2 種飼料投喂下美洲鰣幼魚肌肉營養(yǎng)成分分析及評價

蔣飛　施永海　徐嘉波　嚴銀龍　劉永士　袁新程

摘要：為科學(xué)評價常規(guī)飼料和綠色飼料養(yǎng)殖美洲鰣幼魚肌肉的營養(yǎng)品質(zhì)，采用生化分析方法對2種飼料投喂下美洲鰣幼魚肌肉營養(yǎng)成分進行測定和比較分析。結(jié)果顯示，常規(guī)飼料組肌肉中的粗脂肪含量（7.84%）極顯著高于綠色飼料組（5.05%），水分含量（68.87%）極顯著低于綠色飼料組（71.98%），粗蛋白含量（16.93%）顯著低于綠色飼料組（17.54%）。常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉中必需氨基酸總量/氨基酸總量和必需氨基酸總量/非必需氨基酸總量無顯著差異，均屬于優(yōu)質(zhì)蛋白；綠色飼料組肌肉中鮮味氨基酸、苦味氨基酸和酸味氨基酸含量均顯著高于常規(guī)飼料組，且甜味氨基酸含量極顯著高于常規(guī)飼料組；綠色飼料組肌肉中支鏈氨基酸含量和支/芳值均顯著高于常規(guī)飼料組；根據(jù)氨基酸評分和化學(xué)評分，常規(guī)飼料組和綠色飼料組的第一限制性氨基酸均為色氨酸，常規(guī)飼料組必需氨基酸指數(shù)（73.58）高于綠色飼料組（71.00）。常規(guī)飼料組肌肉中二十碳五烯酸（eicosa pentenoic acid，EPA）和二十二碳六烯酸（docose hexaenoie acid，DHA）含量均極顯著高于綠色飼料組，常規(guī)飼料組肌肉中不飽和脂肪酸、n-3多不飽和脂肪酸（Σn-3）、n-6多不飽和脂肪酸（Σn-6）、多不飽和脂肪酸/飽和脂肪酸和Σn-3/Σn-6多不飽和脂肪酸均極顯著高于綠色飼料組，而綠色飼料組肌肉中飽和脂肪酸/不飽和脂肪酸極顯著高于常規(guī)飼料組。以上結(jié)果表明，2種飼料組均屬于優(yōu)質(zhì)蛋白，在綠色飼料中提高色氨酸、EPA和DHA含量有助于改善美洲鰣肌肉的營養(yǎng)品質(zhì)。

關(guān)鍵詞：美洲鰣；飼料；肌肉；營養(yǎng)成分；氨基酸；脂肪酸

doi：10.13304/j.nykjdb.2023.0352

中圖分類號：S963 文獻標(biāo)志碼：A 文章編號：10080864（2024）05022311

美洲鰣（Alosa sapidissima）隸屬鯡形總目（Clupeomorpha） 鯡形目（Clupeifoemes） 鯡科（Clupeidae）鰣亞科（Alosinae）西鯡屬（Alosa），原分布于北美洲大西洋西岸等水域，屬于溯河產(chǎn)卵洄游性魚類[1-3]。美洲鰣肉質(zhì)細嫩、口感滑潤、味道鮮美，具有很高的經(jīng)濟和營養(yǎng)價值 [4]。美洲鰣作為中國鰣的替代品種，在中國鰣瀕臨滅絕的情況下，美洲鰣因與中國鰣外形相似、肉質(zhì)相媲美，深受消費者的青睞，隨著美洲鰣規(guī)?；庇耐黄?，其養(yǎng)殖面積不斷擴大[5]。目前國內(nèi)外關(guān)于美洲鰣的研究主要集中在繁養(yǎng)技術(shù)[67]、應(yīng)激反應(yīng)機理[89]、營養(yǎng)需求[1011]、捕撈[12]、遷徙[13]以及遺傳多樣性[14]等方面，而美洲鰣養(yǎng)殖多使用常規(guī)海水魚膨化配合飼料，暫無專用配合飼料，且至今尚無綠色飼料對美洲鰣幼魚肌肉營養(yǎng)成分影響的相關(guān)研究報道[15]。綠色飼料是遵循可持續(xù)發(fā)展原則，按照特定的產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)，由綠色生產(chǎn)體系生產(chǎn)的無污染的安全、優(yōu)質(zhì)、營養(yǎng)型飼料[16]。因此，本研究以美洲鰣幼魚為研究對象，分別投喂常規(guī)飼料和綠色飼料，比較分析2組美洲鰣幼魚肌肉營養(yǎng)成分的差異，以期為美洲鰣綠色飼料的研發(fā)及其健康養(yǎng)殖提供依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

