QD滴丸的制備及體外溶出度研究

許浚，張鐵軍，龔蘇曉

(天津藥物研究院，天津 300193)

QD滴丸的制備及體外溶出度研究

許浚，張鐵軍*，龔蘇曉

(天津藥物研究院，天津 300193)

QD滴丸;制備工藝;溶出度;高效液相色譜法

目的:研究QD滴丸的最佳處方和制備工藝，并建立其體外溶出度的檢測(cè)方法。方法:采用正交試驗(yàn)法考察了滴丸成型的影響因素，并采用漿法，以水為溶出介質(zhì)，用HPLC法測(cè)定丹參酚酸B的溶出度。結(jié)果:藥物∶基質(zhì)質(zhì)量比1∶2、物料溫度80℃、冷卻溫度10℃、滴速為每分鐘30滴，制成的滴丸表面光滑，質(zhì)地軟硬適中，成型率高;且3批QD滴丸10 min溶出度均大于80%，15 min基本溶出完全。結(jié)論:工藝合理，成品率高，質(zhì)量可控性好。

天津藥物研究院研制的QD滴丸是以丹參酚酸B等中藥有效成分為主的有效部位復(fù)方新藥，用于治療冠心病和心絞痛。滴丸劑中藥物呈分子、膠體或晶體狀態(tài)分散于滴丸基質(zhì)中，不僅增大了總表面積，而且因其基質(zhì)為水溶性，有利于藥物在人體內(nèi)的溶解和吸收，具有溶解快、吸收好、生物利用度高等特點(diǎn)。

溶出度試驗(yàn)是一種模擬藥物在體內(nèi)崩解、溶解的體外簡(jiǎn)易的試驗(yàn)方法，由于其與藥物的生物利用度之間存在一定的相關(guān)性而受到人們的廣泛關(guān)注，現(xiàn)已成為固體制劑質(zhì)量控制的一個(gè)重要指標(biāo)。本文以主要有效成分丹參酚酸B為溶出指標(biāo)，采用HPLC定量，漿法測(cè)其體外溶出度，探討該藥的體外釋藥特點(diǎn)和規(guī)律，為制定質(zhì)量控制標(biāo)準(zhǔn)提供依據(jù)。

1 儀器與試藥

滴丸裝置(自制);ZRS－8G型智能溶出試驗(yàn)儀(天津天大天發(fā)科技有限公司);Agilent1100高效液相色譜儀;AB204－N型電子分析天平(METTLER TOLEDO)。聚乙二醇6000和聚乙二醇4000(遼陽(yáng)華興化學(xué)品有限公司);液體石蠟(天津天河化學(xué)試劑廠);丹參酚酸B對(duì)照品(中國(guó)藥品生物制品檢定所);QD滴丸(自制，批號(hào)051207、051219、060113);甲醇、乙腈為色譜純，其余試劑為分析純。

2 方法與結(jié)果

2.1 滴丸制備工藝研究

2.1.1 滴丸制備方法將基質(zhì)置水浴上加熱80℃熔融，加入藥物，攪拌均勻，保溫狀態(tài)下倒入滴丸裝置中，以適宜的滴速滴入互不相溶的冷卻劑中，冷卻固化成丸，取出，除去冷卻劑，擦干，即得。

評(píng)價(jià)指標(biāo):硬度:由硬至軟分為1～5級(jí)(手按，由多人獨(dú)自評(píng)分，取平均值);圓整度:由圓到不圓分為1～5級(jí)(用滴丸最短徑/最長(zhǎng)徑來(lái)表示，比值在0.95以上為5分，在0.9～0.95之間為4分，在0.85～0.9之間為3分，在0.8～0.85之間為2分，在0.8以下為1分);拖尾情況由好到差分為1～5分。

