基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)和分子對(duì)接探討王行寬教授治療高血壓核心處方平肝煎的作用機(jī)制

王子焱,范金茹,范建民,周 婕,李 蘇

高血壓是指以體循環(huán)動(dòng)脈壓升高為特征的循環(huán)系統(tǒng)疾病。一項(xiàng)對(duì)我國(guó)31個(gè)省、自治區(qū)、直轄市的179 873名年齡≥18歲常住居民的調(diào)查顯示,高血壓患病率為27.5%[1],且我國(guó)高血壓患病率呈上升趨勢(shì),預(yù)估我國(guó)成人高血壓患病人數(shù)為2.45億人[2]。高血壓是心血管病的獨(dú)立危險(xiǎn)因素[3],能夠?qū)е卵芎托呐K等靶器官損害,使得心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)增加[4],造成嚴(yán)重的社會(huì)經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)[5]。因此,控制過(guò)高血壓、減輕血壓靶器官損害以及改善心腦血管疾病預(yù)后成為當(dāng)前高血壓防控的重點(diǎn)。目前,高血壓的治療藥物主要有鈣通道阻滯劑、血管緊張素轉(zhuǎn)化酶抑制劑、血管緊張素受體拮抗劑等6類藥物[6],在高血壓的防控中發(fā)揮了重要作用,然而,這些藥物也存在一些諸如藥物不良反應(yīng)、使用禁忌證、對(duì)特殊類型高血壓的血壓控制不佳等問(wèn)題[7]。高血壓屬于中醫(yī)學(xué)“眩暈”“風(fēng)眩”范疇?，F(xiàn)代研究證實(shí)中醫(yī)藥對(duì)于治療高血壓具有一定療效,且能夠降低高血壓導(dǎo)致的不良心血管事件風(fēng)險(xiǎn)[8-9]。因此,發(fā)揮中醫(yī)藥特色對(duì)于防控高血壓具有重要意義。

王行寬教授為首屆全國(guó)名中醫(yī),學(xué)驗(yàn)俱豐,主張“雜病治肝、多臟調(diào)燮、綜合治理”和“善用經(jīng)方、不乏驗(yàn)方、用藥平和、易于效仿”,臨床尤精診治心腦血管疾病。平肝煎為王行寬教授經(jīng)驗(yàn)方,由天麻、鉤藤、白蒺藜、石決明組成,現(xiàn)代研究表明天麻能夠通過(guò)直接干預(yù)腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)或通過(guò)激活過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體γ(PPARγ)間接抑制RAAS,調(diào)節(jié)血管張力,抑制血管炎癥物質(zhì)的釋放等途徑降血壓[10-12];鉤藤能夠通過(guò)改善維生素和氨基酸代謝,擴(kuò)張血管和組織外源鈣離子內(nèi)流等途徑降低血壓[13-15];白蒺藜通過(guò)抑制心室肌中心肌轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子和結(jié)締組織生長(zhǎng)因子的表達(dá)及改善腸道菌群等[16-17]途徑降低血壓;石決明可能通過(guò)下調(diào)血漿血管緊張素Ⅱ(AngⅡ)、血清醛縮酶(ALD)含量,上調(diào)血漿一氧化氮(NO)水平以發(fā)揮降壓作用[18]。然而,平肝煎組方降壓的藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制尚不明確。網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)可以基于靶分子、生物功能和生物活性化合物生成復(fù)雜的相互作用網(wǎng)絡(luò),并能從分子水平上系統(tǒng)地闡明中醫(yī)藥的作用機(jī)制,符合中醫(yī)藥整體論治策略[19],故本研究基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)及分子對(duì)接策略探討王行寬教授治療高血壓核心處方機(jī)制與通路,以期系統(tǒng)、全面闡釋其物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制。