試驗用美洲鰣為上海市水產(chǎn)研究所當(dāng)年全人工繁育的幼魚。試驗飼料共2種，即常規(guī)飼料和綠色飼料。常規(guī)飼料是浙江明輝飼料有限公司生產(chǎn)的海水魚膨化配合飼料，綠色飼料是青島龍興飼料有限公司生產(chǎn)的膨化魚用配合飼料。試驗用水為當(dāng)?shù)睾拥赖舆m量天然海水調(diào)配成鹽度為3‰～5‰ 的養(yǎng)殖用水，經(jīng)過蓄水池沉淀和120 目的篩絹網(wǎng)過濾。試驗水槽為室內(nèi)水泥池（550 cm×235 cm×130 cm）。

1.2 試驗設(shè)計

養(yǎng)殖試驗設(shè)2個不同飼料組，即常規(guī)飼料組和綠色飼料組，每組設(shè)3個重復(fù)。試驗開始前15～20 d，將2種飼料按1∶1的比例混合均勻后進行引食。試驗開始前停食24 h，然后拉網(wǎng)將挑選的規(guī)格均勻的200尾美洲鰣幼魚（5～7 cm）隨機放入對應(yīng)的水泥池。試驗期間，每天投喂2次，均采用人工手撒投飼，觀察美洲鰣的進食情況，以表觀飽食為準(zhǔn)；每天上午吸污1次，每周進行1次換水，換水量約2/3。試驗期間，自然水溫20.0～25.0 ℃，連續(xù)曝氣。養(yǎng)殖試驗從2019年9月4日開始至10月30日結(jié)束，歷時8周。

1.3 樣品采集

養(yǎng)殖試驗結(jié)束后，停飼24 h，測量試驗魚的體長和體重，每個重復(fù)取10尾魚組成1個樣本，取魚軀干部肌肉，剪碎后?80 ℃冷凍保存，再將冷凍樣真空凍干至恒重，經(jīng)研磨混勻后測定營養(yǎng)成分。

