乙肝產(chǎn)婦乳汁血清HBV-DNA相關(guān)性分析

鐘偉明，何浩瑜

（廣西壯族自治區(qū)貴港市婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣西貴港 537100）

乙肝產(chǎn)婦乳汁血清HBV-DNA相關(guān)性分析

鐘偉明，何浩瑜

（廣西壯族自治區(qū)貴港市婦幼保健院檢驗(yàn)科，廣西貴港 537100）

目的：探討乙肝產(chǎn)婦乳汁中乙肝病毒標(biāo)志物（HBV-M）和HBV-DNA的關(guān)系，從而正確指導(dǎo)乙肝產(chǎn)婦產(chǎn)后母乳喂養(yǎng)。方法：采用時(shí)間分辨熒光免疫定量分析法（TRFIA）檢測(cè)乙肝產(chǎn)婦血清中的HBV-M，采用熒光定量PCR法（FQ-PCR）檢測(cè)血清及乳汁中HBV-DNA含量情況。結(jié)果：120例乙肝陽(yáng)性產(chǎn)婦大三陽(yáng)的血清與乳汁HBV-DNA陽(yáng)性檢出率為100%，二者HBV-DNA含量為最高，小三陽(yáng)組HBV-DNA陽(yáng)性率分別為87.2%和85.1%，HBsAg/HBcAb組的陽(yáng)性率分別為88.3%和86.0%，后兩組血清HBV-DNA含量分別為4.57×105和5.84×106copy/ml，乳汁HBV DNA分別為4.40×105和5.98×106copy/ml。結(jié)論：乙肝產(chǎn)婦產(chǎn)后能不能母乳喂養(yǎng)與產(chǎn)后產(chǎn)婦血清和初乳中HBV-DNA情況有關(guān)，根據(jù)檢測(cè)結(jié)果決定喂養(yǎng)方式，以保證分娩嬰兒的安全哺乳環(huán)境。

乙肝病毒標(biāo)志物；HBV-DNA；乳汁

乙型肝炎是世界上最常見的傳染病之一，母嬰乙肝病毒的傳播途徑為胎盤傳播感染，分娩時(shí)經(jīng)產(chǎn)道被感染或產(chǎn)后哺乳感染及母嬰的密切接觸感染[1-2]。了解乙肝表面抗原（HB-sAg）陽(yáng)性乳汁中的HBV-DNA含量，有利于指導(dǎo)母乳喂養(yǎng)。

1 資料與方法

1．1 一般資料

收集2006年5月～2008年6月檢測(cè)HBsAg陽(yáng)性并在本院分娩的產(chǎn)婦120例，年齡20～35歲；健康產(chǎn)婦對(duì)照20例，是本院同期住院患者，年齡21～36歲。

1．2 標(biāo)本采集

血液標(biāo)本：采用無(wú)菌操作技術(shù)采集產(chǎn)后2～7 d內(nèi)產(chǎn)婦血液3 ml，置干燥試管中，3 000 r/min，離心 5 min，取血清；乳汁采集：產(chǎn)婦乳頭用無(wú)菌0.9%NaCl溶液消毒后，用無(wú)菌干燥試管留取乳汁3～4 ml，3 000 r/min，離心15 min，取上清液檢測(cè)。

1．3 檢測(cè)方法

TRFIA 法 進(jìn) 行 HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb 5項(xiàng)HBV標(biāo)志物指標(biāo)定量檢測(cè)。儀器與試劑為上海新波生物技術(shù)有限公司提供的SYM-B10型時(shí)間分辨熒光免疫分析儀及配套試劑，操作嚴(yán)格按試劑說(shuō)明書，結(jié)果判斷：HBsAg≥0.5 ng/ml，HBsAb≥10 mIU，HBeAg≥0.03 NCU/ml，HBeAb≥1.5 NCU/ml，HBcAb≥0.1 NCU/ml為陽(yáng)性。HBV-DNA 定量使用美國(guó)ABI公司PE5700自動(dòng)熒光PCR擴(kuò)增儀，試劑盒由中山醫(yī)科大學(xué)達(dá)安基因診斷中心提供，操作嚴(yán)格按說(shuō)明書，臨界陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品 1.0×103copy/ml，強(qiáng)陽(yáng)性標(biāo)準(zhǔn)品為 1.0×108copy/ml。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

HBV-DNA定量結(jié)果用求對(duì)數(shù)平均值的方法來(lái)計(jì)算HBV-DNA平均拷貝數(shù)，陰性結(jié)果不參加平均值的統(tǒng)計(jì)，采用SPSS 11.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行t檢驗(yàn)。

2 結(jié)果

對(duì)照組20例健康產(chǎn)婦的HBV-DNA含量和乙肝標(biāo)志物的檢測(cè)結(jié)果均為陰性，120例產(chǎn)婦血清乙肝陽(yáng)性產(chǎn)婦HBsAg(+)，HBeAg(+)，HBcAb(+)(大三陽(yáng))30 例，占 25%，HBsAg(+)，HBeAb(+)，HBcAb(+)(小三陽(yáng))47 例，占 39.2%，HBsAg(+)，HB-cAb(+)43例，占35.8%。120例產(chǎn)婦血清與乳汁HBV DNA檢測(cè)結(jié)果見表1。

表1 120例產(chǎn)婦血清與乳汁HBV-DNA結(jié)果和陽(yáng)性率比較

120例乙肝陽(yáng)性產(chǎn)婦大三陽(yáng)的血清與乳汁HBV-DNA陽(yáng)性檢出率為100%，二者HBV-DNA含量為最高，小三陽(yáng)組HBV-DNA陽(yáng)性率分別為87.2%和85.1%，HBsAg/HBcAb組的陽(yáng)性率分別為88.4%和86.0%，后兩組血清HBV-DNA含量分別為 4.57×105和 5.84×106copy/ml，乳汁 HBV-DNA 分別為 4.40×105和 5.98×106，兩組相比，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P<0.01），乳汁HBV-DNA含量與血清HBV-DNA含量正相關(guān)（r=0.921）。

