甘草多糖對雞肉品質(zhì)及其相關(guān)候選基因表達(dá)的影響

楊又兵　錢凱鳳　盧小寧　婁然　劉永建　任旭鴿　游祥賓　李淦　徐志謙　雷瑩　白俊艷

摘要：為探究甘草多糖對雞肉品質(zhì)的影響，設(shè)計(jì)不同水平的甘草多糖添加至日糧中，測定愛拔益加肉雞的肉質(zhì)性狀和相關(guān)基因在肉質(zhì)中的含量，以此來研究日糧中添加不同水平甘草多糖對其肉質(zhì)的影響情況；并利用轉(zhuǎn)錄組測序技術(shù)（RNA-SEQ）分析了日糧中添加不同水平甘草多糖飼喂的肉雞胸肌組織樣品的轉(zhuǎn)錄組，從而篩選出能夠調(diào)控肉質(zhì)性狀的關(guān)鍵基因，并利用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證。結(jié)果表明，在日糧中添加300、600、900 mg/kg甘草多糖的試驗(yàn)組雞的胸肌的肉質(zhì)指標(biāo)肉色、pH1、pH24、蒸煮損失和滴定損失與對照組均無顯著差異（P>0.05），但發(fā)現(xiàn)隨著日糧甘草多糖的增加，雞的肉質(zhì)指標(biāo)有著不同程度的改善。在日糧中添加300、600 mg/kg甘草多糖均增加了雞胸肌中LPL基因、PPARγ基因、FABP3基因、CAST基因的相對表達(dá)量，在日糧中添加300、600 mg/kg甘草多糖降低了雞胸肌中CAPN2基因的相對表達(dá)量；在日糧中添加900 mg/kg甘草多糖降低了LPL基因、PPARγ基因、FABP3基因、CAST基因的相對表達(dá)量。

關(guān)鍵詞：甘草多糖；肉質(zhì)性狀；LPL基因；PPARγ基因；CAST基因

中圖分類號：S831.5文獻(xiàn)標(biāo)志碼：A

文章編號：1002-1302（2024）09-0219-07

近年來，甘草多糖這種活性成分受到許多學(xué)者的關(guān)注。甘草多糖具有多種生物學(xué)功能，如可增強(qiáng)機(jī)體免疫力、促進(jìn)生長發(fā)育、抗病毒等，在畜牧業(yè)上有廣闊的應(yīng)用前景。然而，目前國內(nèi)外有關(guān)甘草多糖在雞上的研究寥寥可數(shù)，且飼料中合適的添加量沒有明確標(biāo)準(zhǔn)，作為飼料添加劑還不能廣泛應(yīng)用［1］。

肉質(zhì)性能是影響?zhàn)B肉雞生產(chǎn)經(jīng)濟(jì)效益的關(guān)鍵因素，但雞肉的肉質(zhì)性能很低，現(xiàn)階段對肉雞肉品質(zhì)的研究主要還是在常規(guī)的肉品質(zhì)上。目前，氨基酸和核苷酸是影響肉類及肉制品鮮味的2種重要因素，其中，肌苷酸又是影響核苷酸中鮮味最重要的成分。肌苷酸存在于肌肉中，與肉質(zhì)鮮味的生成有密切關(guān)聯(lián)［2］。一些研究表明，肌苷酸是影響畜禽肉質(zhì)鮮味的重要物質(zhì)，是衡量肉質(zhì)鮮味的重要指標(biāo)［3］。國內(nèi)外學(xué)者的大量研究也表明，肌苷酸是影響肉質(zhì)鮮味特性的關(guān)鍵性物質(zhì)［4］。通過對肉雞肌肉中常規(guī)肉品質(zhì)和風(fēng)味物質(zhì)的研究，可為應(yīng)激管理及應(yīng)激性家禽生長代謝障礙的精準(zhǔn)營養(yǎng)元素調(diào)控提供新的思路和方法。