1.4 營養(yǎng)成分測定方法

1.4.1 常規(guī)營養(yǎng)成分測定

采用真空冷凍干燥法測定水分含量；采用馬弗爐550 ℃高溫灼燒法測定粗灰分含量；用凱氏定氮法測定粗蛋白質(zhì)含量；用氯仿?甲醇提取法測定粗脂肪含量[17]。

1.4.2 氨基酸和脂肪酸的測定

色氨酸含量測定參照GB/T 18246—2019《飼料中氨基酸的測定》[18]，先用堿水解法（GB/T 15400—2018）[19]前處理，再用反相高效液相色譜法測定；除色氨酸外的其余氨基酸含量測定采用鹽酸水解法（GB 5009.124—2016）[20] 進行前處理，再用氨基酸自動分析儀（Biochrom 30型，英國柏楉有限公司）測定。鮮味氨基酸（delicious amino acid， DAA）包括天冬氨酸（Asp）和谷氨酸（Glu）；甜味氨基酸（sweetness aminoacid， SWAA）包括蘇氨酸（Thr）、丙氨酸（Ala）、甘氨酸（Gly）、脯氨酸（Pro）、絲氨酸（Ser）和賴氨酸（Lys）；苦味氨基酸（bitterness amino acid， BIAA）包括異亮氨酸（Ile）、亮氨酸（Leu）、蛋氨酸（Met）、苯丙氨酸（Phe）、纈氨酸（Val）、組氨酸（His）、絲氨酸（Ser）和酪氨酸（Tyr）；酸味氨基酸（sourness amino acid，SOAA）包括天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）和組氨酸（His）。含硫氨基酸（sulfur-containing amino acid，SAA）包括蛋氨酸（Met）和胱氨酸（Cys）；支鏈氨基酸（branched chain amino acid， BCAA）包括纈氨酸（Val）、異亮氨酸（Ile）和亮氨酸（Leu）；芳香族氨基酸（aromatic amino acid， AAA）包括苯丙氨酸（Phe）和酪氨酸（Tyr）。然后計算氨基酸總量（total aminoacid，ΣTAA）、必需氨基酸總量（total essential aminoacid，ΣEAA）、半必需氨基酸總量（total half-essentialamino acid，ΣHEAA）、非必需氨基酸總量（total nonessentialamino acid，ΣNEAA）、必需氨基酸總量/非必需氨基酸總量（ΣEAA/ΣNEAA）、必需氨基酸總量/氨基酸總量（ΣEAA/ΣTAA）。

脂肪酸測定采用水解提取?氣相色譜法（GB5009.168—2016）[21]。計算總的多不飽和脂肪酸（polyunsaturated fatty acid，ΣPUFA）、單飽和脂肪酸（monosaturated fatty acid，ΣMUFA）、不飽和脂肪酸（unsaturated fatty acid，ΣUFA）、飽和脂肪酸（saturated fatty acid，ΣSFA）/不飽和脂肪酸（ΣSFA/ΣUFA）、多不飽和脂肪酸/飽和脂肪酸（ΣPUFA/ΣSFA）、n-3 多不飽和脂肪酸（n-3 PUFA，Σn-3）、n-6多不飽和脂肪酸（n-6 PUFA，Σn-6）和n-3/n-6多不飽和脂肪酸（Σn-3/Σn-6）。

1.5 營養(yǎng)價值評價

根據(jù)氨基酸評分標(biāo)準(zhǔn)模式[22]與全雞蛋蛋白的氨基酸模式[23]進行營養(yǎng)價值比較。氨基酸評分（amino acid score，SAA）、化學(xué)評分（chemical score，SC）和必需氨基酸指數(shù)（essential amino acid index，IEAA）的計算公式如下。

氨基酸含量=魚肌肉干質(zhì)量中氨基酸含量（%）×10×6.25/魚肌肉干質(zhì)量粗蛋白含量（%）（1）

式中，a為該樣品的氨基酸含量（mg·g?1 N）；A（FAO/ WHO）和AEgg分別為聯(lián)合國糧農(nóng)組織/世界衛(wèi)生組織（Food and Agriculture Organization of theUnited Nations/ World Health Organization， FAO/WHO）評分模式和全雞蛋蛋白質(zhì)中同種氨基酸的含量（mg·g?1 N）；n 為比較的氨基酸種類數(shù)；a、b、c、…、i 為樣品中各必需氨基酸含量（mg·g?1 N）；ae、be、ce、…、ie 為全雞蛋蛋白質(zhì)中對應(yīng)的必需氨基酸含量（mg·g?1 N）。

支/芳值（F）為支鏈氨基酸與芳香族氨基酸含量的比值，計算公式如下。

1.6 數(shù)據(jù)處理

用SPSS 23進行數(shù)據(jù)處理，采用獨立樣本t 檢驗進行2個處理組之間的比較，數(shù)據(jù)結(jié)果采用“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差”表示。

2 結(jié)果與分析

2.1 常規(guī)營養(yǎng)組成分析

從表2可以看出，美洲鰣幼魚分別投喂2種飼料8 周后，綠色飼料組肌肉（鮮重）中水分含量（71.98%）極顯著高于常規(guī)飼料組（68.87%，P<0.01），且綠色飼料組肌肉中粗蛋白質(zhì)含量（17.54%）也顯著高于常規(guī)飼料組（16.93%，P<0.05）。常規(guī)飼料組肌肉中粗脂肪含量（7.84%）高于綠色飼料組（5.05%），且差異極顯著（P<0.01）。而常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉中粗灰分含量無顯著性差異。

