一起雞白痢的診治報告

桑圣沛，溫 舒，魯 晨，張洪剛，孫繼燕，宇 凌

（1.山東省巨野縣畜牧服務(wù)中心，山東 巨野 274900；2.山東省菏澤市動物疫病預(yù)防控制中心，山東 菏澤）

雞白?。≒ullorum disease）是由雞白痢沙門氏菌引起的傳染性疾病，各種品種的雞均有感染性，其中成年雞常呈隱性經(jīng)過或慢性感染，雛雞在2～3 周齡的易感性較高，具有高發(fā)病率和高死亡率。一直存在本病的雞場中，雛雞的發(fā)病率為20%～30%，但新傳入該病的雞場，發(fā)病率會增高，可達(dá)到100%，病死率也顯著增高[1]。雞白痢沙門氏菌常寄生在腸道內(nèi)，為腸桿菌科沙門氏菌屬，革蘭陰性菌，無莢膜、鞭毛，無法運(yùn)動，兩端鈍圓呈直桿狀[2]。該菌對熱的抵抗力較弱，在高溫下通常幾分鐘就會死亡，但對干燥、腐敗、日光、低溫等因素抵抗力很強(qiáng)，在禽舍中存活可超過一年，在干燥的土壤中可以存活4 個月，對高錳酸鉀、福爾馬林等化學(xué)消毒劑的抵抗力不強(qiáng)，一般常用消毒劑和消毒方法均能達(dá)到消毒目的。

最急性的病雞無明顯癥狀突然死亡，癥狀稍緩者，病雞精神沉郁、絨毛蓬亂、縮頸閉眼，呈昏睡狀，集堆，不愿走動，食欲減退廢食、大多數(shù)出現(xiàn)軟嗉。排灰白色糊狀糞便，黏附于肛門周圍的羽毛上，肛門被糞便堵塞而造成排糞困難，病雞出現(xiàn)怒責(zé)，發(fā)出“咯咯”叫聲和呻吟聲，最后因呼吸困難、心力衰竭而死亡。有的病雞還患有關(guān)節(jié)腫脹，呈現(xiàn)坡行或伏地不動等癥狀[3]。成年雞多數(shù)呈隱性經(jīng)過或慢性，多數(shù)無明顯的癥狀，但產(chǎn)蛋量、孵化率、受精率明顯下降，孵化出的雛雞也大多為患病雞。有的成年雞也會表現(xiàn)出發(fā)育不良，精神萎頓，腹瀉，因患卵黃性腹膜炎而呈“垂腹”的現(xiàn)象。

雞白痢可垂直傳播，也可經(jīng)種蛋傳播?；茧u白痢的病雞產(chǎn)的種蛋多數(shù)為帶菌蛋，通常在孵化后期種蛋死亡，孵化成功出生的雛雞也易在7 d之內(nèi)患病，一般死亡率很高。該病也可水平傳播，病雞同舍群中的雞容易被感染，主要通過糞口傳播，被污染的水和飼料通過呼吸道、消化道、眼結(jié)膜進(jìn)入體內(nèi)造成健康雞的感染。

世界衛(wèi)生組織將雞白痢列為B 類傳染病，也是我國農(nóng)業(yè)部重點(diǎn)監(jiān)測疾病之一，雞白痢是嚴(yán)重危害養(yǎng)殖業(yè)的一種細(xì)菌性疾病，高發(fā)病率和高死亡率，給雞場造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。為了更好地預(yù)防和控制這種疾病，甚至最終凈化這種疾病，對沙門氏菌進(jìn)行全面研究有著重要的意義。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 病雞 山東某雞場臨診癥狀疑似雞白痢的30 只兩周齡肉雞。

1.1.2 試驗試劑 革蘭染色液（生產(chǎn)日期：2021年10月23 號，購于廣州市西塔生物科技有限公司）；阿莫西林（10 μg/片）、諾氟沙星（10 μg/片）、慶大霉素（10 μg/片）、四環(huán)素（30 μg/片）、頭孢唑啉（30 μg/片）、紅霉素（15 μg/片）、復(fù)達(dá)欣（30 μg/片）、阿米卡星（30 μg/片）、頭孢拉定（30 μg/片）、頭孢哌酮（75 μg/片）、氟苯尼考（30 μg/片）、卡那霉素（30 μg/片）等12 種藥敏片（生產(chǎn)日期：2021年9月7 號，購于杭州天和微生物試劑有限公司）。

