舒泰對18只黑猩猩短期重復(fù)化學(xué)保定的效果分析

霍永騰,趙素芬,陳海良,夏茂華,戴春闊,盧 巖,李 勝,雷 英,焦思敏,朱云蕓,范昕琳,韓俊武,楊明海,劉金鵬,普天春,張成林

[1.北京動物園管理處,北京 西城 100044 ; 2. 北京動物園管理處 圈養(yǎng)野生動物技術(shù)北京市重點實驗室,北京 西城 100044 ; 3. 北京綠野晴川動物園有限公司,北京 大興 102602 ; 4. 大興區(qū)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心農(nóng)業(yè)環(huán)境與設(shè)施管理服務(wù)站,北京 大興 102600 ; 5. 太原動物園,山西 太原 030009 ; 6. 東方尚銳(北京)生物科技有限公司,北京 順義 101300]

在珍稀野生動物研究、管理、防疫和治療中,化學(xué)保定是必要的手段,特別是對散養(yǎng)狀態(tài)下的兇猛動物或敏捷動物的臨床處置中,化學(xué)保定的應(yīng)用極為廣泛和頻繁[1-2]。舒泰是一種獸用復(fù)合麻醉劑,作用于動物的中樞神經(jīng)系統(tǒng)產(chǎn)生木馬樣分離麻醉,該藥的制動機理與氯胺酮很相似,但效力更強,起效速度更快,維持時間更長[3]。

黑猩猩(Pantroglodytes)屬靈長目、人科、黑猩猩屬,分布于非洲加蓬、喀麥隆和民主剛果共和國的熱帶雨林中,集群生活,屬于世界自然保護聯(lián)盟(International Union for Conservation of Nature,IUCN)瀕危物種,華盛頓公約(Convention on International Trade in Endangered Species of Wild Fauna and Flora,CITES)I級保護動物[4-5]。2019年,北京綠野晴川動物園有限公司從國外引進18只黑猩猩,為完成海關(guān)檢疫和動物轉(zhuǎn)移,北京動物園管理處配合實施化學(xué)保定。前期,北京動物園管理處獸醫(yī)工作者多采用氯胺酮對靈長類動物進行化學(xué)保定,但常出現(xiàn)不良反應(yīng),且該藥的審批和購買流程復(fù)雜。為保障動物安全,結(jié)合文獻和引進前動物化學(xué)保定記錄,本批次18只黑猩猩采用舒泰進行化學(xué)保定。鑒于此次化學(xué)保定間隔時間短、動物數(shù)量多、年齡分布廣,且保定效果總體較好,故將化學(xué)保定記錄進行了總結(jié),分析舒泰對黑猩猩的保定效果,以期為今后黑猩猩化學(xué)保定藥物和劑量選擇等提供參考。

1 材料與方法

1.1 研究對象 18只自國外引進的黑猩猩,年齡1～51歲,體重3.2～59.0 kg,雄性9只,雌性9只,檢疫合格前飼養(yǎng)于東方尚銳(北京)生物科技有限公司。2019年9月11日,18只黑猩猩實施入關(guān)后第1次化學(xué)保定,完成血液和拭子等相關(guān)檢疫樣品采集;2019年10月3日,15只檢疫合格黑猩猩實施第2次化學(xué)保定,裝入動物轉(zhuǎn)運籠內(nèi)轉(zhuǎn)移至北京綠野晴川動物園有限公司。

1.2 化學(xué)保定劑 舒泰(Zoletil),法國維克有限公司Virbac S.A.生產(chǎn),規(guī)格：舒泰50和舒泰100。舒泰50：每只凍干瓶含有替來他明125 mg和唑拉西泮125 mg(生產(chǎn)批號：77X2);舒泰100：每只凍干瓶含有替來他明250 mg和唑拉西泮250 mg(生產(chǎn)批號：7BMLA)。

