郭樂樂,李榮香,呂大嬌,胥 博
漯河市中心醫(yī)院生殖醫(yī)學與遺傳中心·河南省生育力保護和優(yōu)生重點實驗室,河南 漯河 462000
男性不育是臨床上較為常見的一類病癥。隨著現(xiàn)代社會的發(fā)展,男性受嗜煙、酗酒、熬夜、縱欲過度等不良生活習慣的影響,其不育風險逐漸上升,而較大的生活壓力也將進一步增加男性不育問題的發(fā)生率[1]。相關研究[2]顯示,生殖道感染是男性不育問題的重要影響因素,沙眼衣原體(CT)與淋球菌(NG)是對生殖影響較大的兩種感染源。此外,解脲支原體(UU)由于具有較高的感染率,且對抗精子抗體與精子的結合具有促進作用,導致感染者精子活力與功能降低,對感染者的精液質(zhì)量具有不利影響。但臨床上各類感染因素對男性生育問題的影響程度還存在著較大爭議。本研究旨在分析男性門診孕前體檢者與男性不育者的UU、CT、NG 感染率與精液參數(shù),現(xiàn)將研究結果報告如下。
隨機選取2020 年9 月—2022 年3 月樣本醫(yī)院收治的150例接受精液檢測分析的門診患者作為研究對象,將100例男性不育者納為觀察組,將50例男性孕前體檢者納為對照組。觀察組:年齡23~42 歲,平均年齡(31.28±2.45)歲。對照組:年齡23~41 歲,平均年齡(30.89±2.37)歲。兩組患者一般資料具有可比性(P>0.05)。本研究經(jīng)醫(yī)院醫(yī)學倫理委員會批準通過。(1)納入標準:①觀察組患者與妻子具有1 年以上同居經(jīng)歷并未孕育,經(jīng)臨床診斷確診為不育者。②觀察組患者性生活正常,且無其他明顯疾病。③所有受檢者均對本研究內(nèi)容知情且同意。(2)排除標準[3]:①觀察組患者受無精子癥、遺傳疾病、性功能障礙等問題的影響導致不育。②受檢者在檢測前1 個月內(nèi)存在服用抗生素類藥物經(jīng)歷。③受檢測精液存在病原學檢測不全問題。
兩組受檢者均接受精液檢測。受檢者在檢驗前需嚴格禁欲2~7 d,禁欲期間要保持良好的生活習慣,禁煙禁酒。檢測時,采用手淫法采集受檢者精液,并將精液保存于無菌器皿中。取樣結束后,需立即將樣本送至檢驗科進行檢驗,樣本需保存于37 ℃的恒溫環(huán)境中,并于1 h 內(nèi)完成對精液樣本的檢驗分析。檢驗過程中,檢驗人員要嚴格遵循相關標準與要求執(zhí)行操作,減少檢驗結果的誤差。
以WHO 制定的《人類精液檢查與處理實驗室手冊》[4]為標準,以精子計數(shù)板與精子質(zhì)量分析儀對受檢者精液樣本的質(zhì)量參數(shù)進行檢驗。對于部分精液密度低、不適用于機器檢驗的樣本,需采用人工顯微鏡進行檢驗。檢驗指標包含精液量、精子濃度、總精子數(shù)、精子總活力、精子前向運動比例及精子畸形率。各指標正常值參考范圍為:精液量≥1.5 mL,精子濃度≥15×106/mL,總精子數(shù)≥39×106/次,精子總活力≥40%,精子前向運動比例≥32%,精子畸形率≤96%。UU 感染率[5]:樣本送檢后浸入到培養(yǎng)液中,于37 ℃恒溫環(huán)境中對培養(yǎng)液進行24~72 h 的培養(yǎng),用UU培養(yǎng)藥敏試劑盒對培養(yǎng)結束后的樣本進行檢測。若樣本培養(yǎng)液顏色由橙變紅,則為陽性,提示存在UU 生長;若樣本培養(yǎng)液顏色不變,則為陰性。CT 感染率[6]:用尿道拭子對受檢者進行核酸檢驗樣本采集,采用熒光定量PCR 方案與熒光定量PCR 儀對樣本CT-DNA 進行檢測。NG 感染率:將樣本接種至TM 培養(yǎng)基中,于37 ℃環(huán)境下孵育48 h,取透明、邊緣整齊、呈水滴狀的可疑菌落,采用細菌自動鑒定儀進行鑒定。