2.2 氨基酸組成比較

常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉中（干物質(zhì)）共測出18種氨基酸，由表3可知，常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉中谷氨酸（Glu）的含量均最高，分別是7.88% 和10.88%，其次是天冬氨酸（Asp）（4.68% 和5.31%）和賴氨酸（Lys）（4.31% 和4.80%），而色氨酸（Trp）含量最低，分別是0.41%和0.44%。在8 種必需氨基酸中，綠色飼料組肌肉中蛋氨酸（Met）含量高于常規(guī)飼料組，且差異極顯著（P<0.01）；亮氨酸（Leu）、苯丙氨酸（Phe）、蘇氨酸（Thr）和纈氨酸（Val）的含量均顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05）；其他必需氨基酸在兩組間差異均不顯著。在2種半必需氨基酸中，綠色飼料組肌肉中精氨酸（Arg）含量極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01），組氨酸（His）含量顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05）。在8 種非必需氨基酸中，綠色飼料組肌肉中絲氨酸（Ser）和丙氨酸（Ala）含量均極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01）；綠色飼料組肌肉中天冬氨酸（Asp）、谷氨酸（Glu）和脯氨酸（Pro）含量均顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05）；其他非必需氨基酸在兩組之間的差異均未達到顯著水平。綠色飼料組肌肉中非必需氨基酸總量（ΣNEAA）、半必需氨基酸總量（ΣHEAA）和氨基酸總量（ΣTAA）均高于常規(guī)飼料組，且差異極顯著（P<0.01）；綠色飼料組肌肉中必需氨基酸總量（ΣEAA）顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05），而ΣEAA/ΣNEAA和ΣEAA/ΣTAA在兩組之間均無顯著差異。

由表4可以看出，綠色飼料組肌肉（干物質(zhì)）中鮮味氨基酸（ΣDAA）、苦味氨基酸（ΣBIAA）和酸味氨基酸（ΣSOAA）含量均顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05），且綠色飼料組肌肉中甜味氨基酸（Σ SWAA）含量極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01）。綠色飼料組肌肉中支鏈氨基酸含量和支/芳值（F）均顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05），而含硫氨基酸和芳香族氨基酸含量在兩組間差異不顯著。

2.3 必需氨基酸營養(yǎng)品質(zhì)評價

由表5 可知，以氨基酸評分（SAA）和化學(xué)評分（SC）進行評價時，常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉中的第一限制性氨基酸均為色氨酸（Trp），而以SAA 進行評價時，常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉中的第二限制性氨基酸均為纈氨酸（Val）；以SC進行評價時，常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉中的第二限制性氨基酸均為蛋氨酸+胱氨酸（Met+Cys）。此外，常規(guī)飼料組的必需氨基酸指數(shù)IEAA（73.58）高于綠色飼料組（71.00）。

2.4 脂肪酸組成及含量分析

對常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉干樣進行C6～C24脂肪酸（37種）的檢測，均檢測出29種脂肪酸，由C12～C24脂肪酸組成（表6）。在飽和脂肪酸中，常規(guī)飼料組和綠色飼料組均以棕櫚酸含量最高，分別為19.42% 和25.83%；其次是硬脂酸，分別是5.34% 和7.39%；綠色飼料組肌肉中月桂酸、肉豆蔻酸、棕櫚酸、硬脂酸含量和飽和脂肪酸總量均極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01），且木蠟酸含量顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05）；而常規(guī)飼料組肌肉中十五烷酸和二十二烷酸含量極顯著高于綠色飼料組（P<0.01），且二十三烷酸含量顯著高于綠色飼料組（P<0.05），其余飽和脂肪酸含量在兩組間的差異均未達到顯著水平（P>0.05）。

