槲皮素防治急性肝損傷作用機(jī)制的研究進(jìn)展

張冬梅，楊強(qiáng)，劉敏

1.重慶市大足區(qū)人民醫(yī)院 急診科，重慶 402360

2.重慶市大足區(qū)人民醫(yī)院 感染科，重慶 402360

3.重慶市大足區(qū)人民醫(yī)院 口腔科，重慶 402360

急性肝損傷是一種嚴(yán)重的疾病，其發(fā)病機(jī)制和影響因素多種多樣，治療方法也不斷更新和完善[1]。急性肝損傷的發(fā)病機(jī)制非常復(fù)雜，包括直接肝毒性、免疫性、代謝性、病毒感染等多種因素，其中直接肝毒性因素包括藥物、酒精、化療藥物等對肝細(xì)胞的直接損傷，免疫性因素包括自身免疫性肝炎、藥物過敏等，代謝性因素包括肝臟疾病、肝衰竭等，病毒感染因素包括乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒[2]。藥物治療是目前急性肝損傷的主要治療方法，可以采用肝保護(hù)劑、免疫抑制劑等藥物[3]。隨著中醫(yī)藥在急性肝損傷研究的深入，中藥獲取方便、安全性高、多途徑、多靶點等優(yōu)勢逐漸受到廣大研究者的關(guān)注[4]。槲皮素是從多種中藥、食物中提取的黃酮醇類化合物，具有抗炎、抗病毒、抗菌、降血壓、調(diào)血糖、保護(hù)心血管、抗氧化、抗凋亡等多種生物活性，對多種器官損傷具有保護(hù)作用[5]。槲皮素及其衍生物在藥物性肝損傷、免疫性肝損傷、酒精性肝損傷、病毒性肝炎、病理學(xué)肝損傷、化學(xué)性肝損傷、代謝相關(guān)脂肪性肝炎具有多途徑、多靶點的肝保護(hù)作用，包括Tol 樣受體（TLR）、核因子κB（NFκB）/STAT、血紅素加氧酶-1（HO-1）、絲裂原活化蛋白激酶（MAPK）、細(xì)胞外信號調(diào)節(jié)激酶（ERK）等多種信號通路[6]。槲皮素可通過抗炎、抗氧化應(yīng)激反應(yīng)、抗肝纖維化、抗細(xì)胞凋亡、增強(qiáng)細(xì)胞自噬、抑制Na+牛磺膽鹽共轉(zhuǎn)運(yùn)體（NTCP）的表達(dá)降低膽汁酸重吸收、調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)代謝，多途徑減輕肝損傷，發(fā)揮肝保護(hù)作用。本文總結(jié)了槲皮素防治急性肝損傷的作用機(jī)制，為急性肝損傷治療提供參考。

