黃豆醬白點(diǎn)控制措施研究綜述

關(guān)鍵詞：黃豆醬白點(diǎn)酪氨酸結(jié)晶體控制

0引言

黃豆醬是一種以黃豆、面粉為主要原料，經(jīng)微生物發(fā)酵而成的傳統(tǒng)調(diào)味食品。在我國豆醬種類中黃豆醬產(chǎn)量最大，對其發(fā)酵和功能性成分[1，2]研究也比較深入。但是在黃豆醬的生產(chǎn)貯藏過程中，其表面經(jīng)常會(huì)出現(xiàn)直徑大約為1mm的乳白色硬圓狀小顆粒，有時(shí)呈較大片狀白斑，俗稱白點(diǎn)，且隨貨架期延長，白點(diǎn)數(shù)量有增多趨勢，這嚴(yán)重影響了黃豆醬成品的外觀和消費(fèi)者的接受度[3，4]。

國內(nèi)外學(xué)者針對黃豆醬白點(diǎn)的性質(zhì)和成因進(jìn)行廣泛研究，主流認(rèn)為黃豆醬白點(diǎn)是由大豆蛋白在酪氨酸羧肽酶（一種酸性蛋白酶）作用下水解產(chǎn)生的酪氨酸結(jié)晶累積析出導(dǎo)致的[5，6]。許多學(xué)者針對解決措施展開研究并取得了一定成效，本文就此做一些綜述和探討。

1菌株的選育與馴化

1.1米曲霉菌株馴化

一些學(xué)者根據(jù)酶生物合成產(chǎn)物阻遏原理，通過向培養(yǎng)基中添加定量酪氨酸，抑制酪氨酸羧肽酶生物合成，完成菌株馴化，以實(shí)現(xiàn)對白點(diǎn)的控制[7]。NIU[8]在米曲霉培養(yǎng)基中添加1g/L～3g/L酪氨酸發(fā)現(xiàn)，3g/L的添加量降低蛋白酶活性效果最好，馴化至第15代的菌株可穩(wěn)定產(chǎn)生相對少量的中性和酸性蛋白酶，其中中性蛋白酶主要促進(jìn)大豆蛋白溶解，酸性蛋白酶可將肽類分解為氨基酸[9，10]。按傳統(tǒng)工藝發(fā)酵生產(chǎn)蠶豆醬，酪氨酸和苯丙氨酸含量分別降至6.14mg/g（干基）和5.36mg/g（干基）及以下，低于酪氨酸臨界析出量[內(nèi)部多次試驗(yàn)為6.16mg/g（干基）]，結(jié)合優(yōu)化發(fā)酵工藝，儲(chǔ)存12月后也未出現(xiàn)白點(diǎn)，消除白點(diǎn)的同時(shí)適當(dāng)?shù)牡鞍酌富钚砸脖ＷC了產(chǎn)品品質(zhì)。林影[11]在培養(yǎng)基中加入0.1%～0.4%的L-酪氨酸進(jìn)行米曲霉菌株訓(xùn)育，同時(shí)進(jìn)行產(chǎn)品性能測定發(fā)現(xiàn)，訓(xùn)育菌株制得的豆豉，氨基酸總量基本不變，酪氨酸含量大大減小，由13.54mg/g（干基）降至2.54mg/g（干基），鮮味氨基酸含量增加，產(chǎn)品基本沒有白點(diǎn)。何熙[12]添加酪氨酸對毛霉菌株馴化后實(shí)現(xiàn)了對另一豆制品——腐乳白點(diǎn)現(xiàn)象的抑制。鄭立紅[13]和雷宏杰[14]均發(fā)現(xiàn)添加0.3%的L-酪氨酸訓(xùn)育15代所得的米曲霉菌株中性蛋白酶活性仍保持較高水平，而酸性蛋白酶活顯著下降，酪氨酸添加超過0.3%時(shí)，培養(yǎng)基會(huì)出現(xiàn)微量白色不溶物。其中，鄭立紅[13]馴化菌株發(fā)酵所得豆醬儲(chǔ)存30d后未觀察到白點(diǎn)。雷宏杰[14]馴化菌株制得的豆醬成品的理化和感官與生產(chǎn)菌株無明顯區(qū)別，而酪氨酸和苯丙氨酸含量均降低，且低于酪氨酸析出值。查文龍[15]通過培養(yǎng)基添加酪氨酸搭配5V～20V低壓磁場（32℃恒溫）對滬釀米曲霉進(jìn)行馴化15代以上，篩選出一株酪氨酸缺陷型菌株，經(jīng)過大生產(chǎn)應(yīng)用發(fā)現(xiàn)具有較好的消除白點(diǎn)效果，生產(chǎn)的蠶豆醬產(chǎn)品基本無白點(diǎn)物，而原菌種出現(xiàn)大量白點(diǎn)。綜上，說明外源添加酪氨酸馴化菌株運(yùn)用到實(shí)際生產(chǎn)對減少白點(diǎn)生成有一定作用。

