• <tr id="yyy80"></tr>
  • <sup id="yyy80"></sup>
  • <tfoot id="yyy80"><noscript id="yyy80"></noscript></tfoot>
  • 99热精品在线国产_美女午夜性视频免费_国产精品国产高清国产av_av欧美777_自拍偷自拍亚洲精品老妇_亚洲熟女精品中文字幕_www日本黄色视频网_国产精品野战在线观看 ?

    黑龍江省和吉林省馬鈴薯晚疫病菌multi-locus基因型分析

    2010-04-16 06:32:50張鉉哲徐生軍
    中國馬鈴薯 2010年2期
    關(guān)鍵詞:同工酶晚疫病交配

    張鉉哲,徐生軍

    (東北農(nóng)業(yè)大學(xué)農(nóng)學(xué)院,黑龍江 哈爾濱 150030)

    由卵菌致病疫霉[Phytophthora infestans(Mont.) de Bary]引起的馬鈴薯晚疫病是馬鈴薯生產(chǎn)中最嚴(yán)重的病害之一[1],在我國各地均有發(fā)生。到 1980年為止,只有墨西哥中部同時存在A1和A2兩種交配型[2],除墨西哥以外的其它地區(qū)只發(fā)生A1交配型,因此世界各地的病菌群體組成比較單一。然而1984年在瑞士首次發(fā)現(xiàn)A2交配型后[3],在世界各地陸續(xù)出現(xiàn)了A2交配型。在國內(nèi),1996年張志銘等[4]首次報道了在內(nèi)蒙發(fā)現(xiàn)A2交配型,之后在我國各馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)陸續(xù)報道了A2交配型的存在。據(jù)Goodwin等[5]的報道,由于有性生殖的出現(xiàn),太平洋沿岸晚疫病菌的種群發(fā)生了顯著變異。因?yàn)镻.infestans的線粒體DNA多態(tài)性是容易測定而且單親本遺傳的,所以它廣泛利用于鑒定病原菌群體的遺傳多態(tài)性研究[6]。Ghimire等[7]在尼泊爾通過交配型、RG57指紋和mtDNA單倍型的分析發(fā)現(xiàn)了11種新基因型。在韓國,Zhang等[8]利用3種分子標(biāo)記測定了P.infestans的遺傳多樣性,并發(fā)現(xiàn)了4種同工酶基因型,一種線粒體DNA單倍型(Ⅱa)和8個RAPD類群。Gotoh等[9]通過RG 57指紋,mtDNA單倍型,兩種Allozyme基因型和交配型的分析,在日本發(fā)現(xiàn)了4種新的基因型。Zwankhuizen等[10]報道 1993~1996年在荷蘭分離的1 048個菌株中發(fā)現(xiàn)了170個新遺傳型,其中 138個是很罕見的。在中國,趙志堅等[11]利用線粒體DNA單倍型測定了 P.infestans菌株的遺傳多樣性。Zhu等[12]用篩選出的10個RAPD隨機(jī)引物對1997~2001年間采自我國9省市的82株及3株來自日本的致病疫霉DNA進(jìn)行了PCR擴(kuò)增,得出RAPD組群與菌株的地理來源、交配型及對瑞毒霉的敏感性無明顯相關(guān)性。

    上述研究說明,在中國缺乏對晚疫病菌multilocus基因型的分析,因此本研究利用交配型、瑞毒霉敏感性、同工酶基因型和線粒體DNA單倍型系統(tǒng)分析黑龍江省和吉林省分離的馬鈴薯晚疫病菌的表現(xiàn)型和基因型。

    1 材料與方法

    1.1 供試培養(yǎng)基

    番茄培養(yǎng)基:800 mL蒸餾水,200 mL番茄汁,20 g瓊脂,4.5 g碳酸鈣。

    選擇性培養(yǎng)基:番茄培養(yǎng)基+(氨芐青霉素500 mg·L-1,利福平50 mg·L-1,萬古霉素200 mg·L-1,匹馬霉素 100 mg·L-1,PCNB 35 mg·L-1,苯菌靈10 mg·L-1)。

    1.2 病原菌分離

    2006~2008年,在吉林省龍井市和黑龍江省的各馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)采集具有單病斑的馬鈴薯病葉。為了病原菌分離,首先把病葉背面朝上放置在滅菌的培養(yǎng)皿,然后其上面再放0.5 cm厚的薯片。封蓋后將培養(yǎng)皿放在22℃黑暗培養(yǎng)箱內(nèi),培養(yǎng)3~5d后將從薯片上長出來的菌絲轉(zhuǎn)移到選擇性培養(yǎng)基。

    1.3 交配型和瑞毒霉敏感性分析

    為了測定交配型的分布,利用已知交配型的標(biāo)準(zhǔn)菌株DN-3085(日本,A1)和BC-3(韓國,A2)。首先把未知交配型菌株的菌餅(直徑為7 mm)放在番茄汁瓊脂培養(yǎng)基中央,然后兩邊以3 cm距離放DN-3085(A1)和BC-3(A2)的菌餅(直徑為7 mm)。封蓋后將培養(yǎng)皿放在22℃,黑暗培養(yǎng)箱內(nèi),培養(yǎng)10~15 d。用顯微鏡檢查兩菌落交界處是否有卵孢子。本試驗(yàn)中利用Zhang等[13]的方法測定馬鈴薯晚疫病菌對瑞毒霉的敏感性。

    1.4 同工酶基因型分析

    為了分析2006~2008年分離的馬鈴薯晚疫病菌菌株的同工酶基因型,利用兩個同工酶位點(diǎn)6-磷酸葡萄糖異構(gòu)酶(Gpi)和肽酶(Pep)。利用纖維素醋酸鹽電泳測定同工酶基因型[9]。同工酶分析的菌絲利用番茄培養(yǎng)基培養(yǎng),菌絲裝入1.5 mL微量離心管中,加入液氮冷凍后用研磨棒研碎,然后加入100μL滅菌去離子水,在4℃下13000rpm·min-1離心5 min,上清液就是酶液。利用 Goodwin等[5]報道的方法進(jìn)行Gpi和Pep電泳。利用瓊脂覆蓋法完成同工酶Gpi和Pep的染色。

