鼻腔－鼻竇葡萄球菌感染檢測(cè)及耐藥性分析

王　慧　黃和贊

【摘要】 目的 了解鼻腔-鼻竇葡萄球菌感染及耐藥狀況，為臨床診斷治療及防止醫(yī)院感染提供依據(jù)。方法 對(duì)鼻腔-鼻竇分泌物標(biāo)本分離葡萄球菌經(jīng)API 20STAPH證實(shí)，再采用K-B紙片法頭孢西?。‵OX）紙片法、苯唑西林（OXA）紙片法和肉湯稀釋（MIC）法GPS藥敏卡對(duì)耐甲氧西林葡萄球菌檢測(cè)比較，并進(jìn)行耐藥性分析。結(jié)果 340株葡萄球菌中MRSA占67.54%（129/191），MRCNS占65.10%（97/149）（P>0.05）。FOX紙片法與OXA紙片法、MIC法檢測(cè)MRSA的敏感性和特異性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）；檢測(cè)MRCNS的特異性FOX紙片法明顯優(yōu)于OXA紙片法（69.23%）和MIC法（59.62%）（P＜0.01），敏感性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。替考拉寧和萬(wàn)古霉素?zé)o耐藥，替考拉寧有11株中敏；MRSA+MRCNS耐藥率為11.5-97.34%高于MSSA+MSCNS耐藥率3.51%～86.84%（P＜0.01），且多重耐藥。結(jié)論 鼻腔-鼻竇耐甲氧西林葡萄球菌檢出率高，而且耐藥壓力增大，檢測(cè)MRSA和MRCNS應(yīng)選擇操作簡(jiǎn)單、敏感性和特異性高的FOX紙片法，治療應(yīng)根據(jù)藥敏結(jié)果選擇抗菌藥物。

【關(guān)鍵詞】 鼻竇;感染; 耐甲氧西林葡萄球菌; 耐藥性

葡萄球菌是引起鼻腔、鼻竇和傷口感染的常見(jiàn)病原菌，近年來(lái)隨著β-內(nèi)酰胺類廣譜抗菌藥物廣泛使用，導(dǎo)致產(chǎn)生mecA基因介導(dǎo)的耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（MRSA）和耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌（MRCNS）增多，耐藥程度日益嚴(yán)重并呈多重耐藥，引起醫(yī)院感染，給臨床治療帶來(lái)極大困難^[1]。為了解鼻腔-鼻竇葡萄球菌感染狀況，筆者從臨床患者鼻腔-鼻竇分泌物標(biāo)本分離葡萄球菌340株，經(jīng)鑒定后采用K-B紙片法頭孢西?。‵OX）紙片法，苯唑西林（OXA）紙片法和微量肉湯稀釋（MIC）法GPS藥敏卡檢測(cè)），并對(duì)其耐藥性進(jìn)行比較分析。

1 資料與方法

1.1 菌株來(lái)源 2007年3月至2008年5月從南昌市第二醫(yī)院耳鼻喉科-頭頸外科鼻-鼻竇分泌物及鼻內(nèi)鏡手術(shù)的患者鼻-鼻竇分泌物標(biāo)本中分離出葡萄球菌340株，其中金黃色葡萄球菌191株，凝固酶陰性葡萄球菌149株。質(zhì)控菌株：金黃色葡萄球菌ATCC25923（甲氧西林敏）、ATCC433300（甲氧西林耐藥）購(gòu)自衛(wèi)生部臨床檢驗(yàn)中心。

1.2 抗菌藥物 FOX紙片（30μg/片）、OXA紙片（1μg/片）、青霉素、頭孢唑啉、頭孢三嗪、阿奇霉素、紅霉素、慶大霉素、四環(huán)素、氯霉素、利福平、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、復(fù)方新諾明、替考拉寧、萬(wàn)古霉素共16種抗菌藥物，購(gòu)自天壇藥物生物技術(shù)開(kāi)發(fā)公司。API 20STAPHGPS藥敏卡購(gòu)自生物梅里埃公司。

1.3 耐甲氧西林葡萄球菌檢測(cè) ①菌株分離鑒定及藥敏試驗(yàn)按操作常規(guī)進(jìn)行，葡萄球菌再用API 20STAPH證實(shí)；②FOX紙片法、OXA紙片法、MIC法根據(jù)CLSI 2007年標(biāo)準(zhǔn)判斷結(jié)果，F(xiàn)OX紙片法抑菌環(huán)直徑≤19 mm 為MRSA，≥20 mm為甲氧西林敏感金黃色葡萄球菌（MSSA）；≤24 mm 為MRCNS，≥25 mm為甲氧西林敏感凝固酶陰性葡萄球菌（MSCNS）。OXA紙片法抑菌環(huán)直徑≤10 mm為MRSA，≥13 mm為MSSA；≤17 mm為MRCNS，≥18 mm為MSCNS；MIC法以≥4 μg/ml為MRSA，≤2 μg/ml為MSSA；≥0.5 μg/ml為MRCNS，≤0.25 μg/ml為MSCNS。

１.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 計(jì)數(shù)資料采用χ²檢驗(yàn)。

２ 結(jié)果

2.1340株葡萄球菌FOX紙片法MRSA和MRCNS檢出率（%）見(jiàn)表1。

2.2 FOX紙片法、OXA紙片法、MIC法檢測(cè)MRSA、MRCNS敏感性和特異性結(jié)果 FOX紙片法、OXA紙片法、MIC法檢測(cè)MRSA敏感性分別為100%、99.22%、97.67%，差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ²=1.004；3.035，均P>0.05)，檢測(cè)MRCNS敏感性分別為100%、96.77%、98.39%差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ²=3.047；2.021，均P>0.05) 檢測(cè)MRSA特異性分別為100%、96.91%、97.94%,差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ²=2.033；1.008，均P>0.05)檢測(cè)MRCNS特異性分別為100%、69.23%、59.62%差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(χ²=18.909；26.313，均P＜0.01)見(jiàn)表2。

