不同受體羊同期發(fā)情及胚胎移植效果的研究

文│蘭淑芬（山東省青島市即墨區(qū)畜牧業(yè)發(fā)展服務(wù)中心）

隨著我國(guó)畜牧業(yè)由傳統(tǒng)的放牧型模式向規(guī)模化、集約化養(yǎng)殖模式轉(zhuǎn)變，胚胎移植技術(shù)也普遍應(yīng)用在我國(guó)畜牧業(yè)發(fā)展上，進(jìn)一步加快良種羊繁育。以胚胎移植技術(shù)最為關(guān)鍵，該技術(shù)包括胚胎回收、胚胎冷凍及移植、同期發(fā)情、超數(shù)排卵等一系列關(guān)鍵技術(shù)，而同期發(fā)情技術(shù)是提高繁殖率、生產(chǎn)管理水平及胚胎移植效果的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，該技術(shù)在現(xiàn)在的養(yǎng)羊生產(chǎn)中十分重要，在生產(chǎn)實(shí)踐中，同期發(fā)情技術(shù)影響著胚胎移植效果，對(duì)母羊繁殖率、羔羊成活率都有極大影響，筆者對(duì)影響不同受體羊同期發(fā)情的因素及影響胚胎移植效果的因素進(jìn)行總結(jié)分析，為羊胚胎移植技術(shù)應(yīng)用提供借鑒。

一、胚胎移植技術(shù)的發(fā)展史

1.國(guó)外胚胎移植技術(shù)的發(fā)展。胚胎移植技術(shù)起源于20世紀(jì)初，自20世紀(jì)中葉以來(lái)，在國(guó)外畜牧業(yè)領(lǐng)域取得了顯著成果。我國(guó)胚胎移植技術(shù)的起步較晚，但隨著近年來(lái)畜禽養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展，胚胎移植技術(shù)的運(yùn)用越來(lái)越廣泛，逐步成為研究熱點(diǎn)，隨著動(dòng)物胚胎移植技術(shù)的提出，1890年世界上第一個(gè)動(dòng)物胚胎移植后代的出現(xiàn)對(duì)畜牧業(yè)及生物學(xué)的發(fā)展具有重大影響。其后將胚胎移植技術(shù)運(yùn)用在綿羊、山羊、牛等動(dòng)物上，直到1974年成立了國(guó)際胚胎移植協(xié)會(huì)（1ETS），其后美國(guó)、加拿大、歐洲相繼成立了胚胎移植協(xié)會(huì)。

2.國(guó)內(nèi)胚胎移植技術(shù)的發(fā)展。在我國(guó)，胚胎移植研究起步較晚。1973年首次在兔子上實(shí)現(xiàn)了胚胎移植。此后，該技術(shù)在羊、牛等動(dòng)物上也取得了成功。到1980年，胚胎移植研究迎來(lái)高潮，全國(guó)多個(gè)研究單位紛紛開(kāi)展胚胎移植相關(guān)工作。到1990年，我國(guó)將胚胎移植技術(shù)運(yùn)用到了生產(chǎn)上，研究者引入了顯微注射、超聲引導(dǎo)等技術(shù)。同時(shí)，冷凍保存技術(shù)得到了改進(jìn)，包括細(xì)胞外滲透保護(hù)劑的使用以及慢速冷凍與快速冷凍技術(shù)等。但隨著胚胎移植技術(shù)的運(yùn)用，發(fā)現(xiàn)影響胚胎移植效果的因素較多，其中實(shí)體的同期發(fā)情對(duì)胚胎移植效果的影響較大，而影響實(shí)體同期發(fā)情的因素也多，因此，研究不同實(shí)體羊同期發(fā)情的影響因素及胚胎移植效果的影響因素具有重要意義。

二、胚胎移植技術(shù)的研究進(jìn)展

1.胚胎移植的意義。胚胎移植技術(shù)對(duì)現(xiàn)代畜牧業(yè)具有重要意義。首先，它有助于提高優(yōu)良種畜的繁殖效率，加速遺傳進(jìn)步，提高畜牧業(yè)的生產(chǎn)力。其次，胚胎移植可以避免疾病的傳播，保障養(yǎng)殖場(chǎng)的生物安全。此外，通過(guò)胚胎移植技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)性別選擇和基因編輯，從而改善畜群結(jié)構(gòu)，提高生產(chǎn)性能和繁殖性能。同時(shí)，胚胎移植還有助于瀕危物種的保護(hù)和繁衍。在畜牧業(yè)可持續(xù)發(fā)展過(guò)程中，胚胎移植技術(shù)發(fā)揮了重要作用?？煽s短家畜的改良周期，加速品種改良，進(jìn)一步提高動(dòng)物品質(zhì)及生產(chǎn)性能；還可以用于品種資源的保存，建立優(yōu)良遺傳特性的家畜胚胎庫(kù)、基因庫(kù)，還可以診斷和治療某些疾病。