麥芽糖、阿拉伯糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇、七葉苷、水楊素、肌醇、尿素、硫化氫、蕈糖等12 種生化鑒定管（生產(chǎn)日期：2021年10月13 號，購于青島海博生物技術(shù)有限公司）；麥康凱瓊脂培養(yǎng)基、普通肉湯、三糖鐵培養(yǎng)基、半固體瓊脂培養(yǎng)基（生產(chǎn)日期：2021年12月20 號，均購于青島捷世康生物科技有限公司）。

1.1.3 試驗儀器 恒溫培養(yǎng)箱（型號：YMJ-250F，購于蘇州景通儀器有限公司）；超凈工作臺（型號：SW-CJ-2F，購于蘇州景通儀器有限公司）。

1.1.4 試驗動物 15 只10 日齡健康雛雞。

1.2 方法

1.2.1 細(xì)菌分離純化試驗 在無菌的情況下，取雞肝臟的病料組織劃線接種于麥康凱培養(yǎng)基，在37 ℃ 的條件下培養(yǎng)24 h。將麥康凱培養(yǎng)基上的革蘭陰性菌特征性菌落，接種于三糖鐵斜面培養(yǎng)基上，在37 ℃ 的條件下恒溫培養(yǎng)24 h 后觀察。

1.2.2 革蘭染色試驗 從三糖鐵斜面培養(yǎng)基上挑選白色透明、菌落邊緣光滑、濕潤的特征性菌落進(jìn)行革蘭染色試驗。在無菌的載玻片上，滴加1～2 滴生理鹽水，用接種環(huán)挑取特征性色菌落均勻地涂片并干燥固定；結(jié)晶紫染色2 min 后水洗；碘液染色1 min，水洗；95%的酒精進(jìn)行脫色15～30 s，水洗；復(fù)染液染色2 min 水洗；用吸水紙將多余的水分吸走，在顯微鏡下進(jìn)行觀察。

1.2.3 生化試驗 對純培養(yǎng)得到的疑似雞白痢沙門氏菌分離株分別接種于麥芽糖、阿拉伯糖、葡萄糖、蔗糖、乳糖、甘露醇等進(jìn)行生化試驗指標(biāo)的測定。

1.2.4 毒力檢測試驗 將分離的細(xì)菌置于肉湯中，取0.5 mL 細(xì)菌培養(yǎng)液注射到健康的雛雞腹腔中，取10 只雛雞進(jìn)行試驗。另外取5 只雛雞在腹腔中注射肉湯，進(jìn)行對照試驗，并每天觀察和記錄它們的生理狀況，如果有死亡的雛雞，從其體內(nèi)分離細(xì)菌進(jìn)行培養(yǎng)及革蘭染色試驗。

1.2.5 藥敏試驗 將雞白痢沙門氏菌接種到普通的培養(yǎng)基上，將菌種均勻地涂開，取藥敏片有規(guī)律固定間距地貼到平皿培養(yǎng)基上。將平皿培養(yǎng)基置于37 ℃ 溫箱中培養(yǎng)24 h 后，觀察結(jié)果。

1.2.6 治療方案 使用藥敏試驗測得雞白痢沙門氏菌對諾氟沙星、氟苯尼考敏感性高，對雞場150 只患有雞白痢的病雞進(jìn)行治療。將諾氟沙星、氟苯尼考與飼料混合，諾氟沙星比例為0.1%～0.2%，氟苯尼考比例為0.1%，連用5～6 d。

2 結(jié)果與分析

2.1 細(xì)菌分離純化試驗

麥康凱培養(yǎng)基長出白色透明，菌落邊緣光滑、濕潤的菌落與培養(yǎng)沙門氏菌的特性一致（圖1）。再將分離純化的細(xì)菌接種于三糖鐵培養(yǎng)基，培養(yǎng)基斜面為紅色，底面為黃色，與雞白痢沙門氏菌的特征一致。

