董長(zhǎng)林,李江闊,張鵬,農(nóng)紹莊,張平
1(大連工業(yè)大學(xué)生物與食品工程學(xué)院,遼寧大連,116034)2(國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心、天津農(nóng)產(chǎn)品采后生理與貯藏保鮮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津,300384)
磨盤柿果實(shí)處理方式與衰老褐變關(guān)系探討*
董長(zhǎng)林1,李江闊2,張鵬2,農(nóng)紹莊1,張平2
1(大連工業(yè)大學(xué)生物與食品工程學(xué)院,遼寧大連,116034)2(國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心、天津農(nóng)產(chǎn)品采后生理與貯藏保鮮重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,天津,300384)
以“磨盤柿”為原料,分析其貯后褐變指數(shù)與品質(zhì)指標(biāo)、生理生化指標(biāo)及褐變相關(guān)酶系活性變化的關(guān)系,探討不同處理方式對(duì)磨盤柿果實(shí)貯后褐變的影響。結(jié)果表明:“磨盤柿”在貯藏過程中褐變指數(shù)與丙二醛(MDA)、PPO活性呈顯著正相關(guān),與總酚含量、POD活性呈顯著負(fù)相關(guān);冰溫庫(kù)結(jié)合柿子專用保鮮袋、氣調(diào)箱包裝及液浸處理與冷庫(kù)對(duì)照均有不同程度的褐變,其中冰溫結(jié)合柿子專用保鮮袋包裝處理褐變指數(shù)最小,效果最好,其余依次是冷庫(kù)對(duì)照、冰溫液浸和冰溫氣調(diào)箱處理。
衰老,褐變,冰溫,磨盤柿
柿樹(Diospyros kaki L.)是我國(guó)特產(chǎn)果樹之一,栽培歷史悠久,資源豐富,我國(guó)柿果產(chǎn)量占世界的60%以上[1]。磨盤柿(Diospyros kaki Thunb.)又名大蓋柿、帽兒柿等,是我國(guó)北方栽培面積最大、產(chǎn)量最高的品種,因其營(yíng)養(yǎng)豐富、風(fēng)味獨(dú)特,并具有很高的經(jīng)濟(jì)及醫(yī)療價(jià)值而深受廣大消費(fèi)者歡迎。但其在澀柿品種中屬于易軟易褐變的品種,在貯運(yùn)過程中,經(jīng)常發(fā)生變色,嚴(yán)重影響了感官質(zhì)量,導(dǎo)致風(fēng)味變劣,使消費(fèi)者購(gòu)買欲降低,商品價(jià)值下降。因此,研究磨盤柿貯藏過程中果實(shí)褐變的原因并揭示其褐變機(jī)理,對(duì)提高磨盤柿貯藏品質(zhì)和促進(jìn)柿貯藏產(chǎn)業(yè)的發(fā)展具有重要指導(dǎo)意義。
果實(shí)褐變與采后成熟衰老生理代謝密切相關(guān)。MSmock等[2]在蘋果貯藏保鮮研究中發(fā)現(xiàn)有7類生理失調(diào)反應(yīng),包括凍害、冷害、組織衰老、缺鈣、高CO2、低O2、機(jī)械損傷等均能引起果實(shí)褐變,由此可見,造成果實(shí)褐變的原因來自多方面。許多研究認(rèn)為果實(shí)貯藏過程中褐變是由酶促褐變引起的,即是由多酚氧化酶引起的,這一結(jié)論在南果梨[3]、番石榴果[4]、蘋果[5]和白頭蒜[6]等果蔬上得到了證實(shí)。然而,目前國(guó)內(nèi)外對(duì)于柿子采后貯藏過程中發(fā)生褐變的原因尚不明確,有關(guān)柿果褐變發(fā)生與其成熟衰老代謝關(guān)系的研究更是鮮有報(bào)道。因此,本文以磨盤柿為研究對(duì)象,通過探討在不同貯藏條件下褐變的發(fā)生與果實(shí)品質(zhì)、生理代謝、酶及底物的變化的關(guān)系,從而揭示磨盤柿貯藏過程中果實(shí)褐變發(fā)生的原因,為提高磨盤柿貯后商品性、開發(fā)新型磨盤柿貯藏保鮮技術(shù)提供理論依據(jù)。
試驗(yàn)所用“磨盤柿”采自天津薊縣。果實(shí)于2009年10月7日采收,用紙箱包裝,當(dāng)天運(yùn)回國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮技術(shù)研究中心(天津)冷庫(kù)充分預(yù)冷。挑選無機(jī)械損傷、大小適中、無病蟲害的柿果進(jìn)行貯前處理。
處理A:用柿子專用保鮮袋包裝,每袋36個(gè)果實(shí),放于冰溫庫(kù)(-0.5~–0.2℃)貯藏。