    1.5 基因組DNA提取

    利用番茄液體培養(yǎng)基培養(yǎng)2006~2008年分離的馬鈴薯晚疫病菌菌株獲得菌絲,菌絲保存在-80℃冰箱。采用Goodwin等[14]報道的方法,微作改動,提取馬鈴薯晚疫病菌基因組DNA。

    1.6 線粒體DNA(mtDNA)單倍型分析

    利用Griffith和Shaw[15]報道的PCR-RFLP方法測定馬鈴薯晚疫病菌mtDNA單倍型,并設(shè)計4對引物組合(表1)。PCR擴(kuò)增反應(yīng)物由200 μM的各種dNTP,0.34 mM引物,1×緩沖液(20 mM KCl,20 mM Tris-HCl,pH 8.4,2 mM MgCl2,10 mM(NH4)2SO4,0.5 μL(1 U)的Taq DNA polymerase和20 ng的基因組DNA,最終把擴(kuò)增反應(yīng)物容量調(diào)至25 μL。PCR擴(kuò)增程序?yàn)椋?4℃預(yù)變性90 s,94℃變性40 s,55℃退火60 s,72℃延伸90 s,40個循環(huán),最終72℃下延伸120s。利用3種內(nèi)切酶CfoⅠ、MspⅠ和EcoRⅠ把5 μL的擴(kuò)增DNA切斷4 h以上(37℃條件下)。

    表1 試驗(yàn)中用于馬鈴薯晚疫病菌線粒體DNA單倍型測定的寡核苷酸引物Table 1 Oligonucleotide primers used to investigate mitochondrial DNA haplotypes of Phytophthors infestans

    2 結(jié)果與分析

    2.1 馬鈴薯晚疫病菌交配型和瑞毒霉抗藥性的分析

    從2006年到2008年在黑龍江省和吉林省共分離了99個馬鈴薯晚疫病菌,其中2006年和2008年在黑龍江省哈爾濱市、齊齊哈爾市、牡丹江市和佳木斯市共分離了83個菌株,2007年在吉林省龍井市分離了16個菌株(表2)。

    為了表明本試驗(yàn)中使用的馬鈴薯晚疫病菌的生物學(xué)特性,分析了交配型和瑞毒霉敏感性。交配型的測定結(jié)果顯示本試驗(yàn)中所使用的99個菌株是A1交配型,說明A1菌株是黑龍江省和吉林省存在的優(yōu)勢交配型。瑞毒霉敏感性測定結(jié)果顯示14個菌株是敏感性菌株(14.1%),7個菌株是中抗菌株(7.1%),78個菌株是抗性菌株(78.8%)(表2)。其中黑龍江省分離的菌株,瑞毒霉敏感性測定結(jié)果顯示11株(13.3%)敏感性菌株,2株(2.4%)中抗菌株,其余70株(84.3%)是抗性菌株,而吉林省分離菌株的瑞毒霉敏感性測定結(jié)果,敏感性菌株、中抗菌株和抗性菌株分別是3(18.8%)、5(31.2%)和8(50.0%)。以上結(jié)果顯示,黑龍江省發(fā)生的馬鈴薯晚疫病菌的瑞毒霉抗性明顯高于吉林省發(fā)生的菌株。

    2.2 晚疫病菌同工酶基因型和mtDNA單倍型分析

    為了分析馬鈴薯晚疫病菌的同工酶基因型,本研究使用了2006~2008年從不同地區(qū)分離的99個菌株。

    同工酶基因型的測定結(jié)果顯示99個致病疫霉菌株Gpi和Pep同工酶基因型譜帶為100/100、96/96;100/100、96/100;100/100、100/100三種類型,分別占被測菌株的3.0%、1.0%和96.0%。在Gpi位點(diǎn)上只發(fā)現(xiàn)1種基因型,而Pep位點(diǎn)上發(fā)現(xiàn)多種基因型,說明在Gpi位點(diǎn)是純合的。2006年在黑龍江省采集的馬鈴薯晚疫病菌株的Gpi和Pep同工酶基因型譜帶為100/100、100/100;2007年在吉林省分離的馬鈴薯晚疫病菌株的Gpi和Pep同工酶基因型譜帶為100/100、96/96和100/100、100/100,分別占2007年被測菌株的6.2%和93.8%;2008年在黑龍江省采集的馬鈴薯晚疫病菌株的Gpi和Pep同工酶基因型譜帶為100/100、96/96,100/100、96/100和100/100、100/100,分別占2008年被測菌株的3.1%、1.6%和95.3%。在所有采集地區(qū)都發(fā)現(xiàn)了同工酶基因型100/100、100/100,表明該基因型是黑龍江省和吉林省普遍存在的優(yōu)勢同工酶基因型。通過比較2006年和2008年采自黑龍江省馬鈴薯晚疫病菌的Gpi和Pep同工酶基因型,基因型逐步增加,表明在黑龍江省出現(xiàn)了“新”的基因型(表3)。

    表2 2006~2008年在黑龍江省和吉林省分離的馬鈴薯晚疫病菌的交配型和瑞毒霉敏感性的分析Table 2 The analysis of mating types and metalaxyl sensitivity of Phytophthora infestans isolates collected in Heilongjiang and Jilin Provinces from 2006 to 2008.