1 抗炎

1.1 抑制TLR4/NF-κB 相關(guān)信號通路

TLR 是慢性肝病炎癥反應(yīng)的中樞介質(zhì)，炎癥與纖維化之間的關(guān)鍵因子，TLR2、TLR4 信號能激活MAPK/NF-κB 信號通路，加劇肝細(xì)胞的炎性損傷[7]。MAPK 信號通路是細(xì)胞內(nèi)源性級聯(lián)反應(yīng)，參與多種細(xì)胞因子的表達(dá)，與肝損傷的炎癥反應(yīng)密切相關(guān)[8]。TLR-4/NF-κB 信號通路是主要的炎癥信號通路，TLR4 可通過激活關(guān)鍵MyD88 蛋白，進(jìn)而激活NFκB 的信號傳導(dǎo)，促進(jìn)多種促炎因子的分泌，參與急性肝損傷的炎性損傷[9]。Sanjay 等[10]研究證實，槲皮素能顯著降低異煙肼和利福平誘導(dǎo)的大鼠肝損傷，抑制丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）、天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶（AST）、堿性磷酸酶（ALP）和膽紅素升高，減輕肝細(xì)胞中的炎癥反應(yīng)和肝細(xì)胞壞死，降低γ-干擾素（IFN-γ）、高遷移率族蛋白B1（HMGB-1）的水平，表明槲皮素能通過阻斷TLR4/NF-κB 信號通路減輕肝細(xì)胞的炎性損傷。Ma 等[11]將槲皮素用于四氯化碳誘導(dǎo)的肝損傷小鼠的實驗發(fā)現(xiàn)，50 mg/kg 槲皮素能降低小鼠血清中AST、ALT 的水平，減輕肝細(xì)胞壞死和炎癥細(xì)胞浸潤，降低活性氧（ROS）、硫代巴比妥酸反應(yīng)物（TBARS）、細(xì)胞色素 P4502E1（CYP2E1）的水平，強(qiáng)烈抑制肝臟中NF-κB、核因子κB 抑制因子α（IκBα）的活性，降低TLR2、TLR4的水平，阻滯小鼠肝臟組織中p38、JNK1/2、ERK1/2的磷酸化，抑制環(huán)氧化酶-2（COX-2）、白細(xì)胞介素（IL）-1β、誘導(dǎo)型一氧化氮合酶（iNOS）的上調(diào)，結(jié)果表明，槲皮素能通過抑制TLR/MAPK/NF-κB 信號通路的活化減輕肝臟的炎癥反應(yīng)。Wei 等[12]通過雷公藤內(nèi)脂誘導(dǎo)的肝損傷小鼠模型顯示，20、50、80 mg/kg 槲皮素能降低AST、ALT 的水平，減輕肝細(xì)胞壞死和炎性細(xì)胞浸潤，減輕丙二醛（MDA）的水平和升高超氧化物歧化酶（SOD）、谷胱甘肽（GSH）的水平，抑制肝細(xì)胞中IL-6、IL-17、TLR4、MyD88、NF-κB 蛋白和基因的表達(dá)，增強(qiáng)IL-10 蛋白和基因的表達(dá)，證明槲皮素能通過抑制TLR4/MyD88/NF-κB 的激活減輕肝臟炎癥反應(yīng)有關(guān)。

1.2 抑制NF-κB 相關(guān)信號通路

IKK/NF-κB 復(fù)合物存在于所有細(xì)胞內(nèi)，該復(fù)合物崩解可導(dǎo)致大量NF-κB 的釋放和激活，促使多種炎癥因子的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，加重肝細(xì)胞損傷[13]。Peng等[14]運(yùn)用槲皮素治療脂多糖/D-半乳糖胺誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠，結(jié)果顯示，25、50、100 mg/kg 槲皮素能顯著減輕肝組織空泡化和肝結(jié)構(gòu)改變，有效降低ALT、AST、三酰甘油（TG）、MDA、ROS 的水平，提高GSH、SOD、過氧化氫酶（CAT）的水平，有效降低IL-1β、IL-6、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）的表達(dá)，明顯抑制p65、IκB、IKK等基因的表達(dá)，阻斷p65 蛋白由細(xì)胞質(zhì)向細(xì)胞核轉(zhuǎn)移，有效抑制ERK、p38MARK、JNK 蛋白的活化，以濃度相關(guān)性抑制Bax、半胱天冬酶3、8、9 的表達(dá)，顯著抑制肝細(xì)胞凋亡，證實槲皮素可通過抑制IKK/NF-κB 信號通路減輕肝組織的炎性損傷。Liu 等[15]通過酒精誘導(dǎo)建立急性肝損傷大鼠模型，使用100 mg/kg 槲皮素治療后，能顯著抑制IL-18、IL-1、TNF-α 的表達(dá)，促進(jìn)IL-10、HO-1 的分泌，進(jìn)一步阻止NF-κB p65 的活化，結(jié)果表明，槲皮素可通過上調(diào)HO-1 的水平抑制NF-κB p65 活化發(fā)揮抗炎活性。Alqahtani等[16]通過對乙酰氨基酚建立急性肝損傷大鼠模型，結(jié)果顯示，50 mg/kg 槲皮素能顯著降低肝組織中TNF-α、NF-κB、iNOS 蛋白的表達(dá)，有效減少大鼠血清和肝組織中ALT、AST 的水平，且發(fā)現(xiàn)ALT 與NF-κB、iNOS 表達(dá)呈正相關(guān)，結(jié)果證實槲皮素能通過下調(diào)TNF-α/NF-κB/iNOS 軸的表達(dá)顯著減輕肝臟細(xì)胞的炎癥損傷。