1.2酶系缺陷型菌株的篩選

除了對菌株進(jìn)行馴化之外，還有一部分學(xué)者直接進(jìn)行酶系缺陷型菌種的篩選，陳執(zhí)[16]從菌種庫中篩選出酸性蛋白酶高、中性蛋白酶低、缺陷游離酪氨酸羧肽酶的米曲霉菌株M13，進(jìn)行中、大試規(guī)模性能驗(yàn)證發(fā)現(xiàn)，黃豆醬成品游離酪氨酸含量38mg/100mL，低于黃豆醬白點(diǎn)析出臨界值（內(nèi)部多次實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證為100mg/100mL[16]），降低了白點(diǎn)析出風(fēng)險(xiǎn)。

1.3消減游離酪氨酸耐鹽菌的篩選

理論上在后發(fā)酵過程直接添加消耗酪氨酸的耐鹽菌，分解利用酪氨酸也可降低白點(diǎn)析出風(fēng)險(xiǎn)?；瑲g歡[4]等從低游離酪氨酸含量的發(fā)酵罐中篩選得到消減酪氨酸效果較好的耐鹽酵母菌和乳酸菌各1株，將豆醬中的游離酪氨酸含量降至黃豆醬白點(diǎn)析出臨界值100mg/100g以下，有效避免了黃豆醬在釀造過程和貨架期白點(diǎn)析出的風(fēng)險(xiǎn)。經(jīng)過小試優(yōu)化和中、大試規(guī)模性能驗(yàn)證，發(fā)酵0d時(shí)即投料當(dāng)天添加5%耐鹽菌（單菌株或混合菌株）發(fā)酵14d～21d時(shí)消減效果最好，既降低酪氨酸含量，又沒有對理化指標(biāo)、顏色及風(fēng)味造成負(fù)面影響。

2生產(chǎn)工藝優(yōu)化

2.1原料配比

大豆蛋白水解、面粉分解以及Maillard反應(yīng)賦予了黃豆醬獨(dú)特的營養(yǎng)和風(fēng)味。選擇既能減少白點(diǎn)出現(xiàn)，又能不影響其風(fēng)味的原料配比就顯得至關(guān)重要。周韜[17]、覃列豪[18]對比黃豆與面粉5∶5、6∶4、7∶3配比下的發(fā)酵，對大曲酶活進(jìn)行測定，發(fā)現(xiàn)三種蛋白酶、糖化酶、纖維素酶、酪氨酸羧肽酶活性最高點(diǎn)均出現(xiàn)在制曲36h時(shí)，此時(shí)6∶4配比的酸性蛋白酶活最高，7∶3配比的中性蛋白酶、堿性蛋白酶、糖化酶活最高，而針對酪氨酸羧肽酶，在制曲36h時(shí)，5∶5配比酶活最高，7∶3配比相對較低。對成品黃豆醬進(jìn)行理化指標(biāo)測定發(fā)現(xiàn)，不同配比的成品理化指標(biāo)均符合國標(biāo)要求，隨大豆含量升高，氨基酸態(tài)氮和總酸含量升高，還原糖含量與pH降低。對氨基酸組成分析發(fā)現(xiàn)，6∶4和7∶3配比時(shí)，谷氨酸（鮮味氨基酸）、甜味氨基酸含量更高，而天冬氨酸（鮮味氨基酸）相差不大，同時(shí)影響白點(diǎn)出現(xiàn)的酪氨酸在6∶4原料配比下含量最低。三種原料配比所制醬醪均未出現(xiàn)白點(diǎn)。結(jié)合大曲酶活、理化指標(biāo)和氨基酸組成，周韜[17]最終選擇原料配比6∶4作為優(yōu)化后原料配比，而覃列豪[18]考慮酪氨酸羧肽酶活選擇7∶3作為優(yōu)化工藝。