1.3 化學(xué)保定方法 化學(xué)保定前,對動物禁食10 h、禁水4 h,根據(jù)黑猩猩入關(guān)前化學(xué)保定劑用量,結(jié)合體型評估體重,選擇舒泰50或舒泰100,或者二者搭配,以2～6 mg/(kg·bw)的參考劑量,計算用藥量,使用吹管注射器于臀部肌肉注射化學(xué)保定劑。除保定獸醫(yī)和必要輔助人員外,其他人員回避,吹射時,應(yīng)避開黑猩猩正面視野,避免其精神緊張和出現(xiàn)應(yīng)激反應(yīng),增加保定難度。臨床上,黑猩猩在肌肉注射舒泰后,一般會在5～10 min出現(xiàn)四肢逐漸無力,對外部刺激逐漸失去反應(yīng),因體重誤差較大難以準(zhǔn)確計算化學(xué)保定劑用量,動物可能會出現(xiàn)不易進入麻醉狀態(tài)的現(xiàn)象;注射15 min后未見明顯麻醉反應(yīng),或者需要延長保定時間,可按照1/3～1/2劑量追加;若追加15 min后動物仍未出現(xiàn)麻醉反應(yīng),需考慮暫緩操作,觀察動物無明顯異常后再行化學(xué)保定。保定時動物側(cè)臥位,頭頸亦呈側(cè)位姿態(tài),若出現(xiàn)呼吸困難需將舌頭牽出口腔,防止呼吸不暢和窒息。在保定過程中,若動物流涎較嚴(yán)重,以0.02～0.05 mg/(kg·bw)劑量肌肉注射阿托品。若動物自然蘇醒時間較長,可注射呼吸中樞興奮劑(如尼可剎米)、吸氧、靜脈或皮下補液等措施縮短其蘇醒時間。

1.4 保定監(jiān)測指標(biāo) 化學(xué)保定后,對每只黑猩猩進行稱重,并實時監(jiān)測其保定后的呼吸頻率、痛覺反應(yīng)、肌松程度、意識反應(yīng)和其他行為。按照傳統(tǒng)的化學(xué)保定分期——誘導(dǎo)期、麻醉期和恢復(fù)期[2],監(jiān)測黑猩猩在不同分期的持續(xù)時間和化學(xué)保定效果。

1.5 保定效果判定 注射化學(xué)保定劑后,動物無明顯麻醉反應(yīng),即判定為保定效果差。誘導(dǎo)期較長,動物四肢無力,出現(xiàn)明顯的麻醉反應(yīng),但動物有輕微的運動意識,嘗試活動,即判定為保定效果一般。誘導(dǎo)期短,保定后動物倒地,生理狀況基本平穩(wěn),肌松良好,呼吸基本平穩(wěn)通暢,偶有流涎癥狀,或恢復(fù)期時間較長,即判定為保定效果較好。誘導(dǎo)期短,保定后動物倒地,生理狀況平穩(wěn),肌松良好,呼吸平穩(wěn)通暢,即判定為保定效果良好。

1.6 統(tǒng)計分析 使用SPSS 20.0軟件對前、后2次化學(xué)保定的不同年齡段用藥劑量[幼年(3～7歲)、成年(10～41歲)、老年(46～51歲)]和保定監(jiān)測期時長[幼年(1～7歲)、成年(10～41歲)、老年(46～51歲)]進行單因素方差分析(One-way ANOVA),不同性別化學(xué)保定劑用量和保定監(jiān)測期時長進行獨立樣本t檢驗。結(jié)果以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差(Mean±SD)”表示,P<0.05表示差異顯著。

