妊娠期陰道出血時(shí)血紅蛋白F(HbF)對(duì)鑒別母體血與胎兒血的作用研究

曾 選 ，習(xí)永生，甘雪華 ，丁洪慧，陸 瑤

(1、江西省婦幼保健院檢驗(yàn)科，江西 南昌 330006；2、江西省腫瘤醫(yī)院放射科，江西 南昌 330029)

胎兒的紅細(xì)胞最主要含有血紅蛋白F(HbF)(＞99%)，而成人紅細(xì)胞中大部分為血紅蛋白A(HbA)，血紅蛋白F含量＜1%。由于血紅蛋白F抗堿和抗酸能力很強(qiáng)，應(yīng)用洗脫和染色方法可使HbF呈鮮紅色，含其它血紅蛋白的紅細(xì)胞只留下淡影的細(xì)胞膜，利用此方法不僅能區(qū)別含HbF的紅細(xì)胞，而且能定量分析含HbF的紅細(xì)胞比例，為準(zhǔn)確診斷妊娠期孕婦陰道出血是否有胎兒血，供臨床醫(yī)生采取及時(shí)正確治療措施提供診斷依據(jù)。現(xiàn)把實(shí)驗(yàn)結(jié)果報(bào)告如下。

1 材料和方法

1.1 對(duì)象 2008年3月份到2010年6月份由于妊娠期陰道出血到我院就診的門診或住院孕婦113例，懷孕21周至臨產(chǎn)。

1.2 試劑和儀器 80%乙醇、酸性緩沖液、蘇木素染色液、伊紅染液。OLYMPUS CX21型光學(xué)顯微鏡。

1.3 方法 嚴(yán)格按照全國(guó)臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程第三版要求操作[1]。無(wú)菌采集孕婦陰道流出血，用枸櫞酸鈉抗凝，制備血涂片，自然干燥1h，用80%乙醇固定5分鐘，水洗干燥后進(jìn)行酸洗脫和染色。干燥后在油鏡下觀察和計(jì)數(shù)，含有HbF的紅細(xì)胞呈鮮紅色為陽(yáng)性，只留下淡影的細(xì)胞膜為陰性。

2 結(jié)果

通過(guò)檢測(cè)113例妊娠期陰道出血的孕婦陰道血HbF紅細(xì)胞，4例HbF紅細(xì)胞比例＞17%，說(shuō)明胎兒在宮內(nèi)有出血現(xiàn)象，其中1例孕周33+4周的孕婦其陰道血含HbF紅細(xì)胞比例達(dá)到71%，送院前陰道已出血，胎心音異常，2小時(shí)后胎心消失，胎兒因失血而很快死在宮內(nèi)，經(jīng)B超證實(shí)胎兒已死亡，失去搶救胎兒的機(jī)會(huì)。另外3例診斷及時(shí)，孕周大于35周，立即終止妊娠，行剖宮產(chǎn)手術(shù)，新生兒及時(shí)搶救，得以存活。其余109例HbF紅細(xì)胞比例＜6%，結(jié)合臨床指針、胎心監(jiān)護(hù)、B超等檢查診斷陰道出血不是胎兒血。

3 討論

正常胎兒血的紅細(xì)胞特點(diǎn)為整個(gè)胚胎發(fā)育過(guò)程中，胎兒造血系統(tǒng)一直處于活躍狀態(tài)。隨胎齡的增加，胎血中的血紅蛋白含量逐漸升高。胎兒第一代紅細(xì)胞的形成主要在卵黃囊的血島[2]，人胚卵黃囊造血功能持續(xù)8～12周；妊娠第4周肝臟開始造血。紅細(xì)胞發(fā)育過(guò)程中形態(tài)變化由大到小。正常人因不同發(fā)育時(shí)期，紅細(xì)胞中的Hb類型有所不同，由胚胎型Hb向胎兒型血紅蛋白,最后向成人型Hb轉(zhuǎn)換[3]。直到胎兒出生時(shí)HbF仍為臍血Hb的主要成分。胎兒的紅細(xì)胞最主要成份血紅蛋白F(HbF)含量＞99%，而成人紅細(xì)胞中大部分為血紅蛋白A(HbA)，血紅蛋白F含量＜1%孕婦自身患有再生障礙性貧血、溶血性貧血、β珠蛋白生成障礙性貧血等血液病以及在懷孕過(guò)程中出現(xiàn)的胎兒-母體輸血均會(huì)引起母體外周血出現(xiàn)少量的HbF紅細(xì)胞，在陰道出血時(shí)即使沒有胎兒血經(jīng)洗脫和染色后乃有少量陽(yáng)性紅細(xì)胞，造成難以診斷，筆者采取在取陰道血的同時(shí)采集母體外周血一份一同做HbF檢測(cè)，如果陰道血的HbF紅細(xì)胞含量大于外周血的HbF紅細(xì)胞，即可診斷有胎兒血；陰道血的HbF紅細(xì)胞含量與母體外周血持平，結(jié)合臨床指針、胎心監(jiān)護(hù)、B超等檢查可排除胎兒宮內(nèi)失血。

妊娠期陰道出血是否含有胎兒血，胎兒血紅蛋白是診斷的決定性因素[4]，對(duì)于臨床處理病情起到十分關(guān)鍵的作用。筆者通過(guò)2年多的時(shí)間對(duì)113例陰道出血的孕婦進(jìn)行HbF紅細(xì)胞的檢測(cè)，其結(jié)果與臨床診斷和病人病情一致。妊娠期陰道出血時(shí)檢測(cè)出含胎兒血 (陰道血HbF紅細(xì)胞含量高于外周血)，說(shuō)明胎兒在宮內(nèi)有出血現(xiàn)象，結(jié)合B超診斷，如果提示胎兒還活著，孕周大于35周，立即行剖宮產(chǎn)以結(jié)束妊娠，挽救孕婦和胎兒的生命為第一。經(jīng)檢測(cè)陰道血為母體血，不含胎兒血，妊娠在35周前，胎兒未達(dá)到成熟，陰道出血量不多，情況穩(wěn)定的孕婦可采取期待療法進(jìn)行治療。

HbF的洗脫和染色方法以及抗堿試驗(yàn)，可快速確定母體血中是否含過(guò)多胎兒紅細(xì)胞，有助于對(duì)分娩前胎兒晚期出血做出迅速判斷[5]，為鑒別妊娠期陰道出血時(shí)是否含有胎兒血提供診斷依據(jù)。該方法操作簡(jiǎn)便、檢測(cè)快速、結(jié)果準(zhǔn)確、方便開展，對(duì)臨床幫助很大，為臨床醫(yī)生采取準(zhǔn)確、果斷治療措施提供依據(jù)，降低胎兒和孕產(chǎn)婦死亡率意義非常大。

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[4]段如麟,陳解民,徐增祥.婦產(chǎn)科急癥學(xué)[M].第1版,北京:人民軍醫(yī)出版社,1998:45.

[5]程 偉.人胎兒血紅蛋白的檢測(cè)及其臨床意義[J].中國(guó)實(shí)驗(yàn)診斷學(xué),2009,13(10):1474-1475.