處理B:用氣調(diào)箱密閉貯藏,每箱36個(gè)果實(shí),放于冰溫庫(kù)(–0.5~–0.2℃)貯藏。
處理C:用塑料箱裸果盛放,每箱36個(gè)果實(shí),然后倒入清水浸藏,果實(shí)漂浮于水面,放于冰溫庫(kù)(–0.5~–0.2℃)貯藏。
處理D:用柿子專用保鮮袋包裝,每袋36個(gè)果實(shí),放于冷庫(kù)[(0±1)℃]中貯藏。
其中柿子專用保鮮袋、塑料氣調(diào)保鮮箱均由國(guó)家農(nóng)產(chǎn)品保鮮工程技術(shù)研究中心(天津)提供。以上所有處理重復(fù)3次,在貯藏125d后取出檢查柿果的褐變情況,并測(cè)定相關(guān)生理生化指標(biāo)。
參照李慶鵬等的測(cè)定方法[7],依據(jù)柿果表面積的大小,將褐變程度分為:0級(jí)(無褐變,褐變面積為0)、1級(jí)(輕微褐變,褐變面積 <5%)、2級(jí)(輕度褐變,褐變面積 <10%)、3級(jí)(中度褐變,褐變面積<30%),4級(jí)(嚴(yán)重褐變,褐變面積 <60%),5級(jí)(極度褐變,褐變面積>60%)。計(jì)算公式:褐變指數(shù)=∑(褐變級(jí)別×該級(jí)褐變個(gè)數(shù))/檢查總數(shù)。
采用英國(guó)產(chǎn)TA.XT.Plus TextureAnalyser物性測(cè)定儀測(cè)定。每個(gè)處理取3個(gè)果,分別在胴部去皮測(cè)4個(gè)點(diǎn),取平均值,單位為kg/cm2。測(cè)定參數(shù)為:探頭型號(hào)P/2,直徑2 mm,測(cè)試速度2.00 mm/s;測(cè)定深度6 mm;最小感知力25 g。
隨機(jī)取3個(gè)具有代表性的無損傷的果實(shí)作為呼吸測(cè)定果,用紅外線CO2分析儀測(cè)定,單位為CO2mg/(kg·k)-1(鮮重)。
采用島津2010型氣相色譜儀法。每次將4個(gè)果實(shí)置于真空干燥器內(nèi),常溫下(25℃)密閉4 h后取樣20mL,用島津2010氣相色譜儀程序升溫法測(cè)定乙烯含量。采用面積外標(biāo)法計(jì)算,標(biāo)樣濃度為50μL/L。
采用島津2010型氣相色譜儀法。稱取2.5 g果肉研磨成漿,加入7.5mL飽和食鹽水,用小瓶密閉封裝,用島津2010氣相色譜儀程序升溫法測(cè)定乙醇含量。采用面積外標(biāo)法計(jì)算。
DDS-307型電導(dǎo)率儀測(cè)定,用直徑1cm的打孔器在6個(gè)果實(shí)胴部的相同部位取樣,切取1 mm厚的均勻薄片10個(gè),置于小燒杯中,加30mL去離子水,立即測(cè)定其電導(dǎo)率值計(jì)為P0,10 min后再次測(cè)定電導(dǎo)率值計(jì)為P1,然后煮沸10 min,冷卻至室溫,再次加水至刻度,測(cè)定其電導(dǎo)率計(jì)為P2,相對(duì)膜透性/%=[(P1-P0)/(P2-P0)]×100
丙二醛含量采用硫代巴比妥酸比色法測(cè)定[8];含水量采用干燥法測(cè)定[9];可滴定酸含量采用NaOH滴定法測(cè)定;可溶性固形物含量采用手持折糖儀測(cè)定;總酚含量采用福林酚法測(cè)定[10];PPO活性、SOD活性、POD活性參照陳建勛等方法測(cè)定[8]。
本實(shí)驗(yàn)所有數(shù)據(jù)均由DPS7.50軟件分析和EXCEL軟件計(jì)算制作圖表
圖1 不同處理方式果實(shí)的褐變指數(shù)
如圖1所示,經(jīng)不同處理柿果間褐變指數(shù)存在顯著差異(P<0.05)。其中,處理A柿果褐變指數(shù)顯著低于其他3種處理,貯藏結(jié)束時(shí)褐變指數(shù)僅為0.11,果實(shí)僅發(fā)生輕微褐變,并不影響其商品價(jià)值;處理D褐變指數(shù)(顯著)低于處理C和B,有少數(shù)完全褐變果出現(xiàn);處理C褐變指數(shù)低于處理B,果皮出現(xiàn)大面積變黑,伴有黑心和果心空洞出現(xiàn),褐變指數(shù)達(dá)2.97;處理B褐變指數(shù)最大,達(dá)到了果實(shí)完全發(fā)生褐變。
硬度是指示果實(shí)軟化的直接外在表現(xiàn),隨著處理方式的不同,柿果硬度出現(xiàn)了不同的變化。如表1所示,4個(gè)處理間柿果的硬度存在顯著差異,處理D的硬度明顯低于其他3種處理,僅為9.91 kg/cm2,其他3個(gè)處理的果實(shí)硬度均在14 kg/cm2以上??梢?,處理A、B、C、能夠有效地保持果實(shí)的硬度的下降,延緩了柿果軟化進(jìn)程。