2 結(jié)果

2.1 動物體征和保定過程監(jiān)測 本試驗使用舒泰分別對18只和15只黑猩猩進行前、后2次化學(xué)保定,實際用藥劑量為1.69～9.75 mg/(kg·bw),平均用藥劑量為(4.90±2.02)mg/(kg·bw),保定效果總體良好,黑猩猩均未出現(xiàn)嚴(yán)重不良反應(yīng)和死亡。其中,15號黑猩猩在第1次化學(xué)保定過程中出現(xiàn)流涎現(xiàn)象,對其肌肉注射硫酸阿托品,癥狀緩解,保定效果判定為較好;13、17和18號黑猩猩在第1次化學(xué)保定的恢復(fù)期用時相對較長,達360 min左右,保定效果判定為較好;2、3、4、5、8和15號黑猩猩在第2次化學(xué)保定的麻醉期有輕微的運動意識,嘗試活動,保定效果判定為一般;其余黑猩猩保定效果均良好,判定為良好(表1)。

表1 黑猩猩個體基礎(chǔ)數(shù)據(jù)和舒泰使用記錄

誘導(dǎo)期黑猩猩四肢逐漸無力,反應(yīng)逐漸遲鈍,興奮度降低,身體搖晃至逐漸臥倒,翻正反射消失,痛覺逐漸消失,對外部刺激逐漸失去反應(yīng);麻醉期黑猩猩肌松良好,睜眼,呼吸平穩(wěn)通暢,翻正反射和痛覺消失,統(tǒng)計麻醉期動物呼吸頻率為18～36 次/min,平均26 次/min;恢復(fù)期黑猩猩眼瞼開始眨動,對外界刺激逐漸恢復(fù)反應(yīng),前肢手指最先開始活動,隨后肢體動作逐漸加大,翻正反射逐漸恢復(fù),痛覺恢復(fù),正常活動和飲食飲水逐漸恢復(fù)正常。

2.2 年齡和性別對用藥劑量和保定監(jiān)測期時長的影響 按年齡分組統(tǒng)計前、后2次化學(xué)保定的平均用藥劑量,結(jié)果如表2所示,5只3～7歲幼年黑猩猩平均用藥劑量為(3.1±0.91)mg/(kg·bw),10只成年黑猩猩為(6.3±1.29)mg/(kg·bw),2只老年黑猩猩為(2.2±0.50)mg/(kg·bw),其中,成年黑猩猩的平均用藥劑量顯著高于幼年和老年黑猩猩(P<0.05),幼年和老年黑猩猩的平均用藥劑量差異不顯著(P>0.05)。6只1～7歲幼年黑猩猩誘導(dǎo)期、麻醉期和恢復(fù)期3個監(jiān)測期的平均時長分別為(17.7±12.46)min、(84.3±15.18)min和(204.7±15.49)min,10只成年黑猩猩3個監(jiān)測期的平均時長分別為(16.7±6.99)min、(72.7±39.55)min和(261.4±45.21)min,2只老年黑猩猩3個監(jiān)測期的平均時長分別為(13.3±1.53)min、(85.7±38.42)min和(351.0±31.00)min;進一步比較分析,3個年齡段分組的誘導(dǎo)期和麻醉期平均時長組間差異不顯著(P>0.05),而在恢復(fù)期平均時長組間存在顯著差異,具體表現(xiàn)在幼年組恢復(fù)期用時最少,老年組恢復(fù)期用時最多,幼年組恢復(fù)期時長顯著少于成年組和老年組(P<0.05),且成年組恢復(fù)期時長同樣顯著少于老年組(P<0.05)。

表2 年齡對黑猩猩舒泰用藥劑量和時長的影響

按性別分組統(tǒng)計前、后2次化學(xué)保定的平均用藥劑量,結(jié)果如表3所示,雄性平均用藥劑量為(4.4±1.71)mg/(kg·bw),雌性為(5.4±2.22)mg/(kg·bw),組間差異不顯著(P=0.171,t=-1.400)。雄性組誘導(dǎo)期、麻醉期和恢復(fù)期3個監(jiān)測期平均時長分別為(13.5±6.65)min、(83.3±31.70)min和(147.4±121.88)min,雌性組3個監(jiān)測期平均時長分別為(19.8±9.65)min、(79.1±32.39) min、(155.4±134.29)min;進一步比較分析,雄性組的誘導(dǎo)期時長顯著少于雌性組(P=0.036,t=-2.203),麻醉期和恢復(fù)期時長無性別差異(P>0.05)。

