膿毒癥病兒血清Treg、Lac和APN動態(tài)變化及與病情嚴(yán)重程度關(guān)系

［摘要］ 目的

探討膿毒癥病兒血清中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）、乳酸（Lac）、脂聯(lián)素（APN）動態(tài)變化及與病情嚴(yán)重程度關(guān)系。

方法 回顧性分析2023年1月—2024年6月我院收治的138例膿毒癥病兒病例資料，根據(jù)病情嚴(yán)重程度將病兒分為輕中度組（60例）和重度組（78例），重度組根據(jù)7 d內(nèi)預(yù)后情況分為存活組（63例）和死亡組（15例）。對不同時間血清Treg、Lac及APN水平進(jìn)行組間比較，并分析重度組病兒入院時血清Treg、Lac及APN水平與急性生理與慢性健康評分系統(tǒng)（APACHE-Ⅱ）評分的關(guān)系。

結(jié)果 入院時和入院后24、48 h時，與輕中度組比較，重度組血清Treg、Lac水平均增高，血清APN水平降低，差異均有統(tǒng)計學(xué)意義（F=6.892～10.623，Plt;0.001）；死亡組各時間點(diǎn)的血清Treg、Lac水平均顯著高于存活組，而血清APN水平低于存活組（F=7.253～12.744，Plt;0.001）。重度組病兒入院時血清Treg及Lac水平與APACHE-Ⅱ評分呈顯著正相關(guān)（r=0.857、0.912，Plt;0.01），而血清APN水平與APACHE-Ⅱ評分呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.886，Plt;0.01）。

結(jié)論 在重度膿毒癥病兒中，血清Treg、Lac和APN水平與病情嚴(yán)重程度相關(guān)。

［關(guān)鍵詞］ 膿毒癥；兒童；T淋巴細(xì)胞，調(diào)節(jié)性；乳酸；脂聯(lián)素；急性病生理學(xué)和長期健康評價

［中圖分類號］ R631

［文獻(xiàn)標(biāo)志碼］ A

［文章編號］ 2096-5532（2024）05-0755-05

doi：10.11712/jms.2096-5532.2024.60.178

［網(wǎng)絡(luò)出版］ https：//link.cnki.net/urlid/37.1517.r.20241128.1504.003;2024-11-29 10：28：12

Dynamic changes in serum regulatory T cells， lactate， and adiponectin and their association with disease severity in children with sepsis

MA Xiaoxue， GUO Chunxia， ZHAO Xiumei

（Department of Pediatric Intensive Medicine， Handan Maternal And Child Health Care Hospital， Handan 056000， China）

［Abstract］Objective To investigate the dynamic changes of serum regulatory T cells （Treg）， lactate （Lac）， and adiponectin （APN） and their association with disease severity in children with sepsis.

Methods A retrospective analysis was performed for the case data of 138 children with sepsis who were admitted to our hospital from January 2023 to June 2024， and according to disease severity， they were divided into mild-to-moderate group with 60 children and severe group with 78 children. According to the prognosis within 7 days， the severe group was further divided into survival group with 63 children and death group with 15 children. The serum levels of Treg， Lac， and APN at different time points were compared between groups， and the children in the severe group were analyzed in terms of the correlation of the serum levels of Treg， Lac， and APN on admission with Acute Physiology and Chronic Health Evaluation Ⅱ （APACHE Ⅱ） score.

Results Compared with the mild-to-moderate group， the severe group had significant increases in the serum levels of Treg and Lac and a significant reduction in the serum level of APN on admission and at 24 and 48 hours after admission （F=6.892-10.623，Plt;0.001）， and compared with the survival group， the death group had significantly higher serum levels of Treg and Lac and a significantly lower serum level of APN at each time point （F=7.253-12.744，Plt;0.001）. For the children in the severe group， the serum levels of Treg and Lac on admission were significantly positively correlated with APACHE Ⅱ score （r=0.857，0.912，Plt;0.01）， while the serum level of APN was significantly negatively correlated with APACHE Ⅱ score （r=-0.886，Plt;0.01）.

Conclusion The serum levels of Treg， Lac， and APN are correlated with disease severity in children with severe sepsis.

