠血清sVCAM-1、血漿TNF-α、NO、ET-1的影響 (±sTab.1 Effects of Simao yongan decoction on serum levels of sVCAM-1,plasma TNF-α,NO,ET-1 in diabetic rats(±s

    注:與正常對照組比較,▲P<0.05,▲▲P<0.01;與模型組比較,*P<0.05,**P<0.01。

    組別正常對照組模型組羅格列酮組四妙勇安湯組sVCAM-1(mg/L)4.06±0.326.01±0.73▲4.46±0.42*4.08±0.39*TNF-α(ng/mL)9.86±2.7646.89±12.06▲28.02±8.62*▲16.85±7.33*ET-1(ng/mL)77.58±9.21127.83±14.52▲▲87.95±8.01**93.24±9.12**NO(μmoL/L)75.85±6.9645.72±7.03▲▲63.23±8.47**67.35±7.87**

    內(nèi)皮功能紊亂是動脈粥樣硬化的起始階段,也是其中心環(huán)節(jié)。血管內(nèi)皮功能同多種因子相關(guān)。VCAM-1是血管內(nèi)皮細(xì)胞表面的黏附分子,屬于免疫球蛋白超家族,表達(dá)于細(xì)胞表面的VCAM-1脫落后進(jìn)入血液成為可溶性細(xì)胞間黏附分子1(sVCAM-1)。盧曙芳等[1]認(rèn)為頸動脈內(nèi)膜厚度(IMT)與血清sVCAM-1呈正相關(guān),本研究提示糖尿病組血清sVCAM-1水平明顯高于正常對照組,說明sVCAM-1參與了2型糖尿病大血管病變的病理過程,其水平增高可能是血管內(nèi)皮激活或早期動脈硬化的分子標(biāo)志,并可作為糖尿病大血管病變的血清學(xué)標(biāo)志。

    TNF-α 由單核/巨噬細(xì)胞活化產(chǎn)生,TNF-α 的高表達(dá),刺激sVCAM-1,使其mRNA和蛋白質(zhì)在血管平滑肌表達(dá),使血管平滑肌與單核細(xì)胞,淋巴細(xì)胞黏附,引起動脈內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)損傷,導(dǎo)致凝血/纖溶系統(tǒng)失衡及促進(jìn)炎性細(xì)胞對VEC黏附,導(dǎo)致血栓調(diào)節(jié)素在內(nèi)皮表面的下降調(diào)節(jié)作用,使凝血酶催化蛋白激酶C(PKC)活性下降,在糖尿病血管并發(fā)癥的形成和發(fā)展中起著重要作用[2]。內(nèi)皮素(ET)和NO是血管內(nèi)皮細(xì)胞(VEC)合成及釋放的一對血管縮、舒因子,NO能舒張血管,抑制血小板黏附和聚集,抑制血管平滑肌細(xì)胞增殖和遷移;ET是已知最強(qiáng)的縮血管多肽,具有促血管收縮和平滑肌細(xì)胞增殖分裂的作用。ET可負(fù)性調(diào)節(jié)內(nèi)皮NO的釋放,NO濃度的增高可抑制ET的生成,兩者的動態(tài)平衡維持著正常的血管內(nèi)皮功能,ET的升高和NO的減少是血管內(nèi)皮損傷的標(biāo)志。本研究中TNF-α,ET水平在模型組明顯升高,NO水平明顯降低,均為糖尿病血管病變發(fā)生發(fā)展的重要因素。

    羅格列酮能夠改善胰島素抵抗,并能通過PPAR-γ受體保護(hù)血管內(nèi)皮功能。本研究結(jié)果顯示,羅格列酮及四妙勇安湯均能顯著降低糖尿病大鼠血管并發(fā)癥模型血漿ET-1、TNF-α含量,升高血漿NO含量,降低PKC通路及氧化應(yīng)激所介導(dǎo)的TNF-α誘導(dǎo)的sVCAM高表達(dá),抑制單核細(xì)胞向血管內(nèi)皮的黏附,且四妙勇安湯可能更優(yōu)于羅格列酮,能夠更有效保護(hù)血管內(nèi)皮功能,阻滯或延緩糖尿病動脈粥樣硬化的發(fā)展,降低糖尿病大鼠血管并發(fā)癥風(fēng)險(xiǎn)。

    [1]盧曙芳,沈建國,朱麒錢,等.2型糖尿病患者頸動脈內(nèi)膜中層厚度與細(xì)胞間黏附分子1、c反應(yīng)蛋白的相關(guān)性[J].中華內(nèi)分泌代謝雜志,2006,22(4):358-359.

    [2]Therry Couffinlad,TNF-αstimulate ICAM-1(in tercellular adhesion molecule-1)expression in human vascular smooth muscle cells Atherosclerosis Thromb,2003,13(3)∶407-417.

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