1.3 促進(jìn)吞噬細(xì)胞M2 表型極化

脂多糖/D-半乳糖胺作為細(xì)胞內(nèi)毒素能促使肝細(xì)胞發(fā)生炎癥反應(yīng)，促使吞噬細(xì)胞活化，并向M1表型極化，釋放IL-1、IL-6、TNF-α 等多種炎癥因子的表達(dá)，加重肝細(xì)胞炎癥損傷[17]。Wei 等[18]使用半乳糖基化殼聚糖修飾的負(fù)載脂質(zhì)體槲皮素治療急性肝損傷大鼠的實驗發(fā)現(xiàn)，半乳糖基化殼聚糖修飾的負(fù)載脂質(zhì)體槲皮素能提高生物利用度，促使活化的巨噬細(xì)胞M2 極化，促進(jìn)CD206、CD163，Arg-1 等抗炎相關(guān)蛋白的分泌，降低巨噬細(xì)胞的破壞功能，降低ALT、AST、ALP、MDA、乳酸脫氫酶（LDH）的水平，結(jié)果證實60 mg/kg 槲皮素可通過促進(jìn)吞噬細(xì)胞M2 表型極化減輕炎癥反應(yīng)。Liu 等[19]使用槲皮素納米脂質(zhì)體治療四氯化碳建立的急性肝損傷大鼠，結(jié)果顯示，50 mg/kg 槲皮素能經(jīng)納米脂質(zhì)體處理后顯著提高藥物濃度，顯著降低肝臟指數(shù)、ALT、AST、直接膽紅素（DBil）的水平，有效減輕肝索動脈、膠原纖維增生等病理學(xué)改變，結(jié)果表明槲皮素納米脂質(zhì)體能顯著提高生物利用度，顯著減輕肝細(xì)胞炎癥浸潤。Ashkani-Esfahani 等[20]將槲皮素用于治療硫代乙酰胺誘導(dǎo)的急性肝損傷大鼠的實驗發(fā)現(xiàn)，300 mg/kg 槲皮素能顯著降低ALT、AST、總膽紅素（TBil）、ALP 的水平，顯著降低肝損傷程度和門脈炎癥評分，減輕局灶性凋亡和壞死，提示槲皮素具有抗炎活性。

1.4 調(diào)節(jié)Th17/Treg 平衡

Th17/Treg 參與肝臟損傷的發(fā)生、發(fā)展，前者可分泌IL-17，介導(dǎo)多種炎癥因子的分泌，后者可促進(jìn)IL-10 的分泌，Th17/Treg 失衡可誘導(dǎo)TLR4 的分泌，加重肝損傷程度[21]。魏彩冰等[22]使用槲皮素治療雷公藤甲素誘導(dǎo)的肝損傷小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，20、80 mg/kg 槲皮素能顯著降低肝細(xì)胞變性、壞死、肝索結(jié)構(gòu)紊亂，降低血清AST、ALT、MDA 的水平，增加SOD、GSH 的水平，提高IL-10 的表達(dá)，降低IL-6、IL-17 和肝臟TLR4 蛋白的表達(dá)，可見槲皮素可通過調(diào)節(jié)Th17/Treg 平衡減輕肝損傷的炎癥反應(yīng)，發(fā)揮肝臟保護(hù)作用。

2 抗氧化應(yīng)激反應(yīng)