可溶性固形物(TSS)是評(píng)價(jià)果實(shí)品質(zhì)的重要指標(biāo)之一,它含有各種水溶性的營(yíng)養(yǎng)成分,變化也較復(fù)雜。隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),TSS的各種成分變化較大,直接影響了其在果實(shí)中含量的變化。由表1可以看出,處理A柿果TSS含量顯著高于其他3種處理,含量為15.26%,其他3種處理柿果中TSS含量間差異不顯著。
隨著貯藏時(shí)間的延長(zhǎng),柿果可滴定酸的含量會(huì)逐漸降低,有機(jī)酸通過生理代謝轉(zhuǎn)化成其它物質(zhì)。如表1所示,各不同處理間柿果可滴定酸含量存在差異,處理B最低為0.07%,處理A最高為0.11%。
水分含量影響著果實(shí)的外觀形態(tài),果實(shí)失水過多,果皮會(huì)出現(xiàn)萎蔫和褶皺現(xiàn)象破壞果實(shí)的商品性,同時(shí)也是水溶性營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的載體和生理代謝的場(chǎng)所。從表1中可以看出,各處理間的水分含量存在顯著差異。處理A果肉的含水量最高為89.88%,而果皮也有較高的含水量為77.43%,較好的抑制了果實(shí)中的水分流失。處理B的果肉含水量和處理D的果皮含 水量最低,分別為73.12%和68.81%。
表1 不同處理方式褐變果實(shí)的品質(zhì)變化
生理代謝活動(dòng)快慢直接影響果實(shí)衰老褐變進(jìn)程,丙二醛(MDA)含量的積累是果實(shí)衰老的重要表現(xiàn)。由表2可以看出,各處理間MDA含量具有顯著地差異性。處理A果肉的MDA含量和果皮MDA的含量最低,分別為 14.43 μmol/g和17.71 μmol/g。相反,處理B果肉的MDA含量和果皮的MDA含量最高分別為32.91μmol/g和28.26 μmol/g。
細(xì)胞膜透性也是果實(shí)衰老的一個(gè)重要檢測(cè)指標(biāo),它的增大標(biāo)志著細(xì)胞膜完整性遭到破壞程度加大。如表2所示,各處理間的細(xì)胞膜透性存在顯著地差異,處理C的細(xì)胞膜透性>處理B>處理D>處理A。
表2 不同處理方式衰老褐變果實(shí)的生理變化
呼吸和乙烯釋放是果實(shí)成熟軟化及衰老褐變過程中的一個(gè)重要的生化過程,它們的強(qiáng)度和速率也影響著貯藏過程中果實(shí)的品質(zhì)。由表2可知,各處理間的呼吸強(qiáng)度和乙烯釋放速率存在顯著差異。處理D呼吸強(qiáng)度最大為22.24 mgCO2/(kg·h)(鮮重),但它的乙烯釋放率最低為3.48μL/(kg·h)。呼吸強(qiáng)度由高到低依次是處理D>處理B>處理A>處理C,而乙烯釋放速率是處理C>處理B>處理A>處理D,兩者沒有明顯的相關(guān)性。
乙醇在柿果的衰老褐變過程中也起著重要的作用,乙醇的含量過高能促使果實(shí)乙醇中毒發(fā)生軟化腐爛現(xiàn)象,它也可以在乙醇脫氫酶的作用下代謝成乙醛使果實(shí)脫澀。從表2中可以看出,處理B的含量最高為0.81 mg,其他處理乙醇含量由大到小的順序處理C>處理D>處理A。
柿果在貯藏過程中極易發(fā)生褐變,嚴(yán)重降低了果實(shí)的食用價(jià)值和商品性。由表3可知,處理A的總酚含量顯著高于其他處理組,含量為7.16 mg/g(鮮重),而PPO活性顯著低于其他處理,為4.51[0.01 A/(g·min)-1(鮮重)],且果實(shí)僅有少量發(fā)生輕微褐變,而其他處理都發(fā)生了不同級(jí)別的褐變。這是由于總酚含量減少,PPO活性增強(qiáng)引起的酶促褐變?cè)斐傻摹?/p>
表3 不同處理方式衰老褐變果實(shí)褐變底物及其相關(guān)調(diào)控酶系的變化
超氧化物歧化酶(SOD)和過氧化物酶(POD)是果實(shí)的保護(hù)酶系,能夠清除氧自由基,抑制果實(shí)褐變程度。如表3所示,各處理間2種酶的活性存在顯著地差異,處理A的SOD活性最高為99.70 U/g,其他處理SOD活性由大到小順序是處理C>處理B>處理D;而處理B的POD活性最低為2.94[0.01 A/(g·min)(鮮重)]。處理A較好的抑制了果實(shí)的褐變的發(fā)生,防止了總酚含量的減少,降低了PPO的活性,抑制了酶促褐變的發(fā)生。
