恩諾沙星治療豬副嗜血桿菌病的效果

王相花

（諸城市賈悅畜牧獸醫(yī)站 山東濰坊 262200）

隨著我國集約化經(jīng)濟(jì)不斷發(fā)展，規(guī)?；B(yǎng)豬的擴(kuò)大伴隨著養(yǎng)豬密度不斷地增加。研究調(diào)查發(fā)現(xiàn)，在我國養(yǎng)豬大省中，斷奶5 d 后的哺乳仔豬一直到70日齡保育豬階段容易發(fā)生豬副嗜血桿菌病。臨床上表現(xiàn)為關(guān)節(jié)腫大跛行、皮毛無光澤、采食量下降生長速度慢，呼吸道表現(xiàn)為咳嗽、呼吸困難，淋巴結(jié)腫大等。該病具有較強(qiáng)的感染性，其傳播途徑廣，因此可以感染整個(gè)圈舍，死亡率在30%左右，給養(yǎng)殖戶帶來較大的經(jīng)濟(jì)損失，因此必須給予高度重視。本文對(duì)如何治療豬副嗜血桿菌病以及該病出現(xiàn)的臨床癥狀進(jìn)行總結(jié)，給后續(xù)科研人員提供借鑒。

1 國內(nèi)外豬副嗜血桿菌疾病研究進(jìn)展

豬副嗜血桿菌病是由豬副嗜血桿菌（HPS）引起，Angen 等[1]研究報(bào)道，HPS 有15 種血清型，其中歐洲、我國等地4、5 和13 型最常見。血清分型中的抗原是脂多糖（LPS），不同血清型之間的交叉保護(hù)性差，每一種血清型有特殊的臨床表現(xiàn)。HPS 定植于豬上呼吸道中，病豬主要表現(xiàn)于腦膜炎、關(guān)節(jié)炎等特征。毒性最強(qiáng)的血清型有1、5、10、12、13 和14 型。

2007年余群英[2]在研究中提到，保育豬發(fā)生HPS 與對(duì)應(yīng)型的毒力相關(guān)，毒力不同。對(duì)應(yīng)的臨床癥狀也不用，一些菌株毒力強(qiáng)會(huì)使感染豬出現(xiàn)全身臨床癥狀，一些菌株毒力弱只表現(xiàn)呼吸道癥狀?？梢詮暮粑?、鼻腔以及扁桃體等部位分離出病菌。主要是由于抵抗力下降、應(yīng)激、環(huán)境變化以及PCV2 和PRRSV 等病毒的發(fā)生導(dǎo)致HPS 的流行[3]。該病主要是在大型規(guī)?；B(yǎng)殖場，由于集約化養(yǎng)殖菌株生長繁殖快速，發(fā)病率呈上升趨勢(shì)。目前治療該病的手段主要是抗生素，導(dǎo)致菌株出現(xiàn)耐藥性。研究表明，我國大多數(shù)省份HPS 對(duì)青霉素、四環(huán)素、慶大霉素、阿莫西林等常用抗生素均產(chǎn)生耐藥性[4]。

2 豬副嗜血桿菌（HPS）簡介

2.1 HPS 病原學(xué)

豬副嗜血桿菌是一種革蘭氏陰性桿菌，非溶血性、無鞭毛、無芽孢，多數(shù)形態(tài)成球狀或球桿狀，有15 種血清型部分類型有莢膜。

2.2 HPS 流行病學(xué)

HPS 主要感染豬15～80日齡之間，定植于上呼吸道。母豬和育肥豬作為主要的傳染源，剛出生1 周齡的仔豬就可檢測(cè)出該病原，主要通過母豬鼻腔接觸進(jìn)行傳播。在哺乳轉(zhuǎn)保育、斷奶之后、轉(zhuǎn)群應(yīng)激等情況下，HPS 最容易發(fā)生。4 周齡主要原因是母源抗體減少免疫力下降，排出具有高病毒傳染性的病菌。

HPS 可以引起繼發(fā)感染，一般常見的疾病有PRRSV、SI、PRV、PCV2 等。HPS 主要的傳播途徑有空氣傳播（氣溶膠等）和接觸傳播（病豬、污染的器械等）。該細(xì)菌空氣中常見是常在菌，造成該病暴發(fā)的主要原因是運(yùn)輸、混群、應(yīng)激、斷奶以及營養(yǎng)不良等情況。豬群中存在PRRSV、SI 等疾病也同樣容易引起HPS 繼發(fā)感染。