對于甘草多糖免疫功能的研究較多，甘草多糖對動物肉質(zhì)的影響研究較少，對雞肉品質(zhì)的影響鮮有研究，本試驗(yàn)設(shè)計(jì)不同水平的甘草多糖添加于日糧中，測定愛拔益加肉雞的肉質(zhì)性狀和影響肉質(zhì)相關(guān)基因的表達(dá)量，以此來研究日糧中添加不同水平的甘草多糖對肉質(zhì)性狀的影響情況，并利用RNA-SEQ分析了日糧中添加甘草多糖飼喂的肉雞胸肌組織樣品的轉(zhuǎn)錄組，從而篩選調(diào)控肉雞肉質(zhì)的關(guān)鍵基因，并利用實(shí)時熒光定量PCR技術(shù)進(jìn)行驗(yàn)證，為愛拔益加肉雞甘草多糖的最適添加量及影響肉質(zhì)性狀的基因提供理論參考。

1 材料與方法

1.1 試驗(yàn)材料

240羽1日齡健康愛拔益加肉雞，采購于洛陽某市場；總RNA反轉(zhuǎn)錄試劑盒、瓊脂糖凝膠回收試劑盒、SYBR GreenⅡRNA染料、DL 2 000 bp maker、RNAiso Plus、固相Rnase清除劑、6×DNA Loading Buffer、2×Taq PCR MasterMix、Trziol、乙醇、異丙醇，均購自北京寶日醫(yī)生物技術(shù)有限公司；冷凍高速離心機(jī)和Nano Drop 2000C超微量分光光度計(jì)，購于武漢塞維爾公司；凝膠成像儀和熒光定量PCR儀，均購于孚約生物科技（上海）有限公司。

1.2 引物設(shè)計(jì)與合成

參考NCBI數(shù)據(jù)庫中愛拔益加肉雞同源序列信息，采用Primer 5.0設(shè)計(jì)引物（表1），送往武漢生物工程有限公司合成。

1.3 試驗(yàn)方法

2021年6月在河南科技大學(xué)動物房進(jìn)行試驗(yàn)，將240羽1日齡健康的愛拔益加肉雞，采用抽簽法隨機(jī)分為4組，每組6個重復(fù)，每個重復(fù)10羽雞。分別在基礎(chǔ)日糧中添加0、300、600、900 mg/kg甘草多糖依次設(shè)為對照組，試驗(yàn)Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ組的飼糧，試驗(yàn)期42 d。

1.3.1 樣品采集

試驗(yàn)雞飼養(yǎng)至42日齡結(jié)束，每重復(fù)隨機(jī)選2羽雞，宰前禁食12 h，并提供足夠的飲用水。屠宰時采用手術(shù)剪剪開體腔，并緩緩分離出左側(cè)胸肌，一部分胸肌置于4 ℃用于測定肉質(zhì)性狀（肉色、pH值、蒸煮損失、滴水損失），一部分置于液氮中冷凍保存，后保存于-80 ℃超低溫冰箱。

1.3.2 肉質(zhì)性能的測定

1.3.2.1 肉色的測定 取各組屠宰雞的胸肌，采用比色板法，將肉樣與標(biāo)準(zhǔn)肉色譜對照、評分。避免在陽光直射下或在室內(nèi)陰暗處評定。評分標(biāo)準(zhǔn)為 1～7分，兩級間允許評0.5分。每份樣品測3個點(diǎn)，取其平均值。

1.3.2.2 肌肉pH值的測定 拿各組宰殺后停止呼吸后45 min已經(jīng)采集好的胸肌樣品，采用酸度計(jì)測定pH值，記作pH1；在4 ℃條件下，冷卻保存24 h后測定pH值，記作pH24。每組測定3次，取其平均值。

1.3.2.3 蒸煮損失的測定 取各組已采集好的胸肌樣品，去除肌外膜、脂肪后，稱重Z1（30～50 g）。將肉樣采用細(xì)繩綁住懸空吊于80 ℃水浴鍋中保持30 min，細(xì)線另一端用透明膠帶固定。30 min 后將肉塊取出，在陰涼通風(fēng)環(huán)境下放置 20 min，稱重Z2。