    本試驗(yàn)利用三種內(nèi)切酶和四種引物組合分析了99個馬鈴薯晚疫病菌的線粒體DNA基因型(圖1)。利用MspⅠ與P2引物組合和EcoRⅠ與P4引物組合分析了101個馬鈴薯晚疫病菌(包括2株標(biāo)準(zhǔn)菌株DN 3085的單游動孢子菌系:Ⅰb單倍型)的線粒體DNA單倍型。結(jié)果顯示所測定的99個菌株中共發(fā)現(xiàn)2種mtDNA單倍型,其中佳木斯分離的11個菌株是Ⅰa單倍型,吉林省龍井市、黑龍江省的哈爾濱市、牡丹江市和齊齊哈爾市分離的馬鈴薯晚疫病菌都顯示為Ⅱa單倍型(表3)。Ⅰa單倍型是在黑龍江省首次發(fā)現(xiàn)的新基因型。Ⅱa單倍型菌株是黑龍江省和吉林省存在的優(yōu)勢線粒體DNA單倍型。

    2.3 馬鈴薯晚疫病菌的multi-locus基因型分析

    圖1 利用3種內(nèi)切酶(CfoⅠ,MspⅠ,EcoRⅠ)分別酶切由4種引物[F1-R1(P1),F2-R2(P2),F3-R3(P3),F4-R4(P4)]組合擴(kuò)增后產(chǎn)生的線粒體DNA單倍型的圖譜Figure 1 Restriction enzyme digestion patterns of PCR products amplified from the DNA of Phytophthora infestans with the primer pairs of F1-R1(P1,cut with Cfo I),F2-R2(P2, cut with Msp I),F3-R3(P3,cut with EcoR I)and F4-R4(P4, cut with EcoR I).Amplifications were conducted with DNA from isolates representing each of the three mitochondrial DNA haplotypes(Ⅰa,Ⅰb andⅡa).Among the mtDNA haplotypes produced with each primer pair,left isⅠa haplotype,middle isⅠb haplotype and right isⅡa haplotype.

    表3 2006~2008年在黑龍江省和吉林省分離的馬鈴薯晚疫病菌的同工酶基因型和線粒體DNA單倍型的分析Table 3 The analysis of allozyme genotypes and mitochondrial DNA haplotypes of Phytophthora infestans isolates collected in Heilongjiang and Jilin Provinces from 2006 to 2008

    根據(jù)交配型、同工酶基因型和mtDNA單倍型,2006~2008年分離的菌株中發(fā)現(xiàn)了7種基因型,其中優(yōu)勢基因型是A(84.9%)。而基因型C和D只發(fā)生在單一地區(qū)(表4)。2006年和2008年哈爾濱市分離的58個菌株中共出現(xiàn)了2種基因型,其中優(yōu)勢基因型是A(96.6%)。2008年牡丹江市分離的12個菌株中共出現(xiàn)了2種基因型,其中優(yōu)勢基因型是A(91.7%)。2006年齊齊哈爾市分離的2個菌株中出現(xiàn)了1種基因型(A)。2008年佳木斯市分離的11個菌株中共發(fā)現(xiàn)了1種基因型(D)。2007年吉林省龍井市分離的16個菌株中共發(fā)現(xiàn)了2種基因型,其中優(yōu)勢基因型是A(93.8%)。黑龍江省分離的83個菌株中共發(fā)現(xiàn)了4種基因型,其中哈爾濱市和牡丹江市分離了2種基因型,反而在齊齊哈爾市和佳木斯市只發(fā)現(xiàn)了1種基因型。

    表4 2006~2008年在黑龍江省和吉林省分離的馬鈴薯晚疫病菌中基因型與分離地區(qū)之間相互關(guān)系Table 4 The correlation between multi-locus genotypes and isolated locations among the Phytophthora infestans isolates collected from Heilongjiang and Jilin Provinces from 2006 to 2008

    3 討論

    3.1 馬鈴薯晚疫病菌的交配型分布和瑞毒霉敏感性

    1996年張志銘等[4]首次報道了在內(nèi)蒙發(fā)現(xiàn)A2交配型,之后朱杰華等[16]在黑龍江省發(fā)現(xiàn)了A2交配型。通過對黑龍江省和吉林省2006~2008年分離純化出來的99個晚疫病菌株的交配型鑒定結(jié)果顯示,黑龍江省和吉林省還未出現(xiàn)馬鈴薯晚疫病菌A2交配型,這與朱小瓊等[17]和金光輝等[18]的報道一致。

    瑞毒霉在我國馬鈴薯晚疫病防治方面用藥歷史較長,因用藥水平、采樣地點(diǎn)及年份的差異,目前在中國各省份均已檢測到不同頻率的瑞毒霉抗性菌株[19],表明中國馬鈴薯主產(chǎn)區(qū)的晚疫病菌對瑞毒霉產(chǎn)生了嚴(yán)重的抗藥性。在黑龍江省和吉林省檢測到78.8%的抗性菌株,因此瑞毒霉在這些地區(qū)繼續(xù)使用只會對病菌群體造成藥劑選擇壓力,導(dǎo)致瑞毒霉敏感群體越來越少,而抗性群體會急劇上升。

    3.2 馬鈴薯晚疫病菌的同工酶基因型和線粒體DNA單倍型分析

    目前為止,利用Gpi酶發(fā)現(xiàn)了14種馬鈴薯晚疫病菌的allozyme基因型[20]。本試驗(yàn)對2006~2008年黑龍江省和吉林省分離的馬鈴薯晚疫病菌同工酶基因型表明Gpi和Pep基因型逐漸多樣化(表3)。在所有采集地區(qū)主要存在1種同工酶基因型(100/100,100/ 100),這說明Gpi:100/100基因型逐步代替了Gpi:86/100基因型。