3討論

眾所周知，母乳喂養(yǎng)嬰兒是最好的喂養(yǎng)方式，母乳成分是嬰兒最佳營(yíng)養(yǎng)品，母嬰密切接觸有利于母嬰的身心健康。乙肝病毒攜帶者母乳傳播問(wèn)題一直是醫(yī)務(wù)人員比較關(guān)注的重要問(wèn)題之一，關(guān)于乙肝病毒標(biāo)志物陽(yáng)性產(chǎn)婦能否進(jìn)行母乳喂養(yǎng)一直有爭(zhēng)議。母嬰傳播是乙肝病毒感染流行的重要途徑之一，約占HBV感染的1/3，新生兒感染HBV，則將有90%可轉(zhuǎn)變?yōu)槁訦BsAg攜帶者，因此乙肝的傳播已成為影響人口素質(zhì)的重要問(wèn)題[3]。

從120例乙肝產(chǎn)婦的乳汁HBV-DNA檢測(cè)中，血清HBV陽(yáng)性的母親，其乳汁可能存在HBV-DNA。HBV攜帶者產(chǎn)婦乳汁和血清中HBV-DNA差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），血中HBeAg陽(yáng)性產(chǎn)婦其初乳中HBV-DNA含量更高[4]，本文也說(shuō)明這一點(diǎn)。從檢測(cè)結(jié)果來(lái)看，乙肝產(chǎn)婦乳汁HBV-DNA含量，大三陽(yáng)組>HBsAg/HBcAb+組>小三陽(yáng)組，乳汁和血清HBV-DNA含量呈正相關(guān)；血清大三陽(yáng)產(chǎn)婦的乳汁HBV-DNA含量最高，檢出率為100%。大量資料表明，血清中HBeAg陽(yáng)性率與HBV-DNA陽(yáng)性率之間有較好的相關(guān)性，HBeAg能基本反映HBV在體內(nèi)的復(fù)制狀態(tài)[5]。血HBeAg陽(yáng)性產(chǎn)婦具有較大的潛在危險(xiǎn)性，HBV-DNA是HBV的遺傳物質(zhì)，是病毒復(fù)制的指標(biāo)之一[6]。HBV-DNA定量測(cè)定的意義是判斷HBV感染者病毒復(fù)制的水平，關(guān)于血液循環(huán)中HBV-DNA濃度與患者傳染性之間的關(guān)系，通常血漿HBV-DNA濃度大于109copy/ml則日常生活中密切接觸中具有較強(qiáng)的傳染性，105～106copy/ml生活中密切接觸中傳染性較小，小于105copy/ml則日常生活中密切接觸幾乎無(wú)傳染性[7]。

結(jié)果表明HBeAg陽(yáng)性產(chǎn)婦體內(nèi)HBV處于復(fù)制活躍期，傳染性大，建議采取人工喂養(yǎng)。

血HBeAg陰性的HBV攜帶產(chǎn)婦不能排除HBV通過(guò)乳汁傳播的可能[8]。本實(shí)驗(yàn)對(duì)其中47例HBeAg陰性HBV攜帶產(chǎn)婦乳汁HBV-DNA檢測(cè)時(shí)發(fā)現(xiàn)，有85.1%HBV-DNA檢出率。血HBeAg陰性產(chǎn)婦HBV攜帶者母乳喂養(yǎng)應(yīng)慎重。

筆者認(rèn)為產(chǎn)婦HBV攜帶者母乳喂養(yǎng)應(yīng)慎重，較理想的方法是HBV感染者在婚前、孕期在醫(yī)生指導(dǎo)下做相關(guān)檢查，根據(jù)需要采取一些防御措施，如妊娠晚期是否需要注射高效乙肝免疫球蛋白，盡量防止或減少母嬰間的垂直傳播，給將分娩的嬰兒一個(gè)安全的哺乳環(huán)境。

[1]李甲芬.HBV標(biāo)志物陽(yáng)性者產(chǎn)婦乳汁HBV DNA檢測(cè)[J].臨床檢驗(yàn)雜志,2005,23(2):119.

[2]隋愛(ài)華,劉相萍,楊堃.乙肝血清學(xué)陽(yáng)性產(chǎn)婦乳汁中HBV DNA檢測(cè)的意義[J].實(shí)用醫(yī)藥雜志,2008,25(11):1329.

[3]林瑞珠.新生兒注射滅活乙肝疫苗的效果評(píng)價(jià)[J].廣東醫(yī)學(xué),2004,25(1):106.

[4]吳岷岷,唐引榮,郭彩玉,等.采用阻斷措施的乙型肝炎病毒攜帶產(chǎn)婦哺乳結(jié)果的觀察[J].中華婦產(chǎn)科雜志,2002,37(4):235.

[5]洪艷華.乳汁乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)的臨床意義[J].臨床和實(shí)驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2007,6(2):92.

[6]陸德源.微生物學(xué)[M].5版.北京:人民衛(wèi)生出版社,2002:289-293.

[7]李金明.實(shí)時(shí)熒光PCR技術(shù)北京[M].北京:人民軍醫(yī)出版社,2007:198.

[8]吳曉蔓,馮秀蘭,周利純.乙肝病毒攜帶產(chǎn)婦乳汁、唾液乙肝病毒標(biāo)志物檢測(cè)結(jié)果分析[J].中國(guó)婦幼保健,2009，24(8):1037.

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1674-4721（2010）09（b）-077-02

2010-06-21)