蒸煮損失=（Z1-Z2）/Z1。

1.3.2.4 滴水損失的測定 取各組胸肌樣品，去除肌外膜、脂肪后，稱重D1（10～20 g）。放入滴水損失測定管置于0～4 ℃冰箱內(nèi)24 h。24 h后，采用電子天平稱取各肉塊重D2，記錄數(shù)據(jù)并計(jì)算。

滴水損失=（D1-D2）/D1。

1.3.3 總RNA提取

提取RNA，于超凈工作臺內(nèi)操作，提前采用紫外光燈照射超凈工作臺約30 min，再使用1%固相RNase清除劑噴灑滅菌，采用吸水紙擦干，采用Trizol試劑盒提取胸肌組織總RNA，稀釋完成后，取1 μL放至超微量分光光度計(jì)中檢測RNA濃度，然后通過瓊脂糖凝膠電泳檢測提取RNA的質(zhì)量。

1.3.4 總RNA反轉(zhuǎn)錄cDNA

使用反轉(zhuǎn)錄試劑盒合成cDNA第1步反應(yīng)條件是：總RNA 1 μL、gDNA Eraser 1 μL、5gDNA Eraser Buffer 2 μL，補(bǔ)RNase Free dH2O至10 μL，42 ℃ 2 min。第2步的反應(yīng)條件是：步驟1的反應(yīng)液 10 μL、RT Primer Mix 1 μL、PrimeScript RT Enzyme Mix 1 μL、5×PrimeScript Buffer（for Real Time） 4 μL、RNase Free dH2O 4 μL，37 ℃ 15 min，85 ℃ 5 s，產(chǎn)物置于-20 ℃保存。

1.3.5 實(shí)時熒光定量 PCR

熒光定量的每個樣品均需要設(shè)置平行重復(fù)，該試驗(yàn)設(shè)置3次重復(fù)，保證每次重復(fù)所有條件均一致。qPCR反應(yīng)所需試劑，由表2可知，熒光定量PCR反應(yīng)條件：94 ℃預(yù)變性 5 min；94 ℃變性30 s，60 ℃退火30 s，72 ℃ 延伸 30 s，40個循環(huán)；熔解曲線為95 ℃ 15 s，60 ℃? 15 s，95 ℃ 15 s。

1.3.6 熒光定量結(jié)果計(jì)算分析

采用2-ΔΔCT 法計(jì)算雞肉質(zhì)相關(guān)候選基因的相對表達(dá)量，以GAPDH基因作為內(nèi)參進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)化，所得試驗(yàn)數(shù)據(jù)運(yùn)用軟件SPSS 25進(jìn)行分析，并利用軟件Graphpad Prism 9.3作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 不同甘草多糖水平對愛益拔加雞肉品質(zhì)的影響

由表3可知，在日糧中添加300、600、900 mg/kg甘草多糖的試驗(yàn)組雞的胸肌肉質(zhì)指標(biāo)肉色、pH1、pH24、蒸煮損失和滴定損失與對照組均無顯著差異（P>0.05），但觀察發(fā)現(xiàn)隨著日糧甘草多糖的增加，雞的肉質(zhì)指標(biāo)有著不同程度的改善。

2.2 總RNA的質(zhì)量檢測

經(jīng)Nano Drop 2 000 C超微量分光光度計(jì)檢測，提取的總RNA濃度均在2.0～3.5 μg/μL，D260 nm/280 nm≥1.9，D260 nm/230 nm均約為2.2，表明肉雞總RNA無明顯降解，無明顯的蛋白質(zhì)、DNA及酚等其他物質(zhì)的污染；1%瓊脂糖凝膠檢測，由圖1可知，RNA條帶清晰明亮，表明所提取的總RNA質(zhì)量良好。綜上，提取的肉雞總RNA可用于后續(xù)試驗(yàn)。