1 資料與方法

1.1 化學(xué)成分與靶點(diǎn)的搜集

通過(guò)中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫(kù)與分析平臺(tái)(TCMSP,http://lsp,nwu.edu.cn/tcmsp.php)、本草組鑒數(shù)據(jù)庫(kù)(HERB,http://herb.ac.cn/)搜尋藥物成分,設(shè)置口服利用度(oral availability,OB)≥30%、類藥性(drug likeness,DL)≥0.18,得到有效成分后通過(guò)其MOL.ID號(hào)搜尋單味藥成分作用靶點(diǎn)。同時(shí),運(yùn)用BATMAN-TCM(http://bionet.ncpsb.org.cn/batman-tcm/)、pubchem(https://pubchem.ncbi.nlm.nih.gov)數(shù)據(jù)庫(kù)獲得化合物,通過(guò)SMILES(Simplified Molecular Input Line Entry System)導(dǎo)入到結(jié)構(gòu)相似度預(yù)測(cè)靶點(diǎn)數(shù)據(jù)庫(kù)SwissTargetPrediction(http://www.swisstargetprediction.ch)預(yù)測(cè)靶點(diǎn)。利用全球蛋白質(zhì)資源數(shù)據(jù)庫(kù)(UniProt,http://www.uniprot.org/)下載化合物Excel數(shù)據(jù)表格,運(yùn)用“TRIM”函數(shù)優(yōu)化數(shù)據(jù),使用“VLOOKU”函數(shù)匹配靶點(diǎn)基因名。并通過(guò)查閱文獻(xiàn)補(bǔ)充未匹配到的基因名稱。最后將通過(guò)以上方法得到的化學(xué)成分的相關(guān)靶點(diǎn)蛋白利用Uniprot(https://www.uniprot.org)數(shù)據(jù)庫(kù)進(jìn)行注釋。

1.2 藥物-成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)分析

準(zhǔn)備化合物基因“network”文件和type文件,運(yùn)用Cytoscape 3.8.2軟件,導(dǎo)入相關(guān)文件,進(jìn)行網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析,根據(jù)度值(Degree值)調(diào)整靶點(diǎn)圖形、顏色、透明度和大小,構(gòu)建“藥物-中藥成分-靶點(diǎn)”網(wǎng)絡(luò)圖。

1.3 疾病靶點(diǎn)的預(yù)測(cè)

運(yùn)用人類基因數(shù)據(jù)庫(kù)(GeneCards,https://www.genecards.org/)、在線人類孟德?tīng)栠z傳數(shù)據(jù)庫(kù)(OMIM,https://www.omim.org/)、藥物數(shù)據(jù)庫(kù)(DrugBank,https://go.drugbank.com/)平臺(tái)獲取疾病相關(guān)靶點(diǎn),疾病名稱取“hypertension”為關(guān)鍵詞搜索高血壓疾病相關(guān)靶點(diǎn)。設(shè)置對(duì)象為“human”,使用“VLOOKUP”函數(shù)匹配靶點(diǎn)基因名,篩選藥物和疾病交集基因。

1.4 關(guān)鍵靶點(diǎn)的獲取

應(yīng)用Venny(https://bioinfogp.cnb.csic.es/tools/venny/)軟件獲取中藥活性化合物作用靶點(diǎn)與高血壓相關(guān)靶點(diǎn)的交集靶點(diǎn),作為中藥復(fù)方治療高血壓的潛在靶點(diǎn)。

1.5 PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建及網(wǎng)絡(luò)拓?fù)浞治?/h3>

通過(guò)生物分子功能注釋系統(tǒng)數(shù)據(jù)庫(kù)(STRING,https://string-db.org/)導(dǎo)入交集基因,設(shè)置對(duì)象為“homo sapiens”,取最高置信度0.900,隱藏游離基因節(jié)點(diǎn),得到蛋白互作關(guān)系。結(jié)果導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件中,選擇“network analyzer”,得到網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)。介度中心值(betweenness centrality,BC)最短路徑穿過(guò)單個(gè)節(jié)點(diǎn)的次數(shù),緊密中心值(closeness centrality,CC)是節(jié)點(diǎn)間溝通的難易程度。把Degree值的二倍中位數(shù)以上,BC和CC的中位數(shù)上作為衡量標(biāo)準(zhǔn)篩選中藥與疾病的核心成分靶點(diǎn),并制作PPI網(wǎng)絡(luò)互作圖。