單不飽和脂肪酸中，常規(guī)飼料組和綠色飼料組均以油酸含量最高，分別為32.12%和45.82%；其次是棕櫚一烯酸，分別為2.44% 和3.24%。十七碳一烯酸含量在兩組間無顯著性差異，常規(guī)飼料組肌肉中順-11-二十烯酸含量極顯著高于綠色飼料組（P<0.01）；其他單不飽和脂肪酸含量和單不飽和脂肪酸總量均表現(xiàn)為綠色飼料組均極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01）。

在多不飽和脂肪酸中，綠色飼料組和常規(guī)飼料組均以亞油酸含量最高，分別為22.55% 和7.05%，含量次之的常規(guī)飼料組為二十二碳六烯酸（docosehexaenoic， DHA，3.79%），而綠色飼料組為γ-亞麻酸（1.55%）。順-11，14，17-二十碳三烯酸含量在兩組間無顯著差異，綠色飼料組肌肉中反亞油酸含量極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01），其他多不飽和脂肪酸含量和多不飽和脂肪酸總量均表現(xiàn)為常規(guī)飼料組極顯著高于綠色飼料組（P<0.01）。

另外，常規(guī)飼料組肌肉中ΣUFA、Σn-3、Σn-6、ΣPUFA/ΣSFA、Σn-3/Σn-6均極顯著高于綠色飼料組（P<0.01）；而綠色飼料組肌肉中ΣSFA/ΣUFA顯著高于常規(guī)飼料組，且差異極顯著（P<0.01）。

3 討論

3.1 2 種飼料投喂下美洲鰣幼魚肌肉常規(guī)營養(yǎng)成分差異

魚體肌肉的營養(yǎng)成分含量與其飼料組成和生長階段等密切相關(guān)[2425]。蔣飛等[26]研究發(fā)現(xiàn)，褐菖鲉（Sebastiscus marmoratus）的粗脂肪和粗蛋白含量與飼料中的粗脂肪和粗蛋白含量存在正相關(guān)。逯尚尉等[27]研究發(fā)現(xiàn)，不同餌料組點帶石斑魚（Epinephelus malabaricus）肌肉中的粗蛋白和粗脂肪含量與對應(yīng)餌料中粗蛋白和粗脂肪含量呈正相關(guān)。本研究中，常規(guī)飼料組肌肉中粗脂肪含量極顯著高于綠色飼料組（P<0.01），粗蛋白含量則顯著低于綠色飼料組（P<0.05），與對應(yīng)飼料中粗脂肪和粗蛋白含量呈正比。Haard[28]認為，養(yǎng)殖魚較低的肌肉水分含量反映了較好的營養(yǎng)物質(zhì)水平，常規(guī)飼料組的水分含量極顯著低于綠色飼料組（P<0.01），且其粗脂肪含量極顯著高于綠色飼料組（P<0.01），可見常規(guī)飼料能夠為美洲鰣幼魚提供較好的營養(yǎng)物質(zhì)水平，但其粗蛋白含量顯著低于綠色飼料組（P<0.05），表明綠色飼料組在粗蛋白含量方面優(yōu)于常規(guī)飼料組。因此，美洲鰣幼魚飼料的研發(fā)還需根據(jù)魚體自身的營養(yǎng)需求進行科學(xué)配比。

3.2 2 種飼料投喂下美洲鰣幼魚肌肉氨基酸組成及其營養(yǎng)價值

氨基酸組成與含量是評價蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值的重要依據(jù)[29]。根據(jù)FAO/WHO要求，必需氨基酸總量與非必需氨基酸總量的比值高于60%、必需氨基酸總量與氨基酸總量的比值在40%左右為優(yōu)質(zhì)蛋白源[30]。本研究中，常規(guī)飼料組和綠色飼料組Σ EAA/Σ TAA（38.61% 和38.29%）和Σ EAA/Σ NEAA（73.65% 和72.69%）均無顯著性差異（P>0.05），均符合優(yōu)質(zhì)蛋白質(zhì)的標(biāo)準(zhǔn)。