2.3 熒光定量 PCR 熔解曲線

由圖2可知，其中，A、B、C、D、E、F、G分別對應(yīng)GAPDH基因、LPL、PPARγ、FABP3、CAPN2、CAST和UCP3基因的熔解曲線，發(fā)現(xiàn)目的基因及內(nèi)參基因的擴(kuò)增曲線整體平滑，且出現(xiàn)了“S”形的曲線， 比較符合預(yù)期。擴(kuò)增曲線出現(xiàn)的曲線拐點(diǎn)較為明顯，且平臺期的曲線穩(wěn)定平滑，無上升趨勢。通過觀察熔解曲線上的拐點(diǎn)，發(fā)現(xiàn)目的基因和內(nèi)參基因的擴(kuò)增產(chǎn)物Tm值均一，熔解曲線上僅出現(xiàn)1個明顯的單一峰，表明在PCR過程中，所采集的信號均來自于特異性擴(kuò)增產(chǎn)物。

2.4 雞肉質(zhì)相關(guān)候選基因表達(dá)規(guī)律分析

2.4.1 LPL基因 mRNA 的表達(dá)分析

由圖3可知， 日糧中添加300、 600 mg/kg甘草多糖均增加了雞胸肌中LPL基因相對表達(dá)量。日糧中添加600、900 mg/kg甘草多糖LPL基因的相對表達(dá)水平差異顯著（P<0.05）。隨著日糧中甘草多糖量的增加，LPL基因的相對表達(dá)量先增再降，當(dāng)添加量為 600 mg/kg 時，基因相對表達(dá)水平最高。

2.4.2 PPARγ基因mRNA的表達(dá)分析

由圖4可知，日糧中添加300、600 mg/kg甘草多糖均增加了雞胸肌中PPARγ基因相對表達(dá)量。日糧中添加600、900 mg/kg甘草多糖PPARγ基因的相對表達(dá)水平差異顯著（P<0.05）。隨著日糧中甘草多糖量的增加，PPARγ基因的相對表達(dá)量先增加再降低，當(dāng)添加量為600 mg/kg時，基因相對表達(dá)水平最高。

2.4.3 FABP3基因mRNA的表達(dá)分析

由圖5可知，日糧中添加300、600、900 mg/kg甘草多糖增加了雞胸肌中FABP3基因相對表達(dá)量，隨著日糧中甘草多糖量的增加，F(xiàn)ABP3基因的相對表達(dá)量先增加后降低。日糧中添加0與600 mg/kg甘草多糖FABP3基因的相對表達(dá)水平差異顯著（P<0.05）。添加量為600 mg/kg時，F(xiàn)ABP3基因表達(dá)水平相對最高。

2.4.4 CAPN2基因mRNA的表達(dá)分析

由圖6可知，日糧中添加300、600、900 mg/kg甘草多糖均降低了雞胸肌中CAPN2基因相對表達(dá)量，隨著日糧中甘草多糖量的增加，CAPN2基因的相對表達(dá)量先降低再增加。日糧中添加0、600 mg/kg 甘草多糖CAPN2基因的相對表達(dá)水平差異顯著（P<0.05）。日糧中添加甘草多糖可降低基因的表達(dá)，當(dāng)添加量為600 mg/kg時，CAPN2基因表達(dá)水平相對最低。

2.4.5 CAST基因mRNA的表達(dá)分析

由圖7可知，日糧中添加300、600、900 mg/kg甘草多糖增加了雞胸肌中CAST基因相對表達(dá)量，隨著日糧中甘草多糖量的增加，CAST基因的相對表達(dá)量先增加后降低。日糧中添加0與600 mg/kg甘草多糖CAST基因的相對表達(dá)水平差異顯著（P<0.05），當(dāng)添加量為600 mg/kg時基因表達(dá)水平相對最高。

2.4.6 UCP3基因mRNA的表達(dá)分析

由圖8可知，日糧中添加300、600、900 mg/kg甘草多糖降低了雞胸肌中UCP3基因相對表達(dá)量，隨著日糧中甘草多糖量的增加，UCP3基因的相對表達(dá)量也在降低。日糧中添加甘草多糖可降低UCP3基因的表達(dá)量，隨著甘草多糖量的增加，基因表達(dá)水平先降低后升高。日糧中添加0與600 mg/kg甘草多糖UCP3基因的相對表達(dá)水平差異顯著（P<0.05），在添加量600 mg/kg時，基因表達(dá)水平達(dá)最低。

