黃金英 馬海玲 蘭天博
血漿凝血酶原時(shí)間(PT)、活化部分凝血活酶時(shí)間(APTT)、凝血酶時(shí)間(TT)、纖維蛋白原(FIB)簡稱凝血四項(xiàng),是臨床常用的血栓與止血篩查試驗(yàn),它的準(zhǔn)確檢測對出血性或血栓性疾病初步診斷、指導(dǎo)臨床用藥、患者術(shù)前準(zhǔn)備等起到非常重要的作用。但在工作中發(fā)現(xiàn)有一些因素常影響到結(jié)果的準(zhǔn)確性,現(xiàn)總結(jié)如下。
1 標(biāo)本因素
1.1 抗凝劑的選擇及其與血液的比例 抗凝劑 為109 mmol/L的枸櫞酸鈉,因枸櫞酸鈉對凝血因子Ⅴ、Ⅷ有保護(hù)作用。枸櫞酸鈉0.2 ml,血液1.8 ml,按1:9比例,當(dāng)HCT>55%或HCT<25%時(shí),應(yīng)調(diào)整抗凝劑用量:抗凝劑量(ml)=(100%-HCT)×血量(ml)×0.001 85[1]。據(jù)報(bào)道血液量增加0.05 ml可使凝固時(shí)間縮短,減少0.5 ml可使凝固時(shí)間延長。
1.2 標(biāo)本采集 采血前患者應(yīng)處于空腹,平靜、放松狀態(tài),因劇烈運(yùn)動(dòng)和情緒激動(dòng)都會(huì)引起因子活性及血小板數(shù)量上升,凝血和纖溶活性增強(qiáng),影響檢測結(jié)果。采血時(shí)止血帶不應(yīng)扎得太緊、時(shí)間過長,采血針頭不能太細(xì),要一針見血,以防穿刺損傷或組織液混入血液,促使凝血酶形成,加速血液凝固,影響結(jié)果。采血后立即將血液和抗凝劑充分混勻,但不要用力過大,以免標(biāo)本出現(xiàn)凝集或溶血,凝血因子消耗或激活,影響結(jié)果。絕對禁止從輸液管或輸液側(cè)手臂取血,以防藥物影響及血液稀釋。
1.3 標(biāo)本的存放與運(yùn)送 標(biāo)本在正確采集并準(zhǔn)確核對后(切忌張冠李戴),需在室溫下立即送檢,低溫會(huì)損傷血小板,活化部分凝血因子,使PT、APTT結(jié)果縮短。血液離體后即開始變化,隨存放方式和時(shí)間的不同,凝血因子逐漸消耗而導(dǎo)致檢驗(yàn)結(jié)果不同[3]。
2 儀器與試劑
我們使用的是法國STAGO公司生產(chǎn)的全自動(dòng)血凝儀,儀器狀態(tài)的好壞直接影響實(shí)驗(yàn)的結(jié)果,所以環(huán)境條件一定要適合儀器的要求,做好儀器的保養(yǎng)與維護(hù),確保儀器的正常運(yùn)行,不要在儀器附近接打手機(jī)。試劑應(yīng)選擇匹配試劑,稀釋試劑要用去離子蒸餾水。試劑應(yīng)放4℃保存,復(fù)溶的試劑需新鮮配制,否則復(fù)溶時(shí)間越長對結(jié)果的準(zhǔn)確性影響越大。試劑要在有效期內(nèi)使用,所用計(jì)量器具要準(zhǔn)確無誤,標(biāo)本經(jīng)離心機(jī)離心后不應(yīng)升溫。
3 實(shí)驗(yàn)人員因素
操作人員的能力及責(zé)任心對于結(jié)果的準(zhǔn)確性起至關(guān)重要的作用。操作人員必須經(jīng)過培訓(xùn)、熟悉儀器性能、能處理常見故障方可上機(jī)。同時(shí)操作人員要具備一定的臨床知識,了解影響凝血4項(xiàng)的常見疾病和藥物,以免不必要的復(fù)查,浪費(fèi)試劑和時(shí)間。操作人員要加強(qiáng)與患者和與臨床的溝通,對于一些與臨床不符、難以解釋的結(jié)果做好溝通、回報(bào)、記錄工作,必要時(shí)要重新采血復(fù)查。操作人員要嚴(yán)格遵守操作規(guī)程,要本著對患者極端負(fù)責(zé)任的態(tài)度做好每一步工作。首先要認(rèn)真核對、檢查標(biāo)本,包括患者姓名、申請項(xiàng)目、采血管、采血量是否正確,仔細(xì)察看是否有凝塊等,對于不合格標(biāo)本要及時(shí)與臨床溝通。離心時(shí)要嚴(yán)格控制3000 r/min離心10 min,以保證血漿貧血小板狀態(tài)。離心時(shí)間和轉(zhuǎn)數(shù)不夠會(huì)使PT、APTT結(jié)果偏低。
離心后要觀察是否有溶血,我們發(fā)現(xiàn)溶血標(biāo)本PT、APTT結(jié)果縮短,TT延長。配試劑量一定要準(zhǔn)確,試劑間不能交叉污染。配制纖維蛋白原試劑時(shí)一定要小心,因試劑是極細(xì)的粉末狀,加蒸餾水時(shí)一定要緩緩加入,且吸管末端要距試劑瓶適宜高度,以免粉末濺出,如濺到吸管上,不僅影響纖維蛋白原試劑的準(zhǔn)確性,還要污染下一試劑,F(xiàn)IB對APTT的影響非常大。我們建議每一種試劑有專用吸管。操作人員應(yīng)在4 h(最好2 h)內(nèi)完成標(biāo)本的檢測。盡管是全自動(dòng)儀器工作時(shí)也要經(jīng)常觀察儀器的工作情況。常見故障儀器會(huì)自動(dòng)報(bào)警,但有些情況儀器并不報(bào)警,如①電磁閥故障導(dǎo)致洗針池排液不暢或滲漏,引起試劑針或加樣針帶液工作,嚴(yán)重影響甚至測不出結(jié)果時(shí);②管路老化漏液時(shí),洗針池對針起不到清洗作用,嚴(yán)重影響結(jié)果,PT極其敏感,明顯延長。遇這些情況儀器依然工作造成試劑大量浪費(fèi)。必須按時(shí)作好儀器的保養(yǎng)和維護(hù)工作。每更換新一批號試劑時(shí),要格外注意結(jié)果,出現(xiàn)系統(tǒng)誤差時(shí),要及時(shí)查找原因,盡管是配套試劑,我們也曾發(fā)現(xiàn)過試劑的問題。所有的標(biāo)本檢測必在每天的質(zhì)控通過的情況下,因?yàn)橘|(zhì)控是對儀器狀態(tài)、試劑質(zhì)量,操作人員因素等的綜合檢驗(yàn)。
總之,患者的正確配合、護(hù)士對標(biāo)本的正確采集和運(yùn)送、儀器和試劑的良好狀態(tài)以及操作人員的良好素質(zhì)是凝血四項(xiàng)結(jié)果準(zhǔn)確性的必要保障。
參考文獻(xiàn)
[1] 葉應(yīng)娛,王毓三,申子瑜.全國臨床檢驗(yàn)操作規(guī)程.東南大學(xué)出版社,2006:211.
[2] 孫彩虹,倪一鳴,余國偉.采血技術(shù)對凝血酶原的影響.實(shí)用護(hù)理雜志,1996,12(9):401.
[3] 叢玉隆,王淑娟.今日臨床檢驗(yàn)學(xué).軍事醫(yī)學(xué)出版社,1997:204-207.