氣相色譜法測(cè)定食品中指示性多氯聯(lián)苯

摘 要：目的：建立氣相色譜法測(cè)定食品中指示性多氯聯(lián)苯含量的分析方法。方法：樣品經(jīng)過(guò)水浴加熱振蕩提取后，依次經(jīng)硫酸、層析柱凈化，氣相色譜-電子捕獲檢測(cè)器測(cè)定，內(nèi)標(biāo)法定量。結(jié)果：7種指示性多氯聯(lián)苯在5～800 μg·L^-1線性關(guān)系良好，相關(guān)系數(shù)均大于0.999。定量限為0.12～0.35 μg·kg^-1，RSD為1.36%～2.55%，在9 μg·kg^-1加標(biāo)水平下回收率為62.87%～98.62%。結(jié)論：建立的方法靈敏度高、穩(wěn)定性好。對(duì)汕尾市場(chǎng)隨機(jī)采集的4類(lèi)22種水產(chǎn)動(dòng)物及其制品進(jìn)行多氯聯(lián)苯檢測(cè)，檢出率為4.55%，未出現(xiàn)超標(biāo)現(xiàn)象。

關(guān)鍵詞：食品；多氯聯(lián)苯；氣相色譜

The Determination of Indicator Polychlorinated Biphenyls in Food by Gas Chromatography

WEN Haiqiong， JIANG Xiaolan

（Guangdong Shanwei Quality and Measuring Supervision Testing Institute， Shanwei 516600， China）

Abstract： Objective： To establish a gas chromatography method for the determination of indicative polychlorinated biphenyls （PCBs） in food. Method： After the samples were extracted by water bath heating and shaking， they were purified by sulfuric acid and chromatography column， and then determined by gas chromatography-electron capture detector （GC-ECD） and quantified by internal standard method. Result： The linear relationship of 7 indicative PCBs was good in the range of 5～800 μg·L^-1， and the correlation coefficients were all greater than 0.999. The limit of quantification was 0.12～0.35 μg·kg^-1， the RSD was 1.36%～2.55%， and the recovery rate was 62.87%～98.62% at the spiked level of 9 μg·kg^-1. Conclusion： The established method has high sensitivity and good stability. PCBs were detected in 22 kinds of aquatic animals and their products randomly collected from 4 categories in Shanwei market， and the detection rate was 4.55%， and no excessive phenomenon was found.

Keywords： food; polychlorinated biphenyls; gas chromatography

多氯聯(lián)苯（Polychlorinated Biphenyls，PCBs）屬于持久性有機(jī)污染物，全球環(huán)境監(jiān)測(cè)系統(tǒng)/食品污染監(jiān)測(cè)與評(píng)估規(guī)劃組織將PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB138、PCB153和PCB180等7種PCBs作為指示性PCBs，用于監(jiān)測(cè)食品中PCBs的污染水平[1]。《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量》（GB 2762—2022）規(guī)定水產(chǎn)動(dòng)物及其制品中多氯聯(lián)苯限量值為20 μg·kg^-1[2]。中國(guó)代表性地區(qū)食物樣品中指示性PCBs含量遠(yuǎn)低于我國(guó)和歐盟限量標(biāo)準(zhǔn)水平，但長(zhǎng)期食用PCBs污染濃度較高的食物可能對(duì)人體造成潛在致癌風(fēng)險(xiǎn)[3]。當(dāng)前，食品中多氯聯(lián)苯的主要檢測(cè)方法包括氣相色譜法、氣相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法和離子阱串聯(lián)質(zhì)譜法[4]。氣相色譜法具有靈敏度高、分離效率高、穩(wěn)定性良好等優(yōu)點(diǎn)。本文建立了氣相色譜法測(cè)定食品中指示性多氯聯(lián)苯含量的方法，并對(duì)汕尾市場(chǎng)隨機(jī)采集的水產(chǎn)動(dòng)物及其制品中的多氯聯(lián)苯進(jìn)行了檢測(cè)，以期為食品多氯聯(lián)苯污染的防控提供參考。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑

4種淡水魚(yú)、4種貝類(lèi)、7種海水魚(yú)和7種水產(chǎn)動(dòng)物制品，汕尾市場(chǎng)隨機(jī)采集。

正己烷（色譜純）、無(wú)水硫酸鈉（分析純）、色譜層析用堿性氧化鋁（200～300目），上海麥克林生化科技有限公司；二氯甲烷（≥90%），默克股份兩合公司；丙酮（色譜純），賽默飛世爾科技（中國(guó)）有限公司；濃硫酸（分析純），廣東廣試試劑科技有限公司；PCB28、PCB52、PCB101、PCB118、PCB138、PCB153和PCB180等7種PCBs混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（各組分濃度均為100 μg·mL^-1），內(nèi)標(biāo)PCB198（100 μg·mL^-1），壇墨質(zhì)檢科技股份有限公司。