3 討論

3.1 肉雞LPL基因的表達(dá)規(guī)律分析

脂蛋白酯酶（LPL）是脂肪代謝的關(guān)鍵酶，它能夠催化和水解甘油三酯，生成脂肪酸和甘油，提供給機(jī)體的各組織利用和儲存［5］。Griffin等的研究表明，肉雞LPL基因的表達(dá)影響雞脂肪代謝，認(rèn)為可將LPL基因作為脂肪調(diào)節(jié)的候選基因［6］。為進(jìn)一步研究兩者間的相關(guān)性，一些研究者對其做了深入研究，王晶研究發(fā)現(xiàn)，隨日齡增長，廣西三黃雞和AA雞胸/腿肌的LPL酶活性逐漸升高，且肌內(nèi)脂肪含量也隨之增加，兩者間呈正相關(guān)［7］。王斌等研究同樣發(fā)現(xiàn)，淮南麻黃雞的胸肌和腿肌脂肪含量與LPL基因表達(dá)量呈顯著正相關(guān)［8-9］

本試驗(yàn)在日糧中添加300、600 mg/kg甘草多糖均增加了雞胸肌中LPL基因相對表達(dá)量，900 mg/kg降低，說明在一定范圍內(nèi)甘草多糖添加量與LPL基因表達(dá)水平呈正相關(guān)，與前人研究結(jié)果一致。

3.2 肉雞PPARγ基因的表達(dá)規(guī)律分析

PPARs能夠調(diào)控許多細(xì)胞內(nèi)的代謝過程，在已發(fā)現(xiàn)的3種亞型中，PPARγ與脂肪細(xì)胞的增殖分化有密切的聯(lián)系。杜琛等通過構(gòu)建絨山羊shRNA-PPARγ慢病毒載體試驗(yàn)，研究發(fā)現(xiàn)沉默PPARγ基因后，脂肪細(xì)胞分化受到顯著影響［10］。白曉蘇等研究同樣發(fā)現(xiàn)，在3T3-L1脂肪細(xì)胞分化過程中PPARγ表達(dá)增加［11］。本試驗(yàn)在日糧中添加300、600 mg/kg甘草多糖均增加了雞胸肌中PPARγ基因相對表達(dá)量，900 mg/kg降低，說明在一定范圍內(nèi)甘草多糖添加量與PPARγ基因表達(dá)水平呈正相關(guān)。

3.3 肉雞FABP3基因的表達(dá)規(guī)律分析

脂肪酸結(jié)合蛋白（FABPs）主要存在于動物細(xì)胞質(zhì)中，它在動物體內(nèi)脂肪的合成與降解中扮演重要角色，在脂肪轉(zhuǎn)運(yùn)過程中發(fā)揮著重要作用［12］。此外，畜禽FABP3基因還能通過影響肌內(nèi)脂肪的含量，進(jìn)而影響肌肉嫩度和風(fēng)味水平，是影響肉質(zhì)性狀的關(guān)鍵候選基因［13］。本試驗(yàn)在日糧中添加300、600 mg/kg甘草多糖均增加了雞胸肌中FABP3基因相對表達(dá)量，900 mg/kg降低說明在一定范圍內(nèi)甘草多糖添加量與FABP3基因表達(dá)水平呈正相關(guān)。

3.4 肉雞CAPN2基因的表達(dá)規(guī)律分析

CAPN1和CAPN2的表達(dá)量均與肌原纖維水解有著密切聯(lián)系，在畜禽肉的嫩化發(fā)揮著關(guān)鍵性作用［14］。目前，國內(nèi)外有關(guān)CAPN2基因的研究還較少。本試驗(yàn)在日糧中添加300、600、900 mg/kg水平的甘草多糖可降低雞胸肌中CAPN2基因相對表達(dá)量，甘草多糖添加量與CAPN2基因表達(dá)水平呈負(fù)相關(guān)。

