反式-2-己烯醛與可溶性鹽聯(lián)用對(duì)柑橘酸腐病菌和酸腐病的抑制作用

歐陽(yáng)秋麗，吳垚焱冰，劉洋梅，葛云舒，陶能國(guó)，袁星星

（湘潭大學(xué)化工學(xué)院，湖南 湘潭 411105）

柑橘酸腐病菌（Geotrichum citri-aurantii）侵染引起的酸腐病是最嚴(yán)重的柑橘果實(shí)采后病害之一。酸腐病易在雨后、重霧或露水未干時(shí)采收的柑橘上發(fā)生，且一旦發(fā)生，發(fā)病范圍快速擴(kuò)大，給柑橘產(chǎn)業(yè)帶來(lái)巨大沖擊[1-2]。目前，已注冊(cè)的商用殺菌劑僅有鄰苯基苯酚鈉鹽、雙胍鹽和丙環(huán)唑可部分防治酸腐病，但這些傳統(tǒng)殺菌劑存在化學(xué)毒性，極易污染環(huán)境，且易導(dǎo)致柑橘果實(shí)油斑病暴發(fā)等問(wèn)題[3-5]。因此，尋找可替代化學(xué)殺菌劑的活性物質(zhì)或替代方案成為近年來(lái)柑橘采后病害研究的熱點(diǎn)之一。

多項(xiàng)研究表明，植物精油及其抑菌組分對(duì)酸腐病菌等多種柑橘采后致病真菌有顯著的抑制作用，且具有安全、高效、低殘留等優(yōu)點(diǎn)，具備控制酸腐病害的潛力[6-8]。反式-2-己烯醛天然存在于香茅油、樟腦油等中，是植物精油的揮發(fā)性組分，也是植物對(duì)外界環(huán)境應(yīng)答防御的重要信號(hào)分子。研究表明，反式-2-己烯醛對(duì)鏈格孢菌、圓弧青霉、擴(kuò)展青霉、灰葡萄孢菌等多種采后致病菌有良好的抑制效果[9-14]，通過(guò)破壞真菌的細(xì)胞膜完整性[9-11]以及抑制真菌能量代謝[14]發(fā)揮其抑菌性能。前期研究發(fā)現(xiàn)，反式-2-己烯醛對(duì)酸腐病菌有明顯的抑制作用，最小抑菌濃度（minimal inhibitory concentration，MIC）和最小殺菌濃度（minimal fungicidal concentration，MFC）分別為0.42 mg/mL和0.85 mg/mL。貯藏7 d時(shí)，10×MFC反式-2-己烯醛處理組的‘宮川’柑橘果實(shí)發(fā)病率相較于對(duì)照組降低了67%，說(shuō)明反式-2-己烯醛是一種潛在的生物殺菌劑[15]。但反式-2-己烯醛價(jià)格較高且氣味濃郁，其實(shí)際應(yīng)用受到限制。