2.2蒸煮條件

原料蒸煮是黃豆醬制作的關(guān)鍵工藝，一方面是為了原料滅菌；另一方面是使大豆蛋白適度變性和淀粉糊化，更利于種曲生長發(fā)育和各種酶系的協(xié)同。同時(shí)蒸煮會(huì)使得蛋白釋放更容易，提高原料利用率；糖類、可溶性蛋白等的溶出也促進(jìn)了黃豆醬的呈味。

肖霄[5]對比高壓蒸煮（0.1MPa，20min）和常壓蒸煮（普通蒸鍋，上汽蒸煮1h）發(fā)現(xiàn)，產(chǎn)品均有白點(diǎn)，只是數(shù)量與產(chǎn)生時(shí)間不同，高壓蒸煮發(fā)酵10天出現(xiàn)細(xì)微白點(diǎn)，而常壓蒸煮發(fā)酵第5天就出現(xiàn)，他提出白點(diǎn)出現(xiàn)與原料蒸煮無直接決定關(guān)系。周韜[17]對比了121℃、20min，121℃、30min和115℃、30min三種蒸煮條件，發(fā)現(xiàn)三種條件下鮮味和甜味氨基酸差異均不明顯，在121℃、20min時(shí)酪氨酸含量最低，為0.08g/100g，蛋白質(zhì)變性適中，氨基酸態(tài)氮和全氮的含量最高；在生產(chǎn)及貯藏期間121℃、30min條件下發(fā)酵得到的黃豆醬有白點(diǎn)生成，最終選擇121℃、20min為較優(yōu)的蒸煮條件。周韜[17]研究了不同蒸煮條件對大豆消化率的影響，優(yōu)化所得最佳蒸煮工藝為121℃、20min，此時(shí)消化率最高，為90.07%，此條件下，原料蛋白變性適中，蛋白質(zhì)被種曲利用的程度最高。綜上，較短的蒸煮時(shí)間會(huì)造成蛋白質(zhì)變性程度不足，導(dǎo)致原料利用度不高，影響后期發(fā)酵；過長的蒸煮時(shí)間和過高的蒸煮溫度會(huì)促使大豆蛋白的過度變性，降低黃豆醬的發(fā)酵品質(zhì)，也有可能產(chǎn)生白點(diǎn)[17]。

2.3種曲接種量

種曲接種量不同對原料的分解程度也不同，是影響豆醬發(fā)酵的重要因素，現(xiàn)在的主流接種量是3‰～5‰，周韜[17]等研究了不同種曲接種量（3‰～5‰）的豆醬發(fā)酵，同時(shí)跟蹤發(fā)酵終端的氨基酸含量，發(fā)現(xiàn)鮮味氨基酸（谷氨酸、天冬氨酸）無明顯差異、甜味氨基酸（絲氨酸）有一定不同，酪氨酸在種曲接種量為3‰時(shí)，含量最低，且此時(shí)的成品在生產(chǎn)貯藏過程中未出現(xiàn)白點(diǎn)，最終選擇3‰的種曲接種量為較優(yōu)接種量。