圖1 麥康凱培養(yǎng)基培養(yǎng)的雞白痢沙門氏菌落

2.2 革蘭染色試驗

革蘭染色觀察到細(xì)菌為兩端頓圓，呈桿狀，革蘭染色為紅色，多數(shù)單個分布（圖2），與雞白痢沙門氏菌的特征一致。

圖2 革蘭染色雞白痢沙門氏菌鏡檢圖（1000×）

2.3 生化試驗

分離菌的生化測定結(jié)果顯示，分離菌對麥芽糖、阿拉伯糖、乳糖、甘露醇、葡萄糖呈陽性，肌醇、硫化氫、尿素、七葉苷、蕈糖、水楊素、蔗糖呈陰性（表1）。將生化試驗結(jié)果比對伯杰細(xì)菌鑒定手冊，確定分離菌為雞白痢沙門氏菌。

表1 疑似雞白痢沙門氏菌分離株生化反應(yīng)結(jié)果

2.4 毒力檢測試驗

接種細(xì)菌的雛雞在3 d 之內(nèi)死亡8 只，雛雞精神沉郁，食欲減退，絨毛松亂，排白色糞便，肛門周圍羽毛粘有糞便，發(fā)出尖叫聲，陸續(xù)死亡，而接種肉湯的雛雞正常生活，各種生命活動指標(biāo)正常（表2）。將死亡的雛雞進(jìn)行解剖，發(fā)現(xiàn)肝臟淤血壞死，培養(yǎng)與鏡檢結(jié)果顯示為雞白痢沙門氏菌，病菌具有致病性。

表2 毒力試驗結(jié)果

2.5 藥敏試驗

藥敏試驗結(jié)果顯示，分離菌對阿莫西林、諾氟沙星、氟苯尼考、慶大霉素、四環(huán)素、頭孢唑啉、頭孢哌酮、復(fù)達(dá)欣敏感，其中諾氟沙星、氟苯尼考敏感性更高，可推薦用于臨床治療；對紅霉素、頭孢拉定為中介；對阿米卡星耐藥（表3）。

表3 藥敏試驗結(jié)果

2.6 治療效果

對150 只病雞進(jìn)行治療，病雞使用諾氟沙星混合飼料50 ppm、氟苯尼考口服0.1～0.15 g，2次/d，3 d 后病情得到了基本的控制，精神好轉(zhuǎn)，其中病情較輕的72 只雞恢復(fù)健康狀態(tài)，繼續(xù)使用3 d 基本痊愈。治療后大約138 只病雞恢復(fù)健康狀態(tài)，治療率為92%，12 只死亡，死亡率為8%（表4）。