3.5 肉雞CAST基因的表達(dá)規(guī)律分析

CAST基因不僅調(diào)控肌肉中蛋白質(zhì)新陳代謝過程，還影響畜禽肉品質(zhì)的嫩度，是作為影響肉質(zhì)性狀的關(guān)鍵候選基因［15］。目前，CAST基因作為嫩度候選基因主要在豬、牛、羊上研究較多，而在雞上的研究寥寥可數(shù)。本試驗(yàn)在日糧中添加300、600 mg/kg 甘草多糖均增加了雞胸肌中CAST基因相對表達(dá)量，900 mg/kg降低，說明在一定范圍內(nèi)甘草多糖添加量與CAST基因表達(dá)水平呈正相關(guān)。

3.6 肉雞UCP3基因的表達(dá)規(guī)律分析

張繼等研究UCP2和UCP3基因表達(dá)對豬肉質(zhì)的影響中發(fā)現(xiàn)，在豬的背最長肌和腰大肌中，UCP2表達(dá)量的增加不利于肌肉內(nèi)脂肪沉積，降低肉的品質(zhì)，UCP3對肉質(zhì)的關(guān)聯(lián)則與UCP2相反［16-17］。由此推測，肉雞UCP3基因可能也影響著肉雞的脂肪代謝，可能UCP3表達(dá)量的增加或減少影響雞肉的肌內(nèi)脂肪沉積，并影響雞的肉品質(zhì)。本試驗(yàn)從研究甘草多糖對肉雞肉質(zhì)的影響，結(jié)合研究甘草多糖對肉雞肉質(zhì)相關(guān)基因UCP3基因表達(dá)的影響，來驗(yàn)證和推測甘草多糖對肉雞作用、肉雞UCP3基因及肉品質(zhì)的相關(guān)性，結(jié)合甘草多糖對肉質(zhì)影響結(jié)果和甘草多糖對肉雞UCP3基因的表達(dá)影響結(jié)果，觀察推測甘草多糖可能影響雞的脂肪代謝。

4 結(jié)論

本試驗(yàn)通過在日糧中分別添加0、300、600、900 mg/kg 甘草多糖，測定愛拔益加肉雞的肉質(zhì)指標(biāo)肉色、pH1、pH24、蒸煮損失和滴定損失及肉質(zhì)相關(guān)基因表達(dá)量，通過對比4種甘草多糖水平組的肉質(zhì)指標(biāo)，得到4種甘草多糖水平組的差異均不顯著，但以600 mg/kg甘草多糖水平的肉質(zhì)指標(biāo)最好。通過對比4種甘草多糖水平組的基因表達(dá)量，得到 600 mg/kg 甘草多糖組的LPL、PPARγ、FABP3和CAST基因表達(dá)量顯著高于對照組（P<0.01）；600 mg/kg 甘草多糖組的CAPN2、UCP3基因表達(dá)量顯著低于對照組（P<0.01）。600 mg/kg甘草多糖對雞肉質(zhì)指標(biāo)和肉質(zhì)相關(guān)基因表達(dá)的影響最顯著。通過向日糧中添加不同水平的甘草多糖，探究愛拔益加肉雞肉質(zhì)性狀和相關(guān)基因的表達(dá)情況，期望為以后肉雞肉品質(zhì)和候選基因的研究提供理論基礎(chǔ)。

參考文獻(xiàn)：

［1］林雨鑫，王 靖. 甘草多糖的生物學(xué)功能及其在動物生產(chǎn)中的應(yīng)用［J］. 中國飼料，2015（1）：27-28，32.

［2］郭亞文，陳 彬，史桃玉，等. 揚(yáng)州鵝及其雜交配套組合肉用仔鵝肌肉中氨基酸和肌苷酸含量的比較［J］. 中國畜牧獸醫(yī)，2018，45（5）：1184-1195.

［3］王雪峰，黃艾祥，普岳紅，等. 云南剝隘雞與河南肉雞肌肉中肌苷酸含量的比較研究［J］. 食品安全質(zhì)量檢測學(xué)報，2018，9（9）：2135-2140.

［4］Zhang T，Lu H Z，Wang L，et al. Specific expression pattern of IMP metabolism related-genes in chicken muscle between cage and free range conditions［J］. PLoS One，2018，13（8）：e0201736.