2.4制曲時(shí)間

雷宏杰[14]研究米曲霉3.042的蛋白酶生成情況發(fā)現(xiàn)，蛋白酶活在制曲72h時(shí)達(dá)最高，隨著繼續(xù)培養(yǎng)，米曲霉產(chǎn)孢子，蛋白酶活開始降低。同時(shí)對比不同制曲時(shí)間（24h～72h）成品中的氨基酸含量發(fā)現(xiàn)，制曲60h時(shí)，苯丙氨酸與酪氨酸含量較低，為6.45mg/g（干基）和6.10mg/g（干基），與正常發(fā)酵的72h比，成品苯丙氨酸高了0.21mg/g（干基），酪氨酸降了1.25mg/g（干基），鮮味氨基酸（谷氨酸、天冬氨酸）所受影響不大。NIU[8]研究蠶豆醬得出相同變化趨勢，但他選擇72h（常規(guī)發(fā)酵）作為最佳培養(yǎng)時(shí)間。洪駟萃[19，20]針對豆豉毛霉菌研究發(fā)現(xiàn)，培養(yǎng)時(shí)間越短白點(diǎn)越不易出現(xiàn)，但培養(yǎng)時(shí)間應(yīng)適度，不宜過短，否則風(fēng)味會(huì)降低。分析原因是較長的培養(yǎng)時(shí)間會(huì)促使蛋白酶系積累，后發(fā)酵加入鹽和其他添加劑，其他酶系協(xié)同作用受到抑制，而酞酰酪氨酸酶仍有較高活性，酪氨酸累積析出產(chǎn)生白點(diǎn)。覃列豪[18]、周韜[17]發(fā)現(xiàn)在黃豆醬不同原料配比下，酪氨酸羧肽酶活性均呈現(xiàn)隨制曲時(shí)間延長而先升后降的趨勢，其中36h時(shí)酶活達(dá)到最高，結(jié)合糖化酶、纖維素酶、蛋白酶和酪氨酸羧肽酶的活性發(fā)現(xiàn)，制曲時(shí)間過短過長都會(huì)影響米曲霉的生長，最終確定收曲時(shí)間為36h。肖霄[5]測得黃豆醬28h曲與40h曲蛋白酶活分別為590和811，觀察成品白點(diǎn)的產(chǎn)生發(fā)現(xiàn)，制曲時(shí)間與其沒有直接決定關(guān)系，只是產(chǎn)生時(shí)間與數(shù)量不同。綜上，制曲時(shí)間不會(huì)直接決定白點(diǎn)的產(chǎn)生，但是會(huì)通過影響蛋白分解度來影響白點(diǎn)的出現(xiàn)，因此在保證適度蛋白分解不至影響風(fēng)味的前提下，減少制曲時(shí)間，可能會(huì)減少白點(diǎn)產(chǎn)生。