采用SPSS 25.0 軟件進行統(tǒng)計分析。計量資料以均數(shù)±標準差(±s)表示,組間比較采用t檢驗。計數(shù)資料以例數(shù)和百分比(%)表示,組間比較采用χ2檢驗。以P<0.05為差異有統(tǒng)計學意義。
兩組受檢者在精液量、精子濃度、總精子數(shù)、精子總活力與精子向前運動方面比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),觀察組受檢者精子畸形率高于對照組受檢者,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表1。
表1 兩組受檢者常規(guī)精液分析情況(±s)
表1 兩組受檢者常規(guī)精液分析情況(±s)
組別觀察組(n=100)對照組(n=50)t值P值精液量(mL)3.49±1.44 3.84±1.52 1.377 0.170精子濃度(×106/mL)54.81±39.76 56.74±40.63 0.278 0.781總精子數(shù)(×106/次)195.57±161.22 211.71±162.08 0.577 0.565精子總活力(%)60.05±22.14 61.75±20.88 0.452 0.652精子向前運動(%)45.53±20.65 46.86±17.83 0.389 0.698精子畸形率(%)97.32±1.44 68.76±10.22 27.494<0.001
兩組受檢者UU 感染率、CT 感染率與NG 感染率比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),見表2。
表2 兩組受檢者UU、CT及NG感染率情況 例(%)
觀察組受檢者中,UU 感染陽性與陰性患者精液量、精子濃度、總精子數(shù)、精子總活力及精子向前運動比較,差異無統(tǒng)計學意義(P>0.05),陽性患者的精子畸形率高于陰性,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),見表3。
表3 觀察組受檢者UU感染陽性與陰性的精液參數(shù)情況(±s)
表3 觀察組受檢者UU感染陽性與陰性的精液參數(shù)情況(±s)
組別陽性(n=30)陰性(n=70)t值P值精液量(mL)3.46±1.28 3.53±1.45 0.229 0.819精子濃度(×106/mL)50.72±40.83 56.24±39.81 0.631 0.530總精子數(shù)(×106/次)181.63±154.95 200.36±164.82 0.530 0.597精子總活力(%)58.36±23.27 60.85±22.41 0.503 0.616精子向前運動(%)44.07±21.86 45.88±20.47 0.397 0.692精子畸形率(%)97.63±1.82 94.47±2.05 7.296<0.001
男性不育問題是男科常見的一類病癥,其病發(fā)原因多與遺傳因素或不良生活習慣有關。有研究[7]顯示,生殖道感染對不良生育問題具有重要影響。目前,臨床已驗證,UU、CT、NG、人型支原體與生殖道支原體可引發(fā)尿道炎、前列腺炎等生殖道感染問題,但支原體在生殖道感染中可表現(xiàn)為無明顯癥狀與體征的定植狀態(tài),因此,臨床上對于支原體、衣原體在生殖道中的致病意義存在較大爭議。臨床觀點普遍認為,泌尿生殖道中存在一個具有多種泌尿道菌落的微生物群落環(huán)境,而非處于一個無菌環(huán)境,在該微生物群落中存在乳酸菌、厭氧菌、葡萄球菌、棒狀桿菌等多種菌落,同潛在的炎癥發(fā)生風險與前列腺癌發(fā)生風險均具有相關性[8]。但生殖道感染對男性不育者精液質(zhì)量的影響,臨床上尚未得出定論。