可溶性鹽主要通過(guò)破壞真菌細(xì)胞壁和細(xì)胞膜、破壞重要酶系統(tǒng)的作用和干擾能量傳遞以及遺傳機(jī)制，從而干擾真菌的正常生長(zhǎng)[16-17]。食品添加劑中一系列低毒的可溶性鹽，如脫氫乙酸鈉、丙酸鈣、苯甲酸鈉、山梨酸鉀等，對(duì)多種果蔬病原微生物有顯著抑制作用，已被報(bào)道可應(yīng)用于柑橘、梨、蘋果、桃、葡萄等水果的采后病害防治，是一類可靠的低毒有效殺菌劑[17-19]。食品添加劑雙乙酸鈉、丙酸鈣、磷酸鈉等也被發(fā)現(xiàn)有良好的抑菌效果[20-22]。用質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.4%的雙乙酸鈉清洗鮮切生菜后，大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和腸炎沙門氏菌分別減少了1.92、1.57（lg（CFU/mL））和1.42（lg（CFU/mL））[21]。丙酸鈣具有一定的抗菌活性，在酸性條件下能夠抑制細(xì)菌和霉菌的生長(zhǎng)[22]。磷酸鈉能有效控制食源性細(xì)菌病原體的生長(zhǎng)，包括沙門氏菌、大腸桿菌、金黃色葡萄球菌和單核細(xì)胞增生李斯特氏菌，對(duì)果蔬采后病原菌粉紅單端孢的菌絲生長(zhǎng)和孢子萌發(fā)也有較好的抑制作用[16]。實(shí)驗(yàn)室前期研究發(fā)現(xiàn)脫氫乙酸鈉對(duì)柑橘采后酸腐病有較好的防控效果，在離體條件下，其對(duì)酸腐病菌的MIC＝MFC＝0.80 mg/mL，在活體實(shí)驗(yàn)中，質(zhì)量濃度為4×MFC的脫氫乙酸鈉可有效抑制柑橘果實(shí)酸腐病的發(fā)生，具有良好的應(yīng)用潛力[23]。

長(zhǎng)期使用一種殺菌劑容易導(dǎo)致病原菌產(chǎn)生抗性，降低藥效，而抑菌物質(zhì)聯(lián)用可以有效提高抑菌效果并降低病原菌的抗性[24-29]。茶皂素與低劑量的咪鮮胺或抑霉唑混合使用提高了其對(duì)接種‘沙糖’柑橘果實(shí)青霉病、綠霉病或酸腐病的防治性能[5]。肉桂醛和檸檬醛聯(lián)用后對(duì)酸腐病菌的抑制效果優(yōu)于二者單獨(dú)作用，可有效地延長(zhǎng)柑橘的貨架期[27]。月桂精油與碳酸氫鈉聯(lián)用可以顯著提升月桂精油的抑菌效果，250 μg/mL月桂精油＋質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%的碳酸氫鈉處理可以完全抑制鏈格孢生長(zhǎng)，500 μg/mL月桂精油與質(zhì)量分?jǐn)?shù)1%的碳酸氫鈉聯(lián)用能顯著降低櫻桃番茄的發(fā)病率[28]。植物精油有良好的抑菌效果，但成本相對(duì)較高。將植物精油與低價(jià)的可溶性鹽進(jìn)行聯(lián)用，可能提高抑菌效果并降低使用成本。因此，探討可溶性鹽與反式-2-己烯醛聯(lián)用效果對(duì)開發(fā)安全有效、價(jià)格低廉的果蔬防腐保鮮劑具有重要意義。

本研究主要探討反式-2-己烯醛與可溶性鹽如雙乙酸鈉、磷酸鈉、丙酸鈣、脫氫乙酸鈉等聯(lián)用對(duì)柑橘酸腐病菌的抑制作用，以期為柑橘貯藏期病害的可持續(xù)治理提供理論依據(jù)。

1 材料與方法

1.1 菌株、材料與試劑

柑橘酸腐病菌（G.citri-aurantii）菌株分離自腐爛的溫州蜜柑果實(shí)，已通過(guò)形態(tài)學(xué)和分子鑒定，現(xiàn)保存于湘潭大學(xué)生物與食品工程專業(yè)實(shí)驗(yàn)室，在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（potato dextrose agar，PDA）上保存待用。

湘西椪柑（Citrus reticulataBlanco cv.Ponkan）果實(shí)于2020年12月21日從湖南省瀘溪縣張家坪村果園采摘，選擇大小均一、著色均勻且無(wú)病斑果實(shí)作為實(shí)驗(yàn)材料。

反式-2-己烯醛（98%）購(gòu)自上海阿拉丁生化科技股份有限公司。所有化學(xué)藥品均為分析級(jí)。

1.2 儀器與設(shè)備

SPX-250B生化培養(yǎng)箱、MLS-3020手提式壓力蒸汽無(wú)菌器 上海博迅實(shí)業(yè)有限公司；SCW-CJ-1F垂直流潔凈工作臺(tái) 蘇州安瑞凈化科技有限公司。