2.5鹽水濃度

鹽水濃度是豆醬發(fā)酵環(huán)節(jié)的關(guān)鍵工藝條件，研究表明產(chǎn)品獨(dú)特的氣味和口味取決于鹽度[21]。雷宏杰[22]研究了酪氨酸在不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)NaCL溶液（1%～9%）中的溶解度，發(fā)現(xiàn)質(zhì)量分?jǐn)?shù)為5%時(shí)最大，可達(dá)420mg/L。周韜[17]研究鹽濃度（10%～14%）對酪氨酸羧肽酶活的影響發(fā)現(xiàn)，隨鹽濃度增加，酶活先上升后下降，當(dāng)鹽濃度為12%～14%時(shí)，酶活較低。對比12%～14%鹽濃度下的發(fā)酵，成品豆醬中鮮味氨基酸（谷氨酸、天冬氨酸）無明顯差異，甜味氨基酸（蘇氨酸）含量有一定不同，酪氨酸在12%鹽濃度發(fā)酵時(shí)含量最低。肖霄[5]在實(shí)際操作中發(fā)現(xiàn)，鹽水濃度偏低時(shí)，白點(diǎn)出現(xiàn)速度加快，分析原因可能是較低鹽度時(shí)，蛋白水解酶系反應(yīng)速度加快導(dǎo)致酪氨酸較早較多生成，他提出可以適當(dāng)加大鹽水濃度。NIU[8]對比12%～21%鹽濃度下發(fā)酵產(chǎn)品的氨基酸含量發(fā)現(xiàn)，酪氨酸含量受鹽水濃度影響較小，而苯丙氨酸含量顯著降低，最終選擇18%鹽水濃度。雷宏杰[14]發(fā)現(xiàn)隨鹽濃度增加，苯丙氨酸和酪氨酸均呈逐漸降低趨勢，鹽濃度21%時(shí)，成品苯丙氨酸和酪氨酸含量分別為5.00mg/g（干基）和5.45mg/g（干基），相比較18%鹽濃度分別降低了1.24mg/g（干基）和1.90mg/g（干基），最終選擇21%鹽濃度。閔世豪[23]模擬發(fā)酵發(fā)現(xiàn)，體系鹽濃度變化時(shí)，酪氨酸含量沒有明顯變化，氨氮受鹽濃度的影響也不大。這個(gè)跟趙建新[24]的研究結(jié)果一致，相對來說在30℃、100g/L鹽濃度條件下發(fā)酵，既能保證風(fēng)味又能有效控制酪氨酸。綜上，適當(dāng)提高發(fā)酵鹽水濃度可減少白點(diǎn)的生成，同時(shí)對成品風(fēng)味無太大影響。

2.6鹽水添加量

雷宏杰[14]和NIU[8]等學(xué)者改變蠶豆醬的物料/液體比（1∶1～1∶1.4），優(yōu)化發(fā)酵條件，所得最佳比例為1∶1，在最佳生產(chǎn)工藝下，成品中酪氨酸和苯丙氨酸含量分別降低至5.87mg/g（干基）和4.81mg/g（干基），與優(yōu)化菌株結(jié)合制備蠶豆醬，貯存12個(gè)月后未形成白點(diǎn)。分析原因可能是水量降低時(shí)，產(chǎn)蛋白酶微生物生長速度減慢，降解蠶豆蛋白程度降低，導(dǎo)致氨基酸含量減少[14]。也可能是鹽水添加較少時(shí)，消耗酪氨酸的細(xì)菌能更好地生長，導(dǎo)致酪氨酸被消耗而濃度降低[8]。

2.7發(fā)酵時(shí)間

肖霄[5]發(fā)現(xiàn)合理縮短豆醬前期發(fā)酵時(shí)間能有效消除白點(diǎn)生成。雷宏杰[14]對比不同發(fā)酵時(shí)間時(shí)（10d～35d）成品醬中的氨基酸含量，發(fā)現(xiàn)隨發(fā)酵時(shí)間延長，各種氨基酸的含量均呈現(xiàn)升高→降低→升高→降低的趨勢。這是蛋白酶水解反應(yīng)產(chǎn)游離氨基酸、Maillard反應(yīng)和Strecker氨基酸降解反應(yīng)消耗游離氨基酸的雙重作用結(jié)果。當(dāng)發(fā)酵25d時(shí)，酪氨酸含量最低，為5.26mg/g（干基），苯丙氨酸含量也較低，為6.01mg/g（干基），此時(shí)呈味氨基酸（谷氨酸和天冬氨酸）含量降幅不大，理化指標(biāo)均符合要求。NIU[8]優(yōu)化豆醬發(fā)酵時(shí)間（10d～35d）發(fā)現(xiàn)，發(fā)酵5d時(shí)酪氨酸含量最低，但風(fēng)味不好，最終選擇30d的發(fā)酵時(shí)間，優(yōu)化工藝下，酪氨酸和苯丙氨酸含量降至5.87mg/g（干基）和4.81mg/g（干基）。綜上，合適的發(fā)酵時(shí)間可以降低游離酪氨酸含量進(jìn)而防止白點(diǎn)出現(xiàn)。