1.6 基因本體(GO)和京都基因與基因組百科全書(shū)(KEGG)富集分析

通過(guò)Metascape(http://metascape.org/)平臺(tái)進(jìn)行GO功能富集分析和KEGG通路富集分析,將所得交集靶點(diǎn)導(dǎo)入基因列表中,設(shè)置對(duì)象為“human”,選擇個(gè)性化分析,設(shè)置最小重疊(min overlap)為3、P值取0.05、最低濃縮度為1.5,得到結(jié)果后,制作GO氣泡圖和KEGG通路圖。運(yùn)用R軟件對(duì)靶點(diǎn)進(jìn)行GO、KEGG富集分析。將關(guān)鍵靶點(diǎn)導(dǎo)入R軟件,采用clusterProfiler進(jìn)行富集分析。GO是注釋基因和分析這些基因的生物學(xué)過(guò)程的主要生物信息學(xué)工具。KEGG是用于從高通量實(shí)驗(yàn)技術(shù)產(chǎn)生的大規(guī)模分子數(shù)據(jù),可集中了解高級(jí)功能和生物系統(tǒng)。為了分析藥材的功能,設(shè)置P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

1.7 分子對(duì)接

對(duì)平肝煎治療高血壓的排名靠前的主要候選化合物與核心靶點(diǎn)進(jìn)行分子對(duì)接驗(yàn)證。蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)由蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)數(shù)據(jù)庫(kù)(RCSB PDB,https://www.rcsb.org/)獲取。對(duì)接小分子庫(kù)由TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù)(https://old.tcmsp-e.com/tcmsp.php)通過(guò)搜索中藥獲取并建立。首先,使用AutoDock Tools 1.5.6對(duì)蛋白質(zhì)晶體結(jié)構(gòu)進(jìn)行去水、加氫操作,并進(jìn)行受體結(jié)構(gòu)準(zhǔn)備工作。使用Open Babel及AutoDock程序?qū)π》肿訋?kù)進(jìn)行拆分等準(zhǔn)備工作。對(duì)接使用AutoDock程序進(jìn)行,最終將結(jié)果導(dǎo)入Pymol進(jìn)行對(duì)接結(jié)果的可視化分析。

2 結(jié) 果

2.1 中藥有效成分篩選及基因名的轉(zhuǎn)換

經(jīng)TCMSP數(shù)據(jù)庫(kù),以O(shè)B≥30%及DL≥0.18為標(biāo)準(zhǔn)得到中藥成分30個(gè),刪除未匹配到靶點(diǎn)的成分后得到26個(gè),查閱文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn),低于標(biāo)準(zhǔn)值的部分成分藥理作用強(qiáng)烈,也納入結(jié)果之中,最后得到鉤藤18個(gè)、白蒺藜4個(gè),通過(guò)HERB數(shù)據(jù)庫(kù)得到天麻相關(guān)成分4個(gè)、石決明相關(guān)成分4個(gè),最后共得到相關(guān)作用靶點(diǎn)751個(gè),去除重復(fù)值后,得到387個(gè)藥物作用靶點(diǎn)。詳見(jiàn)表1。

表1 部分中藥成分-靶點(diǎn)

2.2 疾病靶點(diǎn)及其與藥物作用靶點(diǎn)交集基因的獲取

經(jīng)GeneCards、OMIM、DurgBank平臺(tái)獲取高血壓疾病靶點(diǎn)10 259個(gè),其中最大評(píng)分為94.51分,最小評(píng)分為0.14分。對(duì)所得數(shù)據(jù)卡兩次中位數(shù),最后得到9 095個(gè)疾病靶點(diǎn)。中藥靶點(diǎn)和疾病靶點(diǎn)取交集,刪除重復(fù)值,得到交集基因279個(gè)。詳見(jiàn)圖1。

圖1 中藥-疾病靶點(diǎn)韋恩圖

2.3 構(gòu)建中藥成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)及關(guān)鍵化合物篩選

將基因數(shù)據(jù)導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2軟件,得到中藥成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖,共421個(gè)節(jié)點(diǎn)(nodes)、730條邊(edges),根據(jù)Degree值得到排名居前3位的化合物為大黃素、槲皮素、山柰酚。詳見(jiàn)表2。網(wǎng)絡(luò)圖見(jiàn)圖2。