魚肉的鮮美程度取決于各種風(fēng)味氨基酸的組成和含量[31]。本研究中，綠色飼料組肌肉中ΣDAA、ΣBIAA、ΣSOAA均顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05），且綠色飼料組肌肉中ΣSWAA極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01），這可能與綠色飼料中粗蛋白含量顯著高于常規(guī)飼料有關(guān)。該結(jié)果與Gunasekera等[32]、Yamamoto 等[33]、馬睿[34]研究結(jié)果類似。因此，飼料中低蛋白質(zhì)水平會導(dǎo)致風(fēng)味氨基酸含量減少，從而降低美洲鰣幼魚的風(fēng)味。

支鏈氨基酸有降低膽固醇、保護肝臟、抑制癌細胞等作用[35-38]，正常條件下哺乳動物（含人類）的支/芳值為3.0～3.5，當(dāng)支/芳值降低到1.0～1.5，則意味著肝臟受損[31，39]。本研究中，常規(guī)飼料組和綠色飼料組肌肉中支/芳值分別為2.25和2.30，均大于肝臟受損的數(shù)值，說明常規(guī)飼料組和綠色飼料組的美洲鰣幼魚均具有一定的保健作用。而綠色飼料組肌肉中支鏈氨基酸含量和支/芳值均顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.05），表明綠色飼料組比常規(guī)飼料組更具有良好的保健功效。

氨基酸評分（SAA）、化學(xué)評分（SC）和必需氨基酸指數(shù)（IEAA）均是評價蛋白質(zhì)營養(yǎng)價值的重要指標(biāo)[40]。根據(jù)SAA 和SC，常規(guī)飼料組和綠色飼料組的第一限制性氨基酸均為色氨酸（Trp），提示美洲鰣幼魚飼料在配制過程中，應(yīng)適當(dāng)增加色氨酸水平以滿足美洲鰣幼魚的生長需求。本研究中，常規(guī)飼料組的SAA、SC 和IEAA 都高于綠色飼料組，表明常規(guī)飼料組肌肉營養(yǎng)價值高于綠色飼料組。

3.3 2 種飼料投喂下美洲鰣幼魚肌肉脂肪酸組成差異

脂肪酸的含量與組成也是魚體肌肉營養(yǎng)價值評價的重要依據(jù)[41]。棕櫚酸可降低血清膽固醇含量[39]，Kimata等[42]研究發(fā)現(xiàn)，棕櫚酸含量與口味之間呈正相關(guān)，棕櫚酸含量越高，肌肉品質(zhì)也越好。常規(guī)飼料組和綠色飼料組飽和脂肪酸中均以棕櫚酸含量最高，且綠色飼料組棕櫚酸含量極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01），說明綠色飼料組的肌肉要比常規(guī)飼料組更美味。單不飽和脂肪酸中，常規(guī)飼料組和綠色飼料組均以油酸為主。油酸可以降低膽固醇含量，預(yù)防心血管疾病，也能降低機體過度的炎癥反應(yīng)，有利于機體康復(fù)[4344]。本研究中，綠色飼料組棕櫚酸和油酸含量均極顯著高于常規(guī)飼料組（P<0.01），表明綠色飼料組肌肉更有利于人體健康，這可能與綠色飼料中含有較高的棕櫚酸和油酸有關(guān)。多不飽和脂肪酸（PUFA）可以改善血液微循環(huán)、降低心血管疾病發(fā)生率等，同時還能參與免疫調(diào)節(jié)，延緩衰老的作用[45]。EPA和DHA是機體生長發(fā)育的必需脂肪酸，也常用作魚體脂肪酸營養(yǎng)價值的評價依據(jù) [30，46]。常規(guī)飼料組肌肉中EPA 和DHA含量均極顯著高于綠色飼料組（P<0.01），表明常規(guī)飼料組比綠色飼料組更具較高的食用和保健價值，因此，今后在綠色飼料研發(fā)中可進一步添加一定比例的色氨酸（Trp）、EPA和DHA等營養(yǎng)物質(zhì)，以促進美洲鰣的綠色健康養(yǎng)殖。

參 考 文 獻

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（責(zé)任編輯：胡立霞）

基金項目：上海市科委“科技創(chuàng)新行動計劃”農(nóng)業(yè)領(lǐng)域項目（21N51901100）。