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    八珍益母片中芍藥苷的含量測定

    2013-10-31 05:47:16全維明董禮
    關(guān)鍵詞:重復(fù)性芍藥乙醇

    全維明 董禮

    八珍益母片由益母草、黨參、熟地黃、當(dāng)歸、白芍、茯苓、白術(shù)(麩炒)、川芎、甘草9味藥材組成,有補虛益氣,養(yǎng)血調(diào)經(jīng)的功效,用于婦女氣血兩虧,體虛乏力,月經(jīng)不調(diào)[1]。八珍益母片收載于衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)中藥成方制劑第六冊,標(biāo)準(zhǔn)中未收載含量測定方法。《中國藥典》2010年版一部收載了HPLC法測定八珍益母丸[2]和八珍益母膠囊[2]中芍藥苷的含量。本文對主藥白芍中芍藥苷的含量測定方法進行研究,建立了HPLC法測定芍藥苷含量的方法,本方法簡便、準(zhǔn)確,重復(fù)性好,適合八珍益母片中芍藥苷的定量分析。

    1 儀器和試藥

    Agilent 1100高效液相色譜儀,賽多利斯BD-125電子天平,色譜柱 Agilent 20RBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm)、Phenomenex 00G-4252-E0 C18(250 mm × 4.6 mm,5μm)、Waters Symmetry ShieldTM RP18(250 mm ×4.6 mm,5μm);芍藥苷對照品購自中國藥品生物制品檢定所(批號:110736-200934);乙腈為色譜純,乙醇、磷酸為分析純;八珍益母片由雅安三九藥業(yè)有限公司研制,批號:100401,100402,100403。

    2 溶液的制備

    2.1 對照品溶液 稱取芍藥苷對照品13.05 mg,置于25 ml容量瓶中,加稀乙醇溶解并稀釋至刻度,即得每1 ml含芍藥苷0.522 mg的對照品溶液。

    2.2 供試品溶液和陰性對照溶液 取本品10片,精密稱定,研細,精密稱取1.0 g粉末置于25 ml容量瓶中,加稀乙醇適量,超聲40 min溶解后,加稀乙醇至刻度,濾過,作為供試品溶液。另取缺白芍藥材的陰性對照樣品10片,同法制成陰性對照溶液。

    3 色譜條件

    色譜柱 Agilent 20RBAX SB-C18(250 mm×4.6 mm,5μm),流動相為乙腈-0.1%磷酸溶液(17∶83),檢測波長:230nm,流速:1.0 ml/min,進樣量:10 μl,柱溫 35℃。取對照品溶液1 ml加稀乙醇至10 ml,在本文色譜條件下,理論塔板數(shù)大于8000,芍藥苷對照品和供試品、陰性樣品的色譜圖見圖1。

    圖1 高效液相色譜圖

    4 方法學(xué)考察

    4.1 線性關(guān)系考察 精密量取對照品溶液0.2,0.5,1,2,4 ml,用稀乙醇定溶到5 ml,按本文色譜條件各進樣10μL,以峰面積值Y為縱坐標(biāo),進樣量X為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,得回歸方程:Y=10.4X-115.8 r=0.9999

    結(jié)果表明芍藥苷進樣量在0.2088~4.176μg范圍內(nèi)線性關(guān)系良好。

    4.2 精密度試驗 取供試品溶液,在本文色譜條件下重復(fù)進樣6次,記錄峰面積,結(jié)果RSD為0.6%(n=6)。

    4.3 穩(wěn)定性考察 取供試品溶液,在0,4,8,12,16,24 h進行測定,計算RSD為0.73%。表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

    4.4 重復(fù)性試驗 分別平行配制同一批樣品(批號100401)的供試品溶液6份,在本文色譜條件下進樣,測定,芍藥苷含量平均值為0.535 mg/片,RSD為1.2%。結(jié)果重復(fù)性良好。

    4.5 加樣回收率試驗 精密稱取已經(jīng)測知含量的八珍益母片(芍藥苷含量為0.535 mg/片)細粉0.5 g,加入芍藥苷對照品,稀乙醇溶解,進樣10 μl。結(jié)果加樣回收率在97.7% ~99.7%之間,平均加樣回收率為98.7%(n=6)。

    4.6 樣品測定 取三批樣品,按“2.2”項下方法制備供試品溶液和“3”項下色譜條件測定峰面積,按外標(biāo)法計算芍藥苷的含量,結(jié)果見表1。

    表1 樣品測定結(jié)果(n=4)

    4.7 耐用性驗證 用phenomenex 00G-4252-E0 C18(250 mm×4.6 mm,5μm)、Agilent 20RBAX SB-C18(250 mm × 4.6 mm,5μm)、Waters Symmetry ShieldTM RP18(250 mm ×4.6 mm,5μm)3根不同廠家的色譜柱,分別按照上述色譜條件測定芍藥苷的含量,RSD為0.9%。

    5 結(jié)論

    八珍益母片為非處方藥,以芍藥苷的含量作為指標(biāo),可有效地控制其產(chǎn)品質(zhì)量。本方法簡便、準(zhǔn)確,重復(fù)性好,可用于八珍益母片中芍藥苷的含量測定。

    [1] Drug Specification Promulgated by the Ministry of Public Health,P R China(衛(wèi)生部藥品標(biāo)準(zhǔn)).WS3-B-1076-92

    [2] 國家藥典委員會.中國藥典(一部),北京,中國醫(yī)藥科技出版社,2010:435,436.

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