    Griffith和Shaw[15]的研究結(jié)果表明,當(dāng)用MspⅠ酶切由P2引物組合擴(kuò)增的基因組DNA時,Ⅰa和Ⅱb單倍型有相同的基因片段,不能區(qū)分Ⅰa和Ⅱb單倍型;但用EcoRⅠ酶切由P4引物組合擴(kuò)增的基因組 DNA能區(qū)分Ⅰa和Ⅱb單倍型。因此,本試驗(yàn)為更好分析馬鈴薯晚疫病菌的線粒體DNA使用MspⅠ與P 2和EcoRⅠ與P 4引物組合(圖1)。由于致病疫霉mtDNA是單親本遺傳,使得它成為研究致病疫霉起源進(jìn)化以及系統(tǒng)發(fā)育的理想研究對象。一些研究認(rèn)為,Ⅰb代表致病疫霉群體在第一次全球遷移之前廣泛分布的與US-1無性繁殖譜系密切相關(guān)的“舊”群體,而Ⅰa、Ⅱa和Ⅱb則為第一次全球遷移發(fā)生后在墨西哥以外出現(xiàn)的“新”群體[1-2,14]。本試驗(yàn)中,除來自日本的標(biāo)準(zhǔn)菌株為Ⅰb線粒體DNA單倍型外,采自黑龍江省和吉林省馬鈴薯晚疫病菌的99個菌株分別是Ⅰa和Ⅱa。2006~2008年黑龍江省和吉林省占主導(dǎo)地位的Ⅱa基因型逐漸被Ⅰa基因型代替。這個結(jié)果類似于趙志堅等[11]介紹的云南省分離的馬鈴薯晚疫病菌中Ⅰa基因型逐漸代替Ⅱa基因型的結(jié)果,盡管兩者在群體中的分布差異顯著,但均屬于“新”群體,表明致病疫霉“新”群體已成功地替代了“舊”群體,成為黑龍江省和吉林省馬鈴薯產(chǎn)區(qū)的主導(dǎo)者,這與Akino等[21]報道的中國甘肅和河北馬鈴薯致病疫霉mtDNA單倍型的結(jié)果一致。

    3.3 馬鈴薯晚疫病菌的multi-locus基因型分析

    馬鈴薯晚疫病菌的multi-locus基因型分析通常使用交配型、同工酶基因型、mtDNA單倍型和RG 57指紋圖譜。Spielman等[22]報道無性繁殖系菌株的基因型聚類分析能區(qū)別“舊”和“新”的基因型。本試驗(yàn)利用交配型、同工酶基因型和mtDNA單倍型發(fā)現(xiàn)了4種multi-locus基因型,沒有發(fā)現(xiàn)“舊”基因型US-1[20]。這些multi-locus基因型在交配型、同工酶基因型、mtDNA單倍型和RG 57指紋圖譜特性上不同于波蘭[23],美國[24]發(fā)現(xiàn)的基因型,但此結(jié)果在同工酶基因型和mtDNA單倍型上類似于與Sujkowski等[23]和Zhang等[8]報道的新基因型(Gpi:100/100, Pep:100/100,Ⅱa)逐步代替“舊”基因型(Gpi:86/ 100,Pep:92/100,Ⅰb)的結(jié)果。這說明馬鈴薯晚疫病菌“新”基因型已成功地替代了“舊”基因型,成為黑龍江省和吉林省馬鈴薯產(chǎn)區(qū)的主導(dǎo)者。

    [1]Fry W E,Goodwin S B.Re-emergence of potato and tomato late blight in the United States[J].Plant Disease,1997,81(12)1349-1357.

    [2] Fry W E,Goodwin S B,Dyer A T,et al.Historical and recent migration of Phytophthora infestans:chronology,pathway,and implications[J].Plant Disease,1993,77:653-661.

    [3] Hohl H R,Iselin K.Strains of Phytophthora infestans from Switzerland with A2 mating type behaviour[J].Transactions of the British Mycological Society,1984,83:529-530.

    [4]張志銘,李玉琴,田世民,等.中國發(fā)生馬鈴薯晚疫病菌A2交配型[J].河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,1996,19:62-66.

    [5] Goodwin.S B,Schneider.R E,Fry W E.Use of cellulose acetate electrophoresis for rapid identification of allozyme genotypes of Phytophthora infestans[J].Plant Disease,1995,79:1181-1185.

    [6]Avila-Adame C,Gomez-Alpizar L,Zismann V,et al.Mitochondrial genome sequences and molecular evolution of the Irish potato famine pathogen,Phytophthora infestans[J].Curr Genet, 2006,49:39-46.

    [7] Ghimire S R,Hyde K D,Hodgkiss I J,et al.Variations in the Phytophthora infestans population in Nepal as revealed by nuclear and mitochondrial DNA polymorphisms[J].Phytopathology,2003,93 (2):236-243.

    [8] Zhang X Z,Kim H Y,Kim B S.Analysis of genetic diversity of Phytophthora infestans in Korea by using molecular markers[J]. J Microbiol Biotechnol,2006,16:423-430.

    [9] Gotoh K,Akino S,Kato M,et al.New multilocus genotypes of Phytophthora infestans in Japan[J].J Gen Plant Pathology,2007, 73(5):349-352.

    [10] Zwankhuizen M J,Govers F,Zadoks J C.Inoculum sources and genotypic diversity of Phytophthora infestans in Southern Flevoland, The Netherlands[J].European Journal of Plant Pathology,2000, 106(7):667-680.

    [11] 趙志堅,李先平,李成云,等.致病疫霉線粒體DNA單倍型分子鑒別[J].云南農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2002,17:434-435.

    [12] Zhu X Q,Wang Y H,Guo L Y.Genetic diversity revealed by RAPD analysis among isolates of Phytophthora infestans from different locations in China[J].Acta Phytopathologica Sinaca, 2006,36(3):249-258.

    [13] Zhang X Z,Ryu K Y,Kim J S.Changes in the sensitivity to Metalaxyl,Dimethomorph and Ethaboxam ofPhytophthora infestans in Korea[J].Plant Pathol J,2005,21(1):33-38.