2.1 調(diào)節(jié)多種氧化酶活性

當(dāng)自由基的產(chǎn)生超過抗氧化防御系統(tǒng)清除自由基的能力時，生物體內(nèi)就會發(fā)生脂質(zhì)過氧化反應(yīng)，進(jìn)而造成肝臟組織細(xì)胞的損傷，引起肝功能標(biāo)志物的水平異常[23]。谷胱甘肽S-轉(zhuǎn)移酶（GST）、GSH、谷胱甘肽過氧化物酶（GPx）是與谷胱甘肽相關(guān)的抗氧化酶，能促進(jìn)過氧化氫分解，減輕氧化自由基的水平，CAT、CuZn-SOD 可通過催化過氧化氫生成分子氧和水來保護(hù)細(xì)胞免受過氧化氫的損傷[24]。Wang 等[25]通過雷公藤多苷誘導(dǎo)建立肝損傷小鼠，ig 10、20、40 mg/kg 槲皮素，結(jié)果顯示，槲皮素能顯著降低ALT、AST、ALP、γ-谷氨酰轉(zhuǎn)肽酶（γ-GT）的水平，降低CAT、CuZn-SOD、GST、GSH、GPx 的活性和基因的分泌，證實槲皮素可通過降低氧化應(yīng)激反應(yīng)降低急性肝損傷。1 項將槲皮素用于多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的肝損傷大鼠的實驗發(fā)現(xiàn)，50 mg/kg 槲皮素能降低AST、ALT、ALP、GPx、CAT的水平，提高TBARS、SOD 的水平，顯著減輕肝細(xì)胞索排列紊亂和壞死，結(jié)果表明槲皮素可通過減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng)減輕肝損傷[26]。楊曉敏等[27]研究證實，100 mg/kg 槲皮素對四氯化碳誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠具有更高的肝保護(hù)作用，其作用機(jī)制與槲皮素包括羥基未成苷、多羥基結(jié)構(gòu)特點有關(guān)，具有更高抗氧化活性。1 項槲皮素用于治療乙醇誘導(dǎo)的急性肝損傷大鼠的實驗發(fā)現(xiàn)，10、20、50 mg/kg 槲皮素能有效降低大鼠血清中IL-1β、IL-6、IL-8、TNFα、TG、γ-GT、乙醇脫氫酶（ADH）的水平，提高肝臟GSH 的水平和降低MDA、NO 的水平，結(jié)果表明，槲皮素通過抗氧化反應(yīng)減輕肝損傷程度[28]。Zhang 等[29]證實150、300、450 mg/kg 槲皮素能顯著降低左旋肉堿建立的肝損傷小鼠血清ALT、AST水平，降低肝細(xì)胞中TG、總膽固醇（TC）、MDA 水平，顯著提高抑制羥自由基能力、GSH-Px、SOD 的水平，證實槲皮素通過抗氧化應(yīng)激反應(yīng)以減輕肝細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。

2.2 激活Nrf2/ARE 信號通路

Nrf2 是ARE 調(diào)控基因的關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子，當(dāng)細(xì)胞暴露于與氧化應(yīng)激相關(guān)的因子時，Nrf2 從Nrf2/ARE 復(fù)合物中釋放，并從細(xì)胞質(zhì)轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中，與ARE 結(jié)合以促進(jìn)靶基因HO-1 的轉(zhuǎn)錄，Nrf2/ARE途徑在防止急性肝損傷發(fā)展的防御系統(tǒng)起著關(guān)鍵作用[30]。

1 項槲皮素用于乙醇處理的人源性肝細(xì)胞系的體外實驗發(fā)現(xiàn)，10、20 μmol/L 槲皮素能顯著提高肝細(xì)胞的活力，抑制乙醇誘導(dǎo)的AST、ALT 釋放，顯著降低ROS、MDA 的生成，提高Nrf2、ARE、HO-1、谷氨酸半胱氨酸連接酶催化亞基（GCLC）、NQO-2 的表達(dá)，結(jié)果證實，槲皮素能通過激活Nrf2/ARE信號通路發(fā)揮抗氧化應(yīng)激作用[31]。魏彩冰等[32]使用槲皮素治療雷公藤甲素建立的急性肝損傷小鼠，結(jié)果顯示，20、50、80 mg/kg 槲皮素能呈劑量相關(guān)性降低血清AST、ALT 的水平和肝細(xì)胞壞死、炎癥浸潤、壞死等病理改變，提高GSH、SOD 的水平，提高肝細(xì)胞Nrf2、HO-1、GCLC、NQO1基因的水平，結(jié)果顯示，槲皮素能激活Nrf2/ARE 信號通路減輕脂質(zhì)過氧化反應(yīng)。張紅娜等[33]通過對乙酰氨基酚建立的肝損傷小鼠模型，結(jié)果顯示，50、100 mg/kg 槲皮素能降低小鼠的死亡率，降低肝臟腫大、變性、壞死等病理性損傷，降低小鼠血清AST、ALT 的水平，降低GSH、SOD、IL-1β、TNF-α 的水平，顯著降低肝臟Nrf2、NF-κB p65 蛋白的水平，結(jié)果表明，槲皮素能通過降低Nrf2 信號通路激活減輕肝損傷。

