穴位注射對(duì)慢性萎縮性胃炎患者ＰＣＮＡ和ＡＧ－ＮＯＲ的影響

陳德成　吳　旭等

陳德成吳旭朱云華王雅如朱長(zhǎng)樂

(中國(guó)中醫(yī)研究院針灸研究所,北京100700;1南京中醫(yī)藥大學(xué)附屬醫(yī)院)

摘要對(duì)15例慢性萎縮性胃炎病人,采用足三里、胃俞、肝俞穴位注射黃芪注射液和當(dāng)歸注射液治療,觀察治療前后胃粘膜病理組織學(xué)增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和核仁組成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NOR)的變化。結(jié)果顯示治療后PCNA的陽性表達(dá)例數(shù)明顯減少(P<0.01),Ag-NOR計(jì)數(shù)也明顯減少(P<0.05),說明本療法對(duì)胃粘膜細(xì)胞增殖、增生和分化具有調(diào)控作用,從而抑制胃粘膜異型增生,治愈CAG,防止癌變。

主題詞胃炎,萎縮性/穴位療法抗原/分析銀蛋白質(zhì)類/分析細(xì)胞核抗原水針慢性萎縮性胃炎(簡(jiǎn)稱CAG)是消化系統(tǒng)易癌變的常見難治病之一。筆者近年來采用穴位注射療法治療CAG取得滿意療效,其中部分病人進(jìn)行了病理組織學(xué)增殖細(xì)胞核抗原(PCNA)和核仁組成區(qū)嗜銀蛋白(Ag-NOR)檢查,觀察該兩項(xiàng)指標(biāo)在CAG患者胃粘膜上皮中治療前后的陽性表達(dá),來判斷穴位注射治療CAG的療效和預(yù)后,以及探討其作用的機(jī)理。

1一般資料

符合CAG診斷標(biāo)準(zhǔn)^[1]的15例病人中,男6例,女9例;年齡最小38歲,最大68歲,平均54.32±6.45歲;病程最短1年,最長(zhǎng)30年,平均12.08±7.65年;病情:重度(固有腺體減少2/3以上者)6例,中度(固有腺體減少1/3～2/3者)7例,輕度(固有腺體減少1/3以內(nèi)者)2例;伴腸化14例,伴異型增生5例,伴幽門螺桿菌(HP)感染13例。

2觀察方法

2.1治療方法

取穴:足三里、胃俞、肝俞。藥物:黃芪注射液、當(dāng)歸注射液。

操作:用10 ml注射器、5號(hào)針頭,吸取上述藥液各4 ml搖勻,胃俞、肝俞穴直刺或斜刺,深度不超過2 cm,足三里穴刺入2.5～3.0 cm,進(jìn)針后回抽無回血,即可緩緩?fù)迫胨幰?每穴注入2 ml左右,左右交替進(jìn)行,隔日1次,3個(gè)月為一個(gè)療程。

2.2檢測(cè)方法

患者胃鏡檢查時(shí),取病理活檢組織標(biāo)本3～4塊,福爾馬林固定,石蠟包埋,連續(xù)切片,片厚4 μm備用。治療前后取材部位可盡可能相同,由同一胃鏡醫(yī)生操作及同一病理醫(yī)生讀片。。

2.3Ag-NOR技術(shù)

銀膠染色法,試劑盒由福建三強(qiáng)生物化工有限公司提供。

3結(jié)果

15例CAG患者經(jīng)過1～2個(gè)療程治療,臨床癥狀(腹脹、胃痛、噯氣、嘈雜、食欲減退等)基本消除,胃鏡、病理等指標(biāo)明顯改善。

3.1PCNA檢測(cè)

PCNA染色切片,應(yīng)用半定量分級(jí)方法,采用Jains診斷標(biāo)準(zhǔn)^[2],觀察5個(gè)具有代表性的高倍視野,按陽性細(xì)胞所占比例劃分為4級(jí),即0～25%為Ⅰ級(jí),26%～50%為Ⅱ級(jí),51%～75%為Ⅲ級(jí),76%～100%為Ⅳ級(jí)。

PCNA免疫染色一般位于核上,表現(xiàn)為顆粒樣或彌漫性,正常胃粘膜小凹頸細(xì)胞可見弱的表達(dá),而CAG病人PCNA的陽性細(xì)胞多出現(xiàn)于胃粘膜頸部增殖帶,個(gè)別出現(xiàn)在粘膜淺層,一般呈細(xì)顆粒均勻分布,少數(shù)為粗顆粒雜亂散在,部分切片可見一處或幾處強(qiáng)陽性細(xì)胞群,提示細(xì)胞增殖活性較強(qiáng)。

