黃芪抗氧化部位及其與三七總皂甙配伍組分對動脈粥樣硬化的改善

徐姜波, 王 拓, 翁新楚

(上海大學生命科學學院,上海 200444)

黃芪抗氧化部位及其與三七總皂甙配伍組分對動脈粥樣硬化的改善

徐姜波, 王 拓, 翁新楚

(上海大學生命科學學院,上海 200444)

用油脂穩(wěn)定性指數(shù) (oil stability index,OSI)法篩選確定了黃芪乙酸乙酯抗氧化活性部位,并以高酯飼料喂養(yǎng)鵪鶉造動脈粥樣硬化 (atherosclerosis,AS)模型,考察黃芪抗氧化活性組分及其與三七總皂甙 (PNS)配伍組分對實驗性動脈粥樣硬化的影響.給藥 8周,檢測血清總膽固醇 (TC)、甘油三酯 (TG)、低密度脂蛋白膽固醇 (LDL-C)、高密度脂蛋白膽固醇 (HDL-C)、總抗氧化能力 (T-AOC)、超氧化物歧化酶 (SOD)、丙二醛 (MDA)含量.結(jié)果表明,黃芪抗氧化活性組分及其與 PNS的配伍組分可顯著降低 (P<0.1)血清 TC,TG,LDL-C,TC/HDL-C系數(shù)和MDA,升高血清HDL-C及 T-AOC,SOD水平,對高脂膽固醇鵪鶉動脈粥樣硬化具有很好的改善作用.

鵪鶉;動脈粥樣硬化;黃芪;油脂穩(wěn)定性指數(shù) (oil stability index,OSI)法;抗氧化

Abstract:Antioxidant part of Astragali Radix was determined with an oil stability index(OSI)method.An experimental atherosclerosis in quailswas established to observe the effects of the antioxidant part of Astragali Radix and its combination with Panax notoginseng saponins(PNS).After 8 weeks of feeding with the antioxidant part of Astragali Radix and its combination with PNS,the total cholesterol(TC),triglyceride(TG),low density lipoprotein (LDL-C),high density lipoprotein (HDL-C),total antioxidant capacity(T-AOC),superoxide dismutase(SOD),and malondialdehyde(MDA)in serum were measured.The results show that,compared w ith atherosclerosis(AS)model quails,the serum TG,TC,LDL-C,MDA are obviously lower(P<0.1)while T-AOC,SOD are totally opposite,indicating that the antioxidant part of Astragali Radix and its combination with PNS have good effects in anti-AS.

Key words:quail;atherosclerosis(AS);Astragali Radix;oil stability index(OSI);antioxidant

動脈粥樣硬化 (atherosclerosis,AS)是心血管疾 病 (cardiovascular disease,CD)——心臟病、高血壓、高脂血癥等的主要病因.目前研究認為,在 AS眾多危險因素中,脂質(zhì)發(fā)生過氧化修飾被認為是導致 AS的關鍵因素[1],而過氧化修飾在一定程度上能被抗氧化劑所抑制[2],如 VE、VC[3]、多酚[4]、胡蘿卜素類、黃酮類等.中草藥中大多富含抗氧化性較強的天然抗氧化成分,具有明顯降低和穩(wěn)定 AS病癥的作用,對并發(fā)癥的防治有積極意義.經(jīng)證實,三七[5]、人參、大蒜、水蛭、甘草、山楂、當歸等對 AS均有顯著療效.所以,從天然藥物中尋求高效、低毒的抗AS藥物已受到國內(nèi)外科學研究者的重視.

黃芪是豆科植物蒙古黃芪 (Astragalus mongholicus Bge.)或膜莢黃芪 (Astragalus membranaceus(Fisch.)Bge.)的干燥根[6].黃芪具有保護心血管系統(tǒng)、抗心率失常、擴張冠狀動脈和外周血管、降低血壓、降低血小板粘附力、減少血栓形成、降血脂、抗衰老、抗缺氧、抗輻射等作用.

1 材料和方法

1.1 藥品與試劑

甘肅產(chǎn)內(nèi)蒙黃芪,購于上海德華國藥;三七總皂甙 (Panax notoginseng saponins,PNS)購于云南金不換集團;膽固醇 (AR)購于中國醫(yī)藥集團上?；瘜W試劑公司;肉用仔雞飼料購于上海新楊飼料有限公司;洛伐他汀購于浙江海正藥業(yè)股份有限公司;豬油由上海大學生命科學學院油脂實驗室自制;血清 TC,TG,T-AOC,MDA,HDL-C/LDL-C測定試劑盒購于南京建成生物工程研究所.高脂飼料配方為膽固醇1.5%,花生油 4%,豬油 16%,基礎飼料78.5%.