2.胚胎移植技術(shù)的過(guò)程。胚胎移植技術(shù)是一種將供體動(dòng)物的胚胎移植到受體動(dòng)物子宮內(nèi)的生殖技術(shù)。過(guò)程主要包括：首先，通過(guò)激素處理誘導(dǎo)供體動(dòng)物超排卵，并與種公畜進(jìn)行人工授精或自然交配。然后在受精后的適當(dāng)時(shí)間（通常為6～8天）從供體動(dòng)物子宮內(nèi)取出胚胎。接著對(duì)取出的胚胎進(jìn)行評(píng)估和處理，挑選出質(zhì)量良好的胚胎。此時(shí)，受體動(dòng)物需經(jīng)過(guò)同期發(fā)情調(diào)控，以確保其子宮環(huán)境適宜。最后將選定的胚胎移植到受體動(dòng)物子宮內(nèi)。胚胎移植技術(shù)可提高優(yōu)良種畜的繁殖效率，促進(jìn)畜牧業(yè)的發(fā)展。雖然胚胎移植技術(shù)已廣泛運(yùn)用在畜牧業(yè)生產(chǎn)上，但影響其胚胎移植效果的因素也較多，而如何運(yùn)用好胚胎移植技術(shù)提高胚胎移植效果，保證純種、良種羊快速繁育成為亟須解決的問(wèn)題。

三、影響胚胎移植效果的關(guān)鍵因素

1.不同受體羊同期發(fā)情的影響因素。胚胎移植效果的影響因素較多，其中受體羊是否同期發(fā)情對(duì)移植效果的影響極大。同期發(fā)情是胚胎移植過(guò)程中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)，影響到移植成功率。以下是影響不同受體羊同期發(fā)情的一些因素。品種：不同品種的羊可能對(duì)發(fā)情調(diào)控方法的反應(yīng)存在差異。一些品種更容易實(shí)現(xiàn)同期發(fā)情，而其他品種可能需要更復(fù)雜的干預(yù)措施。年齡：年輕的羊通常發(fā)情更加規(guī)律，更容易實(shí)現(xiàn)同期發(fā)情。相比之下，老年羊可能發(fā)情不穩(wěn)定，難以實(shí)現(xiàn)同期發(fā)情。營(yíng)養(yǎng)狀況：營(yíng)養(yǎng)狀況對(duì)羊的生殖系統(tǒng)具有重要影響。營(yíng)養(yǎng)不良可能導(dǎo)致發(fā)情不規(guī)律，影響同期發(fā)情的成功率。④激素調(diào)控：使用激素調(diào)控是實(shí)現(xiàn)羊群同期發(fā)情的常用方法。但激素使用不當(dāng)可能導(dǎo)致發(fā)情不穩(wěn)定，影響同期發(fā)情效果。⑤疾病和健康狀況：健康狀況對(duì)羊的生殖功能具有重要影響。疾病可能導(dǎo)致發(fā)情不規(guī)律，進(jìn)而影響同期發(fā)情的成功率。因此，在實(shí)施胚胎移植前需要充分考慮這些因素，采取相應(yīng)的干預(yù)措施以提高同期發(fā)情的成功率。

2.胚胎自身的影響因素。胚胎自身對(duì)移植效果的影響也較大，其中包括胚胎的發(fā)育階段、胚胎質(zhì)量及處理胚胎的方法等都會(huì)對(duì)胚胎移植效果產(chǎn)生嚴(yán)重影響。如胚胎發(fā)展階段一般認(rèn)為處于桑葚胚前的胚胎移植效果更好，但通過(guò)大量研究人員試驗(yàn)證明，在囊胚期進(jìn)行胚胎移植，其受胎率比桑葚胚期移植的效果好，其具體原因是囊胚期的胚胎內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞數(shù)量多，對(duì)環(huán)境因素的耐受力比桑椹期胚胎細(xì)胞強(qiáng)，有利于胚胎的存活；還有胚胎質(zhì)量對(duì)胚胎移植的效果影響很大，對(duì)此可以將胚胎質(zhì)量分為A、B、C級(jí)，A、B級(jí)胚胎受胎率明顯高于C級(jí)胚胎，但在實(shí)際胚胎移植工作中以8細(xì)胞胚胎移植效果最好。而在移植過(guò)程中不采用邊緣不規(guī)整的、有缺陷的胚胎，對(duì)2細(xì)胞、4細(xì)胞進(jìn)行移植時(shí)，要根據(jù)實(shí)際情況進(jìn)行移植；還有用不同方法處理的胚胎對(duì)胚胎移植效果的影響也較大，研究人員發(fā)現(xiàn)，即使是使用最好的冷凍和解凍步驟，胚胎致死率也達(dá)10%～20%，其中程序冷凍、玻璃化冷凍處理胚胎后，其受胎率分別為10.7%、42.9%。其次，胚胎在體外保持的時(shí)間長(zhǎng)短對(duì)移植效果也會(huì)產(chǎn)生嚴(yán)重影響，在體外保存的時(shí)間越短其效果越好。