2.3 豬副嗜血桿菌臨床表現(xiàn)與鑒定

臨床表現(xiàn)為體溫升高（40.5～42 ℃）、精神沉郁、采食量下降、生長速度減慢、關(guān)節(jié)腫大、瀕臨死亡前表現(xiàn)為四肢劃水狀；呼吸道表現(xiàn)為咳嗽、呼吸困難、皮膚發(fā)紅、耳朵發(fā)紺，共濟(jì)失調(diào)。伴隨著繼發(fā)感染，出現(xiàn)炎癥，主要部位是關(guān)節(jié)以及呼吸道；關(guān)節(jié)表現(xiàn)為關(guān)節(jié)腫大、跛行以及站立困難；呼吸道表現(xiàn)呼吸困難，出現(xiàn)敗血癥現(xiàn)象；生殖系統(tǒng)感染時(shí)出現(xiàn)精子活力低、性欲差，流產(chǎn)等現(xiàn)象。該病主要感染豬，對(duì)其他動(dòng)物不敏感，發(fā)病率在20%左右，高發(fā)期死亡率達(dá)50%。一般診治該病需要臨床剖檢結(jié)合實(shí)驗(yàn)室檢測(cè)最終確定病原。病死豬剖檢可以觀察到胸腔內(nèi)有黃色透明液體、血液凝固不良、心肝有白膜覆蓋，胸腔和腹腔粘連，關(guān)節(jié)腫大有積液等。目前常用的檢測(cè)方法是病原體檢測(cè)、血清學(xué)檢測(cè)、分子生物學(xué)檢測(cè)。血清學(xué)檢測(cè)主要是通過IHA、CF 和ELISA 實(shí)驗(yàn)進(jìn)行檢測(cè)，該方法只能判定是否感染了HPS。分子生物學(xué)檢測(cè)具有高靈敏、速度快、特異性好的優(yōu)點(diǎn)，RT-PCR 還可以確定病毒含量，儀器操作也簡單。病原體檢測(cè)是HPS 最經(jīng)典的檢測(cè)方法，主要通過弱差豬病原分離，進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)再進(jìn)行鑒定，主要生長在含V 因子的平板上，在血平板下不出現(xiàn)溶血環(huán)，一般實(shí)驗(yàn)室使用巧克力瓊脂培養(yǎng)基；豬副嗜血桿菌與金黃色葡萄球菌聯(lián)合培養(yǎng)會(huì)出現(xiàn)衛(wèi)星現(xiàn)象，兩種菌距離越近菌落越大；該方法可以進(jìn)行藥敏實(shí)驗(yàn)，HPS 敏感性藥物有恩諾沙星、環(huán)丙沙星、阿莫西林、卡那霉素、鹽酸多西環(huán)素、氨芐西林、慶大霉素；對(duì)泰樂菌素、磺胺間甲氧嘧啶、氟苯尼考等藥物是中敏[5]；對(duì)林可霉素大觀霉素、泰妙菌素等是低敏。HPS 大多數(shù)分型菌株對(duì)紅霉素、氨基糖苷類和林可霉素等均有抵抗力，非常容易產(chǎn)生耐藥性。

3 恩諾沙星藥物簡介

3.1 恩諾沙星的理化特征

恩諾沙星（Enrofloxacin），又名恩氟奎林羧酸，屬于喹諾酮類藥物，化學(xué)分子式為C19H22FN3O3，分子量為359.40，顏色為淡黃色結(jié)晶粉末、微苦以及有氣味，被光照射到變?yōu)槌燃t色。pH 在1～10之間對(duì)恩諾沙星的水解速度沒有影響，光照下恩諾沙星降解速度極快。Lesher 等[6]在1962年首次發(fā)現(xiàn)，經(jīng)過長時(shí)間的發(fā)展，目前使用的是第四代喹諾酮抗生素。喹諾酮類抗生素不是天然的，是由人工合成的廣譜抗生素。

3.2 恩諾沙星的藥代動(dòng)力學(xué)

恩諾沙星的作用機(jī)制是藥物進(jìn)入細(xì)菌體內(nèi)部后，能夠阻礙DNA 促旋酶（GyrA 和GyrB）和拓?fù)洚悩?gòu)酶Ⅳ（ParC 和ParE）的作用，抑制細(xì)菌DNA 超螺旋結(jié)構(gòu)的解旋及其復(fù)制，從而阻止細(xì)菌生長繁殖最終殺死細(xì)菌。動(dòng)物在飼料中、飲水中或者肌肉注射進(jìn)入機(jī)體后，能夠快速被吸收，在2～5 h 內(nèi)達(dá)到血藥濃度高峰期，最后通過腎臟排出體外。恩諾沙星不能同氯霉素、四環(huán)素、大環(huán)內(nèi)酯類等抗生素聯(lián)用，容易出現(xiàn)拮抗作用。

