顏永群
(貴州省習(xí)水縣動物疫病預(yù)防控制中心,貴州 習(xí)水 564600)
豬傳染性胃腸炎(porcine transmissible gastroenterictis, TGE)是由豬傳染性胃腸炎病毒( porcine transmissible gastroenteritis virus,TGEV)引起的一種急性、高度接觸性腸道疾病,嚴(yán)重危害我國養(yǎng)豬業(yè)健康穩(wěn)定發(fā)展。豬傳染性胃腸炎的主要病原體是TGEV,其是一種冠狀病毒科、冠狀病毒屬的病毒,光學(xué)顯微鏡下不可見,電鏡負(fù)染可見。TGEV 不穩(wěn)定,極端溫度、強(qiáng)光、強(qiáng)紫外線可將其殺滅。6 h 光照即可有效除去TGEV。此外,TGEV 對氯仿、乙醚、甲醛、氫氧化鈉等化學(xué)品敏感,常溫下易被殺滅。TGEV 只有一個血清型,但目前已發(fā)現(xiàn)多個亞種,包括豬呼吸道冠狀病毒。TGEV 可經(jīng)過糞-口途徑傳播,定植于患豬的小腸上皮細(xì)胞,并迅速增殖,導(dǎo)致腸蠕動功能障礙、腸腔滲透壓改變,大量溶質(zhì)進(jìn)入腸腔,阻礙養(yǎng)分吸收,增加糞便體積,導(dǎo)致患豬營養(yǎng)不良、腹脹腹瀉,進(jìn)而脫水死亡。本文通過對傳染性胃腸炎的進(jìn)一步分析,總結(jié)了有效的診療對策,旨在為相關(guān)技術(shù)人員提供參考。
2023年2月,習(xí)水縣某生豬養(yǎng)殖場的仔豬表現(xiàn)為急性嘔吐、腹瀉,癥狀提示可能患傳染性胃腸炎。但養(yǎng)殖人員沒有及時明確診斷,直接采用抗生素治療。在注射抗生素后較短的一段時間內(nèi),仔豬的癥狀稍有好轉(zhuǎn),但由于藥不對癥,胃腸炎很快在豬場中傳開,30 日齡仔豬病死率逐漸升高,高達(dá)80%。
導(dǎo)致豬傳染性胃腸炎的冠狀病毒TGEV 潛伏期不定,少則1 天內(nèi),長則可至3 天。根據(jù)病豬與死豬的發(fā)病癥狀分析,TGEV 的傳染性強(qiáng),數(shù)天內(nèi)即可導(dǎo)致大面積感染。TGEV 主要感染仔豬,尤其是1 周齡以內(nèi)的仔豬,患豬表現(xiàn)為吃奶后突然嘔吐,繼之腹瀉、脫水,嘔吐物中??梢娔閴K,糞稀薄,有腥臭味,氣味惡臭。由于嚴(yán)重高滲性脫水,患豬常口渴。若癥狀沒有及時控制,仔豬會在2~5 d 內(nèi)死亡。傳染性胃腸炎的病死率約50%。另有部分仔豬盡管可治愈,但治愈后生長發(fā)育明顯落后,經(jīng)濟(jì)價值減少。若成年豬、架子豬或后備豬感染TGEV,癥狀較仔豬輕,多表現(xiàn)為厭食、惡心、腹瀉、體重不增或下降,時間一長,也會出現(xiàn)口渴和脫水癥狀。若母豬感染,可導(dǎo)致乳房功能減退、泌乳量減少;若孕豬感染,可導(dǎo)致流產(chǎn)。成年豬傳染性胃腸炎較少致死[1]。
患豬死亡后,大體表現(xiàn)為腹部腫脹、皮膚干燥、眼眶凹陷、唾液分泌減少。尸檢可見,死豬的胃底黏膜充血或彌漫性出血,微小血管淤血或破裂;仔豬胃腔內(nèi)有時可見大量白色凝乳塊。由于患豬腸蠕動功能下降,死豬腸腔常積氣、積液,腸道內(nèi)積存多量內(nèi)容物、含或不含混合膽汁的泡沫或凝乳塊??v向切開死豬空腸,以生理鹽水徹底清洗,并在培養(yǎng)皿中平鋪,在生理鹽水充分浸潤的前提下,借助低倍鏡觀察,可見受病毒感染的腸段絨毛減少、杯狀細(xì)胞分泌明顯增加,這是豬傳染性胃腸炎最顯著的病理改變[2]。
圖1 病死豬剖檢圖
豬傳染性胃腸炎的鑒別診斷較為困難,因為仔豬的臨床表現(xiàn)不典型,且容易與其他傳染性消化道疾病如痢疾、傷寒、輪狀病毒腸炎等混淆。這些消化道疾病均會出現(xiàn)嘔吐、腹瀉、脫水的表現(xiàn)。因此,為降低仔豬死亡率,應(yīng)當(dāng)及時明確診斷病原。