四、保證胚胎移植效果的關(guān)鍵

1.解決不同受體羊同期發(fā)情的方法。發(fā)情周期可分為卵泡期和黃體期，兩期交替、反復(fù)出現(xiàn)就形成了發(fā)情周期。為解決不同受體羊同期發(fā)情的問(wèn)題，可以采取以下方法。

（1）激素調(diào)控。使用激素[如促性腺激素釋放激素（GnRH）、促黃體生成激素（LH）和孕酮等]來(lái)調(diào)控羊群的發(fā)情周期。激素治療需要嚴(yán)格遵循劑量和給藥時(shí)間，以確保同期發(fā)情效果。

（2）促卵泡成熟劑。使用促卵泡成熟劑（如eCG）來(lái)誘導(dǎo)卵泡的成熟，使羊群在同一時(shí)間進(jìn)入卵泡期。

（3）營(yíng)養(yǎng)調(diào)控。確保羊群處于良好的營(yíng)養(yǎng)狀況，以促進(jìn)發(fā)情周期的正常運(yùn)行。適當(dāng)提高精飼料的供應(yīng)，增加優(yōu)質(zhì)飼草供應(yīng)，并添加適量的微量元素和維生素，有助于發(fā)情調(diào)控。

（4）群體管理。分群管理有利于發(fā)情周期的穩(wěn)定。同時(shí)，保持良好的養(yǎng)殖環(huán)境，減少疾病發(fā)生，對(duì)同期發(fā)情也具有積極影響。

（5）遺傳選擇。選用易于同期發(fā)情的羊品種，通過(guò)遺傳改良提高同期發(fā)情的成功率，有效解決不同受體羊同期發(fā)情的問(wèn)題，為胚胎移植創(chuàng)造良好條件。同時(shí)需注意卵泡期和黃體期的交替出現(xiàn)，以充分利用發(fā)情周期進(jìn)行胚胎移植。

2.胚胎移植過(guò)程的關(guān)鍵技術(shù)。在胚胎移植技術(shù)中要選好供受體，選擇品種優(yōu)良、系譜清楚、生產(chǎn)性能突出、無(wú)疾病、經(jīng)濟(jì)價(jià)值高的成年種羊作為供體羊，選擇健康、體格中上的經(jīng)產(chǎn)母羊作為受體羊；同時(shí)還要注意不同受體羊同期發(fā)情的處理，減少對(duì)胚胎移植效果的影響，還要注意供體超數(shù)排卵，繁殖季節(jié)羊的卵巢發(fā)育、超排率、排卵數(shù)及胚胎發(fā)育質(zhì)量比非繁殖季節(jié)好；同時(shí)選擇更優(yōu)的方法對(duì)胚胎進(jìn)行收集、鑒定及保存；最后要進(jìn)行胚胎移植，羊胚胎移植的方法一般采用手術(shù)法進(jìn)行移植；同時(shí)還要注意供、受體的術(shù)后管理，注意護(hù)理和飼養(yǎng)管理，保證受體羊的健康。

五、研究趨勢(shì)和展望

胚胎移植技術(shù)創(chuàng)新主要體現(xiàn)在非手術(shù)性胚胎回收與移植、超聲引導(dǎo)、胚胎冷凍保存、性別鑒定、基因編輯、多胚胎移植和組織工程與干細(xì)胞技術(shù)等方面。這些技術(shù)減少了動(dòng)物創(chuàng)傷，提高了操作效率和移植準(zhǔn)確性，滿足生產(chǎn)和繁殖需求，優(yōu)化遺傳特性，提高胚胎攜帶率及經(jīng)濟(jì)效益。

六、結(jié)語(yǔ)

隨著畜牧業(yè)的發(fā)展，胚胎移植技術(shù)在羊良種快速擴(kuò)繁中起關(guān)鍵作用，在生產(chǎn)實(shí)踐中得到廣泛的應(yīng)用及推廣，但影響胚胎移植效果的因素較多，會(huì)導(dǎo)致胚胎移植后的受胎率較低，使該技術(shù)在產(chǎn)業(yè)化應(yīng)用中還有一定距離。對(duì)此文章介紹了胚胎移植的發(fā)展史及研究進(jìn)展，并概括了影響胚胎移植效果的因素，其中在羊胚胎移植過(guò)程中，受體羊的同期發(fā)情對(duì)胚胎移植效果影響較大，而影響羊同期發(fā)情的因素包括品種、年齡、季節(jié)及處理方法等，同時(shí)提出了解決受體羊同期發(fā)情的技術(shù)及胚胎移植過(guò)程中關(guān)鍵技術(shù)的注意事項(xiàng)，為后續(xù)提升胚胎移植效果奠定基礎(chǔ)，同時(shí)進(jìn)一步將胚胎移植技術(shù)推廣應(yīng)用，保證畜牧養(yǎng)殖行業(yè)的健康、可持續(xù)發(fā)展。