利用DPS7.50對(duì)柿果的褐變指數(shù)與相關(guān)生理生化指標(biāo)進(jìn)行了相關(guān)性分析,所用相關(guān)數(shù)據(jù)均是各不同處理方式測(cè)定的平均值,結(jié)果見表4。從表4中可以看出,柿果褐變指數(shù)與果肉及果皮中的丙二醛含量及果肉PPO活性呈顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)分別為0.969、0.961和0.953,與果肉總酚含量呈顯著負(fù)相關(guān),相關(guān)系數(shù)為-0.971。而褐變指數(shù)與SOD和POD的活性及其他測(cè)定項(xiàng)相關(guān)性不顯著。說明柿果丙二醛、總酚含量和PPO活性的變化可能是引起柿果褐變的主要原因。此外,果肉總酚含量與PPO活性呈顯著負(fù)相關(guān),果皮和果肉中MDA含量與果肉PPO活性呈顯著正相關(guān),果皮MDA含量與果肉總酚含量呈顯著負(fù)相關(guān),說明總酚、PPO及MDA是通過發(fā)生反應(yīng)及相互作用來影響柿果的褐變程度。
表4 褐變指數(shù)與各項(xiàng)指標(biāo)的線性關(guān)系
研究表明,適宜的包裝和貯藏環(huán)境能夠有效地抑制果實(shí)水分的流失,保持TSS、可滴定酸含量和硬度的下降[17-19],這已經(jīng)在枇杷[11]、草莓[12]和甜瓜[13]得到證明。趙玉梅[20]和 Xue Y B[21]等認(rèn)為果實(shí)失水萎蔫會(huì)促進(jìn)多聚半乳糖醛酸酶和纖維素酶的活性升高及失水后促進(jìn)多聚半乳糖醛酸酶基因的表達(dá),加速果膠和纖維素的降解,導(dǎo)致果實(shí)的硬度下降速度加劇。本實(shí)驗(yàn)的結(jié)果中,冰溫貯藏結(jié)合柿子專用保鮮袋包裝有效的抑制了果實(shí)水分流失和保持了較高的硬度,防止因失水造成果實(shí)萎蔫和褶皺等現(xiàn)象的出現(xiàn),保持了果實(shí)的外觀品質(zhì),減緩了果實(shí)衰老褐變進(jìn)程,這與以上研究結(jié)果相一致。相反,冷庫(kù)結(jié)合柿子專用保鮮袋貯藏,果實(shí)因失水出現(xiàn)了褶皺,破壞了果實(shí)的外在品質(zhì),冰溫結(jié)合密閉氣調(diào)箱和液體浸藏,果實(shí)表皮均有嚴(yán)重褐變現(xiàn)象發(fā)生。
人們發(fā)現(xiàn),失水不僅影響果實(shí)的外觀品質(zhì),同時(shí)也影響內(nèi)在的生理代謝如呼吸強(qiáng)度、乙烯釋放速率、丙二醛含量的積累和質(zhì)膜透性,并最終影響著果實(shí)衰老褐變的進(jìn)程。失水能引起獼猴桃[14]、香蕉[15]和番茄[16]等躍變性果實(shí)呼吸強(qiáng)度和乙烯釋放速率增加。Burdon[22]認(rèn)為,果實(shí)失水后乙烯合成前提物質(zhì)ACC含量會(huì)明顯增高,2個(gè)重要酶ACS和ACO的活性會(huì)增強(qiáng),能加劇果實(shí)乙烯的自我催化;饒景萍等研究認(rèn)為,柿在低濕度環(huán)境下ACS和ACO的基因表達(dá)要明顯高于高濕度環(huán)境下的表達(dá);同時(shí),實(shí)驗(yàn)果實(shí)包裝內(nèi)CO2和O2的比例要控制平衡,保持果實(shí)的正常呼吸速率,避免果實(shí)無氧呼吸,防止產(chǎn)生大量乙醇促進(jìn)果實(shí)的衰老褐變。本實(shí)驗(yàn)中冰溫結(jié)合柿子專用保鮮袋包裝,具有較好的透氣性,有效地抑制了果實(shí)呼吸強(qiáng)度與乙烯釋放量的增加,保持了較低的質(zhì)膜透性,延緩了果實(shí)的衰老褐變的進(jìn)程。冰溫結(jié)合密閉氣調(diào)箱包裝也驗(yàn)證了包裝內(nèi)氣體比例失衡,CO2含量過高引起果實(shí)無氧呼吸,產(chǎn)生大量乙醇,加快了果實(shí)的衰老褐變進(jìn)度。同時(shí)實(shí)驗(yàn)結(jié)果也證實(shí)了丙二醛的含量和果實(shí)的褐變指數(shù)成正相關(guān)。