1.2 儀器與設(shè)備

Agilent 7890B氣相色譜儀，配電子捕獲檢測(cè)器，DB-5ms色譜柱（30 m×0.25 mm，0.25 μm），安捷倫科技（中國(guó)）有限公司；絞肉機(jī)，中國(guó)揚(yáng)子集團(tuán)有限公司；C-2L-AREI旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀，上海舍巖儀器有限公司；TV-64氮?dú)鉂饪s器，BC-1000旋渦振蕩器，逗點(diǎn)生物技術(shù)有限公司；BS224S分析天平，賽多利斯（上海）貿(mào)易有限公司；SHA-C水浴振蕩器，江蘇優(yōu)卓諾儀器制造有限公司；Cenlee 4K離心機(jī)，湘立科學(xué)儀器有限公司。

1.3 實(shí)驗(yàn)方法

1.3.1 樣品前處理

（1）提取。稱(chēng)取絞碎勻質(zhì)的試樣10.0 g置于具塞錐形瓶?jī)?nèi)，先加適量100 μg·mL^-1的內(nèi)標(biāo)PCB198溶液，然后加入適量正己烷+二氯甲烷（50∶50，V/V）提取，置于水浴振蕩器上，在40 ℃、200 r·min^-1振蕩提取2 h，將提取液移至茄形瓶中旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干。

（2）凈化。將提取液轉(zhuǎn)移到10 mL試管中，用適量正己烷洗滌原容器，洗液并入試管中，用正己烷定容；加入0.5 mL濃硫酸，振搖1 min，3 000 r·min^-1離心5 min使硫酸層和有機(jī)層分離。若上層溶液仍有顏色，再加入適量的濃硫酸重復(fù)操作至上層溶液呈無(wú)色。在玻璃柱底端加入少量玻璃棉，然后依次裝入2.5 g堿性氧化鋁、2 g無(wú)水硫酸鈉，先用15 mL的正己烷淋洗，然后將硫酸凈化后的濃縮液移至層析柱上，用適量正己烷洗滌原容器，洗液一起移至層析柱上。當(dāng)液面降至固體層時(shí)，加入15 mL正己烷洗脫2次；當(dāng)液面再次降至固體層時(shí)，用25 mL二氯甲烷+正己烷（5∶95，V/V）洗脫，最后將洗脫液旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)至近干。

（3）濃縮。將試樣溶液移至進(jìn)樣瓶中，用少量正己烷洗滌原容器，洗液并入進(jìn)樣瓶中，用氮?dú)鉂饪s器濃縮至1 mL，待氣相色譜儀分析。

1.3.2 標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制

準(zhǔn)確吸取適量PCBs混標(biāo)溶液，加入適量PCB198內(nèi)標(biāo)溶液用正己烷逐級(jí)稀釋?zhuān)渲瞥蓾舛葹? μg·L^-1、20 μg·L-1、50 μg·L-1、200 μg·L-1和800 μg·L-1的系列標(biāo)準(zhǔn)工作液，內(nèi)標(biāo)濃度均為50 μg·L-1。

1.3.3 氣相色譜條件

色譜柱：DB-5ms（30 m×0.25 mm，0.25 μm）；進(jìn)樣口柱溫：290 ℃；升溫程序：90 ℃保持0.5 min，然后以15 ℃·min^-1升至200 ℃保持5 min，再以2.5 ℃·min^-1升至250 ℃保持2 min，最后以20 ℃·min^-1升至265 ℃保持5 min；載氣：高純氮?dú)?，柱前壓設(shè)為67 kPa；進(jìn)樣量：1 μL（不分流）。

1.3.4 方法驗(yàn)證

（1）檢測(cè)限和定量限。在空白樣品中添加濃度為20 μg·L^-1的PCBs標(biāo)準(zhǔn)溶液，加入定量?jī)?nèi)標(biāo)PCB198，根據(jù)其氣相色譜數(shù)據(jù)，分析PCBs檢測(cè)限（μg·kg^-1），計(jì)算公式見(jiàn)公式（1），定量限按3.3倍檢測(cè)限計(jì)算。

