三種漁藥對(duì)麥穗魚(yú)幼魚(yú)急性毒性的研究

摘要：在水溫20～22℃條件下，對(duì)體長(zhǎng)28±03 cm、體質(zhì)量18±02 g的麥穗魚(yú)幼魚(yú)進(jìn)行聚維酮碘、恩諾沙星、甲苯咪唑靜水急性毒性試驗(yàn)。結(jié)果顯示：聚維酮碘、恩諾沙星、甲苯咪唑?qū)溗媵~(yú)6、12、24和48 h的半致死濃度分別為4465、3602、338、3224 mg/L，250、250、1125、66667 mg/L，151、134、0887、083 mg/L；48 h安全濃度分別為0322、6667、0083 mg/L。試驗(yàn)結(jié)果表明，麥穗魚(yú)幼魚(yú)對(duì)三種漁藥的敏感性大小依次為：甲苯咪唑＞聚維酮碘＞恩諾沙星。在麥穗魚(yú)養(yǎng)殖過(guò)程中，恩諾沙星在保證使用劑量時(shí)可安全使用，甲苯咪唑應(yīng)謹(jǐn)慎使用。

關(guān)鍵詞：麥穗魚(yú)；急性毒性；半致死濃度；安全濃度

中圖分類號(hào)：S948文獻(xiàn)標(biāo)識(shí)碼：A

麥穗魚(yú)（Pseudorasbora parva），屬于鯉形目（Cypriniformes）、鯉科（Cyprinidae）、鮈亞科（Gobioninae）、麥穗魚(yú)屬（Pseudorasbora），主要分布于流速較緩的水域或水生植物豐富的淺水區(qū)域，具有環(huán)境適應(yīng)性強(qiáng)、繁殖能力強(qiáng)、雜食性、廣溫性和廣適性的特點(diǎn)［1］。麥穗魚(yú)通常以浮游生物、孑孓為食，具有一定的經(jīng)濟(jì)價(jià)值，常被用作觀賞魚(yú)、龜鱉的優(yōu)質(zhì)餌料以及家禽飼料［2］。目前，對(duì)麥穗魚(yú)的研究多集中于其生物學(xué)特性［3-6］、養(yǎng)殖技術(shù)［7-8］及農(nóng)藥、重金屬、洗滌劑等環(huán)境污染物對(duì)其產(chǎn)生的急性毒性的影響［9-13］，而聚維酮碘、恩諾沙星、甲苯咪唑三種藥物對(duì)麥穗魚(yú)的毒性研究至今尚無(wú)報(bào)道。本試驗(yàn)的研究結(jié)果將為麥穗魚(yú)人工養(yǎng)殖過(guò)程中三種藥物的合理施用提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

11 試驗(yàn)魚(yú)

試驗(yàn)所用麥穗魚(yú)幼魚(yú)來(lái)自河北省秦皇島市盧龍縣魚(yú)種場(chǎng)，平均體長(zhǎng)28±03 cm，平均體質(zhì)量18±02 g。試驗(yàn)前將幼魚(yú)暫養(yǎng)于底面直徑為56 cm，高為125 cm的塑料圓桶中，暫養(yǎng)7 d正常投飼，待試驗(yàn)魚(yú)適應(yīng)環(huán)境后，挑選無(wú)病健康、行動(dòng)活潑的麥穗魚(yú)作為試驗(yàn)用魚(yú)開(kāi)始試驗(yàn)，試驗(yàn)前2 d停止投飼。

12 試驗(yàn)條件

室溫條件下，在容量為6 L的塑料圓桶中裝入pH 72、溶解氧70～85 mg/L、水溫20～22℃的5 L水進(jìn)行試驗(yàn)。

13 試驗(yàn)藥物

試驗(yàn)所用藥物見(jiàn)表1，使用蒸餾水配制試驗(yàn)藥物，再根據(jù)所需質(zhì)量濃度稀釋。

14 試驗(yàn)方法

采用靜水試驗(yàn)法，其間不喂食以排除殘留餌料和糞便對(duì)結(jié)果的干擾，并定期觀測(cè)與記錄魚(yú)的行為［14］。正式試驗(yàn)前先進(jìn)行預(yù)試驗(yàn)，依據(jù)預(yù)試驗(yàn)的結(jié)果設(shè)定正式試驗(yàn)的濃度梯度。在正式試驗(yàn)中，設(shè)置5個(gè)濃度梯度組和一個(gè)空白對(duì)照組，每組分設(shè)3個(gè)重復(fù)，每個(gè)重復(fù)放入10尾麥穗魚(yú)幼魚(yú)。對(duì)照組置于與試驗(yàn)組相同條件的水環(huán)境中，不添加任何藥物。試驗(yàn)過(guò)程中，每8 h對(duì)麥穗魚(yú)幼魚(yú)的活動(dòng)狀況、中毒癥狀和死亡情況進(jìn)行觀察記錄1次，持續(xù)至48 h。如果魚(yú)在3 min的刺激內(nèi)沒(méi)有反應(yīng)，則被判斷為死亡，及時(shí)記錄死亡時(shí)間和數(shù)量［15］。