果實(shí)貯藏期間的組織褐變是酚類物質(zhì)酶促氧化的結(jié)果,果實(shí)細(xì)胞間的酚類物質(zhì)的含量、多酚氧化酶的活性和氧氣的供應(yīng)是組織產(chǎn)生褐變的基本條件,抑制PPO的活性能夠降低果實(shí)發(fā)生褐變的幾率。Bower[23]和 FridovicH[24]等研究認(rèn)為,細(xì)胞內(nèi)的活性氧和防御系統(tǒng)之間保持著平衡,如果SOD和POD不能協(xié)調(diào)作用,O2–和H2O可經(jīng)過Haber-Weiss或Fenton反應(yīng)引起甲硫氨酸產(chǎn)生依乙烯的·OH,促進(jìn)乙烯合成,加速果實(shí)的衰老褐變。本實(shí)驗(yàn)中冰溫結(jié)合柿子專用保鮮袋包裝阻止了酚類物質(zhì)的降低和抑制了PPO的活性,保持了果實(shí)內(nèi)的SOD和POD的活性比例,有效的控制了果實(shí)的褐變指數(shù)。而其他3個(gè)處理均發(fā)生了不同程度的褐變,這說明保持果實(shí)內(nèi)酚類物質(zhì)的含量和抑制PPO的活性,防止果實(shí)內(nèi)SOD和POD活性的比例失調(diào),能夠有效地抑制果實(shí)酶促褐變的發(fā)生。此外,褐變指數(shù)與總酚含量呈顯著負(fù)相關(guān),與PPO活性呈顯著正相關(guān)。
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Research on the Relationship of the Treatment Methods and Browning of‘MOPAN’Persimmonin
Dong Chang-lin1,Li Jiang-kuo2,Zhang Peng2,Nong Shao-zhuang1,Zhang ping2
1(School of Biological&Food Engineering,Dalian Polytechnic University,Dalian 116034,China)2(Tianjin Key Laboratory of Postharvest Physiology and Storage of Agricultural Products,National Engineering and Technology Research Center for Preservation of Agricultural Products,Tianjin 300384,China)
The correlation of browning index and changes of quality indicators,physiological and biochemical indicators and enzyme activity associated of Mopan persimmons after storage was analyzed.The effect of different treatments on browning index after storage was discussed.The results showed that during storage browning index was significantly correlated with MDA content and PPO activity,but it showed a significant negative correlation with total phenolic content,POD activity.The persimmon fruits were storied by controlled freezing-point technique combined with storage bags,modified atmosphere packaging,immersion treatment and cold storage(CK)all showed some degree of browning.Among them,the treatment of controlled freezing-point combined with storage bags had the smallest browning index and the best storage effect.Next is cold control(CK),controlled freezing point technology combined with immersion,and controlled freezing point technology combined with atmosphere box.
senescence,browning,thermo-ice,mopan persim
碩士研究生(張平為通訊作者)。
*國(guó)家科技支撐項(xiàng)目(2006BAD30B01);天津市農(nóng)業(yè)科技成果轉(zhuǎn)化與推廣項(xiàng)目(201002020)
2010-06-07,改回日期:2010-10-27