表3 性別對黑猩猩舒泰用藥劑量和時長的影響

3 討論

我國多家動物園飼養(yǎng)有黑猩猩,轉(zhuǎn)運、體檢和治療時均需進行化學(xué)保定。臨床上使用的化學(xué)保定劑種類較多,包含氯胺酮、復(fù)方氯胺酮、賽拉嗪和丙泊酚等,在化學(xué)保定過程中,雖然能夠達到保定目的,但黑猩猩會出現(xiàn)流涎、嘔吐和全身強直痙攣等不良反應(yīng)[6]。采用復(fù)方氯胺酮化學(xué)保定,恢復(fù)期黑猩猩會出現(xiàn)狂妄癥[7]。采用復(fù)方氯胺酮、丙泊酚和安定在1.5個月間隔期先、后2次化學(xué)保定黑猩猩進行人工授精,均出現(xiàn)嗆咳、呼吸抑制等不同程度的化學(xué)保定不良反應(yīng),尤其是第2次化學(xué)保定時,用藥劑量大、恢復(fù)期持續(xù)時間長,對動物的損害較大[8]。舒泰由替來他明和唑拉西泮按1∶1混合而成,替來他明具有良好的止痛效果,唑拉西泮具有肌松和抗驚厥效果,2種藥物的作用互補[9-11],安全、高效、刺激性小且無累積毒性,在國內(nèi)外獸醫(yī)界得到廣泛應(yīng)用[12-13]。馬小萍等[6]采用舒泰化學(xué)保定黑猩猩治療皮膚膿腫,取得了良好的保定效果,黑猩猩未出現(xiàn)不良反應(yīng)。因此,舒泰成為本試驗的首選藥物。

依照舒泰說明書,靈長類動物肌肉注射最適用藥劑量為4～6 mg/(kg·bw)。本試驗中,為保障18只黑猩猩和操作人員安全,在入關(guān)后第1次化學(xué)保定時,參考入關(guān)前用藥劑量,由獸醫(yī)和飼養(yǎng)員估測體重后,并且在滿足檢疫采樣保定時長需求的條件下,進行適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)保定劑減量?；瘜W(xué)保定過程中,除1只黑猩猩出現(xiàn)流涎,3只黑猩猩恢復(fù)期較長,其余黑猩猩均達到理想的保定效果。根據(jù)保定后黑猩猩實際體重計算,18只黑猩猩的實際用藥劑量介于2.26～9.75 mg/(kg·bw),其中7、12和13號雌性黑猩猩,實際用藥劑量分別為7.50、9.75和7.94 mg/(kg·bw),遠(yuǎn)超最適用藥劑量;1號1歲齡黑猩猩用藥劑量達6.25 mg/(kg·bw)?？梢?對于黑猩猩而言,舒泰是一種安全范圍較大、蘇醒平穩(wěn)且副作用較小的化學(xué)保定劑。作為獸用化學(xué)保定劑,舒泰購買時無需審批和備案,臨床應(yīng)用時也較為方便。但舒泰沒有專用的拮抗劑,只能待動物自然蘇醒,因此恢復(fù)期用時較長,且恢復(fù)期時長差異較大,這可能與黑猩猩體況不一、估測體重與實際體重存在差異、化學(xué)保定劑在體內(nèi)代謝速度不同有關(guān)。在恢復(fù)期,需將黑猩猩置于較軟的空間中,避免其頭部遭受碰撞;對一些存在嚴(yán)重心臟機能和呼吸機能不全的黑猩猩應(yīng)慎用或不用舒泰,以免引起心肺功能抑制和體溫降低。