2.8發(fā)酵前溫度

肖霄[5]發(fā)現(xiàn)合理提高發(fā)酵前期溫度，可以有效避免白點(diǎn)的生成，但溫度不宜過高，否則會(huì)影響豆醬色澤、鮮味和口感。雷宏杰[14]探究米曲霉產(chǎn)蛋白酶的活性與溫度（20℃～40℃）之間關(guān)系，發(fā)現(xiàn)隨溫度升高，蛋白酶活增加，35℃后開始下降可能是因?yàn)闇囟冗^高米曲霉易老化。閔世豪[23]等設(shè)計(jì)了模擬培養(yǎng)基，并接種米曲霉發(fā)酵，發(fā)現(xiàn)酪氨酸積累與蛋白質(zhì)分解密切相關(guān)，且溫度對二者影響較大。在模擬發(fā)酵70h、30℃、100g/L鹽濃度條件下，可以達(dá)到較高的蛋白質(zhì)分解程度和較低的酪氨酸含量，同時(shí)不影響產(chǎn)品風(fēng)味。覃列豪[18]研究溫度對酪氨酸羧肽酶活性的影響發(fā)現(xiàn)，酶活隨溫度的升高先升后降，40℃時(shí)酶活最高，可能是因?yàn)闇囟扔绊懨傅目臻g結(jié)構(gòu)，為有效控制酶活可將發(fā)酵溫度控制在25℃～35℃、40℃～45℃。25℃～45℃范圍內(nèi)酶活熱穩(wěn)定性較好，2h后酶活仍可保持超70%以上。綜上，控制合適的發(fā)酵前期溫度對防止發(fā)酵環(huán)節(jié)白點(diǎn)出現(xiàn)至關(guān)重要。

2.9調(diào)酸發(fā)酵

將發(fā)酵液調(diào)酸，理論上會(huì)抑制一些酶的活性，利于防止白點(diǎn)[20]產(chǎn)生。黃豆醬發(fā)酵環(huán)節(jié)pH一般處在4.5～6.0的動(dòng)態(tài)變化中，周韜[17]研究了pH4.0～6.5之間酪氨酸羧肽酶活性及穩(wěn)定性，發(fā)現(xiàn)pH4～5.5時(shí)，酶活變化不大且相對穩(wěn)定，當(dāng)pH進(jìn)一步升高時(shí)酶活隨之增加。雷宏杰[22]研究發(fā)現(xiàn)米曲霉3.042積累蛋白酶的最適pH為5～7.2。因此調(diào)酸發(fā)酵可以降低蛋白酶活性，從而抑制酪氨酸生成。

調(diào)酸發(fā)酵另一方面還可以提高酪氨酸溶解度。雷宏杰[22]研究不同pH下酪氨酸的溶解度，發(fā)現(xiàn)pH5～6時(shí)最低，因?yàn)槠涞入婞c(diǎn)為pH5.68。Chiou[25]在拌曲鹽水中以體積比1∶100加入冰醋酸，調(diào)整發(fā)酵過程pH至4.8左右，避開酪氨酸結(jié)晶出現(xiàn)的等電點(diǎn)，產(chǎn)品的白點(diǎn)明顯減少。綜上為了防止白點(diǎn)現(xiàn)象可以考慮控制發(fā)酵環(huán)節(jié)pH。