最易受TGEV 感染的仔豬月齡為1~4月齡。其中,以斷奶期尤甚。感染后急性期,仔豬表現(xiàn)為便秘、腹痛、嘔吐、腹脹等,進(jìn)而皮膚黏膜淤血、出血。如果仔豬患慢性副傷寒,通常表現(xiàn)為食欲不振,排黃綠色、灰綠色或白陶土樣血便,伴腥臭味??蓮幕钾i血清樣本中分離出沙門桿菌,即可與傳染性胃腸炎鑒別。輪狀病毒腹瀉的潛伏期多為5~8 天,表現(xiàn)為嘔吐、腹瀉,體溫不升或略升高,食欲不振。但輪狀病毒腹瀉為自限性疾病,且存在明顯的季節(jié)性(夏秋、秋冬換季時多發(fā)),雖無有效對癥治療方式,但少有仔豬病死,除非繼發(fā)感染,死亡率可升至10%以上。
當(dāng)前,用于確診傳染性胃腸炎的金標(biāo)準(zhǔn)仍是病原學(xué)鑒定。臨床常用的檢測方法有ELISA、常規(guī)PCR 和熒光定量PCR。另外可將TGEV 分離培養(yǎng),即提取患豬的部分小腸絨毛上皮細(xì)胞進(jìn)行傳代。初代病毒定植的細(xì)胞多繼發(fā)水腫,呈球形或橢球形;若病毒多次傳代,則細(xì)胞水腫加劇,可膨脹為半透明氣球樣。此外,可借助血清學(xué)檢測的方式,即ELISA(酶聯(lián)免疫吸附試驗)或組化染色。多克隆抗體雙夾心ELISA 也是近年來常用的血清學(xué)TGEV 分離方法[3]。
提取TGE 核酸前,首先將少量小腸絨毛上皮提取并置于EP 管內(nèi),加入滅菌蒸餾水,攪拌,使二者均勻混合。組織液凍融至少3 次后,離心2 000 rpm、10 min,取上清液提取核酸。
離心引物探針序列和RT-PCR 酶反應(yīng)液,進(jìn)而借助移液槍將后者轉(zhuǎn)移到引物探針中,充分混勻,制作RT-PCR 反應(yīng)液。加樣結(jié)束后,將反應(yīng)管離心,并在熒光PCR 儀中接續(xù)如下操作:(1)反轉(zhuǎn)錄:50 ℃,15 min;(2)預(yù)變性:95 ℃,30 s;(3)變性:95 ℃,15 s;(4)延伸:60 ℃,20 s,步驟2~4 共40 個循環(huán);60 min 時間,將FAM 熒光信號記錄整理[4]。
借助核酸檢測,可見待檢RNA 的Ct 值為31.35,符合陽性對照,確定樣品含有TGEV 核酸,表明送檢小腸絨毛上皮細(xì)胞中含有TGEV。
為預(yù)防TGEV 擴(kuò)散,首先應(yīng)當(dāng)做好豬場的管理工作,提供均衡配比、營養(yǎng)充足的飼料,以增強(qiáng)豬的免疫力??刂骑曫B(yǎng)密度,保持豬場通風(fēng)、光照、溫濕度適宜。如遇極端天氣,或者氣溫降低,應(yīng)當(dāng)及時對豬場進(jìn)行保暖。及時消毒,清理豬場內(nèi)的排泄物,并使用2%~3%的強(qiáng)堿溶液消毒水槽和食槽。墊料應(yīng)及時換新,避免發(fā)霉生菌。飼料飼喂前應(yīng)檢查質(zhì)量,如發(fā)現(xiàn)霉變等,需及時更換,避免豬食用后發(fā)生胃腸道感染[5]。
其次,應(yīng)當(dāng)對孕豬、哺乳期母豬和仔豬進(jìn)行保健防護(hù)。泌乳期的母豬可不限制喂養(yǎng)方式,使其自由覓食,以提升產(chǎn)奶量、提高產(chǎn)奶品質(zhì)。新生仔豬必須及早飼喂母乳,且以初乳為佳。飼養(yǎng)員應(yīng)對仔豬進(jìn)行飲食護(hù)理。例如,出生后3 日內(nèi)的仔豬要及時補(bǔ)充微量元素如鐵,并添加飼料輔食。為提升仔豬的腸道功能和免疫能力,可在飼料中添加有機(jī)酸、抗生素和酶制劑。為避免仔豬積食,應(yīng)減少單次攝食量,增加攝食頻率。