［Key words］ sepsis; child; T-lymphocytes， regulatory; lactic acid; adiponectin; APACHE

膿毒癥是由于宿主對病原體感染的反應(yīng)失調(diào)而導(dǎo)致的全身炎癥反應(yīng)失控和多器官功能障礙的綜合征，重癥者可因休克或多器官功能衰竭而死亡［1-2］。全球每年有2 000萬5歲以下兒童患膿毒癥［3-5］。研究表明，血清中調(diào)節(jié)性T細(xì)胞（Treg）、乳酸（Lac）和脂聯(lián)素（APN）與膿毒癥的發(fā)生、發(fā)展以及感染、炎癥反應(yīng)、免疫和組織損傷等有關(guān)［6］。Treg可調(diào)控

機(jī)體的免疫活性，其表達(dá)的改變會導(dǎo)致機(jī)體清除病原體的能力下降，并間接促進(jìn)感染的擴(kuò)散和病原體的擴(kuò)增［7］。Lac可反映全身組織灌注情況［8-9］。研究發(fā)現(xiàn)，APN可減輕膿毒癥小鼠的心臟損傷，并通過抑制線粒體損傷發(fā)揮神經(jīng)保護(hù)作用，影響膿毒癥小鼠的預(yù)后［10-11］。目前，關(guān)于膿毒癥病兒血清中Treg、Lac和APN動態(tài)變化特征及其與臨床預(yù)后的關(guān)系報道較少。本研究旨在分析膿毒癥病兒血清中Treg、Lac和APN水平的動態(tài)變化及與急性生理與慢性健康評分系統(tǒng)（APACHE-Ⅱ）評分的關(guān)系，為兒童膿毒癥的診斷和治療提供新的視角。

1 對象與方法

1.1 研究對象

選取2023年1月—2024年6月我院重癥監(jiān)護(hù)室（ICU）收治的138例膿毒癥病兒作為研究對象，根據(jù)病情嚴(yán)重程度分為輕中度組（60例）和重度組（78例），重度組根據(jù)7 d內(nèi)預(yù)后情況分為存活組（63例）和死亡組（15例）。納入標(biāo)準(zhǔn)：①年齡2～14周歲；②同一ICU病兒；③從發(fā)病到住院時間lt;48 h；④至少入住ICU 48 h；⑤監(jiān)護(hù)人簽署知情同意書，自愿加入本次研究。排除標(biāo)準(zhǔn)：①先天性畸形；②合并遺傳代謝性疾病；③合并慢性基礎(chǔ)疾??；④長期應(yīng)用激素、免疫抑制劑、化療藥物；⑤智力低下與認(rèn)知障礙；⑥臨床資料不全。本研究已通過我院倫理委員會審批（HDFY20230115）。

1.2 血清指標(biāo)檢測方法

采集所有病兒入院時（0 h）和入院后24、48 h的外周靜脈血各5 mL，靜置30 min后分離血清，采用流式細(xì)胞儀雙標(biāo)法測定Treg水平，血?dú)夥治鰞x測定Lac水平，酶聯(lián)免疫吸附法測定APN水平。

1.3 膿毒癥病情評估

采用APACHE-Ⅱ評分對138例膿毒癥病兒進(jìn)行病情評估。APACHE-Ⅱ評分系統(tǒng)是評估重癥病人預(yù)后的常用工具，包括急性生理學(xué)評分、年齡和慢性健康狀況評分，總分為0～71分。輕中度組病兒APACHE-Ⅱ評分≤20分，重度組APACHE-Ⅱ評分＞20分。

1.4 統(tǒng)計學(xué)方法

采用SPSS 26.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析。正態(tài)分布的計量資料以±s表示，兩組間比較采用t檢驗，不同時間點(diǎn)兩組間比較采用重復(fù)測量方差分析；計數(shù)資料以例數(shù)表示，組間比較采用χ2檢驗；相關(guān)性分析采用Pearson相關(guān)分析法。以Plt;0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。

2 結(jié)" 果

2.1 兩組病兒一般臨床資料比較

兩組病兒年齡、性別及原發(fā)病（重癥肺炎、顱腦感染和其他疾?。┍容^，差異均無顯著意義（P＞0.05）。見表1。

2.2 兩組病兒血清Treg、Lac及APN水平比較

重復(fù)測量設(shè)計方差分析顯示，重度組和輕中度組膿毒癥病兒血清Treg、Lac和APN水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F組間=93.122～351.559，Plt;0.001），不同時間比較差異亦有統(tǒng)計學(xué)意義（F時間=5.806～37.694，Plt;0.05），Treg和APN組別和時間不存在交互效應(yīng)（F組間×?xí)r間=2.332、0.119，P=0.129、0.731），而Lac組別和時間存在交互效應(yīng)（F組間×?xí)r間=7.732，Plt;0.01）。重度組各時間點(diǎn)的血清Treg、Lac水平均顯著高于輕中度組，而血清APN水平低于輕中度組（F=6.892～10.623，P均lt;0.001）。隨時間延長，重度組的血清Treg、Lac水平持續(xù)升高，血清APN水平則不斷下降（F=12.643～18.355，P均lt;0.001）。見表2。