采用直線內(nèi)插法分別計(jì)算每一濃度梯度組6、12、24和48 h半致死濃度，公式為：LC50=C1+（50%-P1）×（C2-C1）/（P2-P1）。式中：C1、C2為死亡率近50%的低端和高端藥液濃度；P1、P2為死亡率近50%的低端和高端死亡率。安全濃度的計(jì)算采用經(jīng)驗(yàn)公式為：安全濃度（SC）=48 h LC50×01［16］。

2 結(jié)果與分析

21 麥穗魚(yú)幼魚(yú)死亡率及中毒癥狀

麥穗魚(yú)幼魚(yú)的死亡率如表2所示，結(jié)果表明，三種漁藥對(duì)麥穗魚(yú)幼魚(yú)均具有一定程度的毒性作用，且在一定濃度范圍內(nèi)，隨著濃度的增加，毒性逐漸增強(qiáng)。

聚維酮碘試驗(yàn)開(kāi)始后的4 h，在5個(gè)濃度梯度組中的麥穗魚(yú)幼魚(yú)入水后急性應(yīng)激反應(yīng)均出現(xiàn)增加，表現(xiàn)為經(jīng)常浮至水面附近，在臨近水面下來(lái)回游動(dòng)，偶爾跳躍。濃度416 、477 和538 mg/L的試驗(yàn)組，1 h幼魚(yú)即出現(xiàn)死亡。死亡前急性毒性表現(xiàn)為旋轉(zhuǎn)游動(dòng)后沉入水底并側(cè)面躺在試驗(yàn)桶底部。各試驗(yàn)組中麥穗魚(yú)幼魚(yú)的死亡特征為體表顏色變淺至淺黃色，尤其是鰭部和鱗片的顏色變淺明顯，同時(shí)眼球突出、口部張開(kāi)、腹部發(fā)白、身體呈不自然彎曲。

恩諾沙星試驗(yàn)初期各試驗(yàn)組麥穗魚(yú)表現(xiàn)正常，并無(wú)異?；顒?dòng)現(xiàn)象，對(duì)恩諾沙星并不敏感。隨著試驗(yàn)時(shí)間的增加，各濃度組的麥穗魚(yú)活動(dòng)減少，出現(xiàn)靜止停游在試驗(yàn)桶底部的現(xiàn)象，又在死亡前的6 h內(nèi)出現(xiàn)活動(dòng)性增加，貼近水面中層和上層游動(dòng)，個(gè)別魚(yú)貼近水面張口呈呼吸狀。中毒表現(xiàn)為游動(dòng)速度減慢后停止不動(dòng)，躺在試驗(yàn)桶底部，個(gè)別魚(yú)先在水面漂游，后失去平衡，尾部偶爾擺動(dòng)一次，鰓部和口部慢慢張合，身體不正常蜷曲。隨著試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)，高濃度組試驗(yàn)魚(yú)出現(xiàn)運(yùn)動(dòng)失衡、呼吸困難等癥狀，先是減緩游動(dòng)，后側(cè)身游動(dòng)和翻滾游動(dòng)，無(wú)法掌握身體平衡，翻身側(cè)躺在桶底部，逐漸停止活動(dòng)，隨后死亡，最后漂浮水面。在250 mg/L濃度下，試驗(yàn)開(kāi)始4 h后麥穗魚(yú)幼魚(yú)中毒表現(xiàn)為眼球普遍突出，張嘴沿桶壁游動(dòng)，貼近水面，個(gè)別魚(yú)出現(xiàn)跳躍現(xiàn)象；死亡后的表現(xiàn)為部分腹部顏色發(fā)白和部分腹部有出血點(diǎn)，眼球突出，口部普遍張開(kāi)，側(cè)臥漂浮水面。

甲苯咪唑的低濃度組中，麥穗魚(yú)幼魚(yú)的存活率較高，但表現(xiàn)出行為異常，如在水面上層游動(dòng)、游動(dòng)速度減緩；在高濃度組中，麥穗魚(yú)出現(xiàn)明顯的應(yīng)激反應(yīng)，如圍繞桶壁迅速游動(dòng)、撞擊桶壁等。濃度151 mg/L的試驗(yàn)組，5 h幼魚(yú)即出現(xiàn)死亡，先出現(xiàn)嚴(yán)重的中毒性癥狀，如劇烈扭動(dòng)、失去平衡、圍繞試驗(yàn)桶旋轉(zhuǎn)游動(dòng)，中毒后表現(xiàn)為活動(dòng)下降，如部分沉于水底側(cè)臥、部分漂浮于水面。死亡魚(yú)身上有少量白色絮狀物，身體呈不自然彎曲、眼部發(fā)白，鰓部和腹部均有少量出血點(diǎn)。對(duì)照組試驗(yàn)期間無(wú)死亡。