?omakll? 等[34]使用長春新堿建立肝損傷大鼠模型，結(jié)果顯示，50 mg/kg 槲皮素能降低大鼠血清AST、ALT、ALP 的水平，降低MDA 的表達(dá)，提高GPx、CAT、SOD、GSH 的活性，激活Nrf2/HO-1 信號通路，降低大鼠肝細(xì)胞中NF-κB/STAT3 和沉默信息調(diào)節(jié)因子1（SIRT1）/過氧化物酶體增殖物激活受體γ 輔激活因子-1α（PGC-1α）的活性，抑制半胱天冬酶3、Bax基因的表達(dá)，減輕肝細(xì)胞中壞死、水腫變性的病理改變和膠原纖維沉積，提示槲皮素能通過激活Nrf2/HO-1 信號通路發(fā)揮抗氧化應(yīng)激活性。Zhang 等[35]將槲皮素治療四氯化碳誘導(dǎo)急性肝損傷小鼠，實驗中發(fā)現(xiàn)20、80 mg/kg 槲皮素能顯著降低ALT、AST 的水平，降低肝臟中MDA、脂質(zhì)過氧化物（LPO）的水平，升高GSH、4-羥基壬烯酸的水平，提高肝細(xì)胞Prx-1、Prx-2、Prx-5、Prx-6、TrxR2基因的表達(dá)，增加肝臟Nrf2、HO-1基因的表達(dá)，結(jié)果證實槲皮素能通過激活Nrf2/HO-1信號通路促進(jìn)多種抗氧化酶的表達(dá)以減輕氧化應(yīng)激反應(yīng)。呂云龍等[36]使用槲皮素治療四氯化碳誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠發(fā)現(xiàn)，100 mg/kg 槲皮素能減輕肝細(xì)胞炎性浸潤、水腫、結(jié)構(gòu)紊亂等病理改變，降低血清中ALT、TNF-α 的水平，提高肝勻漿GSH、異染色蛋白1（HP-1）蛋白和基因的水平，表明槲皮素能通過提高HO-1 表達(dá)減輕肝細(xì)胞氧化應(yīng)激損傷。Ji 等[37]通過吡咯里西啶生物堿建立肝損傷小鼠模型，結(jié)果顯示，60、90 mg/kg 槲皮素能顯著降低ALT、AST 的水平和減輕肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)破壞，降低半胱天冬酶3 的水平以減輕肝細(xì)胞凋亡，降低肝臟LPO、MDA 的水平，提高GSH 的表達(dá)，誘導(dǎo)的Fmo5、Po2k、Sod2、Ephx2、sod1、Hmox2 和Hmox1的表達(dá)，結(jié)果提示槲皮素可通過減輕氧化應(yīng)激損傷以降低急性肝損傷。

3 抗肝纖維化

3.1 抑制Rac1/NOX1 的過表達(dá)

RNOX1 是由多種蛋白質(zhì)組成的復(fù)合體，在各種刺激下產(chǎn)生ROS，在肝星狀細(xì)胞活性和肝纖維化中的關(guān)鍵作用，Rac1 的過表達(dá)能促使NOX1 產(chǎn)生過多的ROS，增加肝星狀細(xì)胞的活性，最終導(dǎo)致肝纖維化的加重[38]。Kabirifar 等[39]使用槲皮素治療膽管結(jié)扎建立的肝損傷大鼠的實驗發(fā)現(xiàn)，30 mg/kg 槲皮素能降低ALP、ALT、AST 等肝損傷標(biāo)志物及羥脯氨酸的水平，阻止肝細(xì)胞α 平滑肌肌動蛋白（α-SMA）、I 型膠原蛋白、人轉(zhuǎn)化生長因子1（TGF-1）基因的表達(dá)，降低Rac1、Rac1-gtp、NOX1 的蛋白表達(dá)，結(jié)果表明，槲皮素能通過抑制Rac1/NOX1 的過表達(dá)以減輕肝組織纖維化進(jìn)程。

3.2 下調(diào)TGF-β1/Smad 的活性

人轉(zhuǎn)化生長因子-β1（TGF-β1）是關(guān)鍵的纖維化介質(zhì)，能促進(jìn)星狀細(xì)胞纖維化基因表達(dá)，增強(qiáng)細(xì)胞外基質(zhì)沉積和膠原酶活性，激活Smad2/3 下游信號分子，促進(jìn)結(jié)締組織生長因子（CTGF）的表達(dá)，加快肝細(xì)胞纖維化進(jìn)程[40]。Lin 等[41]通過膽總管結(jié)扎建立膽汁淤積性肝損傷大鼠模型，使用20 mg/kg 槲皮素能顯著降低肝實質(zhì)形態(tài)改變，降低AST、ALP、TG、TG、IL-1β、單核細(xì)胞趨化蛋白-1（MCP-1）、TGF-β1、γ-谷氨酰基轉(zhuǎn)移酶（GGT）的水平，抑制基質(zhì)金屬蛋白酶（MMP）-2、MMP-9、膠原蛋白、CTGF 中基因的表達(dá)，減輕肝成纖維細(xì)胞的活化，證實槲皮素可通過下調(diào)TGF-β1/Smad 的活性以減輕肝組織纖維化進(jìn)程。