2.1.2 基質(zhì)的選擇取藥物1份，與2份不同比例的PEG4000或PEG6000進(jìn)行混合，其他條件固定(滴制溫度為80～90℃，滴距4 cm，冷卻劑溫度為10～15℃，冷卻柱長(zhǎng)度為80 cm)。結(jié)果見(jiàn)表1。

表1 不同基質(zhì)比例對(duì)滴丸成型的影響

由試驗(yàn)可知，用PEG6000做載體時(shí)，藥液黏度大，滴制困難，用PEG4000做載體時(shí)，滴丸硬度和圓整度都較差。選用PEG4000∶PEG6000質(zhì)量比為1∶3作為基質(zhì)可以提高滴丸成型質(zhì)量。

2.1.3 冷卻劑的選擇經(jīng)預(yù)試驗(yàn)，以冰浴冷卻的液狀石蠟為冷卻劑即能滿(mǎn)足本試驗(yàn)的要求。

2.1.4 正交試驗(yàn)法研究滴丸成型工藝根據(jù)預(yù)試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)本品滴丸的藥物與基質(zhì)(PEG 6000)的比例、藥液溫度、冷凝劑溫度選用正交試驗(yàn)設(shè)計(jì)L9(34)(見(jiàn)表2)，對(duì)滴丸的外觀質(zhì)量進(jìn)行綜合評(píng)分。試驗(yàn)結(jié)果見(jiàn)表3。

表2 因素水平表

表3 L9(34)正交試驗(yàn)及結(jié)果

由直觀分析可知，A、B、C、D四因素對(duì)滴丸成型的影響大小為A＞B=D＞C，A因素對(duì)滴丸成型效果的影響較大。優(yōu)選出滴制滴丸的最佳工藝條件是:A2B2C2D1，即藥物與基質(zhì)的質(zhì)量比為1∶2，料溫為80℃，冷卻劑溫度為10℃，滴速30 d/min。

2.1.5 驗(yàn)證試驗(yàn)根據(jù)上述確定工藝，制備3批產(chǎn)品，經(jīng)外觀、丸重差異、溶散時(shí)限考察，均符合要求，結(jié)果見(jiàn)表4。

表4 驗(yàn)證試驗(yàn)結(jié)果

2.2 丹參酚酸B含量測(cè)定方法

2.2.1 色譜條件［1］采用Dikma C18(200 mm×4.6 mm，5 μm)色譜柱;甲醇－乙腈－水－甲酸(30∶10∶59∶1)為流動(dòng)相;檢測(cè)波長(zhǎng)為286 nm;柱溫35℃。理論板數(shù)按丹參酚酸B峰計(jì)算應(yīng)不低于2 000，丹參酚酸B峰與雜質(zhì)峰的分離度不小于1.5。

2.2.2 對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取丹參酚酸B對(duì)照品適量，加入75%甲醇制成每1 mL含0.10 mg的溶液，搖勻，即得。

2.2.3 供試品溶液的制備取本品2丸，精密稱(chēng)定，置50 mL量瓶中，加蒸餾水約25 mL，超聲處理5 min，放冷，加蒸餾水至刻度，搖勻，即得。

2.2.4 測(cè)定法分別吸取對(duì)照品溶液和供試品溶液各10 μL，注入液相色譜儀，記錄色譜圖，計(jì)算含量。色譜圖見(jiàn)圖1。

圖1 丹參酚酸B對(duì)照品(A)和QD滴丸(B)HPLC圖譜

2.2.5 線性關(guān)系考察分別精密吸取丹參酚酸B對(duì)照品溶液(0.109 mg/mL)2、5、10、15、20和25 μL，注入液相色譜儀，測(cè)得丹參酚酸B的峰面積，以進(jìn)樣量為橫坐標(biāo)，峰面積為縱坐標(biāo)，作線性回歸，回歸方程為:Y=1 224.7X+18.389，相關(guān)系數(shù);r=0.999 8。結(jié)果表明:在進(jìn)樣量為0.22～2.73 μg之間，呈良好的線性關(guān)系。