圖2 中藥有效成分-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖

表2 Degree值排名居前3位的化合物

2.4 PPI網(wǎng)絡(luò)制作與核心蛋白的獲取

經(jīng)STRING平臺(tái)分析隱藏游離節(jié)點(diǎn)后得到247個(gè)節(jié)點(diǎn)、1 110條邊,平均節(jié)度點(diǎn)為9.28。下載TSV文件導(dǎo)入Cytoscape 3.8.2后經(jīng)網(wǎng)絡(luò)拓?fù)鋵W(xué)分析,把Degree值的二倍中位數(shù)以上,BC和CC的中位數(shù)上靶點(diǎn)作為中藥復(fù)方的核心作用靶點(diǎn)。居前5位的靶點(diǎn)基因分別為蛋白激酶B1(AKT1)、腫瘤蛋白P53(TP53)、腫瘤壞死因子(TNF)、白細(xì)胞介素6(IL-6)、Jun原癌基因(JUN)。隨著Degree值和連接分?jǐn)?shù)的增高,節(jié)點(diǎn)的形狀越大,顏色越鮮明、線條越粗,蛋白的地位也就越重要。詳見(jiàn)圖3。

圖3 平肝煎PPI網(wǎng)絡(luò)圖

2.5 GO與KEGG通路富集分析

經(jīng)Metascape平臺(tái)分析,GO分析結(jié)果獲得生物過(guò)程(biological processes,BP)4 615條,通過(guò)logP值和基因數(shù)的百分?jǐn)?shù)比重新對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行排名,排名居前為對(duì)營(yíng)養(yǎng)水平的反應(yīng)、對(duì)脂多糖的反應(yīng)、對(duì)細(xì)菌來(lái)源分子的反應(yīng)、對(duì)藥物的反應(yīng)等。分子功能(molecular function,MF)643條,主要涉及核受體活性、配體激活的轉(zhuǎn)錄因子活性、血紅素結(jié)合、DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、受體配體活性、RNA聚合酶Ⅱ特異性DNA結(jié)合轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合等;細(xì)胞成分(cellular components,CC)共118條,主要由膜筏、突觸后膜、受體復(fù)合體、細(xì)胞質(zhì)核周區(qū)域、轉(zhuǎn)錄因子復(fù)合體等構(gòu)成。提示中藥復(fù)方可能通過(guò)調(diào)控細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子、參與脂多糖等反應(yīng)來(lái)干預(yù)治療高血壓。詳見(jiàn)圖4。

圖4 GO富集分析

KEGG通路富集分析共得到276條富集結(jié)果(見(jiàn)圖5),主要涉及通路有糖尿病并發(fā)癥中的高級(jí)糖基化終末產(chǎn)物-受體信號(hào)通路(AGE-RAGR)、脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化信號(hào)通路、乙型肝炎信號(hào)通路、化學(xué)致癌-受體激活信號(hào)通路、前列腺癌信號(hào)通路等,提示中藥復(fù)方可能通過(guò)上述通路調(diào)節(jié)干預(yù)高血壓。

圖5 KEGG通路富集分析

2.6 化合物靶點(diǎn)-核心蛋白分子對(duì)接驗(yàn)證

分子對(duì)接結(jié)合熱能<-4.18 kJ/mol表示具有結(jié)合活性,<-20.92 kJ/mol表示結(jié)合活性較好。因此,由AutoDock Tools 1.5.6軟件分子對(duì)接結(jié)果可知:拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)排名居第1位的中藥化合物小分子槲皮素與PPI核心蛋白拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)居前5位的大分子受體(AKT1、JUN、TP53、TNF、IL-6)均具有良好的結(jié)合活性,其中槲皮素與AKT1(-29.87 kJ/mol)、TNF(-29.33 kJ/mol)的結(jié)合熱能較低,結(jié)合活性較好。詳見(jiàn)圖6、圖7。