3.3 抑制β-catenin/Wnt 信號通路激活

β-catenin/Wnt 信號通路在細(xì)胞發(fā)育可發(fā)揮關(guān)鍵作用，能增強(qiáng)成纖維化細(xì)胞增殖，促使多種炎癥因子的墳?zāi)?，加快肝組織纖維化[42]。陳文龍等[43]使用槲皮素治療四氯化碳誘導(dǎo)肝損傷大鼠，結(jié)果顯示，15、30、50 mg/kg 槲皮素能降低肝細(xì)胞形態(tài)、空泡等病理損傷，顯著提高肝/體質(zhì)量比例，呈劑量相關(guān)性降低羥脯氨酸（Hyp）、IL-1β、IL-6、TNF-α 的水平，阻止肝臟中I 型膠原蛋白（collagen-I）、α-SMA的蛋白表達(dá)和COL1A1、COL3A1基因的表達(dá)，結(jié)果表明，槲皮素能通路抑制β-catenin/Wnt 信號通路激活發(fā)揮抗肝纖維化活性，對肝臟發(fā)揮保護(hù)作用。

4 抗細(xì)胞凋亡

4.1 調(diào)節(jié)凋亡相關(guān)蛋白分泌

Bcl-2 蛋白家族在調(diào)控內(nèi)源性凋亡途徑中發(fā)揮作用，Bcl-2 的功能是防止細(xì)胞死亡，而與Bcl-2 形成異二聚體的Bax 似乎可加速細(xì)胞死亡信號，ROS生成和MAPK 激活的增加導(dǎo)致抗凋亡和促凋亡Bcl-2 家族蛋白之間的失衡，導(dǎo)致肝細(xì)胞凋亡[44]。David 等[45]采用槲皮素處理硫代乙酰胺誘導(dǎo)肝損傷大鼠，結(jié)果顯示，50 mg/kg 槲皮素能顯著降低氨基轉(zhuǎn)移酶水平，有助于降低肝細(xì)胞的炎癥浸潤和胞質(zhì)、胞核壞死，提高CAT、GPx、SOD 的水平，提高Bax/Bcl-2 比值，證實槲皮素通過干預(yù)凋亡途徑減輕肝臟細(xì)胞凋亡。

4.2 降低TRAF6/JNK 的信號通路活性

TRAF6/JNK 信號通路參與肝損傷進(jìn)程，腫瘤壞死因子受體相關(guān)因子6（TRAF6）能促使TLR4 的激活，進(jìn)一步誘導(dǎo)c-Jun 氨基端激酶（JNK）1/2 磷酸化，誘導(dǎo)細(xì)胞因子、毒素、代謝等多種病理改變，還能是Bcl-2 的失活，促使Beclin-1 誘導(dǎo)的自噬，進(jìn)而促進(jìn)肝細(xì)胞的凋亡[46]。JNK 參與器官組織的生存、凋亡、應(yīng)激等多種病理生理進(jìn)程，能促進(jìn)MAPK激活，能調(diào)控下游靶基因表達(dá)介導(dǎo)細(xì)胞凋亡[47]。Wu等[48]使用槲皮素治療二甲基亞砜誘導(dǎo)的急性肝損傷小鼠，100、200 mg/kg 槲皮素能顯著降低小鼠血清中IL-6、TNF-α、AST、ALT 的水平，顯著降低肝臟的病理損傷，抑制肝細(xì)胞中IL-6、TNF-α、IFNγ基因表達(dá)，降低半胱天冬酶-3、半胱天冬酶-9、LC3、Bax、Beclin-1 的表達(dá)，結(jié)果證實，槲皮素能通過降低TRAF6/JNK 的信號通路減少細(xì)胞凋亡和自噬。1 項槲皮素治療對乙酰氨基酚建立的急性肝損傷小鼠實驗發(fā)現(xiàn)，100 mg/kg 槲皮素能顯著減輕肝臟細(xì)胞病理損傷，減輕肝小葉結(jié)構(gòu)、水腫、壞死、炎癥細(xì)胞浸潤等病理改變，降低肝臟和血清GSH 和p-JNK/JNK 比值的水平，表明槲皮素能通過降低凋亡通路JNK 的表達(dá)以減輕肝組織損傷[49]。

