柱前衍生氣相色譜法測定植物油中的脂肪酸

唐 鵬，唐 亮

（1.空氣產品氣體（中山）有限公司，廣東 中山 528434；2.北京氦普北分氣體工業(yè)有限公司，北京 100095）

0 引言

食用油脂中最主要的成分是脂肪酸，構成脂肪酸的有飽和、不飽和及特殊脂肪酸，以及幾何及位置異構體等[1]。油脂的營養(yǎng)價值主要取決于它的脂肪酸組成及其配比。我國主要使用的植物油，由于種類、產地不同，其主要成分也有差別；同時，近年國內市場的食用植物油摻偽現(xiàn)象也時有發(fā)生。因此，植物油的成分分析也越來越得到人們的重視。

氣相色譜法具有分離效率高、成本較低等特點，可便捷、準確地實現(xiàn)多種不同脂肪酸的分離和測定[2]，使用氣相色譜進行脂肪酸分析時必需進行衍生化處理，酯化衍生化方法是氣相色譜中常用的柱前衍生化方式[3-4]。本文采用柱前酯化衍生化氣相色譜法測定食用植物油中的脂肪酸的組成，為合理利用食用油提供科學依據(jù)。

1 實驗部分

1.1 主要儀器與試劑

儀器為SP-3420A 型氣相色譜儀（北京北分瑞利分析儀器（集團）有限責任公司），配有FID 檢測器，填充柱注樣口；BF-2002 色譜工作站（北京北分瑞利分析儀器（集團）有限責任公司）；色譜柱：Φ3 mm×2 m不銹鋼填充柱，20% DEGS 涂于酸洗101 白色擔體上；載氣：高純氮（北京氦普北分氣體工業(yè)有限公司，純度≥99.999%）。

試劑有氫氧化鈉、甲醇、三氟化硼、正己烷、氯化鈉、無水硫酸鈉，均為分析純；氫氧化鈉甲醇溶液：約0.5 mol/L；三氟化硼甲醇溶液：質量分數(shù)12%～15%。

1.2 甲酯化試樣制備

用移液管吸取油樣0.35 mL 置于50 mL 圓底燒瓶中，加入6 mL 氫氧化鈉甲醇溶液（0.5 mol/L），然后將冷凝管固定于燒瓶上，水浴鍋加熱到60 ℃左右時，將燒瓶置于水浴中，加熱回流約30 min，直至油滴消失。用移液管從冷凝管頂部加入6 mL 三氟化硼甲醇溶液于沸騰溶液內，繼續(xù)煮沸2 min，經(jīng)冷凝管頂部加入4 mL 正己烷，繼續(xù)煮沸1 min，停止加熱，冷卻至室溫后取下冷凝管，加入少量飽和氯化鈉溶液并輕搖燒瓶數(shù)次，繼續(xù)加入氯化鈉溶液至燒瓶頂部，靜置分層后吸取上層溶液于小試管中，經(jīng)無水硫酸鈉去除痕量水。

1.3 色譜條件

柱溫為200 ℃；進樣口溫度為250 ℃；FID 溫度為270 ℃；載氣流速為30 mL/min；氫氣流速為30 mL/min；空氣流速為300 mL/min；進樣量為1 μL。

1.4 定性及定量分析

按照上述方法和條件測定樣品，以保留時間定性，面積歸一法定量。

2 結果與討論

2.1 衍生化技術

衍生化技術是通過化學反應將樣品中難于分離檢測的目標化合物定量轉化成另一種易于分析檢測的化合物，通過后者的分析檢測可以對目標化合物進行定性和定量分析。柱前衍生化在色譜分離之前進行衍生化反應，可擴大色譜分析的應用范圍，是色譜分析中樣品處理的一個重要方法。

有機酸由于極性較強，易產生嚴重的拖尾現(xiàn)象，而且大多數(shù)有機酸揮發(fā)性差，熱穩(wěn)定性也較低。因此，植物油中的脂肪酸在進行氣相色譜分析之前都要衍生為相應的酯，常用的衍生化方法有三氟化硼法、三甲基氫氧化硫法、酯交換法。本文使用三氟化硼作催化劑通入甲醇中配制酯化劑，然后再進行酯化反應，該反應能迅速、定量地進行，反應重復性好，反應條件不苛刻，容易操作；衍生化反應產物只有相應的甲酯，無反應的副產物，過量的衍生化試劑不干擾目標化合物的分離與檢測。

2.2 各種脂肪酸甲酯的保留時間（見表1）

表1 脂肪酸甲酯的保留時間 單位：min

2.3 精密度

甲酯制備過程、色譜柱的選擇、色譜條件及氣相色譜儀對重復性值有重要影響。使用本方法對某品牌米糠油中的脂肪酸含量進行測定，平行測定5 次，取平均值，分別計算平行測定的相對標準偏差，分析結果見表2。

表2 精密度實驗（n=5）

2.4 實際樣品分析

使用本方法對某公司生產的花生油、芝麻油、米糠油、菜籽油中的脂肪酸含量進行了測定，實驗結果見表3。

表3 實際樣品分析結果

不同種類植物油中的脂肪酸組成及特征脂肪酸含量各不相同，如花生油中特征脂肪酸是山崳酸、花生酸，菜籽油中特征脂肪酸是芥酸，其含量均高于其它油種相應組分。因此，將得到的不同油種中脂肪酸的組成及特征脂肪酸含量與產品標準中規(guī)定的含量進行對比即可鑒別是否摻偽及摻入的油種。

3 結語

使用本方法測定植物油中的脂肪酸，衍生化反應速度較快，酯化效率高，方法簡便、準確，適合分析大批量樣品，可被廣泛應用于植物油質量檢驗監(jiān)督工作中。