1.2 主要儀器設備

RE-85Z旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀,脂類氧化穩(wěn)定性快速自動測定儀,752分光光度儀.

1.3 黃芪氧化活性部位篩選

黃芪石油醚、乙酸乙脂、95%乙醇依次提取部分對豬油抗氧化作用進行測定,添加量分別為豬油重量的 0.05%和 0.10%,并以同濃度 VC作參照.

1.4 動物分組

健康日本種雄性鵪鶉同窩孵出,30 d齡,體重(90±10)g,購于上海榮華肉鵪鶉公司.80只鵪鶉隨機分成 8組,分別為正常組、高脂組、高脂 +黃芪提取物(A)40 mg/(kg·d)、高脂 +黃芪提取物 (A)80 mg/(kg·d)、高脂 +黃芪提取物 (A)120 mg/(kg·d)、高脂 +PNS(B)80 mg/(kg·d)、高脂 +黃芪提取物 (A)40 mg/(kg·d)+PNS(B)40 mg/(kg·d)、高脂 +洛伐他汀 (Lov)8 mg/(kg·d).每只鵪鶉早晚各喂食1次,每次 10 g,自由飲水,室溫 20～25℃,每日光照 12 h,給藥 8周,處死前禁食 12 h.

1.5 血清指標測定

實驗 8周后,鵪鶉全部處死,嚴格按照試劑盒說明步驟測定血脂 4項 (TC,TG,LDL-C,HDL-C)及T-AOC,MDA,SOD指標.

1.6 統(tǒng)計學處理

數(shù)據(jù)用x—±s表示,用方差分析(F檢驗).各均數(shù)間兩兩比較用 Student-Newmarn-Keuls(SNK)法進行.

2 結(jié) 果

2.1 不同溶劑對黃芪提取率比較

黃芪粉末過 60目篩,稱取 200 g裝入索氏提取器,依次采用石油醚、乙酸乙脂、95%乙醇作為提取溶劑進行梯度提取,各提取 10 h,分別減壓濃縮至浸膏,50℃真空干燥,計算各提取得率,結(jié)果如表 1所示.

表 1 不同極性溶劑對黃芪提取率(n=3)Table 1 Extraction ration of d ifferent solvents(n=3)

2.2 黃芪抗氧化部位篩選

取豬油 5 g置于反應管中,測定誘導時間 IP,并計算抗氧化保護系數(shù) (Pf),Pf=IP樣品/IP空白.測定條件為溫度 100℃,空氣流量 20 L/h.黃芪不同溶劑不同比例添加到豬油中,測定結(jié)果如表 2所示.

表 2 黃芪不同溶劑不同比例添加量對豬油誘導期的影響(n=2)Table 2 Effects of extraction s by d ifferen t solven ts on the IP of lard(n=2)

通常以抗氧化保護系數(shù) (Pf)來表示抗氧化性的強弱.Pf≤1表示物質(zhì)沒有抗氧化活性,Pf>1表示有抗氧化活性.由表 2可知,黃芪乙酸乙酯部位抗氧化活性優(yōu)于石油醚和 95%乙醇提取部位,其含量在0.10%的時候,抗氧化活力等同于 0.05%的VC活力.

2.3 黃芪乙酸乙脂抗氧化篩選部位及其配伍對高脂飲食鵪鶉血脂各指標的影響

鵪鶉模型組血清 TC,TG,LDL-C含量都明顯高于對照組(P<0.01),而HDL-C含量則低于對照組 (P<0.01),由此可見高脂高膽固醇鵪鶉造模成功.給藥 8周后,經(jīng)測定,黃芪乙酸乙酯提取物 (A)40,80,120 mg組,TG,TC,LDL-C水平較高脂組均顯著下降,且與濃度有較好的相關性,HDL-C含量則明顯上升.各給藥組 TG與陽性對照 Lov組比較無顯著性差異 (P<0.05).同時,其與 PNS(B)配伍組也表現(xiàn)出較好的改善效果.TC/HDL-C為評判 AS危險關鍵指數(shù).由表 3可看出,各給藥組與高脂組 TC/HDL-C指數(shù)均有極顯著性差異 (P<0.01),且黃芪組降低 TC/HDL-C系數(shù)優(yōu)于 PNS及配伍組,這說明黃芪乙酸乙酯提取物與PNS配伍組對AS有較好的改善作用.