1.3 方法

1.3.1 可溶性鹽單獨(dú)處理對(duì)柑橘酸腐病菌的抑制效果

采用瓊脂稀釋培養(yǎng)法[29]測(cè)定雙乙酸鈉、磷酸鈉、丙酸鈣對(duì)柑橘酸腐病菌菌絲體生長(zhǎng)的影響。雙乙酸鈉、磷酸鈉、丙酸鈣終質(zhì)量濃度分別為0（對(duì)照）、1.00、2.00、4.00、8.00、16.00 mg/mL。每個(gè)培養(yǎng)皿中心接種1 個(gè)直徑為6.0 mm的菌餅，在（28±2）℃恒溫培養(yǎng)箱培養(yǎng)96 h，每24 h測(cè)量其生長(zhǎng)直徑，并計(jì)算其抑制率。MIC為培養(yǎng)48 h時(shí)完全沒(méi)有生長(zhǎng)的最低質(zhì)量濃度，MFC為生長(zhǎng)96 h時(shí)完全沒(méi)有生長(zhǎng)的最低質(zhì)量濃度。對(duì)照組中加入相應(yīng)體積的吐溫80（體積分?jǐn)?shù)0.5%）。柑橘酸腐病的抑制率按式（1）計(jì)算。

式中：dc為對(duì)照組生長(zhǎng)直徑/mm；dt為處理組生長(zhǎng)直徑/mm。

1.3.2 反式-2-己烯與可溶性鹽聯(lián)用對(duì)柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)的影響

用1.3.1節(jié)方法測(cè)定反式-2-己烯分別與脫氫乙酸鈉、雙乙酸鈉、磷酸鈉、丙酸鈣聯(lián)用對(duì)柑橘酸腐病菌菌絲體生長(zhǎng)的影響。反式-2-己烯醛和脫氫乙酸鈉、雙乙酸鈉、磷酸鈉、丙酸鈣以質(zhì)量比0.849∶1.000進(jìn)行復(fù)配，復(fù)配物的終質(zhì)量濃度為0、0.12、0.23、0.46、0.92 mg/mL。

采用分?jǐn)?shù)抑制濃度（fractional inhibitory concentration，F(xiàn)IC）[30]評(píng)定反式-2-己烯與可溶性鹽的聯(lián)用效果。當(dāng)FIC≤0.5時(shí)，兩種物質(zhì)為協(xié)同作用；0.5＜FIC≤1則為相加作用；1＜FIC≤4為無(wú)關(guān)作用；FIC＞4為拮抗作用。FIC按公式（2）計(jì)算。

式中：MICa,聯(lián)用表示MIC下兩物質(zhì)聯(lián)用時(shí)反式-2-己烯的質(zhì)量濃度；MICa,單用表示單獨(dú)使用反式-2-己烯時(shí)的MIC；MICb,聯(lián)用表示MIC下兩物質(zhì)聯(lián)用時(shí)可溶性鹽的質(zhì)量濃度；MICb,單用表示單獨(dú)使用可溶性鹽時(shí)的MIC。

1.3.3 反式-2-己烯與可溶性鹽聯(lián)用對(duì)柑橘酸腐病發(fā)生的影響

反式-2-己烯與可溶性鹽聯(lián)用對(duì)柑橘酸腐病發(fā)生的影響參照Ouyang Qiuli等[27]的方法。浸泡液配制：將反式-2-己烯分別與不同的可溶性鹽均勻溶于含吐溫80（體積分?jǐn)?shù)0.5%）的水溶液中，最終反式-2-己烯與各可溶性鹽聯(lián)用的質(zhì)量濃度分別為0、1×MFC、5×MFC和10×MFC。