2.10發(fā)酵工藝

一些學(xué)者研究了改進(jìn)發(fā)酵工藝對豆醬白點(diǎn)的影響。肖霄[5]在發(fā)酵初期用席子封壓表面，減少表面氧化層。發(fā)酵初期隔氧、前澆淋、換汁后攪拌結(jié)合的操作方法，有效抑制了白點(diǎn)的出現(xiàn)，制得豆醬理化指標(biāo)和風(fēng)味均正常。發(fā)酵初期隔氧抑制白點(diǎn)的原因有待進(jìn)一步探究。洪駟萃[19]發(fā)現(xiàn)在控制毛霉培養(yǎng)時(shí)間的前提下，對制曲后豆豉先采用4d～6d的薄膜密封無鹽發(fā)酵，再拌料加鹽發(fā)酵，可有效預(yù)防豆豉白點(diǎn)的產(chǎn)生，前發(fā)酵（無鹽發(fā)酵）時(shí)間越短，白點(diǎn)越易產(chǎn)生。耿予歡[26]加強(qiáng)發(fā)酵管理，增加前期翻醬次數(shù)，使得翻醬徹底、均勻，結(jié)團(tuán)粉料得到分散，同時(shí)搭配復(fù)合乳化劑，使得產(chǎn)品質(zhì)量得到一定提升。

3使用添加劑

3.1表面活性劑

表面活性劑在食品中使用廣泛[27]，加入豆醬后，可以使醬料的表面張力降低，界面的增溶作用增強(qiáng)，減少氨基酸的集結(jié)，使其分散溶解于醬料中。其與氨基酸的作用通常以多種方式同時(shí)存在，有疏水鍵結(jié)合（苯丙氨酸）、氫鍵結(jié)合（酪氨酸）、靜電作用的鹽式結(jié)合等[28]。FLEGEL[29]在泰國大豆醬發(fā)酵開始時(shí)添加聚乙二醇4000（1g/L醬料），降低了白點(diǎn)產(chǎn)生的嚴(yán)重程度。李國基[30]等在蒜蓉豆豉醬研磨煮制環(huán)節(jié)分別加入0.2%（質(zhì)量分?jǐn)?shù)）的苯乙烯化苯酚（SP）、蔗糖脂肪酸酯（SE）和無糖脂肪酸酯（SPE），存放一年，發(fā)現(xiàn)白點(diǎn)明顯減少或不再出現(xiàn)，效果SEF＞SP＞SE。耿予歡[26]等在加工醬料中加入自研的復(fù)合乳化劑，明顯改善產(chǎn)品質(zhì)量。雷宏杰[14]試驗(yàn)了不同PEG（聚乙二醇）濃度（0.2%～1.0%）下酪氨酸的溶解度，發(fā)現(xiàn)0.8%時(shí)最大，為470mg/L。此外，朱洪康[31]將吐溫80加入到成熟腐乳湯汁中也使白點(diǎn)生成率降低了50%。綜上，可以考慮發(fā)酵中加入定量表面活性劑來防止白點(diǎn)結(jié)晶析出，但有效抑制白點(diǎn)的添加劑種類及用量還需要進(jìn)一步研究。

3.2添加劑-抑菌劑

有學(xué)者研究在拌曲鹽水中添加抗菌劑對白點(diǎn)形成的影響。Chiou[25]以1∶100體積比加入冰醋酸，肖霄[5]添加冰醋酸將發(fā)酵過程pH調(diào)至4.8左右，均發(fā)現(xiàn)成品的白點(diǎn)明顯減少。雷宏杰[14]對比10mL/L冰醋酸、0.1%苯甲酸鈉、0.1%山梨酸鉀對成品氨基酸含量的影響，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，成品中酪氨酸、苯丙氨酸和呈味氨基酸含量均明顯降低，其中冰醋酸降低酪氨酸含量效果更好。綜上，可以考慮在拌曲鹽水中加入定量冰醋酸限制微生物生長，控制酪氨酸含量。

4成品處理

4.1超聲波處理

張雯[32]利用多頻多模調(diào)制超聲波發(fā)生器對發(fā)酵好的豆醬產(chǎn)品進(jìn)行酪氨酸震碎處理。采用頻率23kHz～27kHz，功率密度0.25W/cm2～0.35W/cm2，沿發(fā)酵池內(nèi)壁豎直方向設(shè)置3行，每行長度方向3～6個(gè)，寬度方向2～4個(gè)，避免了產(chǎn)品貨架期白點(diǎn)現(xiàn)象的出現(xiàn)。