表3 黃芪抗氧化部位對高脂飲食鵪鶉血脂四項含量的影響(x—±s,n=10)Table 3 Effects of an tiox idan t par t of Astragali Radix and its com b ination w ith PNS on blood lip ids and cholesterol in exper imental atherosclerosis quails(x—±s,n=10)mmol·L-1

2.4 黃芪抗氧化組分及其配伍對高脂飲食鵪鶉血清 T-AOC,SOD及MDA含量的影響

灌胃給藥 8周后,高脂模型組鵪鶉血清 T-AOC,SOD較對照組明顯降低 (P<0.01),而MDA含量顯著升高 (P<0.01).各給藥組與高脂組比較,血清 TAOC,SOD活力明顯升高,同時MDA含量降低,有顯著性差異(P<0.01),這說明黃芪抗氧化部位組分及其與 PNS的配伍組分可提高機體抗氧化能力,抑制過氧化,具體如表 4所示.

表 4 PNS對高脂飲食鵪鶉血清 T-AOC,SOD及MDA含量的影響(x—±s,n=10)Table 4 Effects of antioxidant par t of Astragali Radix and its com bination w ith PNS on serum T-AOC,SOD,MDA in exper imental atherosclerosis quails(x—±s,n=10)

3 結(jié) 束 語

通過喂食高脂、高膽固醇飼料,成功誘導鵪鶉AS病變,各指標顯示造模成功;同時以黃芪抗氧化活性提取物及其與 PNS配伍組分通過灌胃給藥,進行藥物干涉治療.結(jié)果表明,各給定藥物能有效調(diào)節(jié)血脂,抑制 AS的發(fā)生與發(fā)展,主要表現(xiàn)為降低血清TC,TG,LDL-C含量,升高 HDL-C水平及 TC/HDL-C的比值;同時血清 T-AOC,SOD顯著升高,血清MDA顯著降低,這表明其抗氧化活性成分能夠保護機體免受氧化損傷.

黃芪抗氧化部位提取物對于高脂、高膽固醇鵪鶉動脈粥樣硬化具有很好的改善作用.但其抗氧化活性部位提取率低,故仍需進一步研究其延緩AS發(fā)展、抵抗 AS損傷的機制,以提高其利用率.

[1] HARKEW ICZ R,HARTV IGSEN K,ALMAZAN F,et al.Cholesteryl ester hydroperoxides are biologically active components of minimally oxidized low density lipop rotein[J].Biol Chem,2008,283(16):10241-10251.

[2] JACOB R F,MASON R P.Lipid peroxidation induces cholesterol domain formation in model membranes[J].Biol Chem,2005,280(47):39380-39387.

[3] KNEKT P,RITZ J,PEREIRA M A,et al.Antioxidant vitamins and coronary heart disease risk: a pooled analysisof 9 cohorts[J].American Journal of Clinical Nutrition,2004,80(6):1508-1520.

[4] LAU F C,SHUKIT H B,JOSEPH J A.The beneficial effects of fruitpolyphenolson brain aging[J].Neurobiol Aging,2005,26(1):128-132.

[5] ZHANG H G,L I X H,YANG Z C.Effects of Panax notoginseng saponins on myocardial GsαmRNA expression and ATPase activity after severe scald in rats[J].Burns,2003,29(6):541-645.

[6] 江蘇新醫(yī)學院.中藥大辭典 (下冊)[M].上海:上?？茖W技術出版社,1999:4151-4153.

[7] 顧衛(wèi)紅.中藥對藥的配伍法則淺析 [J].中醫(yī)藥學刊,2005,23(5):915-916.

[8] 王巍,景厚德.鵪鵓動脈粥樣硬化模型的建立 [J].中華心血管雜志,1984,12(3):222-224.

[9] 唐曉旭.血脂檢測的臨床意義淺識[J].實用中醫(yī)內(nèi)科雜志,2008,22(4):62.

[10] 房利民.血脂檢測對于冠心病患者的臨床應用價值[J].臨床和實驗醫(yī)學雜志,2008,7(2):80-82.

(編輯:劉志強)

Effects of An tiox idant Par t of Astragali Radix and Its Com bination w ith Panax notoginseng sapon in s on Atherosclerosis

XU Jiang-bo, WANG Tuo, WENG Xin-chu
(School of Life Sciences,ShanghaiUniversity,Shanghai 200444,China)

R 965.1

A

1007-2861(2010)03-0327-04

10.3969/j.issn.1007-2861.2010.03.022

2009-01-03

翁新楚 (1962～),男,教授,博士生導師,研究方向為脂類化學.E-mail:wxch@staff.shu.edu.cn