支原體在人體中是一種條件致病菌,而UU 是人體泌尿生殖道感染問題中最為常見的一種支原體,同時也是男性生殖道感染與不育癥診斷中一項重要的常規(guī)檢查項目。目前,臨床上對于UU 在男性不育問題中的作用機制尚未明確。有研究[9]顯示,UU 感染后可黏附于生精細胞表面或侵入生精細胞中,導致精母細胞的細胞膜受到損壞,從而使精母細胞的結構發(fā)生改變。此外,UU 感染后還將對曲細精管內(nèi)生精上皮形成侵犯,從而對精子的產(chǎn)生與成熟造成不利影響,導致患者出現(xiàn)不育問題。有研究[10]指出,UU 可附著于精子頭部與尾部,導致精子游動無力、相互纏繞,且能夠產(chǎn)生神經(jīng)胺酶樣物質(zhì),對精子與卵子的接觸形成干擾,進一步加重感染者的不育情況。另有研究[11]指出,由于精子與精子膜蛋白之間存在交叉免疫反應,而UU吸附于精子細胞表面能夠誘導T細胞活化,從而通過細胞免疫功能實現(xiàn)對精子細胞的滅殺。CT 是一種具有獨特發(fā)育周期與專性細胞內(nèi)生長的原核型微生物,能夠在正常男性的尿道分泌物中檢測出來。相關研究[12]顯示,CT 感染會導致精子凋亡情況加劇,對精子的頂體膜造成損傷,使精子頂體消失,從而對精子的穿透能力造成嚴重的不利影響。除此之外,CT 感染還可引發(fā)免疫反應,導致感染者機體產(chǎn)生抗精子抗體,從而加重感染者的不育情況。有研究[13]指出,CT 在寄生過程中能夠?qū)λ拗骷毎募毎x功能起到抑制作用,導致細胞發(fā)生溶解、破壞,溶酶體內(nèi)大量的水解酶釋放出來,誘發(fā)生殖道炎癥反應,進一步加重感染者的不育情況。NG 是一種能夠引發(fā)泌尿生殖道化膿性感染的寄生菌,主要存在于尿道炎患者的膿性分泌物中。NG 感染可通過泌尿系統(tǒng)與生殖道擴散至附睪、前列腺、精囊腺等部位,并引發(fā)炎癥反應,而附睪炎可引發(fā)輸精管水腫、梗阻及相鄰睪丸實質(zhì)性萎縮問題,前列腺炎則能夠引發(fā)射精管水腫、受壓問題[14]。在附睪炎、前列腺炎等病癥的影響下,感染者具有較高的少精子癥、無精子癥發(fā)生風險,并為感染者帶來不育問題。
本研究結果的產(chǎn)生原因與精液參數(shù)指標易受多因素影響有關。當前社會活動中所存在的大氣污染、水體污染、不良生活飲食習慣等問題,均會對男性精液參數(shù)指標產(chǎn)生影響。此外,常規(guī)精液分析指標僅為男性生育能力評估中的一個項目,而男性精液參數(shù)在生殖道感染外也可能存在其他影響因素。受檢者出于性經(jīng)歷復雜、猜測自身生育能力不佳或在研究中存在隱瞞自身病史等原因,導致病史調(diào)查結果失真。在生殖道感染問題方面,相關研究[15]已證實,CT 感染與NG 感染能夠?qū)δ行缘纳芰υ斐蓢乐負p害。研究[16]發(fā)現(xiàn),UU 感染陽性患者的精子濃度、精子存活率與前向運動比例均低于陰性患者,而陽性患者的精子畸形率要高于陰性患者。分析其原因在于,UU 與精子膜糖蛋白之間存在交叉抗原,在交叉抗原的影響下,免疫系統(tǒng)所產(chǎn)生的UU 抗體不僅能與UU 結合,也能與精子進行結合,從而導致精液參數(shù)各方面指標降低。UU 在融入精子細胞后會對精子活動產(chǎn)生不利影響,導致精子的運動方式發(fā)生變化,并引發(fā)精子畸形問題。本研究中,由于樣本量較少,且UU 感染陽性不育者與陰性不育者在數(shù)量上存在較大差距,因此導致研究結果存在一定差異。在精子畸形率上,UU 感染陽性不育者的發(fā)生率要高于陰性不育者,提示UU 感染對不育患者精子形態(tài)存在明顯的不利影響,UU 感染為男性不育者精子質(zhì)量的重要影響因素之一。
綜上所述,UU 感染容易引發(fā)精子畸形問題,對男性不育患者的精液質(zhì)量與不育情況產(chǎn)生不利影響,同時也是臨床診療中一項重要的觀察指標。而UU、CT、NG 感染對男性不育者精液質(zhì)量的影響有待加入更多參考因素,展開更加全面的探究。