4.3 阻止PI3K/Akt 信號通路激活

磷脂酰肌醇3 激酶/蛋白激酶B（PI3K/Akt）是典型的細(xì)胞生存信號通路，參與葡萄糖代謝的調(diào)節(jié)，能激活NF-κB 通路，提高半胱天冬酶-3 的活性，進(jìn)而促使細(xì)胞凋亡[50]。Zhu 等[51]通過乙醇建立肝損傷小鼠的模型，經(jīng)30 mg/kg 槲皮素能降低AST、ALT、TG、TBil 的水平，提高SOD、GSHPx 的水平，降低IL-1β、IL-6、IL-10 的水平，降低半胱天冬酶-3、Bax/Bcl-2 的水平，并降低STAT3、NF-κB、多聚ADP 核糖聚合酶（PARP）、Akt 的蛋白水平，結(jié)果表明，槲皮素能通過阻止PI3K/Akt 信號通路激活有關(guān)。

4.4 調(diào)節(jié)SIRT1/NLRP3 信號通路

SIRT1 參與細(xì)胞代謝、氧化應(yīng)激、炎癥、細(xì)胞凋亡等多種進(jìn)程，能通過抑制NLRP3 炎癥小體活化，抑制多種細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)，以阻止細(xì)胞凋亡[52]。Zhang 等[53]使用槲皮素治療異煙肼建立的肝損傷大鼠的動物實驗和用于L02 肝細(xì)胞的體外實驗發(fā)現(xiàn)，100、300 mg/kg 槲皮素能降低AST、ALT的水平，降低肝細(xì)胞炎癥浸潤和細(xì)胞凋亡，可顯著抑制肝細(xì)胞中NLRP3 炎癥小題的活性，提高SIRT1的表達(dá)，降低p53、Bax/Bcl-2、半胱天冬酶-3 的水平，在體外實驗也顯示出此變化，結(jié)果證實，槲皮素可通過調(diào)節(jié)SIRT1 途徑減弱NLRP3 炎癥小體活化發(fā)揮抗細(xì)胞凋亡作用。陳冬琳等[54]采用槲皮素治療順鉑誘導(dǎo)肝損傷小鼠，40 mg/kg 槲皮素能減輕肝組織炎癥浸潤和壞死，降低小鼠血清AST、ALT、ROS、MDA 的水平，提高GSH-Px 的水平，抑制Bax、半胱天冬酶-3 的表達(dá)，降低肝細(xì)胞凋亡，阻止順鉑引起的NLRP3 炎癥小體的激活，結(jié)果表明，槲皮素能抑制NLRP3 炎癥小體激活阻止細(xì)胞凋亡減輕急性肝損傷程度。

4.5 抑制HMGB1 的表達(dá)

HMGB1 參與各種肝損傷，抑制中性粒細(xì)胞清除和巨噬細(xì)胞的吞噬，與細(xì)胞DNA 結(jié)合，激活半胱天冬酶-3 信號通路，從而促進(jìn)細(xì)胞凋亡[55]。Peng等[56]將槲皮素處理D-半乳糖胺誘導(dǎo)人肝細(xì)胞L02肝損傷的體外實驗，1、25、50 μmol/L 槲皮素能顯著降低L02 細(xì)胞的毒性和凋亡，提高細(xì)胞活力，降低ROS、Bax/Bcl-2、半胱天冬酶-3、半胱天冬酶-9的水平，降低TLR4、HMGB1 的表達(dá)，結(jié)果表明，槲皮素能通過抑制HMGB1 的表達(dá)減輕細(xì)胞凋亡。