4 恩諾沙星對(duì)豬副嗜血桿菌病的應(yīng)用

4.1 不同給藥方法、劑量對(duì)HPS 治療分析

恩諾沙星是國家批準(zhǔn)動(dòng)物專用藥物，市面上該藥有片劑、可溶性粉、可溶性溶液、注射液等。片劑、注射液適用于個(gè)體治療，缺點(diǎn)是不適用于規(guī)模化養(yǎng)殖場?？诜髦Z沙星有苦味，豬不愿意食用，對(duì)胃腸道有一定刺激，導(dǎo)致豬嘔吐。新型的恩諾沙星有恩諾沙星包被型劑微囊等。參照《DB13/T 1216—2010 副豬嗜血桿菌病防治技術(shù)規(guī)程》進(jìn)行治療，感染豬嗜血桿菌病的豬按照肌肉注射、飲水加藥、飼料給藥等方式進(jìn)行治療，按照2.5 mg/kg·bw 恩諾沙星進(jìn)行治療，連續(xù)使用3～5 d。治療后第3、5、7 天觀察臨床癥狀、采食量及死亡率，第30 天測(cè)量生長速度情況。

劉新義[7]研究表明，使用恩諾沙星治療60日齡感染HPS 保育豬，治療劑量為5 mg/kg·bw 治療7 d，飼料給藥，豬群表現(xiàn)不喜食，精神差。肌肉注射豬只情況一般，采食量稍微恢復(fù)；肌肉注射應(yīng)激會(huì)大一些，在抱豬等動(dòng)作行為中會(huì)造成機(jī)械性刺激，影響疾病沒有改善。飼料加藥按照規(guī)定劑量添加，豬采食量少，主要是由于藥物到達(dá)機(jī)體內(nèi)不能達(dá)到藥物濃度，治療效果不明顯。治療過程中，一般是聯(lián)合給藥，與土霉素、氟苯尼考以及多西環(huán)素等藥物聯(lián)合用藥，治療效果會(huì)更好。

4.2 HPS 豬生化指標(biāo)的測(cè)定

運(yùn)用《NY/T2417—2013 豬副嗜血桿菌檢測(cè)方法》進(jìn)行檢測(cè)。豬給藥后30 min、1 h、2 h、5 h、12 h 和48 h 時(shí)，采集血液和尿液備用，血液加入肝素，離心分離血漿，-20 ℃保存，運(yùn)用高效液相色譜（HPLC）測(cè)定恩諾沙星在血液中的藥物濃度。也可以采集豬只內(nèi)臟組織進(jìn)行恩諾沙星血藥濃度測(cè)定，使用恩諾沙星檢測(cè)試劑盒，測(cè)定方法和步驟嚴(yán)格遵試劑盒說明書進(jìn)行操作使用。剖檢豬只采集血液、取內(nèi)臟組織進(jìn)行細(xì)菌分離培養(yǎng)，判定細(xì)菌耐藥性。運(yùn)用細(xì)菌耐藥性評(píng)判規(guī)則，微量稀釋法測(cè)定恩諾沙星對(duì)副豬嗜血桿菌的MIC、MBC 和MPC。恩諾沙星藥物的消除半衰期為5.43±1.30 h，與周云波等[8]研究報(bào)道的5.08±1.12 h 相差不大，說明該藥在體內(nèi)消除較緩慢，可以存留很長時(shí)間，可以有效地殺死病原。

5 討論

恩諾沙星治療豬細(xì)菌類疾病非常好，缺點(diǎn)在于豬不愿食用，需要再進(jìn)行恩諾沙星包被，降低苦味。HPS 細(xì)菌病的發(fā)生常常與外界飼養(yǎng)環(huán)境相關(guān)，環(huán)境差、污水排放不掉等都會(huì)加劇該病的暴發(fā)。要改善飼養(yǎng)環(huán)境，加強(qiáng)通風(fēng)，圈舍消毒，溫濕度適宜。突發(fā)疾病用恩諾沙星治療能夠達(dá)到很好的效果，但粉劑相對(duì)較苦，不愿意采食。對(duì)于轉(zhuǎn)群、閹割斷尾豬要進(jìn)行飲水中添加維生素，減少應(yīng)激。環(huán)境中HPS 常在，只有在豬抵抗力低時(shí)才能夠?qū)е仑i發(fā)病。HPS 在環(huán)境中比較容易殺死，保持干凈的環(huán)境。在豬舍選址中，一定要選擇遠(yuǎn)離市區(qū)，容易空氣流通，合適采光的地方，減少疾病的傳播。預(yù)防該疾病還需要控制飼養(yǎng)密度，夏季防暑、冬季防寒，科學(xué)飼養(yǎng)，做好消毒隔離工作，減少疾病傳播。一旦發(fā)現(xiàn)該疾病，需要立馬進(jìn)行治療，同時(shí)減少應(yīng)激，減緩疾病綜合征的出現(xiàn)?！?/p>