    [14] Goodwin S B,Drenth B A,Fry W E.Cloning and genetic analysis of two highly polymorphic moderately repetitive nuclear DNAs from Phytophthora infestans[J].Curr Genet,1992,22:107-155.

    [15] Griffith G W,Shaw D S.Polymorphism in Phytophthora infestans: four mitochondrial haplotypes are detected after PCR amplification of DNA from pure culture or from host lesions[J].Appl Environ Microbiol,1998,64:4007-4014.

    [16] 朱杰華,張志銘,李玉琴.馬鈴薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)A2交配型的分布[J].植物病理學(xué)報,2000,30:375.

    [17]朱小瓊,車興璧,國立耘,等.六省市致病疫霉交配型及其對幾種殺菌劑的敏感性[J].植物保護(hù),2004,30(4):20-23

    [18] 金光輝,白雅梅,孫秀梅,等.黑龍江省馬鈴薯晚疫病菌A2交配型的測定[J].中國馬鈴薯,2006,20(4):212-214

    [19] 王英華,國立耘,梁德霖,等.馬鈴薯晚疫病菌在內(nèi)蒙古和甘肅的交配型分布及對幾種殺菌劑的敏感性[J].中國農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報,2003,8(1):78-82

    [20] Forbes G A,Goodwin S B,Drenth A,et al.A global marker database for Phytophthora infestans[J].Plant Disease,1998,82: 811-818.

    [21] Akino S,Gotoh K,Nishimura R,et al.Comparison of Chinese and Japanese A1 isolates of Phvtophthora infestans[J].Journal of General Plant Pathology,2004,70:212-214.

    [22] Spielman L J,Drenth A,Davidse L C,et al.A second worldwide migration and population displacement of Phytophthora infestans[J].Plant Pathology,1991,40:422-430.

    [23] Sujkowski L S,Goodwin S B,Dyer A T,et al.Increased genotypic diversity via migration and possible occurrence of sexual reproduction of Phytophthora infestans in Poland[J]. Phytopathology,1994,84:201-207.

    [24] Goodwin S B,Smart C D,Sandrock R W,et al.Genetic change within populations of Phytophthora infestans in the United States and Canada during 1994 to 1996:role of migration and recombination[J].Phyropathology,1998,88:939-949.