椪柑用自來(lái)水洗凈后，在體積分?jǐn)?shù)2%的次氯酸鈉溶液中浸泡2 min，用蒸餾水洗凈并自然晾干。晾干后的椪柑用無(wú)菌手術(shù)刀在赤道處對(duì)稱劃2 個(gè)傷口（3 mm×2 mm）。接種濃度為1×105個(gè)/mL的柑橘酸腐病菌孢子懸浮液10 μL。接種后的椪柑靜置4 h后，在相應(yīng)濃度的浸泡液中浸泡1 min，對(duì)照組為果蠟浸泡組。椪柑貯藏溫度為（25±2）℃，相對(duì)濕度為85%～90%，每組10 個(gè)果實(shí)。每天測(cè)定椪柑腐爛率和腐爛直徑，并通風(fēng)1 h。發(fā)病率按公式（3）計(jì)算。

1.4 數(shù)據(jù)分析

所有實(shí)驗(yàn)均重復(fù)3 次，采用Excel軟件進(jìn)行數(shù)據(jù)處理，結(jié)果用平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用軟件SPSS 16.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，采用單因素方差分析（one-way ANOVA）進(jìn)行差異顯著性分析（P＜0.05），使用Adobe Photoshop CS6軟件進(jìn)行作圖。

2 結(jié)果與分析

2.1 可溶性鹽單獨(dú)處理對(duì)柑橘酸腐病菌的抑制作用

由表1可知，雙乙酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌菌絲體的抑制作用隨著質(zhì)量濃度增加而增強(qiáng)。在整個(gè)培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，質(zhì)量濃度低于4.00 mg/mL的雙乙酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌菌絲體的抑制率低于30%，效果不佳；當(dāng)雙乙酸鈉質(zhì)量濃度達(dá)到16.00 mg/mL，柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)被完全抑制，說(shuō)明雙乙酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌的MIC和MFC均為16.00 mg/mL。

表1 雙乙酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌的抑制率Table 1 Inhibition rates of sodium diacetate on G.citri-aurantii

由表2可知，隨著作用質(zhì)量濃度的增加，磷酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌的抑制作用逐漸增強(qiáng)。在整個(gè)培養(yǎng)時(shí)間內(nèi)，低質(zhì)量濃度（1.00～2.00 mg/mL）的磷酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌菌絲體的生長(zhǎng)抑制效果隨著培養(yǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而效果減弱。培養(yǎng)2 d時(shí)，4.00 mg/mL的磷酸鈉可完全抑制柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)；培養(yǎng)4 d時(shí)，16.00 mg/mL的磷酸鈉可完全抑制柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)，說(shuō)明磷酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌的MIC和MFC分別為4.00 mg/mL和16.00 mg/mL。

表2 磷酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌的抑制率Table 2 Inhibition rates of sodium phosphate on G.citri-aurantii

由表3可知，在整個(gè)培養(yǎng)過(guò)程內(nèi)，1.00～16.00 mg/mL的丙酸鈣對(duì)柑橘酸腐病菌的抑制作用較弱。當(dāng)處理質(zhì)量濃度達(dá)到16.00 mg/mL時(shí)，對(duì)柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)的抑制率僅為50.00%～66.28%，說(shuō)明丙酸鈣抑制柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)的MIC和MFC均高于16.00 mg/mL。

表3 丙酸鈣對(duì)柑橘酸腐病菌的抑制率Table 3 Inhibition rates of calcium propionate on G.citri-aurantii

2.2 反式-2-己烯與可溶性鹽聯(lián)用對(duì)柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)的影響