檢測(cè)限＝3×N×m_s/H×RRF×m （1）

式中：N為噪聲峰高；H為定量?jī)?nèi)標(biāo)的峰高；ms為加入定量?jī)?nèi)標(biāo)的量，ng；RRF為相對(duì)響應(yīng)因子；m為試樣量，g。

（2）精密度。在空白樣品中添加濃度為20 μg·L^-1的PCBs標(biāo)準(zhǔn)溶液，重復(fù)進(jìn)樣7次，計(jì)算相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（Relative Standard Deviation，RSD）。

（3）回收率。稱(chēng)取10.0 g樣品4份，分成2組，每組2份。1組為空白樣品，另1組2份樣品均添加9 μg·kg^-1的PCBs，其余步驟同樣品前處理相同。

2 結(jié)果與分析

2.1 標(biāo)準(zhǔn)曲線

根據(jù)系列標(biāo)準(zhǔn)溶液的氣相色譜數(shù)據(jù)，以濃度（μg·L^-1）為橫坐標(biāo)，特征峰面積為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，得到線性方程，結(jié)果見(jiàn)表1。在5～800 μg·L^-1濃度范圍內(nèi)，7種PCBs的相關(guān)系數(shù)均大于0.999，線性良好。

2.2 檢測(cè)限和定量限

如表2所示，根據(jù)1.3.4方法確定7種PCBs的定量限為0.12～0.35 μg·kg^-1，滿足《食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中指示性多氯聯(lián)苯含量的測(cè)定》（GB/T 5009.190—2014）中各目標(biāo)化合物定量限為0.5 μg·kg^-1的要求[5]。

2.3 精密度

如表3所示，7種PCBs的峰面積的RSD為1.36%～2.55%，符合《實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)》（GB/T 27404—2008）中精密度要求[6]。

2.4 加標(biāo)回收率

采用黑魚(yú)樣品進(jìn)行9 μg·kg^-1水平加標(biāo)回收試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表4。7種PCBs的回收率為62.87%～98.62%，符合GB/T 27404—2008要求。

2.5 樣品檢測(cè)結(jié)果

在汕尾水產(chǎn)市場(chǎng)采集了22種樣品（4種淡水魚(yú)、4種貝類(lèi)、7種海水魚(yú)、7種水產(chǎn)動(dòng)物制品）進(jìn)行檢測(cè)，具體檢測(cè)結(jié)果見(jiàn)表5。只有田螺檢出含有PCB153，含量為0.585 μg·kg^-1，檢出率為4.55%。

3 結(jié)論

氣相色譜法靈敏度高、穩(wěn)定性好，本文建立了氣相色譜檢測(cè)食品中指示性多氯聯(lián)苯的分析方法，并對(duì)汕尾市場(chǎng)隨機(jī)采集的4類(lèi)22種水產(chǎn)動(dòng)物及其制品中多氯聯(lián)苯進(jìn)行了檢測(cè)，檢出率為4.55%，未出現(xiàn)超標(biāo)現(xiàn)象。

參考文獻(xiàn)

[1]樊景麗，聞勝，劉小方，等.中國(guó)部分地區(qū)豬肉中指示性多氯聯(lián)苯污染水平和膳食暴露風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].中國(guó)食品衛(wèi)生雜志，2024，36（1）：32-38.

[2]國(guó)家衛(wèi)生健康委員會(huì)，國(guó)家市場(chǎng)監(jiān)督管理總局.食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中污染物限量：GB 2762—2022[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2022.

[3]王惠榮，蔣友勝，周健，等.中國(guó)代表性地區(qū)典型動(dòng)物源性食品指示性多氯聯(lián)苯污染水平和人群膳食風(fēng)險(xiǎn)評(píng)估[J].中國(guó)公共衛(wèi)生，2022，38（4）：444-448.

[4]丁立平，蔡春平，王丹紅.雙重凈化/氣相色譜法測(cè)定水產(chǎn)品中指示性多氯聯(lián)苯[J].分析測(cè)試學(xué)報(bào)，2014，33（10）：1178-1183.

[5]國(guó)家衛(wèi)生和計(jì)劃生育委員會(huì).食品安全國(guó)家標(biāo)準(zhǔn) 食品中指示性多氯聯(lián)苯含量的測(cè)定：GB/T 5009.190—2014[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2014.

[6]國(guó)家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局，中國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)化管理委員會(huì).實(shí)驗(yàn)室質(zhì)量控制規(guī)范 食品理化檢測(cè)：GB/T 27404—2008[S].北京：中國(guó)標(biāo)準(zhǔn)出版社，2008.