15例CAG病人治療前后PCNA陽性細(xì)胞分級(jí)表達(dá)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)秩和檢驗(yàn)結(jié)果見表1。

從表1可以看出,治療后PCNA陽性表達(dá)的例數(shù)明顯減少(P<0.01),即治療后PCNA陽性表達(dá)明顯低于治療前,說明對(duì)增殖帶細(xì)胞過度增生具有調(diào)控作用。3.2Ag-NOR檢測(cè)

鏡下觀察銀染切片細(xì)胞核內(nèi)Ag-NOR陽性顆粒,觀察典型病變中的100個(gè)細(xì)胞,計(jì)數(shù)每個(gè)細(xì)胞核內(nèi)的Ag-NOR顆粒數(shù)取平均值。

一般正常胃粘膜核內(nèi)Ag-NOR顆粒大多為1～2個(gè),且大小較一致,均為核仁型,而CAG病人則多少不等,多數(shù)為2～4個(gè),大小也略有不同,個(gè)別有團(tuán)塊狀,15例CAG病人治療前后Ag-NOR顆粒計(jì)數(shù)經(jīng)統(tǒng)計(jì)學(xué)t檢驗(yàn)結(jié)果見表1,從表1可以看出治療后Ag-NOR計(jì)數(shù)明顯減少(P<0.05),說明對(duì)細(xì)胞的增殖、增生和分化具有調(diào)控作用。

4討論

當(dāng)CAG腺體萎縮、消失時(shí),常伴隨頸部腺體的增生,這是一種對(duì)損傷的修復(fù)、代償現(xiàn)象,當(dāng)增生過度時(shí)會(huì)出現(xiàn)組織結(jié)構(gòu)的異型性,主要表現(xiàn)為細(xì)胞異型、結(jié)構(gòu)紊亂和分化異常,即出現(xiàn)異型增生,這是真正的癌前病變。本研究通過對(duì)CAG病人胃粘膜進(jìn)行PCNA和Ag-NOR檢測(cè),發(fā)現(xiàn)穴位注射具有明顯的調(diào)控細(xì)胞增殖和分化的作用。

PCNA是具有36 KD的多肽,為DNA多聚酶的輔助蛋白,并在增殖細(xì)胞中合成與表達(dá),PCNA的異常活躍和表達(dá),能反映出病變的增殖點(diǎn),提示潛在的惡變信息^[3],為胃癌的早期診斷和預(yù)后提供參考^[4]。Ag-NOR是DNA的一個(gè)片段,位于5對(duì)染色體特殊部位的核糖體基因,在銀染時(shí)與其相關(guān)酸性非蛋白的結(jié)合產(chǎn)物,它與核糖體基因轉(zhuǎn)錄及細(xì)胞的增殖活性密切相關(guān)。Ag-NOR顆粒數(shù)在細(xì)胞分裂期間增多是惡性細(xì)胞的特征之一,被廣泛應(yīng)用于腫瘤的分型、分級(jí)以及癌前病變的診斷^[5],PCNA和Ag-NOR聯(lián)合檢測(cè),是在細(xì)胞的動(dòng)力學(xué)基礎(chǔ)上,從不同角度反映病變細(xì)胞的增殖狀態(tài),以觀察癌變的趨勢(shì)和程度。

本研究結(jié)果顯示:CAG病人治療后PCNA陽性表達(dá)明顯減少(P<0.01),Ag-NOR顆粒數(shù)也明顯減少(P<0.05),可見Ag-NOR的檢測(cè)結(jié)果與PCNA相平行,充分證明胃粘膜增殖區(qū)的細(xì)胞分裂、合成和代謝活動(dòng)受到了控制,也說明穴位注射具有調(diào)控細(xì)胞增殖和分化的作用,從而抑制胃粘膜異型增生,治愈CAG,防止癌變。

5參考文獻(xiàn)

1李益農(nóng),等.慢性胃炎的診斷問題.中華內(nèi)科雜志,1983;(5):257

2Jams,et al.Application of Proliferating Cell Nuecleer.Antigen(PCNA) Immunosining inGastric Carcinoma J Pathol,1991;(6):351

3Anderson NE,Roseublum MK,Grans F.et al.Neurolongy,1988;(38):1391

4Posner JB,Dalman J,Fumeaux HM et al. Neurology,1990;(40):165

5王梅先,等.PCNA及Ag-NOR在胃粘膜上皮增生中的檢測(cè)及其病理生物學(xué)意義.中國(guó)實(shí)驗(yàn)臨床免疫學(xué)雜志,1995;(4):18

(收稿日期,1999-12-27,齊淑蘭發(fā)稿)