如表4所示，反式-2-己烯醛與磷酸鈉、雙乙酸鈉和丙酸鈣聯(lián)用為協(xié)同作用（FIC≤0.5），與脫氫乙酸鈉聯(lián)用為相加作用（0.5＜FIC≤1），與單獨(dú)使用相比，復(fù)合使用時(shí)反式-2-己烯醛和可溶性鹽的使用量均明顯降低。反式-2-己烯醛和雙乙酸鈉聯(lián)用后，抑制柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)的MIC＝MFC＝0.23 mg/mL，反式-2-己烯醛和雙乙酸鈉的用量明顯低于單獨(dú)抑菌時(shí)的質(zhì)量濃度，相較于單獨(dú)使用時(shí)的MIC和MFC，反式-2-己烯醛質(zhì)量濃度為0.11 mg/mL，雙乙酸鈉質(zhì)量濃度為0.12 mg/mL，表明雙乙酸鈉與反式-2-己烯醛聯(lián)用后，反式-2-己烯醛的用量減少73.81%～87.06%，雙乙酸鈉的用量減少99.25%。反式-2-己烯醛與磷酸鈉聯(lián)用顯著抑制柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)（MIC＝MFC＝0.23 mg/mL），此時(shí)反式-2-己烯醛和磷酸鈉的質(zhì)量濃度分別為0.11 mg/mL和0.12 mg/mL，相比于單獨(dú)使用時(shí)的MIC和MFC，磷酸鈉和反式-2-己烯醛質(zhì)量濃度分別降低97.00%～99.25%和73.81%～87.06%。反式-2-己烯醛與丙酸鈣聯(lián)用之后MIC＝MFC＝0.23 mg/mL，反式-2-己烯醛用量相比于單獨(dú)處理時(shí)的MIC和MFC減少73.81%～87.06%，丙酸鈣質(zhì)量濃度為0.12 mg/mL，明顯低于丙酸鈣單獨(dú)作用時(shí)的質(zhì)量濃度。反式-2-己烯醛和脫氫乙酸鈉聯(lián)用同樣可降低物質(zhì)的單獨(dú)用量，對(duì)酸腐病菌的MIC＝MFC＝0.46 mg/mL（反式-2-己烯醛質(zhì)量濃度為0.21 mg/mL，脫氫乙酸鈉質(zhì)量濃度為0.25 mg/mL），相比單獨(dú)使用時(shí)的MIC和MFC，反式-2-己烯醛和脫氫乙酸鈉分別減少了50.00%～75.29%和68.75%的用量。由以上結(jié)果可知，反式-2-己烯醛與可溶性鹽聯(lián)用可大幅增強(qiáng)二者的抑菌效果。

表4 反式-2-己烯與可溶性鹽聯(lián)用抑制柑橘酸腐病菌生長(zhǎng)的MIC和MFC值Table 4 MIC and MFC values of trans-2-hexene combined with soluble salts against the growth of G.citri-aurantii

2.3 反式-2-己烯聯(lián)用可溶性鹽對(duì)柑橘酸腐病發(fā)生的影響

經(jīng)反式-2-己烯醛聯(lián)用可溶性鹽處理后，接種柑橘酸腐病菌的果實(shí)發(fā)病率和病斑直徑變化分別如表5、6和圖1所示。貯藏3 d時(shí)，對(duì)照組果實(shí)開始發(fā)病，發(fā)病率為（36.67±5.77）%，病斑直徑為（4.3±0.6）mm，處理組中，反式-2-己烯醛＋丙酸鈣處理組開始發(fā)病，但發(fā)病率和病斑直徑均顯著低于對(duì)照組（P＜0.05）。貯藏4 d時(shí)，對(duì)照組發(fā)病率達(dá)到90%，病斑直徑擴(kuò)大至（14.9±0.3）mm。反式-2-己烯醛＋磷酸鈣處理組在4 d時(shí)開始發(fā)病，在所有已發(fā)病的處理組中，1×MFC反式-2-己烯醛＋丙酸鈣處理組發(fā)病率最高（50.00%），病斑直徑（（7.8±0.9）mm）顯著低于對(duì)照組。貯藏5 d時(shí)，反式-2-己烯醛＋雙乙酸鈉處理組開始發(fā)病，處理組中1×MFC和10×MFC反式-2-己烯醛＋丙酸鈣發(fā)病率最高，分別為（84.07±11.42）%和（86.67±5.77）%，病斑直徑分別為（23.2±4.7）mm和（25.1±2.4）mm，發(fā)病率與對(duì)照組無(wú)顯著性差異，但病斑直徑顯著低于對(duì)照組。貯藏6 d時(shí)，對(duì)照組和1×MFC反式-2-己烯醛＋丙酸鈣處理組發(fā)病率達(dá)到1 0 0%，病斑直徑分別是（60.6±5.3）mm和（55.6±9.7）mm，除反式-2-己烯醛＋丙酸鈣處理組外，其他聯(lián)用處理組發(fā)病率以及病斑直徑均顯著低于對(duì)照組，其中5×MFC和10×MFC反式-2-己烯醛＋脫氫乙酸鈉處理組椪柑果實(shí)均未發(fā)病。