    猜你喜歡
    同工酶晚疫病交配
    菌源同工酶分析揭示菌源DPP4同工酶是潛在的抗2型糖尿病靶點(diǎn)
    遺傳(2023年8期)2023-08-25 06:59:00
    臨汾市馬鈴薯晚疫病發(fā)生趨勢預(yù)報
    如何防治大棚番茄晚疫病
    不同交配方式對家蠶種性影響
    缺糖基轉(zhuǎn)鐵蛋白與線粒體同工酶在酒精性肝病中的臨床應(yīng)用
    馬鈴薯晚疫病發(fā)生趨勢預(yù)報
    二化螟的多次交配及其對雌蛾產(chǎn)卵量的影響
    當(dāng)自由交配遇上自由組合的幾種解法淺析
    黑龍江省發(fā)現(xiàn)馬鈴薯晚疫病菌(Phytophthora infestans)A2交配型
    中國馬鈴薯(2015年3期)2015-12-19 08:03:56
    茶葉多酚氧化酶及其同工酶的研究進(jìn)展
    茶葉通訊(2014年2期)2014-02-27 07:55:39
    亚洲av不卡在线观看| 国产精品一区二区性色av| 精品人妻一区二区三区麻豆| 波野结衣二区三区在线| 少妇人妻久久综合中文| 美女内射精品一级片tv| 九九爱精品视频在线观看| 国产精品不卡视频一区二区| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 国产欧美另类精品又又久久亚洲欧美| 亚洲婷婷狠狠爱综合网| 97在线人人人人妻| 欧美日韩综合久久久久久| 亚洲精品成人久久久久久| 偷拍熟女少妇极品色| 少妇 在线观看| 国产成人精品一,二区| 国产老妇女一区| 日韩中字成人| 69人妻影院| 少妇人妻精品综合一区二区| 91精品一卡2卡3卡4卡| 日韩av在线免费看完整版不卡| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 日韩欧美精品免费久久| 亚洲国产精品国产精品| 全区人妻精品视频| 国产精品一及| 好男人在线观看高清免费视频| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 久久女婷五月综合色啪小说 | 亚洲成人久久爱视频| 成人美女网站在线观看视频| 在线看a的网站| 色吧在线观看| 国产片特级美女逼逼视频| 真实男女啪啪啪动态图| 国产女主播在线喷水免费视频网站| 中国三级夫妇交换| 久久久久网色| 亚洲欧美成人精品一区二区| 国产黄色免费在线视频| 亚洲av一区综合| 欧美丝袜亚洲另类| 亚洲欧美日韩东京热| 国产一区二区三区av在线| 免费大片18禁| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | av卡一久久| 国产爽快片一区二区三区| 精品酒店卫生间| 欧美bdsm另类| 亚洲精品国产av成人精品| 极品少妇高潮喷水抽搐| 亚洲av日韩在线播放| 亚州av有码| 男插女下体视频免费在线播放| videos熟女内射| 国产男女超爽视频在线观看| 国产精品人妻久久久影院| 国产在视频线精品| 国产成人精品一,二区| 在线看a的网站| 国产精品一及| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 涩涩av久久男人的天堂| 国产伦在线观看视频一区| 天堂中文最新版在线下载 | 国产精品久久久久久精品电影小说 | 狂野欧美激情性xxxx在线观看| 男男h啪啪无遮挡| 国产片特级美女逼逼视频| 啦啦啦啦在线视频资源| 极品少妇高潮喷水抽搐| 赤兔流量卡办理| 内射极品少妇av片p| 久久久久久久久久久免费av| 两个人的视频大全免费| 成人黄色视频免费在线看| 在线观看三级黄色| 久久综合国产亚洲精品| 欧美xxxx黑人xx丫x性爽| 国产美女午夜福利| 中文字幕亚洲精品专区| 大又大粗又爽又黄少妇毛片口| 在线精品无人区一区二区三 | 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产综合精华液| 如何舔出高潮| 九九在线视频观看精品| 丰满乱子伦码专区| 亚洲精品中文字幕在线视频 | 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 99久久九九国产精品国产免费| 搡女人真爽免费视频火全软件| 亚洲国产最新在线播放| 秋霞伦理黄片| 亚洲成人中文字幕在线播放| 最近手机中文字幕大全| 午夜精品一区二区三区免费看| 在线看a的网站| 久久久精品94久久精品| 国产v大片淫在线免费观看| 网址你懂的国产日韩在线| 免费av毛片视频| 毛片女人毛片| 看黄色毛片网站| av播播在线观看一区| av在线播放精品| 亚洲久久久久久中文字幕| 欧美区成人在线视频| 午夜激情久久久久久久| 97精品久久久久久久久久精品| 亚洲无线观看免费| 亚洲av.av天堂| 色婷婷久久久亚洲欧美| 欧美激情国产日韩精品一区| 99久久中文字幕三级久久日本| 久久久久网色| www.av在线官网国产| 99久久精品热视频| 欧美xxxx性猛交bbbb| 日韩成人伦理影院| 久久久久久伊人网av| 国产精品嫩草影院av在线观看| 久热这里只有精品99| 观看美女的网站| 久久久久久久大尺度免费视频| 在线a可以看的网站| 欧美精品国产亚洲| 极品教师在线视频| 人妻夜夜爽99麻豆av| 男女国产视频网站| 丝袜脚勾引网站| 日本一本二区三区精品| 国产综合懂色| 精品久久久精品久久久| 人妻系列 视频| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 亚洲欧美日韩东京热| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 久久久久久伊人网av| 99九九线精品视频在线观看视频| 男人爽女人下面视频在线观看| 国产爽快片一区二区三区| 亚洲,欧美,日韩| 日韩一本色道免费dvd| 国产成年人精品一区二区| 国产精品久久久久久av不卡| 免费看日本二区| 精品久久久久久久人妻蜜臀av| 欧美xxⅹ黑人| 菩萨蛮人人尽说江南好唐韦庄| 黄色怎么调成土黄色| 韩国av在线不卡| 亚洲人成网站在线观看播放| 日韩av不卡免费在线播放| 搡老乐熟女国产| 性色av一级| 色综合色国产| 99热国产这里只有精品6| 国产免费视频播放在线视频| 日本三级黄在线观看| 国产有黄有色有爽视频| 色吧在线观看| 午夜爱爱视频在线播放| 日韩一区二区视频免费看| 日日啪夜夜撸| 久久99热这里只频精品6学生| 欧美高清性xxxxhd video| av福利片在线观看| 国产精品国产三级国产av玫瑰| 男人爽女人下面视频在线观看| 18+在线观看网站| 免费高清在线观看视频在线观看| 精品一区在线观看国产| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 97在线人人人人妻| av.