圖6 槲皮素與AKT1分子對(duì)接

圖7 槲皮素與TNF分子對(duì)接

3 討 論

王行寬教授結(jié)合歷代醫(yī)家的認(rèn)識(shí)及現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究進(jìn)展,將高血壓對(duì)應(yīng)“風(fēng)眩”,認(rèn)為其病在血脈,病機(jī)總署陰虛為本、陽(yáng)亢為標(biāo)[20],治以平肝潛陽(yáng),臨證常用平肝煎加減化裁治療高血壓。平肝煎為王行寬教授經(jīng)驗(yàn)方,由天麻、鉤藤、白蒺藜、石決明組成,本課題組前期研究結(jié)果顯示,王行寬教授診療高血壓病的核心藥物組合即為平肝煎,方中天麻味甘、性平,《本草從新·卷一草部》載天麻可“治諸風(fēng)眩掉”,可平抑肝陽(yáng)、息風(fēng)止痙,是止眩暈之要藥;鉤藤味甘、性涼,《本草綱目·草部(三)》載主治“頭旋目?！?既能平肝潛陽(yáng),又可兼清肝熱,以防肝陽(yáng)上亢,郁而化火;白蒺藜性微溫,味辛、苦,可平抑肝陽(yáng),又可解郁活血,使肝得疏泄;石決明為質(zhì)重之介類,性味咸寒,可重鎮(zhèn)肝陽(yáng),又可涼肝熱、護(hù)肝陰。四藥同入肝經(jīng),共同發(fā)揮平肝潛陽(yáng)之效[21]。

本研究從化合物-靶點(diǎn)網(wǎng)絡(luò)圖分析,平肝煎通過(guò)大黃素、槲皮素、山柰酚等26個(gè)活性成分作用于高血壓相關(guān)的279個(gè)靶點(diǎn),說(shuō)明平肝煎通過(guò)多成分、多靶點(diǎn)協(xié)同發(fā)揮治療高血壓作用。現(xiàn)代研究認(rèn)為大黃素通過(guò)提高超氧化物歧化酶(SOD)活性,降低丙二醛(MDA)含量以其抗氧化應(yīng)激,以發(fā)揮降血壓作用[22]。槲皮素及其代謝物能夠通過(guò)抑制血管平滑肌細(xì)胞(VSMC)中的煙酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶活性發(fā)揮抗氧化作用[23],減少血管超氧化物并改善內(nèi)皮功能以降低血壓,且一項(xiàng)納入7項(xiàng)隨機(jī)對(duì)照試驗(yàn)的系統(tǒng)評(píng)價(jià)和薈萃分析顯示,補(bǔ)充槲皮素在降低血壓方面具有顯著效果[24]。同時(shí)山柰酚、槲皮素同屬于黃酮類化合物,山柰酚、槲皮素能夠通過(guò)NO/環(huán)磷酸鳥(niǎo)苷(cGMP)通路和抑制氧化應(yīng)激相關(guān)炎癥生物標(biāo)志物如MDA、SOD改善高血壓[25]。

通過(guò)PPI網(wǎng)絡(luò)的拓?fù)鋵W(xué)性質(zhì)篩選出平肝煎防治高血壓的5個(gè)核心靶點(diǎn)基因,分別為AKT1、TP53、TNF、IL-6、JUN。AKT1是磷脂酰肌醇-3激酶/蛋白激酶B(PI3K/AKT)信號(hào)通路下游的主要靶點(diǎn),主要參與調(diào)節(jié)炎癥反應(yīng),激活 PI3K/AKT信號(hào)通路會(huì)導(dǎo)致肺血管內(nèi)壁增厚、肺動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞增殖和凋亡[26]。p53是TP53的蛋白產(chǎn)物,p53的表達(dá)與細(xì)胞凋亡增加有關(guān),miR-31a-5p通過(guò)加速動(dòng)脈平滑肌細(xì)胞的增殖和通過(guò)靶向TP53抑制細(xì)胞凋亡參與高血壓的發(fā)生發(fā)展[27]。TNF、IL-6為人體內(nèi)重要的炎性因子,TNF-α是由多核巨細(xì)胞產(chǎn)生的一種細(xì)胞因子,具有廣泛的生物活性,不僅具有調(diào)節(jié)機(jī)體免疫功能的作用,還可以介導(dǎo)炎癥反應(yīng)過(guò)程[28],其中TNF-α可通過(guò)分泌內(nèi)皮素-1(ET-1)收縮血管,導(dǎo)致血壓升高;IL-6是一種炎性細(xì)胞因子,現(xiàn)有研究表明抑制IL-6使得蛋白酪氨酸激酶2/信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)子與激活子3(Janus kinase signal transducers 2 and activator of transcription 3,JAK2/STAT3)信號(hào)通路的活性降低,從而減輕AngⅡ誘導(dǎo)的高血壓[29];JUN是c-Jun氨基末端激酶(JNK)信號(hào)通路的典型靶標(biāo)[30],能夠通過(guò)影響細(xì)胞的增殖與分化以及細(xì)胞凋亡引發(fā)高血壓[31]。GO 富集分析預(yù)測(cè)出平肝煎可能通過(guò)調(diào)控細(xì)胞核轉(zhuǎn)錄因子、參與脂多糖等反應(yīng)來(lái)干預(yù)治療高血壓,與以上核心靶點(diǎn)基因引發(fā)高血壓的機(jī)制相符合。