4.2微波處理

微波技術(shù)可以將能量透射物料內(nèi)部轉(zhuǎn)化熱量，使蛋白酶變性失活。葉云花[33]對發(fā)酵后的豆豉進(jìn)行500W微波滅酶處理30s和60s，發(fā)現(xiàn)37℃儲(chǔ)存條件下白點(diǎn)的出現(xiàn)由第2周延長至第3周。當(dāng)處理120s時(shí)，恒溫儲(chǔ)存1個(gè)月內(nèi)都未出現(xiàn)白點(diǎn)，且原有風(fēng)味未改變。但處理時(shí)間進(jìn)一步延長，豆豉皮干裂且有焦味，豆豉品質(zhì)受到破壞。綜上，微波滅酶能夠防止豆豉白點(diǎn)結(jié)晶析出，

4.3熱處理

李國基[30]、查文龍[15]等對有白點(diǎn)的蒜蓉豆豉醬和蠶豆辣醬成品進(jìn)行4h，100℃的常壓水浴和15min，120℃的加壓蒸煮，白點(diǎn)均只有很小的減少，說明加熱、加壓處理均不能消除白點(diǎn)。朱洪康[31]對腐乳成品進(jìn)行加熱處理，發(fā)現(xiàn)白點(diǎn)生成率降8.3%，風(fēng)味沒有改變。對比分析推測，在白點(diǎn)出現(xiàn)之前進(jìn)行熱處理，能更好地鈍化蛋白酶活，抑制蛋白過度水解，降低游離酪氨酸含量，但是熱處理對成品風(fēng)味和理化指標(biāo)的影響需要進(jìn)一步研究。

4.4生物抑制劑

張雯[32]在發(fā)酵好的豆醬產(chǎn)品中添加福東鏈霉菌（1%～1.5%料重）培養(yǎng)10d～12d，使其產(chǎn)生抑制酪氨酸生成的酸性蛋白酶抑制劑，隨后添加防腐劑、消毒和包裝。此工藝對口感無影響，且貨架期無白點(diǎn)附著容器壁。

5結(jié)語

黃豆醬是一種風(fēng)味獨(dú)特、營養(yǎng)豐富、生理活性豐富的傳統(tǒng)發(fā)酵豆制品，但白點(diǎn)問題引發(fā)了消費(fèi)者對其質(zhì)量安全的質(zhì)疑，制約了行業(yè)發(fā)展。針對黃豆醬白點(diǎn)的防控，國內(nèi)外學(xué)者進(jìn)行了廣泛研究，一方面從菌株入手，研究了米曲霉菌株的馴化、酶系缺陷型菌株的篩選和消減游離酪氨酸耐鹽菌的篩選；另一方面從工藝入手，優(yōu)化了原料配比、蒸煮條件，制曲環(huán)節(jié)、發(fā)酵環(huán)節(jié)等工藝全過程；同時(shí)還研究了表面活性劑和抑菌劑等添加劑的作用效果以及超聲波處理、微波處理等成品處理的作用效果，這些研究對于黃豆醬白點(diǎn)的控制具有一定效果，但還是很難徹底解決這一問題，且容易對產(chǎn)品風(fēng)味產(chǎn)生影響。因此，既能保持產(chǎn)品風(fēng)味又能根本解決白點(diǎn)的方法還需要更深入地研究。未來可以應(yīng)用現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)，全面了解白點(diǎn)出現(xiàn)與微生物組成的具體關(guān)系，同時(shí)結(jié)合結(jié)晶機(jī)理，尋找根除白點(diǎn)的有效方法，還可以研究白點(diǎn)向有益成分轉(zhuǎn)化的方法，以生產(chǎn)高品質(zhì)黃豆醬，降低消費(fèi)者對于食品安全的擔(dān)憂。