2.2.6 精密度考察取供試品溶液，連續(xù)進(jìn)樣6次，依法測(cè)定，記錄丹參酚酸B色譜峰面積，結(jié)果表明:供試品峰面積RSD為0.27%，精密度良好。

2.2.7 穩(wěn)定性考察取供試品溶液，放置0、2、4、6、8、12 h分別進(jìn)樣1次，依法測(cè)定，記錄丹參酚酸B色譜峰面積，結(jié)果表明:供試品峰面積RSD為0.26%，供試品溶液室溫放置12 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.2.8 重復(fù)性考察取供試品，精密稱(chēng)取本品6份，按供試品溶液制備方法制備，依法測(cè)定，記錄丹參酚酸B色譜峰面積，計(jì)算制劑中丹參酚酸B的含量，結(jié)果表明:本方法RSD為1.25%，重現(xiàn)性良好。

2.2.9 加樣回收率試驗(yàn)取供試品9份，每份1粒滴丸，精密稱(chēng)定，各取3份分別加入相當(dāng)于供試品含量80%、100%和120%3種濃度的丹參酚酸B對(duì)照品溶液，按供試品溶液制備方法制備，依法測(cè)定，記錄丹參酚酸B色譜峰面積，計(jì)算制劑中丹參酚酸B的含量，結(jié)果表明，本方法平均回收率為100.13%，RSD(n=9)為0.68%，回收率符合要求。

2.3 溶出度的研究

2.3.1 溶出介質(zhì)考察按《中國(guó)藥典》2005年版二部附錄XC溶出度測(cè)定法項(xiàng)下第二法(大杯法)操作。

分別以脫氣的蒸餾水或0.1 mol/L鹽酸900 mL為溶出介質(zhì)，每杯中放入本品8丸，溫度控制在37.0℃±0.5℃，轉(zhuǎn)速100 r/min，供試品進(jìn)入釋放池瞬間開(kāi)始計(jì)時(shí)，分別在2、4、7、10、15、25 min時(shí)取樣5 mL(同時(shí)補(bǔ)充等體積相同溫度的溶出介質(zhì))，立即濾過(guò)，取續(xù)濾液進(jìn)樣，測(cè)定丹參酚酸B含量，并計(jì)算相對(duì)累積溶出百分率，即得。以取樣時(shí)間點(diǎn)為橫坐標(biāo)，丹參酚酸B累積溶出百分率為縱坐標(biāo)作圖得溶出曲線，結(jié)果見(jiàn)圖2。

圖2 不同溶出介質(zhì)對(duì)丹參酚酸B溶出度的影響

結(jié)果表明，蒸餾水中丹參酚酸B的溶出量遠(yuǎn)大于0.1 mol/L鹽酸溶液，因此選擇蒸餾水作為溶出介質(zhì)。

2.3.2 轉(zhuǎn)速考察按《中國(guó)藥典》2005年版二部附錄XC溶出度測(cè)定法項(xiàng)下第二法(大杯法)操作。以脫氣的蒸餾水900 mL為溶出介質(zhì)，分別以轉(zhuǎn)速100 r/min和50 r/min進(jìn)行試驗(yàn)，操作同上，以取樣時(shí)間點(diǎn)為橫坐標(biāo)，丹參酚酸B累積溶出百分率為縱坐標(biāo)作圖得溶出曲線，結(jié)果見(jiàn)圖3。