表4 治療結(jié)果

3 討論

藥敏試驗結(jié)果顯示，分離菌對阿莫西林、慶大霉素、諾氟沙星、氟苯尼考、四環(huán)素、頭孢哌酮、頭孢唑啉、卡那霉素、復(fù)達(dá)欣敏感，其中諾氟沙星、氟苯尼考敏感性更高；對紅霉素、頭孢拉定為中介；對阿米卡星耐藥。對于患雞白痢的病雞，大多數(shù)雞場采用抗生素藥物進(jìn)行治療，但要注意劑量，避免產(chǎn)生耐藥性，注意交替、穿梭用藥，在治療時應(yīng)選擇平時不用或少用的藥，并結(jié)合藥敏試驗進(jìn)行選擇，以達(dá)較好的治療效果。同時也要注意治療過程中的用藥禁忌，不恰當(dāng)?shù)挠盟帟沟半u產(chǎn)生嚴(yán)重的副作用，給養(yǎng)殖場戶造成嚴(yán)重的經(jīng)濟(jì)損失。我國農(nóng)業(yè)部在多個文件列出獸藥禁用藥40 多種，諾氟沙星、氟苯尼考不在禁用藥范圍之內(nèi)。通過使用諾氟沙星、氟苯尼考進(jìn)行治療，使92%的病雞恢復(fù)健康狀態(tài)，8%的病雞死亡。諾氟沙星、氟苯尼考不可在蛋雞產(chǎn)蛋期內(nèi)使用，在產(chǎn)蛋雞期間，盡量少用或不用藥物預(yù)防，過量使用藥物或不恰當(dāng)?shù)氖褂脮巩a(chǎn)蛋雞的產(chǎn)量下降，也不能保證養(yǎng)殖的安全性。本研究的藥敏實驗與李靜怡[4]藥敏試驗結(jié)果有很大的差異，藥敏試驗結(jié)果顯示頭孢他啶、氯霉素、頭孢吡肟、慶大霉素、多黏菌素B、卡那霉素和阿米卡星等藥物敏感，氨芐西林、復(fù)方新諾明、四環(huán)素、甲氧芐啶、青霉素耐藥。與張志文[5]的藥敏試驗有一定的差異，分離菌對青霉素等藥物高度耐藥，對阿米卡星、苯唑青霉素耐藥，對復(fù)達(dá)欣特別敏感。致病菌的耐藥程度可能與養(yǎng)殖場的用藥習(xí)慣、養(yǎng)殖場的飼養(yǎng)環(huán)境密切相關(guān)。孫書靜[6]使用呋喃酮（痢特靈），在病雛飼料中按0.01%～0.04%添加或是在飲水中按0.01%～0.02%添加，連續(xù)飲7 d，治愈率為90%。唐彬[7]用鏈霉素治療，放入飲用水中，混水比例為0.1%～0.2%，連續(xù)用藥3～4 d，94%的病雞可恢復(fù)到健康狀態(tài)。周武全[8]治療雞白痢采用中草藥進(jìn)行治療，可將白頭翁、白術(shù)、茯苓等研磨成粉末狀，拌于飼料中，服用數(shù)天，可獲得較好的治療效果。楊定坤[9]用蔥、大蒜治療雞白痢也具有較好的治療效果，將去皮的洋蔥或大蒜碾碎拌于飼料中，抗生素混合使用效果會更好，可使95%的病雞獲得痊愈。

雞白痢沙門氏菌病的預(yù)防是關(guān)鍵一步。嚴(yán)格挑選健康無疾病的種蛋、種雞。堅持自繁自養(yǎng)，不從有疫情的地區(qū)引進(jìn)種雞、種蛋。養(yǎng)殖人員要對種雞定期進(jìn)行春秋兩季的血清凝集試驗，進(jìn)行全面檢疫或不定期接種。加強(qiáng)飼養(yǎng)管理，保持合理的禽舍溫度，做好防寒保暖措施，溫度不要過低，低溫可導(dǎo)致雞白痢的發(fā)病率升高。經(jīng)常通風(fēng)，保持空氣流通，保證禽舍處于干燥的狀態(tài)[10]。墊草應(yīng)該勤曬和勤換。飼養(yǎng)密度要合理，避免禽舍過度擁擠。要經(jīng)常對禽舍進(jìn)行消毒，特別是雛雞的保育室，對種蛋的孵化器進(jìn)行消毒，對飼養(yǎng)槽和凈水器定期消毒并每天進(jìn)行清洗，以免糞便污染飼料與飲水。時刻關(guān)注雛雞的生活狀態(tài)，一旦發(fā)現(xiàn)排白色糞便，病雞糊肛等癥狀應(yīng)立即進(jìn)行合理治療[11]。保證雞的營養(yǎng)均衡，提高雞體免疫力，可以添加抗生素的飼料添加劑，不僅有預(yù)防作用，還可促進(jìn)動物生長，但要注意地區(qū)抗菌株的出現(xiàn)。

4 結(jié)論

進(jìn)行細(xì)菌分離純化培養(yǎng)、革蘭染色試驗、生化試驗確診病雞感染雞白痢沙門氏菌，毒力試驗結(jié)果反應(yīng)雞白痢沙門氏菌具有致病性，通過藥敏試驗發(fā)現(xiàn)雞白痢沙門氏菌對諾氟沙星、氟苯尼考高敏。使用諾氟沙星、氟苯尼考進(jìn)行治療，獲得良好的效果，治愈率為92%，死亡率為8%。