22 半致死濃度和安全濃度

試驗(yàn)藥物對(duì)麥穗魚(yú)幼魚(yú)的半致死濃度及安全濃度見(jiàn)表3，隨著藥物的質(zhì)量濃度增加和試驗(yàn)時(shí)間的延長(zhǎng)，麥穗魚(yú)幼魚(yú)死亡率逐漸升高。聚維酮碘、恩諾沙星、甲苯咪唑的48 h LC50依次為3224、66667和0830 mg/L，試驗(yàn)藥物對(duì)麥穗魚(yú)幼魚(yú)毒性大小依次為甲苯咪唑＞聚維酮碘＞恩諾沙星。

3 討論

31 麥穗魚(yú)幼魚(yú)對(duì)三種試驗(yàn)藥物的耐受力

聚維酮碘是一種常見(jiàn)的高效低毒消毒劑，具有氧化和抗菌能力，在水中能迅速釋放活性碘離子與魚(yú)體內(nèi)的微生物和蛋白質(zhì)發(fā)生反應(yīng)，破壞細(xì)胞膜的完整性，抑制細(xì)菌的代謝和生長(zhǎng)，同時(shí)也可能對(duì)魚(yú)體自身的細(xì)胞產(chǎn)生傷害。在實(shí)際應(yīng)用中聚維酮碘對(duì)魚(yú)蝦類的使用濃度為02～05 mg/L，本試驗(yàn)中聚維酮碘對(duì)麥穗魚(yú)幼魚(yú)的安全濃度為0322 mg/L，當(dāng)聚維酮碘使用濃度位于安全濃度范圍內(nèi)時(shí)，可以使用。

恩諾沙星（Enrofloxacin）是一種廣譜抗菌藥，屬于氟喹諾酮類抗生素，通過(guò)抑制細(xì)菌DNA的合成和復(fù)制，阻斷細(xì)菌的生長(zhǎng)和繁殖，達(dá)到治療細(xì)菌感染的目的。在魚(yú)類體內(nèi)恩諾沙星可能與生物酶發(fā)生作用，導(dǎo)致酶活性失調(diào)，影響魚(yú)體的正常生理功能。在實(shí)際應(yīng)用中使用恩諾沙星浸浴的濃度為4 mg/L，本試驗(yàn)麥穗魚(yú)幼魚(yú)的安全濃度為6667 mg/L，麥穗魚(yú)的安全濃度高于常用濃度，可放心使用，但需合理用量并控制時(shí)間，防止出現(xiàn)耐藥性。

甲苯咪唑（Mebendazole）作為一種廣譜抗寄生蟲(chóng)藥物，是苯并咪唑類化合物，通過(guò)干擾寄生蟲(chóng)的代謝和生長(zhǎng)過(guò)程，導(dǎo)致寄生蟲(chóng)死亡，甲苯咪唑也可能對(duì)魚(yú)體自身的細(xì)胞產(chǎn)生一定的毒性作用，比如影響細(xì)胞膜的穩(wěn)定性和細(xì)胞內(nèi)生化過(guò)程，影響魚(yú)的健康。在實(shí)際應(yīng)用中使用甲苯咪唑的濃度為01～015 mg/L，本試驗(yàn)麥穗魚(yú)幼魚(yú)的安全濃度為0083 mg/L，安全濃度低于常用濃度，應(yīng)避免使用。

試驗(yàn)結(jié)果表明，聚維酮碘、恩諾沙星在保證使用劑量時(shí)可安全使用，甲苯咪唑應(yīng)避免使用。

32 三種試驗(yàn)藥物對(duì)其他魚(yú)類的耐受力比較

恩諾沙星對(duì)德國(guó)鏡鯉夏花魚(yú)種的安全濃度為155 mg/L［21］，遠(yuǎn)高于對(duì)麥穗魚(yú)的安全濃度6667 mg/L。試驗(yàn)結(jié)果表明，麥穗魚(yú)對(duì)恩諾沙星的耐受性較低，對(duì)恩諾沙星的劑量敏感。

如表5所示，甲苯咪唑?qū)溗媵~(yú)幼魚(yú)的安全濃度0083 mg/L僅低于虹鱒幼魚(yú)的安全濃度0165 mg/L［22］，高于長(zhǎng)吻鮠的安全濃度005 mg/L［23］，且遠(yuǎn)遠(yuǎn)高于金魚(yú)的安全濃度0029 mg/L［24］、黑尾近紅鲌魚(yú)的安全濃度0028 mg/L［25］、美洲鰣的安全濃度0027 mg/L［26］、花鰻鱺黑仔苗種的安全濃度0023 mg/L［27］。麥穗魚(yú)對(duì)甲苯咪唑的耐受性在上述六種魚(yú)（除虹鱒幼魚(yú)）中最高，耐受性較高。

4 結(jié)論

試驗(yàn)結(jié)果表明，麥穗魚(yú)幼魚(yú)對(duì)三種漁藥的敏感性大小依次為：甲苯咪唑＞聚維酮碘＞恩諾沙星。聚維酮碘、恩諾沙星在保證使用劑量時(shí)可安全使用，甲苯咪唑應(yīng)避免使用。

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