［5］趙 薇，曹國偉，周子航，等. 雞肉品質(zhì)相關(guān)調(diào)控基因研究進(jìn)展［J］. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報，2022，30（2）：370-378.

［6］Griffin H D，Whitehead C C，Broadbent L A. The relationship between plasma triglyceride concentrations and body fat content in male and female broilers：a basis for selection？［J］. British Poultry Science，1982，23（1）：15-23.

［7］王 晶. 廣西三黃雞肉質(zhì)性狀分析及LPL、H-FABP基因表達(dá)與肌內(nèi)脂肪含量的相關(guān)研究［D］. 南寧：廣西大學(xué)，2013.[HJ2.05mm]

［8］王 斌，廖 望，何凱琴，等. FASN和LPL基因?qū)茨下辄S雞肌內(nèi)脂肪含量的影響［J］. 西北農(nóng)林科技大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2020，48（9）：1-9.

［9］劉 蒙，宋代軍，齊珂珂，等. 日糧代謝能水平對北京油雞脂肪沉積和LPL基因表達(dá)的影響［J］. 中國畜牧獸醫(yī)，2009，36（5）：9-13.

［10］杜 琛，李金泉，陳秀娟. 白絨山羊PPARγ基因RNA干擾慢病毒載體的構(gòu)建及對肌內(nèi)脂肪細(xì)胞增殖分化的影響［J］. 畜牧獸醫(yī)學(xué)報，2016，47（4）：671-678.

［11］白曉蘇，劉志明，黎智森，等. 3T3-L1脂肪細(xì)胞分化的PPARγ、AQP7的表達(dá)及大黃素的促進(jìn)作用研究［J］. 海南醫(yī)學(xué)院學(xué)報，2016，22（14）：1476-1478.

［12］Samulin J，Berget I，Lien S，et al. Differential gene expression of fatty acid binding proteins during porcine adipogenesis［J］. Comparative Biochemistry and Physiology（Part B：Biochemistry and Molecular Biology），2008，151（2）：147-152.

［13］鄧龍華，謝 亮，羅成龍，等. 雞心臟型脂肪酸結(jié)合蛋白（H-FABP）基因多態(tài)性對肉質(zhì)性狀和組織表達(dá)的影響［J］. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報，2010，18（3）：545-555.

［14］Riley D G，Chase C C Jr，Pringle T D，et al. Effect of sire on mu-and m-calpain activity and rate of tenderization as indicated by myofibril fragmentation indices of steaks from Brahman cattle［J］. Journal of Animal Science，2003，81（10）：2440-2447.

［15］張?jiān)鰳s. 雞CAPN1、CAPN2、CAPN3和CAST基因的克隆、表達(dá)及其在肉質(zhì)中的遺傳效應(yīng)分析［D］. 雅安：四川農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

［16］張 繼，吳 雪，邱淦遠(yuǎn)，等. 江口蘿卜豬UCP2基因多態(tài)性與基因表達(dá)量及肉品質(zhì)的相關(guān)性研究［J］. 中國畜牧雜志，2019，55（10）：71-77.

［17］張 繼，吳 雪，邱淦遠(yuǎn)，等. 江口蘿卜豬UCP3基因變異及其表達(dá)量與肉質(zhì)性狀關(guān)聯(lián)性分析［J］. 農(nóng)業(yè)生物技術(shù)學(xué)報，2020，28（3）：490-500.

收稿日期：2023-05-09

基金項(xiàng)目：河南省科技攻關(guān)項(xiàng)目（編號：222102110477）；河南省高校國家級大學(xué)生創(chuàng)新創(chuàng)業(yè)訓(xùn)練計(jì)劃重點(diǎn)支持領(lǐng)域項(xiàng)目（編號：202210464064）。

作者簡介：楊又兵（1977—），男，湖北黃岡人，博士，副教授，研究方向?yàn)閯游镞z傳育種和動物遺傳資源保護(hù)與開發(fā)利用。E-mail：yangyoubing@sina.com。

通信作者：白俊艷，博士，教授，研究方向?yàn)閯游锓肿佑N。E-mail：junyanbai@163.com。