在线天堂| 2018国产大陆天天弄谢| 秋霞在线观看毛片| 人人妻人人爽人人添夜夜欢视频 | 国产成人a区在线观看| 色网站视频免费| 国产精品一及| 久久久久网色| 中国美白少妇内射xxxbb| av免费观看日本| 精品久久久久久久末码| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 老司机影院毛片| 国产一区亚洲一区在线观看| 一本一本综合久久| 男女无遮挡免费网站观看| 欧美精品人与动牲交sv欧美| 久久久国产一区二区| 五月天丁香电影| 天堂网av新在线| 插逼视频在线观看| 2018国产大陆天天弄谢| 99久久人妻综合| 国产永久视频网站| 国产在视频线精品| 女人久久www免费人成看片| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 亚洲精品456在线播放app| 制服丝袜香蕉在线| 美女内射精品一级片tv| 亚洲在久久综合| 爱豆传媒免费全集在线观看| 狠狠精品人妻久久久久久综合| 边亲边吃奶的免费视频| 王馨瑶露胸无遮挡在线观看| 亚洲无线观看免费| 色哟哟·www| 亚洲不卡免费看| 久久久亚洲精品成人影院| 91精品伊人久久大香线蕉| a级一级毛片免费在线观看| 国内揄拍国产精品人妻在线| a级毛色黄片| 一级毛片黄色毛片免费观看视频| 久久6这里有精品| 国产探花在线观看一区二区| 免费av毛片视频| 青春草国产在线视频| 夫妻性生交免费视频一级片| 一区二区三区四区激情视频| 中国美白少妇内射xxxbb| 免费不卡的大黄色大毛片视频在线观看| 干丝袜人妻中文字幕| 夜夜看夜夜爽夜夜摸| 在线观看美女被高潮喷水网站| 免费少妇av软件| 国产一区二区在线观看日韩| 国产精品久久久久久精品电影小说 | 亚洲色图av天堂| 91久久精品国产一区二区三区| 别揉我奶头 嗯啊视频| 亚洲精品亚洲一区二区| 五月天丁香电影| 国产黄片美女视频| av国产精品久久久久影院| 日韩一区二区视频免费看| 久久久成人免费电影| 国产精品国产三级国产专区5o| 日本免费在线观看一区| av国产精品久久久久影院| 日韩欧美一区视频在线观看 | 国产真实伦视频高清在线观看| 男人和女人高潮做爰伦理| 黄色配什么色好看| 亚洲av一区综合| 欧美潮喷喷水| 亚洲av免费在线观看| 久热久热在线精品观看| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 精品人妻熟女av久视频| 国内精品美女久久久久久| 卡戴珊不雅视频在线播放| 黄色欧美视频在线观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 嘟嘟电影网在线观看| 中文字幕av成人在线电影| 欧美日韩国产mv在线观看视频 | 国产 一区精品| 国产精品一区www在线观看| 久久久精品免费免费高清| 国产精品久久久久久精品电影| 日本黄色片子视频| 色综合色国产| 一级片'在线观看视频| av线在线观看网站| 亚洲精品自拍成人| 91久久精品国产一区二区成人| 人妻 亚洲 视频| 最近最新中文字幕免费大全7| 男人狂女人下面高潮的视频| 91午夜精品亚洲一区二区三区| 日本一二三区视频观看| av福利片在线观看| 啦啦啦中文免费视频观看日本| a级一级毛片免费在线观看| 中国三级夫妇交换| 乱码一卡2卡4卡精品| 哪个播放器可以免费观看大片| 日韩 亚洲 欧美在线| 天堂中文最新版在线下载 | 熟女av电影| 一边亲一边摸免费视频| 黄色欧美视频在线观看| 777米奇影视久久| 亚洲图色成人| 日本wwww免费看| 成人鲁丝片一二三区免费| 中文天堂在线官网| 在线免费十八禁| 国产有黄有色有爽视频| 最后的刺客免费高清国语| 看免费成人av毛片| 日本爱情动作片www.在线观看| 欧美变态另类bdsm刘玥| 男女国产视频网站| 另类亚洲欧美激情| 综合色av麻豆| 亚洲人成网站在线观看播放| a级毛片免费高清观看在线播放| 久久久久久久亚洲中文字幕| 亚洲精品色激情综合| 直男gayav资源| 成人黄色视频免费在线看| 麻豆乱淫一区二区| 午夜福利在线在线| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 91久久精品电影网| 亚洲欧美中文字幕日韩二区| 91久久精品电影网| 熟女人妻精品中文字幕| 天天躁夜夜躁狠狠久久av| 日韩亚洲欧美综合| 亚洲国产高清在线一区二区三| 天天躁日日操中文字幕| 欧美最新免费一区二区三区| 91在线精品国自产拍蜜月| 国产成人一区二区在线| 偷拍熟女少妇极品色| 午夜免费男女啪啪视频观看| 综合色av麻豆| 久热这里只有精品99| 2018国产大陆天天弄谢| 99久久精品一区二区三区| 亚洲精品乱久久久久久| 国产成人精品一,二区| 色吧在线观看| 国产成人a区在线观看| 99久久中文字幕三级久久日本| 直男gayav资源| 精品国产三级普通话版| 精品99又大又爽又粗少妇毛片| 97人妻精品一区二区三区麻豆| 性色av一级| 国产亚洲5aaaaa淫片| 久久人人爽人人片av| 22中文网久久字幕| 亚洲精品成人av观看孕妇| 久久热精品热| 韩国av在线不卡| 国产黄色免费在线视频| 青春草国产在线视频| 2022亚洲国产成人精品| 超碰97精品在线观看| 亚洲精品,欧美精品| 99热6这里只有精品| 亚洲精品亚洲一区二区| 国产视频内射| 91aial.com中文字幕在线观看| 麻豆精品久久久久久蜜桃| 汤姆久久久久久久影院中文字幕| 少妇 在线观看| 久久精品人妻少妇| 国产精品一二三区在线看| freevideosex欧美| 女人被狂操c到高潮| 国产精品无大码| 啦啦啦啦在线视频资源| 国产一区二区在线观看日韩| 久久精品国产a三级三级三级| 看非洲黑人一级黄片| 18禁动态无遮挡网站| 精品国产乱码久久久久久小说| 欧美成人精品欧美一级黄| 亚洲欧美日韩无卡精品| 亚洲国产成人一精品久久久| 又大又黄又爽视频免费| 国产在线一区二区三区精| www.