2.3 340株葡萄球菌對(duì)14種抗菌藥物耐藥結(jié)果 MRSA+MRCNS耐藥率明顯高于MSSA+MSCNS（P＜0.01） (紅霉素差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義P>0.05)。有6種抗生素同時(shí)耐藥占52.3%。對(duì)替考拉寧有11株中敏，未檢出替考拉寧和萬(wàn)古霉素耐藥菌株。見(jiàn)表3。

3 討論

葡萄球菌在20世紀(jì)80年代后感染率、耐藥范圍及程度逐年增加，特別是MRSA+MRCNS具有毒性、耐藥廣泛、療效差易于傳播等特點(diǎn)，引起急性、亞急性、慢性、急性復(fù)發(fā)性、慢性急性發(fā)作各型鼻腔、鼻竇炎癥，成為院內(nèi)感染和社區(qū)感染重要致病菌。MRSA、MRCNS檢出率文獻(xiàn)報(bào)道不一，陳俊^[2]等為37.6%、38.3%；張卉^[3]為53.85%、61.76%；本試驗(yàn)結(jié)果為67.54%、65.10%。檢出率相互存在差異其原因可能與檢測(cè)方法敏感性和特異性差異，病程標(biāo)本選擇差異及區(qū)域性差異有關(guān)。目前檢測(cè)MRSA和MRCNS方法普遍采用OXA紙片法和MIC法（GPS藥敏卡），檢測(cè)MRSA的敏感性和特異性與陳穎^[4]報(bào)道的99.10%、100.00%和97.10%、100.00%結(jié)果相近，與FOX紙片法比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05）。但FOX紙片法能檢出低水平異質(zhì)性MRSA，敏感性高。OXA紙片法和MIC法檢測(cè)MRCNS特異性低，分別為69.23%和59.62%，有較高假陽(yáng)性，臨床容易導(dǎo)致誤診和耐藥菌株產(chǎn)生，應(yīng)引臨床高度起重視。FOX紙片法檢測(cè)MRCNS特異性明顯優(yōu)于OXA紙片法和MIC法（P＜0.01），但其敏感性差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P>0.05），與文獻(xiàn)報(bào)道相同^[5]。

染色體介導(dǎo)的基因編碼PBP2a和質(zhì)粒轉(zhuǎn)導(dǎo)、轉(zhuǎn)化或插入是導(dǎo)致葡萄球菌的耐藥主要原因。340株葡萄球菌藥敏結(jié)果顯示，MRAS和MRCNS對(duì)14種抗菌藥物耐藥率>50%有7種（青霉素、阿奇霉素、紅霉素、四環(huán)素、氯霉素、環(huán)丙沙星、左氧氟沙星），青霉素類、頭孢菌素類、氯霉素類、多數(shù)氨基糖苷類、四環(huán)素類、大環(huán)內(nèi)酯類、喹諾酮類）體外敏感，臨床治療無(wú)效；MSSA+MSCNS耐藥率>50%有3種（青霉素、阿奇霉素、紅霉素）；葡萄球菌對(duì)利福平有較高敏感性。MRSA+MRCNS耐藥率明顯高于MSSA+MSCNS（P＜0.01），且多重耐藥。有11株對(duì)替考拉寧中敏，提示對(duì)糖肽類抗生素耐藥壓力增大^[6]，未檢出替考拉寧和萬(wàn)古霉素耐藥菌株。

總之，鼻腔-鼻竇葡萄球菌MRSA和MRCNS檢出率高，對(duì)多種抗生素耐藥壓力增大，應(yīng)引起耳鼻咽喉-頭頸外科醫(yī)師的重視。鼻腔-鼻竇感染治療前或術(shù)后出現(xiàn)不明原因發(fā)熱、頭痛、鼻分泌物明顯增多的患者及時(shí)進(jìn)行分泌物微生物培養(yǎng)，對(duì)MRSA和MRCNS分離鑒定，選擇有效藥物治療，防止MRSA和MRCNS醫(yī)源性感染。

參 考 文 獻(xiàn)

［1］ 張文紅. 耐甲氧西林葡萄球菌醫(yī)院感染耐藥性分析. 中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2007，17（8）：998-999.

［2］ 陳俊，傅愛(ài)清，朱秋萍，等.慢性鼻竇炎耐甲氧西林葡萄球菌對(duì)抗生素的耐藥分析.山東大學(xué)耳鼻喉眼學(xué)報(bào),2007，21（2）:130-135.

［3］ 張卉. 葡萄球菌耐藥性監(jiān)測(cè)及分析. 實(shí)用醫(yī)技雜志, 2006，13（08）：1284.

［4］ 陳穎，周建黨，郭建軍. 頭孢西丁擴(kuò)散法檢測(cè)耐甲氧西林葡萄球菌異質(zhì)性耐藥菌株的評(píng)價(jià).中南大學(xué)學(xué)報(bào)（醫(yī)學(xué)版）,2007， 32(1): 179-181.

［5］ 趙瑞珍，陳乾，劉彬，等. 頭孢西丁紙片法檢測(cè)mecA基因介導(dǎo)的MRS. 中華醫(yī)院感染雜志, 2006，16（07）：839-840.

［6］ 張遠(yuǎn)春，李爽，李鳳蓮，等.耐甲氧西林凝固酶陰性葡萄球菌對(duì)糖肽類耐藥的檢測(cè)與分析. 中華醫(yī)院感染雜志,2007，17（9）:1152-1155.