圖1 反式-2-己烯醛與可溶性鹽聯(lián)用對(duì)接種柑橘酸腐病椪柑果實(shí)發(fā)病進(jìn)程的影響Fig.1 Effect of trans-2-hexenal combined with soluble salts on the progression of sour rot disease in ponkan fruit inoculated with G.citri-aurantii

表5 反式-2-己烯醛與可溶性鹽聯(lián)用對(duì)接種酸腐病菌椪柑果實(shí)的酸腐病發(fā)病率的影響Table 5 Effect of trans-2-hexenal combined with soluble salts on the incidence of sour rot disease in ponkan fruits inoculated with G.citri-aurantii

表6 反式-2-己烯醛與可溶性鹽聯(lián)用對(duì)接種酸腐病菌椪柑果實(shí)病斑直徑的影響Table 6 Effect of trans-2-hexenal combined with soluble salts on the lesion diameter of ponkan fruit inoculated with G.citri-aurantii

3 討論

已有研究表明，反式-2-己烯醛具有顯著的抑菌活性和防腐作用，對(duì)鏈格孢菌、尖孢炭疽菌、擴(kuò)展青霉、灰葡萄孢菌、酸腐病菌等采后病菌具有良好的抑制作用，能有效地控制灰霉病、綠霉病、黑腐病和酸腐病，并對(duì)果實(shí)品質(zhì)沒(méi)有不利影響[9-15]。雙乙酸鈉、丙酸鈣、磷酸鈉、脫氫乙酸鈉等可溶性鹽也具有一定的抑菌效果。雙乙酸鈉和丙酸鈣均可抑制肉制品中枯草芽孢桿菌生長(zhǎng)，MIC分別為50 μg/mL和6.25 μg/mL[22]；磷酸鈉可抑制果蔬采后病原菌粉紅單端孢以及棗、桃果實(shí)的褐腐病[16]，不同濃度的磷酸鈉處理蘋果能夠有效控制青霉病，并促進(jìn)蘋果本身營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)的積累，不影響蘋果品質(zhì)[31]。脫氫乙酸鈉對(duì)酸腐病菌的MIC＝MFC＝0.80 mg/mL，并對(duì)柑橘采后酸腐病有較好的防控效果[15]。本研究結(jié)果表明，雙乙酸鈉、丙酸鈣、磷酸鈉對(duì)柑橘酸腐病菌有一定的抑制效果，具有抑制柑橘采后酸腐病的潛力，其中磷酸鈉對(duì)酸腐病菌的抑制效果最強(qiáng)。