2.3 存活組與死亡組病兒血清Treg、Lac及APN水平比較

重復(fù)測量設(shè)計方差分析顯示，死亡組和存活組膿毒癥病兒血清Treg、APN水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F組間=946.665、32.354，Plt;0.001），而Lac水平比較差異無顯著性（F組間=1.139，P=0.322）；不同時間血清Treg、APN水平比較差異有統(tǒng)計學(xué)意義（F時間=1 354.240、12.963，Plt;0.001），而Lac水平比較差異無顯著性（F時間=0.793，P=0.454）；組別和時間均存在交互效應(yīng)（F組間×?xí)r間=9.608～1 209.325，Plt;0.001）。死亡組各時間點(diǎn)的血清Treg、Lac水平均顯著高于存活組，而血清APN水平低于存活組（F=7.253～12.744，P均lt;0.001）。隨時間延長，死亡組血清Treg、Lac水平持續(xù)升高，血清APN水平不斷下降（F=13.944～23.182，P均lt;0.001）。見表3。

2.4 重度組病兒入院時血清Treg、Lac及APN水平與APACHE-Ⅱ評分關(guān)系

Pearson相關(guān)性分析結(jié)果顯示，重度組病兒入院時血清Treg及Lac水平與APACHE-Ⅱ評分呈顯著正相關(guān)（r=0.857、0.912，Plt;0.01），而血清APN水平與APACHE-Ⅱ評分呈顯著負(fù)相關(guān)（r=-0.886，Plt;0.01）。見圖1～3。

3 討" 論

兒童膿毒癥是一種嚴(yán)重的全身性感染性疾病，病情進(jìn)展迅速，嚴(yán)重威脅病兒生命安全。由于膿毒癥的發(fā)病機(jī)制涉及炎癥反應(yīng)和免疫失衡等多個方面，臨床上針對膿毒癥某一方面的治療效果不佳，導(dǎo)致其病死率居高不下［12-13］。由于膿毒癥的病情進(jìn)展迅速，故早期識別和干預(yù)可顯著提高病兒的生存率。然而，單一的血清指標(biāo)往往難以全面反映膿毒癥復(fù)雜的病理過程。因此，近年來研究人員一直致力于尋找更敏感和特異的多指標(biāo)組合，以提高診斷的準(zhǔn)確性。

目前，免疫失衡仍是膿毒癥發(fā)病機(jī)制諸多學(xué)說中的研究重點(diǎn)，當(dāng)機(jī)體受到病原微生物入侵時，會立即觸發(fā)固有免疫系統(tǒng)和適應(yīng)性免疫系統(tǒng)，其中適應(yīng)性免疫系統(tǒng)起主要作用［14］。T淋巴細(xì)胞和B淋巴

細(xì)胞是適應(yīng)性免疫系統(tǒng)的重要組成部分，T淋巴細(xì)胞在數(shù)量上占主導(dǎo)優(yōu)勢，故具有廣泛的生物學(xué)功能。研究發(fā)現(xiàn)，T淋巴細(xì)胞衰竭與膿毒癥的發(fā)生和發(fā)展有關(guān)［15］。本研究通過對外周血的檢測發(fā)現(xiàn)，Treg水平隨著膿毒癥病情的進(jìn)展而顯著升高，尤其是在膿毒性休克時升高最為顯著。本研究結(jié)果顯示，重度組的Treg水平明顯高于輕中度組，死亡病兒的Treg水平持續(xù)上升，而存活病兒的Treg水平逐漸下降。Treg是一種負(fù)性調(diào)節(jié)因子，可抑制宿主清除病原體的能力，促進(jìn)病原體載量的擴(kuò)大。同時，Treg的增加也會影響Treg/Th17的平衡，導(dǎo)致免疫失衡，加劇疾病進(jìn)展。研究發(fā)現(xiàn)，膿毒癥病人的Treg水平持續(xù)升高，且與APACHE-Ⅱ評分呈正相關(guān)，提示Treg水平與膿毒癥的病死率和預(yù)后密切相關(guān)［16］，這與本研究結(jié)果一致。此外，張賓等［17］研究表明，膿毒癥病人外周血中Treg水平顯著高于健康人群，Treg水平每增加1個單位，膿毒癥風(fēng)險增加1.973倍。