本試驗中15只通過檢疫的黑猩猩進行入關(guān)后第2次化學(xué)保定時,僅需采取轉(zhuǎn)運前的裝籠操作,為減少短時間內(nèi)重復(fù)使用化學(xué)保定劑對黑猩猩造成的不良反應(yīng),獸醫(yī)對大部分成年和老年黑猩猩用藥劑量進行了再次減量。其中9只黑猩猩保定效果較為理想,而2、3、4和5號4只幼年黑猩猩以及8和15號2只成年黑猩猩在麻醉期有輕微的運動意識,但不影響裝籠時人員和黑猩猩安全,故未追加藥物用量。結(jié)合保定后實際稱重結(jié)果進行計算,15只黑猩猩的實際用藥劑量介于1.69～7.42 mg/(kg·bw)。其中,2、3、4和5號4只幼年黑猩猩在第2次化學(xué)保定時,雖未對化學(xué)保定劑進行減量,但與第1次化學(xué)保定相比,其體重增加2.8～5.0 kg不等,實際用藥劑量由2.33～4.55 mg/(kg·bw)減至2.00～3.33 mg/(kg·bw),可能臨近黑猩猩舒泰用量的最低閾值,致使保定效果欠佳。8和15號2只成年黑猩猩的用藥劑量分別為5.10 和3.98 mg/(kg·bw),雖在參考劑量范圍內(nèi),但它們在麻醉期有輕微的活動意識,分析這可能是由藥物減量、體重增加和個體對藥物的耐受性不同所致。研究表明,重復(fù)對同一女性患者給于氯胺酮麻醉時,其鎮(zhèn)痛時間明顯縮短,氯胺酮用量增加[14];重復(fù)使用戊巴比妥對比格犬進行保定,隨著用藥次數(shù)的增加,藥物實際總用量也增加[15]。本試驗中6只黑猩猩麻醉期出現(xiàn)活動意識,尤其是2只成年黑猩猩該現(xiàn)象的產(chǎn)生可能與連續(xù)使用化學(xué)保定劑導(dǎo)致藥物耐受有關(guān)。

年齡和性別均為影響麻醉劑藥代動力學(xué)的重要因素[16-17]。麻醉劑需要量與年齡有關(guān),不同麻醉劑的吸收和排出速度也各不相同[18],老年人達到相同麻醉狀態(tài)僅需成年人一半的藥量[19-20]。分析黑猩猩年齡對舒泰劑量的影響發(fā)現(xiàn),成年組用藥劑量顯著高于老年組,恢復(fù)期時長顯著少于老年組,這可能是由于老年黑猩猩大腦和各器官衰老造成的對藥物敏感性升高和代謝變慢所致[21]。臨床化學(xué)保定中,老年個體因麻醉藥用量不當(dāng)而造成的麻醉事故頻發(fā)[22],因此,在黑猩猩化學(xué)保定過程中要嚴(yán)格控制老年個體用藥劑量。兒童多次暴露于麻醉劑會導(dǎo)致學(xué)習(xí)障礙的發(fā)生率提高[23]。本試驗中,1歲齡黑猩猩單次用藥劑量雖在舒泰安全劑量范圍內(nèi),且保定后未出現(xiàn)明顯不良反應(yīng),但關(guān)于低齡黑猩猩使用舒泰進行化學(xué)保定的最佳劑量有必要進行進一步研究驗證。對比幼年與成年黑猩猩保定監(jiān)測期時長,幼年組保定時長顯著少于成年組,這可能與藥物在幼年黑猩猩體內(nèi)代謝速率高于成年黑猩猩有關(guān)[24]。侯麗紅等[25]研究發(fā)現(xiàn),女性患者全身麻醉時,在10 min以內(nèi)的各個時間點的血藥濃度均顯著低于男性。在本試驗中雌性黑猩猩的誘導(dǎo)期顯著長于雄性黑猩猩,可能是因為有效血藥濃度相對較低致使誘導(dǎo)期較長。