長(zhǎng)期使用單一化學(xué)殺菌劑會(huì)使病菌產(chǎn)生抗藥性，其殺菌作用會(huì)大大降低，因此將多種殺菌劑進(jìn)行復(fù)合是目前防治柑橘酸腐病的一種手段。脫氫乙酸鈉和硅酸鈉按照質(zhì)量比1∶4進(jìn)行聯(lián)用時(shí)可以協(xié)同抑制酸腐病菌菌絲體生長(zhǎng)[24]。雙乙酸鈉、丁酸鈉、丙酸鈣和山梨酸鉀抑制黃曲霉的MFC分別為32、32、64 mg/mL和128 mg/mL；雙乙酸鈉與山梨酸鉀（質(zhì)量比為2∶1）聯(lián)用后對(duì)黃曲霉的MFC僅為1 mg/mL，鹽類物質(zhì)的使用量大大減少[25]。本研究發(fā)現(xiàn)，離體實(shí)驗(yàn)時(shí)，可溶性鹽單獨(dú)作用酸腐病菌時(shí)抑菌效果較差，但與反式-2-己烯醛聯(lián)用后其抑菌性能提高且抑菌物質(zhì)用量降低。反式-2-己烯醛與脫氫乙酸鈉復(fù)合為相加作用，反式-2-己烯醛＋雙乙酸鈉、反式-2-己烯醛＋磷酸鈉、反式-2-己烯醛＋丙酸鈣為協(xié)同作用，其中反式-2-己烯醛與雙乙酸鈉、丙酸鈣的聯(lián)用效果優(yōu)于其他兩種可溶性鹽。這與韓乾杰等[26]實(shí)驗(yàn)結(jié)果一致，丁酸鈉對(duì)大腸桿菌、沙門氏菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、乳酸菌沒(méi)有顯示出抑菌作用，但不同的植物精油與丁酸鈉聯(lián)用可以協(xié)同抑制上述細(xì)菌的生長(zhǎng)。反式-2-己烯醛和鹽類殺菌劑聯(lián)用后，對(duì)酸腐病菌的抑菌效果強(qiáng)于單獨(dú)殺菌劑作用，推測(cè)鹽類溶于水后會(huì)造成細(xì)胞膜兩側(cè)滲透壓不同，影響細(xì)胞膜通透性，加速反式-2-己烯醛進(jìn)入細(xì)胞，加劇細(xì)胞損傷。

將肉桂醛和檸檬醛按照1∶2（體積比）的比例混合，用1×MFC混合物處理柑橘果實(shí)時(shí)，貯藏8 d后的腐爛率僅為60%，而對(duì)照組果實(shí)已經(jīng)全部腐爛[27]。百里香精油和不同質(zhì)量分?jǐn)?shù)的碳酸鈉溶液聯(lián)用，發(fā)現(xiàn)1 600 μL/L百里香精油和質(zhì)量分?jǐn)?shù)0.5%碳酸鈉混合可以完全抑制柑橘酸腐病害的發(fā)生[29]。與反式-2-己烯醛單獨(dú)處理相比，5×MFC和10×MFC 反式-2-己烯醛＋脫氫乙酸鈉對(duì)柑橘酸腐病均有顯著的抑制作用，處理組第6天時(shí)的果實(shí)未發(fā)?。?0×MFC反式-2-己烯醛＋磷酸鈉效果較好，第6天時(shí)發(fā)病率為（32.78±12.51）%?；铙w實(shí)驗(yàn)所用的反式-2-己烯醛有效質(zhì)量濃度遠(yuǎn)高于離體實(shí)驗(yàn)的有效質(zhì)量濃度，可能由于活體實(shí)驗(yàn)所用空間較大，反式-2-己烯醛揮發(fā)得更快導(dǎo)致有效濃度降低。

綜上，反式-2-己烯醛與雙乙酸鈉、磷酸鈉、脫氫乙酸鈉聯(lián)用能夠顯著抑制酸腐病菌菌絲體生長(zhǎng)，降低使用量，并有效控制柑橘采后酸腐病。其中，5×MFC和10×MFC 反式-2-己烯醛＋脫氫乙酸鈉防控效果最佳。