KEGG富集分析預(yù)測(cè)出平肝煎可能通過(guò)糖尿病并發(fā)癥中的晚期糖基化終末產(chǎn)物(advanced glycosylation end products,AGEs)-糖基化終末產(chǎn)物受體(receptor of AGEs,RAGE)信號(hào)通路、脂質(zhì)和動(dòng)脈粥樣硬化信號(hào)通路、乙型肝炎信號(hào)通路等調(diào)節(jié)干預(yù)高血壓。AGE-RAGR信號(hào)通路可通過(guò)TNF-α、NF-κB等炎癥和氧化應(yīng)激因子的上調(diào),從而導(dǎo)致炎癥、內(nèi)皮功能障礙和氧化應(yīng)激,引發(fā)血管硬化,最終導(dǎo)致血壓升高[32-33]。高血壓與動(dòng)脈粥樣硬化關(guān)系密切,高血壓是動(dòng)脈粥樣硬化性心血管疾病的主要獨(dú)立危險(xiǎn)因素[2]。高血壓可能通過(guò)誘發(fā)內(nèi)皮功能障礙導(dǎo)致炎癥細(xì)胞浸潤(rùn),調(diào)節(jié)造血功能,激活交感神經(jīng)系統(tǒng),導(dǎo)致動(dòng)脈粥樣硬化,使心血管疾病風(fēng)險(xiǎn)增加[34],動(dòng)脈粥樣硬化亦會(huì)導(dǎo)致高血壓情況加重[35]。

分子對(duì)接結(jié)果顯示,拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)排名居第1位的槲皮素與PPI核心蛋白拓?fù)鋵W(xué)參數(shù)居前5位的大分子受體(AKT1、JUN、TP53、TNF、IL-6)均具有良好的結(jié)合活性,其中槲皮素與TNF(-29.33 kJ/mol)、AKT1(-29.87 kJ/mol)的結(jié)合熱能較低,結(jié)合活性較好。研究表明槲皮素能夠降低血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)換酶(ACE)活性、AngⅡ和TNF-α以發(fā)揮降壓作用,而槲皮素調(diào)控AKT1信號(hào)通路以發(fā)揮降壓作用的機(jī)制目前尚少有相關(guān)文獻(xiàn)報(bào)道,有待于進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證。

綜上所述,平肝煎可能通過(guò)抗炎、抗氧化應(yīng)激、改善血管內(nèi)皮功能、調(diào)節(jié)機(jī)體免疫方面發(fā)揮平肝潛陽(yáng)之效,以達(dá)到降壓效果。本研究運(yùn)用網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)技術(shù),探討了平肝煎通過(guò)多靶點(diǎn)、多通路協(xié)同作用于高血壓病的網(wǎng)絡(luò)機(jī)制,并通過(guò)分子對(duì)接技術(shù)對(duì)相關(guān)領(lǐng)域進(jìn)行驗(yàn)證,發(fā)現(xiàn)槲皮素是其發(fā)揮降壓作用的潛在分子基礎(chǔ),對(duì)于后期開(kāi)展平肝煎治療高血壓病的機(jī)制研究以及為臨床用藥提供了理論基礎(chǔ)。