最后,應(yīng)當(dāng)及時保護(hù)易感豬,即對未患病的生豬進(jìn)行免疫接種。常選用的疫苗是胃腸炎-豬流行性腹瀉二聯(lián)滅活疫苗。在仔豬斷奶后的7 d內(nèi),應(yīng)當(dāng)注射1 mL 二聯(lián)疫苗。孕豬在預(yù)產(chǎn)期前的20~30 d 內(nèi),應(yīng)注射4 mL 滅活疫苗,以降低仔豬感染率。
豬傳染性胃腸炎需要及時治療,以降低死亡率。治療的原則是“消除炎癥,清潔腸道,去除毒物,防止脫水”。同時,應(yīng)隔離患豬,在一般治療的基礎(chǔ)上選用合適的對因療法[6]。
3.2.1 中醫(yī)治療 用于治療豬傳染性胃腸炎的中藥方劑,含有黃連18 g、大黃50 g、郁金36 g、白芍18 g、梔子18 g、黃芩15 g,煎藥前需加入1 L 水。用量為200 mL/頭,灌服,1 次/d。實踐證明,中藥可有效緩解胃腸炎癥狀,促進(jìn)痊愈[7]。
本方劑的主要功效為清熱解毒,主藥為黃芩,主攻各類炎癥,其余藥物為輔藥。白芍可緩解胃腸痙攣,解除腹痛、消腫去結(jié)、清熱去火。黃連可清熱解毒,主要用于治療嘔吐、腹瀉等癥狀。梔子清熱利濕,郁金活血止痛,大黃促進(jìn)毒素排出。
3.2.2 西醫(yī)治療 使用西醫(yī)藥物治療豬傳染性胃腸炎為常規(guī)方法。首先,應(yīng)當(dāng)進(jìn)行抗菌消炎,使用緩瀉劑、輕瀉劑促進(jìn)腸道內(nèi)毒物排出。待急性期后,可使用環(huán)丙沙星抗菌,按藥物說明使用。如仔豬嘔吐,可肌注維生素B12,連續(xù)2~3 d。如仔豬腹瀉嚴(yán)重,可使用4 g 鞣酸蛋白加6 g 小蘇打,溶于水中灌服。若患豬脫水嚴(yán)重,應(yīng)當(dāng)及時擴(kuò)容,避免休克。具體方法是,使用5%的葡萄糖鹽水40 mL 加1.3%小蘇打溶液20 mL 進(jìn)行腹腔注射,1 次/d,連續(xù)使用2~3 d。其次,應(yīng)當(dāng)重視患豬護(hù)理工作,減少患豬飼料攝入量,以減輕胃腸道負(fù)擔(dān)。若腹瀉嚴(yán)重,可適量使用木炭粉或蒙脫石散口服,以保護(hù)消化道。此外,也可以在患豬的飼料中增加黃連素等,避免繼發(fā)細(xì)菌感染,加重病情[8]。
多種致病因素或病原體可導(dǎo)致豬出現(xiàn)腹瀉癥狀。其中,病毒的癥狀最重、致死率最高,且傳播速度最快,難以有效預(yù)防和治療,因此應(yīng)格外受到關(guān)注。
在上文所述的豬場中,經(jīng)常有患豬發(fā)生嘔吐、腹瀉、脫水等表現(xiàn),且新生仔豬嚴(yán)重腹瀉,乃至脫水死亡的病例頻發(fā),給豬場造成了嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。同時,抗生素治療效果不佳,考慮致病因素為病毒,但在病原學(xué)檢測之前,尚不能明確具體的致病原因。而某些病原體導(dǎo)致的病理改變,在光鏡下具有相似性,故而難以區(qū)分。
在熒光RT-PCT 等核酸檢測技術(shù)的輔助下,組織材料中的TGEV 病毒核酸可以直接被提取,且不受外界環(huán)境、病毒載量等的影響。該技術(shù)具有較高的靈敏度和特異性,能夠迅速確診。在本案例中,經(jīng)過熒光RT-PCR 檢測,成功從患豬的小腸絨毛上皮細(xì)胞中檢出TGEV。
豬傳染性胃腸炎通常發(fā)病于春冬季節(jié),但夏季也會有散在發(fā)病。在既往無TGEV 感染的豬場內(nèi),生豬體內(nèi)無抗體,因此初次感染可呈暴發(fā)性。成年母豬較少患病,但仔豬、育肥豬易感染,且仔豬死亡率接近50%。既往曾有發(fā)病的豬場中,本病多表現(xiàn)為季節(jié)性流行,由于常規(guī)療效差、難以及時鑒別診斷,因此常給豬場造成嚴(yán)重經(jīng)濟(jì)損失。