5 增強(qiáng)細(xì)胞自噬

5.1 增強(qiáng)線粒體自噬

乙醇可促使肝細(xì)胞線粒體DNA 損傷和ROS 產(chǎn)生，導(dǎo)致線粒體功能障礙，F(xiàn)OXO3a 可促進(jìn)線粒體自噬，加快線粒體降解，促進(jìn)線粒體功能恢復(fù)，AMPK 和ERK2 的表達(dá)可促進(jìn)FOXO3a 的活性[57]。Xiao 等[58]使用槲皮素治療乙醇誘導(dǎo)的肝損傷小鼠，結(jié)果發(fā)現(xiàn)，100 mg/kg 槲皮素能有效減輕乙醇引起的肝臟線粒體形態(tài)、腫脹、壞死等病理改變，能有效激活線粒體自噬，促進(jìn)線粒體降解，增強(qiáng)FOXO3a、LC3II、P62、Parkin、電壓依賴性陰離子通道蛋白1（VDAC1）的表達(dá)和核易位，結(jié)果表明，槲皮素可通過調(diào)節(jié)FOXO3a 的活性上調(diào)AMPK 和ERK2 的表達(dá)以促進(jìn)線粒體自噬減輕肝損傷。李艷艷等[59]采用槲皮素治療乙醇誘導(dǎo)的肝損傷小鼠，結(jié)果顯示，100 mg/kg 槲皮素能顯著降低線粒體結(jié)構(gòu)的損傷，減輕內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和線粒體損傷，降低血清AST、ALT、MDA 的水平，提高肝臟GSH 的水平，有效降低LC3-II、p62 等自噬相關(guān)蛋白的表達(dá)，顯著增加LAMP2A 溶酶體的水平，結(jié)果證實，槲皮素可通過促進(jìn)肝臟細(xì)胞自噬減輕肝損傷。

5.2 調(diào)節(jié)AMPK/mTOR 信號通路增強(qiáng)細(xì)胞自噬

AMPK/mTOR 信號通路介導(dǎo)細(xì)胞自噬，能激活巨噬細(xì)胞NLRP3 炎癥小體，加重肝細(xì)胞缺血再灌注損傷[60]。沈欽海等[61]通過氯喹建立的肝損傷大鼠模型，結(jié)果顯示，100 mg/kg 槲皮素能降低AST、ALT 水平和肝細(xì)胞結(jié)構(gòu)紊亂、壞死等病理損傷，降低血清IL-1β、IL-6、TNF-α、AST、ALT 的水平，降低肝組織中AMPK、Beclin1 蛋白和基因表達(dá)，提高mTOR 蛋白和基因的表達(dá)，顯著提高肝細(xì)胞的陽性細(xì)胞率，結(jié)果證槲皮素能通過調(diào)節(jié)AMPK/mTOR信號通路促進(jìn)細(xì)胞自噬對肝損傷發(fā)揮保護(hù)作用。

6 抑制轉(zhuǎn)運(yùn)體NTCP 的表達(dá)降低膽汁酸重吸收

涂君雪等[62]使用槲皮素治療膽汁淤積性急性肝損傷大鼠的實驗發(fā)現(xiàn)，50、100 mg/kg 槲皮素可顯著降低肝細(xì)胞水腫、壞死、炎性浸潤等病理變化，降低ALT、AST、ALP、膽汁酸、膽汁流量，降低肝臟組織中MRP2、BSEP 的表達(dá)，降低CYP7A1、CYP8BI 的表達(dá)，促進(jìn)SULT2A1 的表達(dá)，結(jié)果證實槲皮素能抑制轉(zhuǎn)運(yùn)體NTCP 的表達(dá)降低膽汁酸重吸收有關(guān)。

7 調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)代謝

李自發(fā)等[63]使用槲皮素治療鎘致肝損傷小鼠的實驗發(fā)現(xiàn)，2.5 mg/kg 槲皮素能顯著降低小鼠血清AST、ALT 的水平和肝臟組織的小葉結(jié)構(gòu)改變，提高體質(zhì)量，顯著提高肝臟中FAS、LPL 蛋白的表達(dá)，結(jié)果證實，槲皮素能通過調(diào)節(jié)肝臟脂質(zhì)代謝來保護(hù)肝功能。

8 結(jié)語

有效防治急性肝損傷成為廣大醫(yī)生一直探討的焦點。槲皮素可通過抗炎、抗氧化、抗肝纖維化、抗細(xì)胞凋亡、增強(qiáng)細(xì)胞自噬、降低膽汁酸重吸收、調(diào)節(jié)脂質(zhì)代謝，多途徑多靶點減輕急性肝損傷程度，對肝功能發(fā)揮保護(hù)作用，有望為急性肝損傷的治療提供補(bǔ)充。但目前槲皮素防治急性肝損傷的研究多停留于基礎(chǔ)研究階段，在人體的作用機(jī)制尚未得到確認(rèn)。同時人體對槲皮素吸收較差，納米脂質(zhì)體、半乳糖基化殼聚糖修飾的負(fù)載脂質(zhì)體可顯著提高槲皮素的生物利用度，可為槲皮素的成藥提供參考。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突