圖3 不同轉(zhuǎn)速下丹參酚酸B溶出度曲線

結(jié)果表明，轉(zhuǎn)速為50 r/min溶出效果與100 r/min相似，故選擇50 r/min為測(cè)定轉(zhuǎn)速。

2.3.3 3批制劑溶出度測(cè)定按《中國(guó)藥典》2005年版二部附錄XC溶出度測(cè)定法項(xiàng)下第二法(大杯法)操作。

分別取本品各批樣品8丸，以脫氣的蒸餾水900 mL為溶出介質(zhì)，溫度控制在(37.0±0.5)℃，轉(zhuǎn)速50 r/min，供試品進(jìn)入釋放池瞬間開(kāi)始計(jì)時(shí)，分別在2、4、7、10、15、25 min時(shí)取樣5 mL(同時(shí)補(bǔ)充等體積相同溫度的溶出介質(zhì))，立即過(guò)濾，取續(xù)濾液進(jìn)樣，測(cè)定丹參酚酸B含量，并計(jì)算相對(duì)累積溶出百分率。以取樣時(shí)間點(diǎn)為橫坐標(biāo)，丹參酚酸B累積溶出百分率為縱坐標(biāo)作圖得溶出曲線，結(jié)果見(jiàn)圖4。

結(jié)果表明，本品10 min時(shí)溶出超過(guò)80%，15 min溶出基本完全。

圖4 3批制劑的溶出度曲線

2.3.4 溶出度參數(shù)提?。?］根據(jù)表1中的數(shù)據(jù)，進(jìn)行溶出模型擬合，采用威布爾分布(Weibull)進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，求得3批制劑的溶出參數(shù)T50、Td和m，結(jié)果見(jiàn)表5。

表5 3批QD滴丸溶出參數(shù)結(jié)果(n=6)

3 討論

3.1 滴丸的成型和質(zhì)量受多種因素的相互影響，例如影響滴丸圓整度的因素主要有滴頭與冷凝液的距離、液滴在冷凝液中移動(dòng)的速度、冷凝柱長(zhǎng)度、液滴的大小，影響滴丸重量差異的因素主要有保溫溫度、液滴的滴速、儲(chǔ)液筒內(nèi)料液量等，因此在優(yōu)選滴丸制備工藝時(shí)，難于用某一個(gè)指標(biāo)來(lái)衡量，本文采用滴丸的硬度、圓整度、拖尾指標(biāo)綜合評(píng)定工藝的優(yōu)劣，結(jié)果更可靠合理。

3.2 實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)，藥物以稠浸膏形式加入，與基質(zhì)混合困難，隨著保溫時(shí)間的延長(zhǎng)，還會(huì)產(chǎn)生較硬的顆粒裝沉淀物堵塞滴頭，加吐溫－80和水也無(wú)法改善，而以干膏粉形式加入即可與基質(zhì)混勻，物料放置也很穩(wěn)定，滴制的成品外觀圓整。另藥物與基質(zhì)混勻時(shí)，干膏粉的粒度對(duì)滴丸的外觀質(zhì)量也有顯著影響，干膏粉過(guò)100目以上篩，可使成品顏色均勻、外表光滑。

3.3 本試驗(yàn)以丹參酚酸B為指標(biāo)，采用高效液相色譜法建立了QD滴丸的體外溶出度的檢測(cè)方法。在溶出介質(zhì)的選擇試驗(yàn)中，筆者分別考察了QD滴丸在蒸餾水和0.1 mol/L鹽酸溶液的溶出度，其中0.1 mol/L鹽酸溶液中的溶出度小于30%，可能是由于丹參酚酸B在酸性溶液中呈游離的分子狀態(tài)，在水溶液中的溶解度較低所致。

［1］中國(guó)藥典［S］.一部.2005:52.

［2］張莉.用電子表格Excel計(jì)算藥物溶出度Weibull分布參數(shù)［J］.藥學(xué)進(jìn)展，2002，26(1):48－49.

R944 文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼:A 文章編號(hào):1001－1528(2010)06－0943－04

2009－06－05

“十一五”國(guó)家科技支撐計(jì)劃資助項(xiàng)目(2006BAI06A01和2007BAI41B06)

許浚(1976－)，男，助理研究員，從事中藥新藥開(kāi)發(fā)研究。Tel:(022)23003935 E－mail:xujuntj@163.com*通訊作者:張鐵軍。Tel:(022)23006848 E－mail:tiezheng4@sina.com