膿毒癥是炎癥和感染雙重作用引起的一種失控性炎癥反應(yīng)，導(dǎo)致內(nèi)皮細(xì)胞表型改變，使其逐漸向促進(jìn)血液凝固、增強(qiáng)細(xì)胞黏附、加劇炎癥反應(yīng)和促進(jìn)細(xì)胞凋亡等方向轉(zhuǎn)變，進(jìn)而導(dǎo)致微血管功能受損，這種情況會導(dǎo)致組織器官血液供應(yīng)不足，進(jìn)而可能引發(fā)多器官功能損害或衰竭［18-19］。組織器官灌注不足是造成器官功能受損的主要原因，故液體復(fù)蘇是治療膿毒癥的主要措施［20］。血Lac是葡萄糖代謝的產(chǎn)物，正常生理狀態(tài)下Lac水平恒定，一旦血清中Lac濃度升高，則表明組織器官灌注不足。因此，血Lac可作為反映組織灌注不足的重要生物標(biāo)志物［21］。本文研究結(jié)果顯示，重度組病兒的血Lac水平明顯高于輕中度組，死亡病兒的血Lac水平持續(xù)上升，而存活病兒的血Lac水平逐漸下降。隨著膿毒癥病情的進(jìn)一步發(fā)展，血Lac水平會持續(xù)升高，不斷損傷組織器官功能，形成惡性循環(huán)。宋林等［22］研究發(fā)現(xiàn)，血Lac水平越高，器官功能損傷越重，預(yù)后越差，這與本研究結(jié)果一致。這可能是由于死亡病兒體內(nèi)的炎癥反應(yīng)未能得到有效控制，導(dǎo)致機(jī)體氧債持續(xù)加重，從而導(dǎo)致血Lac水平不斷升高。

近年來的研究表明，脂肪組織不僅可充當(dāng)脂質(zhì)存儲的“倉庫”，還可以通過分泌某些激素或多肽活性物質(zhì)參與機(jī)體的代謝活動，特別是在膿毒癥發(fā)生和發(fā)展過程中，大量脂肪細(xì)胞參與其中，并且脂肪組織與疾病預(yù)后密切相關(guān)［23-24］。APN作為脂肪組織與其他器官之間交流的重要信使，發(fā)揮著重要影響，

可作為膿毒癥診斷和預(yù)后生物標(biāo)志物［25］。研究發(fā)現(xiàn)，APN缺乏促進(jìn)炎性細(xì)胞因子的表達(dá)，膿毒癥的病情嚴(yán)重程度與血清APN濃度呈負(fù)相關(guān)［26］。本文研究結(jié)果顯示，重度組病兒血APN水平明顯低于輕中度組，死亡病兒APN水平持續(xù)下降，而存活病兒APN水平逐漸升高。膿毒癥的本質(zhì)是機(jī)體大量釋放致炎因子，產(chǎn)生炎癥介質(zhì)的瀑布級聯(lián)反應(yīng)，誘導(dǎo)多組織器官損傷或衰竭。APN可影響巨噬細(xì)胞與脂多糖結(jié)合，抑制炎性介質(zhì)的形成。此外，APN還會抑制黏附分子的表達(dá)，阻礙內(nèi)皮與炎癥細(xì)胞的黏附，抑制血管內(nèi)皮細(xì)胞激活。據(jù)此推測，APN不僅具有抗炎作用，還具有調(diào)節(jié)脂肪代謝和能量平衡的作用，膿毒癥病兒血APN水平的下降可能與炎癥反應(yīng)加劇、脂肪組織功能障礙及能量代謝失衡有關(guān)。

本文研究結(jié)果顯示，重癥組膿毒癥病兒入院時血清Treg、Lac水平與APACHE-Ⅱ評分呈顯著正相關(guān)，而血清APN水平與APACHE-Ⅱ評分呈顯著負(fù)相關(guān)。監(jiān)測膿毒癥病兒不同時間的血Treg、Lac和APN水平，對于膿毒癥病兒的臨床管理具有重要的指導(dǎo)意義。這些生物標(biāo)志物不僅能夠幫助醫(yī)生更準(zhǔn)確地評估病兒病情的嚴(yán)重程度，還能為制定個性化的治療方案提供科學(xué)依據(jù)。由于Treg在膿毒癥中表現(xiàn)為負(fù)性調(diào)控作用，其高水平表達(dá)往往伴隨著病情惡化及預(yù)后不良，故降低Treg數(shù)量或抑制其功能，可能會成為改善膿毒癥病兒免疫功能、促進(jìn)病原體清除的有效途徑。血Lac濃度的升高是組織低氧和灌注不足的敏感指標(biāo)，其變化趨勢可以反映膿毒癥病兒的病情變化。

綜上所述，重癥膿毒癥病兒血清Treg、Lac和APN水平明顯異常，而這些指標(biāo)在存活病兒和死亡病兒中的變化趨勢相反。因此，這些指標(biāo)在評估膿毒癥的嚴(yán)重程度方面具有重要價值。臨床應(yīng)重視對重癥膿毒癥病兒血清Treg、Lac和APN等指標(biāo)的定期監(jiān)測。

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（本文編輯 牛兆山）

［收稿日期］2024-06-20; ［修訂日期］2024-10-11

［基金項目］邯鄲市科學(xué)技術(shù)研究與發(fā)展計劃項目（2142208-3080）

［第一作者］馬曉雪（1982-），女，主治醫(yī)師。E-mail：138320910-

72@163.com。