色视频.com| 国产乱人偷精品视频| 国产精品秋霞免费鲁丝片| 久久精品国产a三级三级三级| 亚洲国产av新网站| 真实男女啪啪啪动态图| 国产男女内射视频| 日韩在线高清观看一区二区三区| 日韩成人av中文字幕在线观看| 亚洲在久久综合| 国产高清有码在线观看视频| 白带黄色成豆腐渣| 欧美成人一区二区免费高清观看| 亚洲国产高清在线一区二区三| 国内精品宾馆在线| 22中文网久久字幕| 韩国高清视频一区二区三区| 黄片wwwwww| 在线亚洲精品国产二区图片欧美 | a级一级毛片免费在线观看| 国产一区二区亚洲精品在线观看| 亚洲国产精品999| 超碰av人人做人人爽久久| 91精品一卡2卡3卡4卡| 亚洲av一区综合| 九草在线视频观看| 国模一区二区三区四区视频| 大话2 男鬼变身卡| 亚洲欧美日韩另类电影网站 | 我的女老师完整版在线观看| 国产色婷婷99| 综合色av麻豆| 成人高潮视频无遮挡免费网站| 69av精品久久久久久| av天堂中文字幕网| 好男人在线观看高清免费视频| av网站免费在线观看视频| 少妇 在线观看| av在线观看视频网站免费| 国产精品久久久久久精品古装| 亚洲熟女精品中文字幕| 国产久久久一区二区三区| 我的女老师完整版在线观看| av专区在线播放| 男女国产视频网站| 国产一区二区三区综合在线观看 | 精品亚洲乱码少妇综合久久| 中文精品一卡2卡3卡4更新| 秋霞伦理黄片| 日韩成人av中文字幕在线观看| 伦理电影大哥的女人| 欧美成人一区二区免费高清观看| 纵有疾风起免费观看全集完整版| 亚洲国产色片| 我的老师免费观看完整版| 午夜老司机福利剧场| 成人亚洲精品一区在线观看 | 日本av手机在线免费观看| 久久亚洲国产成人精品v| 久久精品综合一区二区三区| 夜夜爽夜夜爽视频| 我的女老师完整版在线观看| 午夜精品国产一区二区电影 | 综合色丁香网| 欧美变态另类bdsm刘玥| 亚洲精品色激情综合| 国产在线一区二区三区精| 国产一区二区在线观看日韩| 国产精品一二三区在线看| 欧美精品一区二区大全| 高清欧美精品videossex| 亚洲经典国产精华液单| 免费大片18禁| 国产又色又爽无遮挡免| 欧美精品国产亚洲| 新久久久久国产一级毛片| 亚洲av一区综合| 欧美97在线视频| 久久ye,这里只有精品| 亚洲最大成人中文| 一本久久精品| 久久热精品热| 中文字幕亚洲精品专区| 国内精品宾馆在线| 神马国产精品三级电影在线观看| 亚洲av不卡在线观看| av免费在线看不卡| 国产午夜精品一二区理论片| 亚洲,一卡二卡三卡| 插逼视频在线观看| 午夜激情福利司机影院| 99热国产这里只有精品6| tube8黄色片| av一本久久久久| 人妻制服诱惑在线中文字幕| 一本久久精品| 国产极品天堂在线| 国产在线一区二区三区精| 久久人人爽人人爽人人片va| 国产精品99久久久久久久久| 18禁在线无遮挡免费观看视频| 日本黄大片高清| 人妻系列 视频| 亚洲欧美成人综合另类久久久| 伊人久久国产一区二区| 久久99热这里只有精品18| 日日啪夜夜爽| 精品久久久久久电影网| 乱码一卡2卡4卡精品| 亚州av有码| 精品一区二区三卡| 精品久久久久久久久av| 久久久精品免费免费高清| 国产亚洲91精品色在线| 成人综合一区亚洲| 国产男人的电影天堂91| 天堂网av新在线| 久久久国产一区二区| 真实男女啪啪啪动态图| 精品久久久久久久久av| 久久久久国产网址| 好男人在线观看高清免费视频| 日本与韩国留学比较| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 男女国产视频网站| 女人久久www免费人成看片| 春色校园在线视频观看| 日产精品乱码卡一卡2卡三| 亚洲图色成人| 一级a做视频免费观看| 不卡视频在线观看欧美| 2021少妇久久久久久久久久久| 久久精品人妻少妇| 欧美成人午夜免费资源| 麻豆国产97在线/欧美| 看免费成人av毛片| 亚洲国产色片| 久久精品国产自在天天线| 夜夜爽夜夜爽视频| 啦啦啦中文免费视频观看日本| 永久网站在线| 国产精品久久久久久久久免| 黑人高潮一二区| 麻豆成人av视频| 最近手机中文字幕大全| 国产精品偷伦视频观看了| 亚洲精品一区蜜桃| 久久ye,这里只有精品| av福利片在线观看| 一级黄片播放器| 亚洲伊人久久精品综合| kizo精华| 日韩免费高清中文字幕av| 免费看a级黄色片| 日日啪夜夜爽| 一级二级三级毛片免费看| 国产熟女欧美一区二区| 欧美3d第一页| 在线观看三级黄色| 免费大片黄手机在线观看| 色婷婷久久久亚洲欧美| av国产免费在线观看| 黄色欧美视频在线观看| 亚洲色图综合在线观看| 91久久精品电影网| 高清毛片免费看| 精品一区在线观看国产| 最近中文字幕2019免费版| 三级国产精品片| 一本—道久久a久久精品蜜桃钙片 精品乱码久久久久久99久播 | www.色视频.com| 亚洲精品一二三| 97热精品久久久久久| 久久久午夜欧美精品| videos熟女内射| 国产精品女同一区二区软件| 欧美三级亚洲精品| 免费看日本二区| 2018国产大陆天天弄谢| 久久久久久久久久久免费av| 秋霞在线观看毛片| 丰满人妻一区二区三区视频av| 亚洲国产精品999| 2021少妇久久久久久久久久久| 国产 一区精品| 男女无遮挡免费网站观看| 亚洲国产精品成人综合色| 男女啪啪激烈高潮av片| 精品亚洲乱码少妇综合久久| 美女xxoo啪啪120秒动态图| 日本-黄色视频高清免费观看| 成人鲁丝片一二三区免费| 在线观看三级黄色| 国产精品.久久久| 国产美女午夜福利| 久久久久久伊人网av| 伦精品一区二区三区| 中文乱码字字幕精品一区二区三区| 日韩伦理黄色片| 国产精品国产av在线观看| 亚洲va在线va天堂va国产| av播播在线观看一区| 精品一区二区三卡| 国产成人a∨麻豆精品| 2022亚洲国产成人精品| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 国产高清有码在线观看视频| 日韩一本色道免费dvd| 涩涩av久久男人的天堂| 嫩草影院新地址| 久久久亚洲精品成人影院| 亚洲天堂国产精品一区在线| 亚洲精品久久午夜乱码| 久久热精品热| 国产 一区 欧美 日韩| 国产黄片视频在线免费观看| 男女啪啪激烈高潮av片| 国产 一区 欧美 日韩| 91在线精品国自产拍蜜月| 久久精品人妻少妇| 免费黄频网站在线观看国产| 一区二区三区四区激情视频| 日韩av在线免费看完整版不卡| 观看免费一级毛片| 一区二区三区四区激情视频| 亚洲av国产av综合av卡| 国产日韩欧美在线精品| 69人妻影院| 亚洲精品日韩在线中文字幕| 国产亚洲av片在线观看秒播厂| 国产高清有码在线观看视频| 神马国产精品三级电影在线观看| 国产精品麻豆人妻色哟哟久久| 亚洲国产精品成人综合色| 亚洲真实伦在线观看| 一级爰片在线观看| 午夜福利视频精品| 国产精品福利在线免费观看| 国产欧美日韩精品一区二区| 国模一区二区三区四区视频|